阿司匹林抑制核因子-κB增强索拉非尼对肝癌的促凋亡作用

目的 观察合用阿司匹林(Aspirin)与索拉非尼(Sorafenib)对肝癌生长转移的抑制作用和促凋亡作用并探讨其机制.方法 采用人肝癌裸鼠原位模型LCI-D20,分为对照组、Sorafenib 单用组(30 mg/kg灌胃,1d1次)、Sorafenib+ Aspirin合用组、Aspirin单用组(30 mg/kg灌胃,1 d 1 次),治疗4周后观察荷瘤小鼠生存期、肿瘤体积、肺转移,定量比较肿瘤细胞凋亡指数,观察各组荷瘤鼠生存期,检测各组核因子-κB (NF-κB)及IκBα表达.结果 对照组、Sorafenib治疗组、Sorafenib + Aspirin合用组、Aspirin治疗组肿瘤体积分别为(4.76±0.51)、(1.41±0.08)、(0.66 ±0.12)和(4.58±0.47) cm3;肺转移灶数目分别为(189±21)、(96±15)、(30±17)和(92±18)个;中位生存期分别为72、98、112、80 d.肿瘤凋亡指数分别为(2.6±1.1)％、(8.6±3.7)％、(24.3±6.9)％和(6.8±1.5)％;与Sorafenib治疗组比较,Sorafenib+ Aspirin合用明显降低肿瘤体积(P＜0.05)、抑制肺转移灶数目(P＜0.01),延长荷瘤鼠生存期(P＜0.05)和促进肿瘤细胞凋亡(P＜0.05).Sorafenib 在肝癌中具有下调IκBα和上调NF-κB-p65的作用而合用Aspirin可逆转此作用.结论 Aspirin通过抑制NF-κB活化,进一步增强Sorafenib对肝癌凋亡的促进作用及对肝癌生长转移的抑制作用,并延长荷瘤鼠生存期.     

诱导型一氧化氮合酶抑制剂对胃癌MFC细胞增殖与凋亡的影响

目的研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)选择性抑制剂氨基胍(AG)对鼠胃癌MFC细胞增殖和凋亡的影响。方法将40只MFC胃癌皮下接种模型小鼠随机分成4组对照组(等体积生理盐水)、丝裂霉素组(MMC,每周注射2次,每次0.7mg/kg)、AG组(150mg·kg-1·d-1)和MMC加AG组。均采用腹腔内注射给药法,持续14d;停药后24h处死动物。应用Greiss反应法测定荷瘤动物血浆中一氧化氮(NO)量;剥离肿瘤,称重并计算抑瘤率;应用免疫组织化学法检测肿瘤细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞的凋亡,透射电镜观察凋亡细胞的超微结构。结果AG显著降低荷瘤小鼠血浆中NO的合成,明显抑制肿瘤的生长,抑瘤率为47.1%,与对照组比较,P<0.01。AG组的肿瘤细胞PCNA表达值为25.2±3.6,MMC加AG组为22.0±3.6,明显低于对照组的82.0±3.6(P<0.01);但凋亡指数未见下降,电镜下亦未见典型的细胞凋亡形态学变化。结论AG通过抑制肿瘤组织中NO的产生而抑制肿瘤生长,但并未促进肿瘤细胞凋亡。     

槲皮素对TRAMP-C2前列腺癌细胞的体内抑制作用及对雄激素受体和细胞凋亡的影响

目的观察槲皮素对TRAMP-C2前列腺癌小鼠模型的体内抑制作用,探讨其作用机理。方法建立前列腺癌细胞株TRAMP-C2小鼠模型并随机分成4组。A组(对照组),B组(槲皮素25mg/kg治疗组),C组(槲皮素50mg/kg治疗组),D组(槲皮素100mg/kg治疗组)。观察槲皮素对各组小鼠的抑瘤作用并检测各组肿瘤标本的雄激素受体表达和细胞凋亡。结果接种5周后A、B、C、D各组小鼠肿瘤体积分别为3475.67±197.04mm3、2244.17±597.38mm3、1912.33±225.67mm3、1458.50±229.19mm3,治疗组体积明显小于对照组(P<0.01),B、C、D组的抑瘤率分别为35%、44%、58%。治疗组肿瘤的雄激素受体的表达强度和范围明显下降(P<0.05)。各组凋亡指数分别为12.49±2.11%、16.37±2.56%、20.96±3.14%、29.09±3.06%,治疗组明显大于对照组(P<0.01)。结论槲皮素可抑制前列腺癌细胞株TRAMP-C2小鼠移植瘤的生长,其机理可能与抑制前列腺癌细胞雄激素受体表达和促进肿瘤细胞凋亡有关。     

