粉背薯蓣根茎中2个甾体皂苷体外对人癌细胞的细胞毒作用

作者采用美国国立癌症研究所抗癌药筛选系统，对粉背薯蓣Dioscorea collettii var.hypoglauca日根茎中的2个甾体皂苷——甲基原新纤细薯蓣皂苷(NSC-698793)和纤细薯蓣皂苷(NSC-698787)进行了体外细胞毒活性试验。     

绵萆薢中甾体皂苷的分离鉴定

目的:分离、鉴定绵萆薢根茎中的甾体皂苷类化合物。方法:采用溶剂提取、硅胶柱色谱及ODS柱色谱进行分离纯化,通过化学和光谱分析鉴定化合物结构。结果:分离得到3种甾体皂苷类化合物,分别鉴定为:薯蓣皂苷(Ⅰ),原薯蓣皂苷(Ⅱ),原纤细薯蓣皂苷(Ⅲ)。结论:化合物Ⅱ,Ⅲ为首次从绵萆薢中分离得到的呋喃型甾体皂苷。     

盾叶薯蓣薯蓣皂苷元积累动态研究

目的研究盾叶薯蓣薯蓣皂苷元积累动态,确定适宜的采收期。方法对不同采收期不同根茎中薯蓣皂苷元含量及含水量进行分析。结果种根在6月上旬到10月中上旬之间,薯蓣皂苷元含量呈缓慢的上升趋势,10月下旬以后就急剧下降。新生根茎在6月上旬到8月中下旬之间薯蓣皂苷元含量呈上升趋势,然后逐步下降,到10月下旬同样明显下降;生长期内种根与新生根茎含水量变化趋势不同,而且薯蓣皂苷元含量与含水量无相关关系。结论考虑到产量和薯蓣皂苷元含量两方面因素,10月中下旬采收盾叶薯蓣较为适宜。     

薯蓣皂苷水解微生物的筛选

目的:筛选可水解薯蓣皂苷的微生物。方法:从盾叶薯蓣根茎表面、根际土壤、叶片及根茎内筛选可降解薯蓣皂苷得皂苷元的菌株,薯蓣皂苷元采用薄层层析和高效液相色谱法鉴定。结果:筛选得到水解薯蓣皂苷的微生物,经鉴定分别属于曲霉属和交链孢属,并对其中一株菌的产酶特性和发酵工艺进行了初步研究。结论:筛选菌株分泌的薯蓣皂苷水解酶,可水解薯蓣皂苷得到皂苷元。     

铁、锰、锌肥对盾叶薯蓣根茎产量及薯蓣皂苷元的影响

目的大田条件下,研究铁、锰、锌肥对盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元量及根茎产量的影响。方法采用单因素施肥法,HPLC法测定薯蓣皂苷元的量,数据采用SPSS13.0软件包分析。结果 3种微肥使盾叶薯蓣根茎产量与薯蓣皂苷元量均有不同程度的增加,对薯蓣皂苷元量的影响为锰肥>锌肥>铁肥,对根茎产量的影响为铁肥>锰肥>锌肥。结论施用适当浓度的锰肥,对盾叶薯蓣的优质、高产栽培,具有重要的实践意义。     

γ射线辐射薯蓣根茎在实践中的应用

在种植前,用γ射线对薯蓣根茎进行剂量为100、500、2000拉德的辐射,可加速其生长发育并提高植株根茎中薯蓣皂苷配基(diosgenina)的含量。用γ射线辐射薄荷根茎使幼苗增多和促进根的生长。但是,目前对于多数药用植物,尚未能应用这种方法来改善种子发芽和加速植株的生长。种植薯蓣的目的是为了获得薯蓣皂苷配基,这种物质在医学上广泛用于治疗动脉硬化症。但是薯蓣在一般情况下生长缓慢,头两年更是如此。经过处理的植株生长到第3—4年时,根茎中薯蓣皂苷配基含量可达到8—4%。因此,在种植前应用电离辐射处理薯蓣根茎,以达到提高植株根茎中薯蓣     

氮磷钾对盾叶薯蓣产量及薯蓣皂苷元含量的影响

目的:研究大田条件下N、P、K肥料不同配比对盾叶薯蓣根茎产量及薯蓣皂苷元含量的影响.方法:采用肥料单因素正交试验,SPSS11.5统计软件包统计分析.结果:N、P、K可不同程度提高盾叶薯蓣根茎产量及薯蓣皂苷元含量,其中N、K对产量影响达到极显著水平(P＜0.01),P肥达到显著水平(P＜0.05),N、P、K单施对含量影响未达到显著水平(P＞0.05);3种肥料配施以N肥对薯蓣皂苷元含量影响达到显著水平(P＜0.05).表明肥料对薯蓣皂苷元含量影响的顺序为N＞K＞P,对根茎产量影响的顺序为K＞N＞P,综合最优组合为N2K1P2.结论:适当配比的N、P、K肥料可以同时提高盾叶薯蓣根茎产量与薯蓣皂苷元含量.     