羟基磷灰石纳米粒子肝动脉灌注对兔VX2肝种植瘤生长和bax/bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨羟基磷灰石纳米粒子（NanoHAP）在体内对兔VX2肝种植瘤生长的抑制作用及对肿瘤细胞bax／bcl-2凋亡蛋白表达的影响。方法 将56只VX2肝荷瘤兔随机分成四组，通过肝动脉灌注NanoHAP溶胶、5-Fu以及5-Fu与NanoHAP的混合液，并与生理盐水组对照。观察各组动物的一般情况，对肿瘤体积进行监测并比较。采用免疫组织化学染色观察bax／bcl-2蛋白的表达。结果 各治疗组对肿瘤生长都有明显的抑制作用。NanoHAP溶胶组肿瘤体积明显小于对照组（P〈0．05），肿瘤生长抑制率达到28．1％；5-Fu组抑瘤率达到43．7％，但动物表现出明显毒副作用；联合治疗组抑瘤率达到51．2％，而且毒副反应明显小于5-Fu组。NanoHAP组及联合治疗组免疫组织化学染色显示bcl-2蛋白表达率分别为41．7％（5／12）、38．5％（5／13），较对照组72．7％（8／11）明显降低；bax蛋白表达率为50．0％（6／12）、61．5％（8／13），明显高于对照组127．3％（3／11）。结论 NanoHAP在体内对兔VX2肝种植瘤生长有明显的抑制作用，而且能明显降低5-Fu的毒性作用。其抑瘤机制可能是通过影响bax／bcl-2的表达加速肿瘤细胞凋亡。     

合用阿伐斯汀增强索拉非尼对肝癌生长转移的抑制作用

目的 观察合用阿伐斯汀(avastin)与索拉非尼(sorafenib)对人肝癌裸鼠模型的抑制效果.方法 采用人肝癌裸鼠原位模型LCI-D20,分为对照组、serafenib单用组(30mg/kg灌胃,1 d1次)、sorafenib与avastin合用组、avastin单用组(5 mg/kg腹腔注射,1周2次),治疗4周后观察肿瘤体积、肺转移、血浆血管内皮生长因子(VEGF),定量比较肿瘤微血管密度(MVD)和肿瘤血管内皮细胞凋亡指数,观察各组荷瘤鼠生存期.结果 对照组、sorafenib治疗组、mrafemb与avastin合用组、avastin治疗组肿瘤体积分别为(5.70±0.17)、(1.10±0.18)、(0.60±0.12)和(2.10±0.28)mm~3;肺转移灶数目分别为(191±23)、(98±18)、(31±19)和(98±20)个;血浆VEGF分别为(1689±612)、(3762±1195)、(1844±746)和(420±161)ng/L;中位生存期分别为70、87、112、80 d.4组肿瘤微血管密度分别为(3.77±0.44)%、(1.28±0.15)%、(0.56±0.08)%、(1.32±0.18)%;肿瘤血管内皮细胞凋亡指数分别为(12.6±1.8)%、(32.6±8.7)%、(54.3±11.9)%、(26.8±6.5)%;与sorafenib治疗组比较,avastin与sorafenib合用明显抑制血浆VEGF(P<0.05)、降低肿瘤体积(P<0.05)、抑制肺转移灶数目(P<0.01),延长荷瘤鼠生存期(P<0.05),降低肿瘤微血管密度(P<0.05)和促进肿瘤血管内皮细胞凋亡(P<0.05).结论 sorafenib在肝癌裸鼠模型中上调血浆VEGF导致耐药,avastin下调VEGF,通过促进肿瘤血管内皮细胞凋亡和降低肿瘤微血管密度,进一步增强sorafenib对肝癌生长和转移的抑制作用,并延长荷瘤鼠生存期.     

端粒酶抑制剂与丝裂霉素C联合应用对膀胱癌的作用

目的:探讨端粒酶抑制剂对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响及与化疗药物的协同作用。方法:应用端粒酶抑制剂齐夫多啶(AZT)联合化疗药物丝裂霉素C(MMC)治疗小鼠移植性膀胱癌(T24),观察其对抑瘤率、肿瘤端粒酶的表达及对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:AZT、MMC、MMC加AZT的抑瘤率分别为12. 1%、29. 6%和43. 6%,AZT与MMC均能抑制肿瘤生长,并且AZT与MMC联用明显优于两者单独应用(P<0. 05 )。采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数分别为(20. 23±0. 89)%、(8. 04±0. 12)%和(24. 09±1. 81)%。肿瘤端粒酶活性检测显示各组端粒酶阳性率分别为36. 5%、43. 6%和11. 8%,与对照组比较,AZT、MMC均有减少肿瘤端粒酶活性的作用(P<0. 05)。结论:MMC及AZT均能抑制小鼠膀胱癌T24细胞的生长及降低其端粒酶活性,诱导细胞凋亡,二者联用有相加作用。     

53基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗的体内研究

目的　探讨p5 3基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗在动物体内的疗效。　方法　以C6鼠胶质瘤细胞和SD大鼠建立动物模型 ,原位注射腺病毒介导p5 3和单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK)基因 ,腹腔给以更昔洛韦 (GCV ,15mg·kg-1·d-1,共 14d)。观察荷瘤鼠生存期 ;强化MRI动态监测荷瘤鼠肿瘤大小 ;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。评价p5 3基因对HSV TK GCV系统治疗胶质瘤的优化作用。　结果　p5 3基因明显增强HSV TK GCV的疗效 ,使荷瘤鼠生存期明显延长 ,肿瘤细胞凋亡明显增加 ;强化MRI显示 4周肿瘤消失。　结论　p5 3基因联合HSV TK GCV可作为临床上优化自杀基因治疗方案的一种较佳选择     

Survivin反义寡核苷酸对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究

目的探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法30只裸鼠建立人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机分3组，每组10只。分别于瘤周及瘤体注射阳离子脂质体（1ipofectin，Lip），ASODN／Lip及NODN／Lip，每5天1次，共3次。观察肿瘤抑制率、肿瘤体积和裸鼠体重的变化。用TUNEL法，透射电镜观察体内瘤体的细胞调亡情况；用Western—blot检测各组肿瘤的survivin蛋白表达情况。结果成功建立了裸鼠皮下移植瘤模型。ASODN／Lip治疗组的肿瘤体积在治疗期内减少，抑瘤率达70．10％；而NODN／Lip治疗组和Lip对照组肿瘤体积增加。各组裸鼠体重无明显变化。ASODN／Lip组细胞凋亡率为38．6％明显高于其他两组，差异有显著性（P〈0．05）。ASODN／Lip组肿瘤的survivin蛋白表达明显降低。结论survivin反义寡核苷酸可有效地抑制人乳腺癌裸鼠皮下肿瘤的生长速度，并促进诱导肿瘤细胞的凋亡。     

胸苷激酶/更昔洛韦系统联合肿瘤坏死因子-α治疗鼠膀胱癌

目的 观察腺病毒介导胸苷激酶/更昔洛韦(TK/GCV)系统联合肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对鼠膀胱癌的杀伤作用.方法 构建MB49小鼠皮下模型,随机分为对照组、TK/GCV组、TNF-α组、联合治疗组.按治疗计划分组进行病毒及药物注射,实验结束测量肿瘤体积大小,进行组织病理学检查.结果 体外实验验证低浓度TNF-α联合GCV较单纯GCV对细胞的杀伤率明显增强,差异有统计学意义(P＜0.01).流式细胞仪检测,联合治疗组较单独用药组凋亡率明显提高,差异有统计学意义(P＜0.01).动物实验结束后肿瘤体积对比:TK/GCV组为(93.43±2.10) mm3、TNF-α组为(53.95±2.61)mm3、对照组为( 171.52±4.33) mm3、联合治疗组为(18.23±1.11) mm3,联合治疗组肿瘤体积较其他各组明显缩小,差异有统计学意义(P＜0.01).苏木素-伊红(HE)染色见各治疗组均出现细胞坏死凋亡,其中联合治疗组仅于周边见少量肿瘤细胞存活.结论 GCV对转染腺病毒MB49细胞及TNF-α对MB49细胞均有良好的抑制生长作用,且呈浓度依赖性；TK/GCV、TNF-α均能有效诱导凋亡,且两者具有协同作用；TK/GCV系统联合小剂量TNF-α能增强自杀基因系统对小鼠膀胱癌的治疗作用.     