穿龙薯蓣内生真菌的分离及其次生代谢产物的研究

目的:从穿龙薯蓣根茎中分离纯化内生真菌,筛选能产生皂苷类成分的功能菌株。方法:通过组织分离法从穿龙薯蓣根茎中分离内生真菌,利用高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱法(HPLC-MS)对分离得到的内生真菌发酵产物进行分析和检测。结果:共分离纯化内生真菌50株,HPLC检测发现内生真菌C12能产生与薯蓣皂苷元具有相同紫外吸收的结构相近化合物,经HPLCMS分析鉴定该成分为△3,5-去氧替告皂苷元。结论:穿龙薯蓣内生真菌资源丰富,其中内生真菌C12具有产生皂苷类成分的功能。     

盾叶薯蓣转录组分析及其皂苷元生物合成关键酶基因的挖掘

目的分析比较盾叶薯蓣根茎与叶片的转录组,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因。方法利用Illumina Hi Seq2000高通量测序技术对盾叶薯蓣根茎与叶片进行转录组测序,对测序结果进行注释分析;并结合根茎与叶片中皂苷元的含量测定结果,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因;最后利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术对部分候选基因的表达模式进行分析。结果共获得了81 660个Unigene,有64.33%在NT、NR、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG数据库中得到注释;根据其表达量与代谢通路分析筛选出29种共227个可能参与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径的催化酶基因,部分催化酶基因的表达模式与皂苷元含量具有一定相关性;并发现5个盾叶薯蓣内生菌基因。结论研究初步获得了盾叶薯蓣中参与皂苷元生物合成的候选关键酶基因,部分候选酶基因可能参与盾叶薯蓣中皂苷类成分的后修饰过程,并发现盾叶薯蓣根茎中内生菌可能参与其皂苷元的生物合成,为进一步阐明盾叶薯蓣中皂苷元生物合成的分子机制奠定基础。     

不同种植基地滇重楼根茎中甾体皂苷有效成分差异的研究

目的:探讨不同种植基地滇重楼根茎中甾体皂苷有效成分的差异。方法:采用超高效液相色谱法(UHPLC)测定不同种植基地滇重楼根茎中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及总皂苷的含量,并用液质联用(LC-MS)技术定性分析其甾体皂苷有效成分的差异。结果:不同种植基地滇重楼根茎中重楼皂苷Ⅰ及总皂苷含量差异较小,重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量差异较大;重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅲ(薯蓣皂苷)、重楼皂苷Ⅴ、重楼皂苷Ⅶ是不同种植基地滇重楼根茎中甾体皂苷的主要存在形式,不同种植基地滇重楼根茎中重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、纤细薯蓣皂苷差异较大;根据不同种植基地滇重楼根茎正离子模式下液质数据的主成分分析(PCA)模型可将其分为四类。结论:不同种植基地滇重楼根茎中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及总皂苷的含量、甾体皂苷有效成分及化学成分种类差异较大。     

加压提取法制备盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元

目的建立加压提取法制备盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元。方法单因素试验优化乙醇体积分数、提取温度、料液比、提取时间,在优化条件下制备薯蓣皂苷元,并与直接酸水解法、索氏抽提-常压酸水解法、双相联合酸水解法进行比较。结果最佳条件为将药材粉末与20倍量60%乙醇混合后在130℃下加压提取2.0 h,提取液减压回收乙醇,进行加压双相酸水解,薯蓣皂苷元得率达3.56%,高于3种传统提取方法(2.48%、2.96%、3.37%)。结论该方法简便环保,得率更高,可用于制备盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元。     

4种重楼不同部位薯蓣皂苷及皂苷元含量的分析

目的评价不同种重楼不同组织部位的药用价值。方法分别提取七叶一枝花、球药隔重楼、狭叶重楼和华重楼的地下根茎、地上茎、叶、种子、果皮和外种皮的薯蓣皂苷及皂苷元,采用HPLC法检测其含量。结果七叶一枝花地下根茎的薯蓣皂苷及皂苷元含量均高于其他组织部位,分别为12.42 mg/g、13.78mg/g;华重楼的地下根茎含有较高的薯蓣皂苷元,为8.91mg/g;七叶一枝花的外种皮和华重楼的叶片中薯蓣皂苷含量较高,分别为:5.24mg/g、7.11mg/g;七叶一枝花果皮与华重楼叶片中薯蓣皂苷元含量较高,分别为11.35mg/g、10.35mg/g;七叶一枝花整个植株的薯蓣皂苷及皂苷元总含量最高,为50.79mg/g。结论不同种重楼不同组织部位的药用成分含量相差较大,其中七叶一枝花地下根茎薯蓣皂苷及皂苷元总含量高于其它组织部位,具有最高的药用价值;七叶一枝花整株薯蓣皂苷及皂苷元总含量高于其他品种,为较好的重楼种植品种。     