端粒酶抑制剂与阿霉素联合应用治疗小鼠膀胱癌

目的 观察端粒酶抑制剂与化疗药物阿霉素联用抑制小鼠膀胱癌的协同作用.方法 AZT(端粒酶抑制剂齐夫多啶)4.5 mg、阿霉素0.1 mg、AZT 4.5 mg+阿霉素0.1 mg分组治疗T24膀胱癌荷瘤小鼠,观察肿瘤生长、细胞凋亡情况.结果 治疗后15 d,AZT、阿霉素、AZT+阿霉素各治疗组抑瘤率分别为35.6%、18.5%和43.2%.TUNEL法检测各组肿瘤细胞凋亡指数为(18.16±0.78)、(9.23±0.22)和(25.15±1.65).肿瘤端粒酶活性检测示各组端粒酶阳性率分别为24.5%、47.2%和12.3%,AZT、阿霉素均有减少肿瘤端粒酶活性的作用,且联用效果明显优于两者单独应用(P＜0.05).结论 AZT及阿霉素均能抑制小鼠膀胱癌T24细胞的生长及降低其端粒酶活性、诱导细胞凋亡,两者联用有相加作用.     

内皮抑素基因对ACHN RCC细胞增殖和凋亡的影响

目的 利用已构建的带有内皮抑素基因真核表达载体质粒导入裸鼠ACHN肾细胞癌(renal cell carcinoma, RCC)细胞中,研究内皮抑素基因对RCC细胞增殖和凋亡的影响.方法 ACHN细胞浓度1×107个/L,经裸鼠右侧背部皮下注射0.2 ml,共注射24只裸鼠.荷瘤裸鼠随机分为3组,每组8只.治疗组:每只裸鼠瘤内3点注射复合物100 μl(内含30 μl梭华-SofastTM和30 μg pSecES质粒);对照组:每只裸鼠瘤内3点注射复合物100 μl(内含30 μl梭华-SofastTM和30 μg pcDNA3.1质粒);空白组:每只裸鼠瘤内3点注射生理盐水100 μl.各组每只裸鼠间隔3 d注射1次,连续注射3次.以增殖细胞核抗原(PCNA)作为细胞增殖状态,按链霉亲和素生物素法(SABC)进行免疫组化染色.细胞凋亡检测用TUNEL法.结果 内皮抑素真核表达质粒能显著抑制裸鼠ACHN RCC肿瘤体积增长,pSecES治疗组平均瘤重明显小于空白组和对照组(P<0.01),与空白组的肿瘤生长抑制率为34.48%,与对照组的肿瘤生长抑制率为40.68%.治疗组肿瘤细胞的凋亡指数(AI)明显高于对照组和空白组(P<0.01).pSecES治疗组肿瘤组织的AI/PI比值明显高于对照组和空白组(F＝189.27,P<0.05).Spearman相关分析表明,肿瘤体积与细胞增殖之间无明显相关性(r =-0.041 2,P>0.05),肿瘤体积与细胞凋亡呈负相关(r =-0.734 6,P<0.01).结论 内皮抑素基因治疗可使裸鼠ACHN RCC肿瘤细胞凋亡增加,肿瘤细胞的数量减少,在总体上表现为肿瘤的生长变慢、体积变小.     

重组人内皮抑素对裸鼠胃癌瘤株生长的影响

目的　探讨重组人内皮抑素 (rhES)对胃癌裸鼠瘤株生长的影响。方法　随机将 12只胃癌荷瘤裸鼠分为实验组与对照组。对照组瘤周注射生理盐水 0 .1ml ,实验组瘤周注射rhES 2mg/kg ,1次 /d ,连用 10d。自用药开始 ,每 5d测量肿瘤体积 ,直至用药结束后 5d ,检测肿瘤组织VEGF ,bFGF ,PDGF ,VEGF c ,VEGFR 3 ,FVIIIAg ,PCNA和bcl 2及肿瘤细胞凋亡指数 (AI) ;计算抑瘤率 ,肿瘤缩小率 ;分析对照组与实验组AI ,肿瘤体积及微血管密度以及实验组治疗前后肿瘤体积差异的显著性。结果　用药前实验组肿瘤体积与对照组差别无统计学意义。用药后实验组肿瘤体积迅速减小 ;用药后 5d肿瘤体积与对照组相比明显缩小 (P =0 .0 0 0 1)。实验组肿瘤用药后较用药前明显缩小 (P =0 .0 0 15 )。抑瘤率为91.2 % ,肿瘤缩小率为 5 3 .5 %。实验组VEGF ,bFGF ,VEGF c ,VEGFR 3 ,bcl 2及PDGF表达强度均低于对照组 ;实验组AI高于对照组相 (P =0 .0 0 0 0 ) ;MVD低于对照组相 (P =0 .0 0 2 2 ) ;HE染色坏死区多于对照组。结论　rhES可减少肿瘤血管生成 ,增加肿瘤细胞凋亡 ,抑制肿瘤生长。     