黄山药化学成分的研究(Ⅱ)

黄山药 Dioscorea panthaica Prain et Burkill为我国特有的薯蓣科薯蓣属植物 ,主要分布于云南、贵州、四川、湖南等地区 ,根茎含薯蓣皂苷元 1 .7%～2 .3% ,生药能祛风除湿 ,清热解毒[1] 。为了进一步探讨黄山药根茎的化学成分 ,我们对其根茎的化学成分进行了研究 ,从中分离鉴定了 4个化合物 :薯蓣皂苷元 ( diosgenin, ) ,延令草次苷 ( trillin, ) ,2 6- O-β- D-葡萄吡喃糖基 ( 2 5 R) -呋喃 - 5 ,2 0 ( 2 2 ) -二烯 - 3β,2 6-二羟基 - 3- O- [α- L-鼠李吡喃糖基 ( 1 - 2 ) ]- β- D-葡萄吡喃糖苷 ( ) ,原薯蓣皂苷 ( protodioscin, …     

HPLC测定地奥心血康胶囊中薯蓣皂苷元的含量

地奥心血康胶囊为《中国药典》一部2005年版收载品种,由薯蓣科植物黄山药、穿龙薯蓣的根茎提取物经加工而成的胶囊剂,其主要成分为薯蓣皂苷,占药物成分量的30%左右,临床上主要用于治疗心绞痛、冠心病等心肌缺血疾病[1]。薯蓣皂苷可经酸水解成薯蓣皂苷元(diosgenin)和葡萄糖、鼠李糖等糖类,薯蓣皂苷元的含量测定方法主要为HPLC法[2-4]。地奥心血康胶囊中薯蓣皂苷元测定方法尚未见报道,本研究建立了一种高效液相色谱法测定地奥心     

离体培养滇重楼根茎中甾体皂苷类化学成分的研究

该研究采用LC-MS与HPLC技术对离体培养条件下3种不同产地滇重楼根茎中甾体皂苷类化学成分进行定性、定量分析,探究在离体培养条件下滇重楼根茎中能否合成包含2020年版《中国药典》中质量控制指标性成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ和Ⅶ在内的甾体皂苷类化学成分。从3种不同产地云龙长新(S1)、大理凤仪(S2)和洱源牛街(S3)离体培养滇重楼根茎中鉴定出滇重楼皂苷A、D、E,原重楼皂苷Ⅱ,重楼皂苷G、H,重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷,薯蓣次皂苷A,Tg, isomer of Th, saponin Th, reclinatoside, proto-paris D,pseudoproto-dioscin, 23-O-glc-(23S,25R)-spirost-5-en-3β,23α-diol-3-O-rha-(1→2)-[ara(1→4)]-glc或27-O-glc-(23S,25R)-spirost-5-en-3β,27α-diol-3-O-rha-(1→2)-[ara(1→4)]-glc共20个甾体皂苷类化学成分。其中,从离体培养S1滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.109 1%、0.165 2%、0.051 03%,总量为0.325 3%;从离体培养S2滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.192 2%、0.074 23%,总量为0.266 5%;从离体培养S3滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.207 7%、0.186 9%,总量为0.394 6%。上述结果表明在离体培养条件下滇重楼根茎中可以合成包含2020年版《中国药典》中质量控制指标性成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ在内的甾体皂苷类化学成分,但总量尚未达到2020年版《中国药典》不得少于0.60%的规定。因此,该研究滇重楼离体培养方案可行,但离体培养条件还需进一步改善。     

腾冲重楼根茎的化学成分及抗菌活性研究

目的 研究藜芦科植物腾冲重楼Paris tengchongensis根茎的化学成分及抗菌活性。方法 采用HPD100大孔吸附树脂、正相硅胶、RPC18硅胶和Sephadex LH-20凝胶色谱,以及半制备高效液相色谱等方法进行分离和纯化,利用NMR和MS等波谱数据对化合物的化学结构进行鉴定。对分离到的化合物用微量稀释法进行抗细菌和真菌活性评价。结果 从腾冲重楼根茎70%乙醇提取物中分离并鉴定了16个化合物,分别为parisvanioside A(1)、kingianoside K(2)、7-氧薯蓣皂苷（3）、pariposide A(4)、parisvanioside B(5)、parisrugoside H(6)、(25R)-17α-羟基螺甾-5-烯-3β-基O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、麦冬皂苷C’(8)、纤细薯蓣皂苷（9）、重楼皂苷Ⅰ（10）、重楼皂苷Ⅱ（11）、重楼皂苷Ⅵ（12）、pennogenin 3-O-β-chacotrioside(13)、重楼皂苷H(14)、重楼皂苷Ⅶ（15）和β-蜕皮激素...     

不同种植基地滇重楼根茎和叶中甾体皂苷类有效成分的差异及相关性分析

目的:探讨不同种植基地滇重楼根茎和叶中主成分及甾体皂苷类有效成分的差异及相关性。方法:采用液质联用技术(LC-MS)定性分析不同种植基地滇重楼根茎和叶中甾体皂苷类有效成分、主成分的差异及相关性,流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~12 min,45%~60%B;12~25 min,60%~30%B;25~28 min,30%~100%B;28~30 min,100%B;30~35 min,100%~45%B;35~40 min,45%B),检测波长203 nm,采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式扫描,毛细管电压4 k V,终板抵消电压500 V,雾化器压力253.8 k Pa,干燥气体为氮气,气体流速8 L·min-1,干燥温度350℃,离子源温度220℃。结果:定性检测到不同种植基地滇重楼根茎和叶中重楼皂苷Ⅰ,重楼皂苷Ⅱ,重楼皂苷Ⅲ(薯蓣皂苷),重楼皂苷Ⅴ,重楼皂苷Ⅵ,重楼皂苷Ⅶ,重楼皂苷H,纤细薯蓣皂苷8种甾体皂苷有效成分;重楼皂苷Ⅰ,重楼皂苷Ⅲ(薯蓣皂苷),重楼皂苷Ⅴ,重楼皂苷Ⅶ是不同种植基地滇重楼根茎中的主要存在形式,重楼皂苷Ⅴ和重楼皂苷Ⅵ是不同种植基地滇重楼叶中的主要存在形式;根据不同种植基地滇重楼根茎、叶正离子模式下液质数据的主成分分析模型可将其分为4类,其中巍山、南涧、弥渡、曲靖4个种植基地滇重楼根茎中主成分和不同种植基地滇重楼叶中主成分聚为一类。结论:不同种植基地滇重楼根茎和叶中8种主要甾体皂苷类有效成分存在较大差异;不同种植基地滇重楼根茎中主成分差异较大,而叶中主成分无显著差异。     

重楼属9种植物根茎中甾体皂苷有效成分的差异

目的:探讨重楼属9种植物根茎中甾体皂苷有效成分和主成分的差异及相关性。方法:采用液质联用(LCMS)技术定性分析重楼属9种植物根茎中甾体皂苷有效成分和主成分的差异及相关性。结果:滇重楼,金线重楼,毛重楼,滇重楼(阔瓣),南重楼,五指莲,黑籽重楼,多叶重楼8种重楼属植物根茎中均能检测到2015年版《中国药典》(一部)药材质量控制指标重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ,同时还检测到重楼皂苷Ⅴ;重楼皂苷H,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷3种主要甾体皂苷有效成分差异较大。根据重楼属9种根植物根茎正离子模式下液质数据的主成分分析(PCA)模型可将S1(滇重楼),S2(金线重楼),S3(毛重楼),S4[滇重楼(阔瓣)],S5(南重楼),S6(五指莲),S9(多叶重楼) 7种重楼属植物聚为一类,S7(黑籽重楼),S8(长柱重楼)各自聚为一类,距离滇重楼最远。结论:滇重楼,金线重楼,毛重楼,滇重楼(阔瓣),南重楼,五指莲,多叶重楼根茎中甾体皂苷有效成分和主成分主要差异较小,但能否替代滇重楼入药还值得进一步深入研究。     

黄山药化学成分的研究

黄山药 Dioscorea panthaica Prain et Burkill为我国特有的薯蓣科薯蓣属植物 ,主要分布于云南、贵州、四川、湖南等地区 ,根茎含薯蓣皂苷元 1 .7%～2 .3% ,生药能祛风除湿 ,清热解毒 ,可治胃病、风湿性心脏病、风湿性关节炎、跌打损伤、牛马炭疽病[1] 。我们对其甾体皂苷类成分进行分离 ,通过硅胶柱色谱及 HPLC分离鉴定了 5个化合物 :progenin( ) ,progenin( ) ,薯蓣皂苷 (dioscin, ) ,纤细皂苷(gracillin, ) ,pseudoproto- dioscin( )。其中 ～ 为已知化合物 , 系首次从该植物中分得。1　仪器和材料熔点仪用 Yanoco MP- 53显微熔点测…     

不同性别及去花对穿龙薯蓣中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷含量的影响

目的：探讨不同性别及去花对薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷含量的影响。方法：采用高效液相色谱法和比色法,测定不同时期穿龙薯蓣根茎中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷的含量。结果：雌性植株薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷的含量显著高于雄性,雌性去花后含量明显降低,与雄性植株接近。结论：三者具有相似的季节积累规律,各发育时期含量变化不大。