131 I标记的抗癌胚抗原抗体C50治疗裸鼠结直肠癌移植瘤的疗效观察

目的　探讨结直肠癌放射免疫治疗 (RAIT)不同治疗剂量用法与疗效的关系。方法建立表达癌胚抗原 (CEA)的人结直肠癌荷瘤裸鼠模型。接种肿瘤细胞第 9天 ,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别尾静脉注射 5 .5 5× 10 6 、7.40× 10 6 、1.11× 10 7Bq的1 3 1 I标记的抗CEA单克隆抗体C5 0 ( 1 3 1 I C5 0 ) ,Ⅳ组分 2次给予总量 1.11× 10 7Bq的1 3 1 I C5 0 ,计算各组裸鼠肿瘤体积、群体倍增时间及抑瘤率 ,比较接种第 30天肿瘤体积。接种第 15天 ,观察肿瘤组织病理学改变。结果　Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组两两之间接种第 30天肿瘤体积差异均有非常显著性 (P <0 .0 0 1) ,群体倍增时间依次延长 ,抑瘤率依次增大。光学显微镜下见各治疗组肿瘤组织均有不同程度灶状坏死。结论　结直肠癌RAIT疗效呈剂量依赖性。在总治疗剂量相等的情况下 ,分次RAIT疗效优于单次RAIT。     

联合重组人纤维连接蛋白活化的杀伤细胞过继性治疗肾癌的实验研究

目的 探讨肾癌患者外周血来源联合重组人纤维连接蛋白(RetroNectin)活化的杀伤细胞(RAK)体外杀伤肾癌细胞及裸鼠体内的抑瘤作用.方法 采用RetroNectin+抗人CD3单克隆抗体(CD3mAb)+白细胞介素2(IL-2)培养肾癌患者外周血分离出的单个核细胞,培养产生RAK细胞,流式细胞仪测定细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD25、CD16、CD56,酶联免疫吸附法(ELISA)检测RAK分泌的细胞因子,乳酸脱氢酶法(LDH)定量检测RAK细胞体外杀伤肾癌细胞的能力,观察体内治疗肾癌荷瘤鼠抑瘤作用.统计学分析RAK培养前后分泌细胞因子浓度及荷瘤鼠治疗前后瘤体积的差异.结果 体外培养14 d,肾癌RAK细胞数由1×107扩增至3.2×109,以CD3+CD8+细胞为主,占50%以上,CD25表达由5%上调至36%,且能分泌高水平干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),培养上清中IFN-γ浓度900 pg/ml,TNF-α浓度90 pg/ml.RAK治疗组荷瘤鼠肿瘤平均体积为259.6 mm3,对照组为932.1 mm3,差异有统计学意义(P＜0.05),抑瘤率72.1%.结论 利用RetroNectin可以使少量外周血来源的单个核细胞生成大量的RAK细胞,RAK可以在体外杀伤肾肿瘤细胞,并能在动物体内起到抑制肾肿瘤生长的作用.     

MAT2A siRNA对荷瘤鼠肝癌细胞生长的影响

目的探讨MAT2A小干扰RNA对荷瘤鼠肝癌细胞生长和细胞凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将MAT2A小干扰RNA质粒表达载体转染人肝癌细胞系Bel-7402细胞，建立持续转录小干扰RNA的细胞系，并将该细胞系皮下接种裸鼠，观察肿瘤生长情况；为进一步观察裸鼠体内抑瘤性，将皮下接种稳定表达小干扰RNA的Bel-7402细胞系的裸鼠分为三组：A、盐水对照组，B、空质粒对照组，C、siRNA治疗组；于接种后第12天，每组动物行纯化质粒DNA瘤内注射，观察肿瘤大小；治疗后2周，处死所有动物，取肿瘤，测量大小；部分石蜡包埋切片、HE染色，部分进行凋亡检测。结果得到稳定转染siRNA载体、并能持续表达siRNA的Bel-7402细胞系，将稳定建系的细胞传代，持续表达siRNA细胞系肿瘤细胞生长明显缓慢。皮下接种建系的Bel-7402细胞建立荷瘤鼠模型，可以观察到siRNA组肿瘤生长缓慢，平均第13天才长出皮下可及、但肉眼看不到的肿瘤，而接种control siRNA组，平均第9天可长出肉眼可见的肿瘤；用裸鼠肿瘤模型观察siRNA的体内抑瘤效果，质粒DNA注射后，对照组瘤体10．93mm^3，空质粒对照组为11．13mm^3，而siRNA质粒转染组为4．26mm^3（P〈0.01）；HE染色显示，对照组和空质粒组质粒DNA注射后，病灶充满肿瘤细胞；而siRNA组质粒DNA注射后，病灶内有大量炎性细胞浸润，坏死明显，仅见少量肿瘤细胞；且siRNA明显诱导荷瘤鼠肝癌细胞凋亡，其凋亡指数为（28．79±2．13）％，较盐水对照组（9．54±1．89）％和空质粒治疗组（10．24±2．06）％明显升高（t=15．41，P〈0．01）。结论靶向MAT2A基因的siRNA诱导荷瘤鼠肝癌细胞凋亡，抑制肝癌细胞生长。     

地氟醚预处理对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的 探讨地氟醚预处理对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的影响.方法 人脐静脉内皮细胞株接种于培养板或培养皿中,随机分为5组(n=5),正常对照组(C组)不行任何处理;缺氧/复氧组(A/R组)缺氧30 min后,复氧60 min;缺氧/复氧+炎症介质刺激组[A/R+重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)组]在复氧同时加入10 ng/ml rhTNF-α 10 μl;地氟醚预处理+缺氧/复氧组(Des+A/R组)及地氟醚预处理+缺氧/复氧+炎症介质刺激组(Des+A/R+ rhTNF-α组)先给予7.2%地氟醚30 min,洗脱10 min,然后进行缺氧/复氧,复氧同时加入10 ng/ml rhTNF-α 10 μl.采用流式细胞术和原位缺口末端标记法测定细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;应用透射电镜观察细胞凋亡和坏死情况.结果 与C组比较,A/R组和A/R+rhTNF-α组细胞凋亡率升高(P＜0.05);与A/R组比较,Des+A/R组细胞凋亡率降低(P＜0.05);与A/R+rhTNF-α组比较,Des+A/R+rhTNF-α组细胞凋亡率降低(P＜0.05).电镜下,A/R组和A/R+rhTNF-α组可见凋亡和坏死细胞,Des+A/R组和Des+A/R+rhTNF-α组细胞处于增殖和修复状态.结论 7.2%地氟醚预处理30 min可减轻人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤.     

去势对人前列腺癌裸鼠移植瘤miR-301a表达水平的影响

目的 探讨人前列腺癌LNCaP细胞荷瘤裸鼠去势后miR-301a和其宿主基因SKA2的表达变化. 方法 制备LNCaP荷瘤裸鼠模型,待肿瘤长至体积为200mm 3时,将LNCaP荷瘤裸鼠随机分成4组,每组6只,2组行去势手术,另2组作为对照组,绘制肿瘤体积变化曲线图.在去势组裸鼠肿瘤体积缩小过程中选择一时间点,处死去势荷瘤裸鼠和对照裸鼠各1组,取出皮下肿瘤称重,作为第1次取材的肿瘤.继续观察另2组裸鼠肿瘤大小,在肿瘤缩小后又再次增长的过程中选择一时间点,处死l组去势荷瘤裸鼠和对照裸鼠,取出肿块称重,作为第2次取材的肿瘤.2次取材均计算抑瘤率,并抽提肿瘤组织RNA,实时定量PCR检测肿瘤miR-301a和SKA2的表达. 结果 LNCaP荷瘤裸鼠自去势手术的第2天,肿瘤体积逐渐减小,至去势后第13天(第1次取材),肿瘤体积缩小为(62.5±21.5)mm3,肿瘤抑瘤率为59.8％,差异有统计学意义(t=-3.895,P=0.018).去势后的第17天,裸鼠肿瘤体积达到最小值,随后逐渐增大,在去势后的第41天(第2次取材),肿瘤体积增长为(364.5±97.3)mm3,抑瘤率为62.2％,差异有统计学意义(t=-7.017,P=0.002).第1次取材的肿瘤组织中miR-301a和SKA2在去势组的表达水平显著低于对照组,分别是对照组的65％和50％,差异有统计学意义(P＜0.05).在第2次取材的肿瘤组织中,miR-301a和SKA2的表达水平2组基本一致,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 去势能够使前列腺癌荷瘤裸鼠的肿瘤从雄激素依赖性转变为雄激素非依赖性,miR-301a和宿主基因SKA2的表达水平随前列腺癌雄激素依赖性质的转变而发生变化,两者具有密切的相关关系.     

抑癌基因p53增强胶质瘤自杀基因作用的实验研究

目的 研究抑癌基因p53提高恶性胶质瘤自杀基因治疗的可行性. 方法 以C6鼠胶质瘤细胞和SD大鼠建立动物模型,原位注射腺病毒为载体的p53和自杀基因,腹腔给以阿昔洛韦(100 mg·kg-1day-1 × 14 d);观察荷瘤鼠生存期:强化MRI动态监测荷瘤鼠肿瘤大小;TUNEL法检测凋亡;评价P53基因对自杀基因系统治疗胶质瘤的优化作用. 结果 体内p53基因联合自杀基因使荷瘤鼠生存期明显延长,凋亡明显增加;强化MRI示肿瘤生长明显减慢. 结论 在体内p53基因可明显增强胶质瘤自杀基因系统的抑瘤作用.     

quercetin抑制肝细胞癌生长的在体实验研究

目的:探讨quercetin对肝癌细胞体内生长的抑制作用及机制。方法:用人肝癌Hep G2细胞皮下接种法建立裸鼠移植瘤模型,成瘤后随机分为对照组、quercetin治疗组、5-FU治疗组、5-FU+quercetin联合治疗组,溶剂或药物均1次/d腹腔注射,3周后观察各组移植瘤大小并计算各治疗组的抑瘤率,分别用RT-PCR、Western blot、免疫组化法检测各组移植瘤组织中cyclin D1、cyclin E、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:与对照组比较,各治疗组移植瘤体积明显减小、移植瘤组织中cyclin D1、cyclin E m RNA和蛋白表达以及PCNA阳性指数均明显降低(均P0.05),其中联合治疗组的抑瘤率明显大于两个单药组,cyclin D1、cyclin E、PCNA表达的降低程度也明显大于两个单药组(均P0.05),而两个单药组间各项指标差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:quercetin能通过下调cyclin D1与cyclin E的表达而抑制肝癌细胞的增殖,且与5-FU联合应用具有协同作用。     

重组人内皮抑素联合应用5氟脲嘧啶对胃癌裸鼠移植瘤的影响

目的探讨重组人内皮抑素(recombinant human endostatin,rhES)与5氟脲嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)联合应用对胃癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法建立胃癌异位移植BALB/C裸鼠模型,分为4组,每组6只.分别注射生理盐水,腹腔内注射5-FU(10 mg/kg),rhES组瘤周注射rhES(2 mg/kg)同时给予5-FU与rhES,每天1次,连用10 d.计算肿瘤体积、抑瘤率及肿瘤缩小率,检测肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、Ⅷ因子相关抗原(FⅧAg)、增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2表达及肿瘤细胞凋亡指数(AI).结果rhES+5-FU组肿瘤体积为(43±2)mm3,5-FU组为(169±45)mm3,rhES组为(95±28)mm3,对照组为(1057±114)mm3(P＜0.01).抑瘤率为99.6%,肿瘤缩小率为98.2%.用药前rhES+5-FU组肿瘤体积为(207±50)mm3,比5-FU组与rhES组下降更迅速(P＜0.01).rhES+5-FU组与5-FU组VEGF、bFGF及VEGF-C表达强度均为0～+;rhES+5-FU组PCNA及bcl-2表达最弱;rhES+5-FU组AI为11.7±1.1,5-FU组为6.2±0.6,rhES组为5.8±0.8,对照组为2.4±0.6(P＜0.01).微血管密度在rhES+5-FU组为8.9±2.5,rhES组为10.0±1.5,均低于5-FU组(27.3±1.7)与对照组(29.9±2.3)(P＜0.01).结论联合应用5-FU及rhES能显著抑制胃癌血管生成,增加肿瘤细胞凋亡,使胃癌裸鼠移植瘤的肿瘤体积明显缩小.