乙型肝炎病毒C基因启动子和前C基因变异对HBeAg表达及病情的影响

目的研究乙型肝炎病毒 (HBV)C基因启动子 (CP)和前C基因变异对HBeAg表达和病情的影响。方法通过DNA扩增、测序检测乙型肝炎患者的HBVCP和前C基因序列 ,通过微粒子发光法和荧光定量PCR技术定量检测血清中的HBeAg和HBVDNA。结果 (1 )前C终止变异在重型乙型肝炎病例中的发生率显著升高 ;CP双变异在慢性乙型肝炎中度和重度病例中的发生率显著升高。 (2 )双变异组和终止变异组的HBeAg含量均显著下降 ,而后者下降更明显 ,且e抗体阳性率显著升高 ;而终止变异联合双变异组的HBeAg含量及e抗体阳性率与终止变异组相似。(3)双变异组、终止变异组和对照组之间的HBVDNA定量无明显差异。结论前C终止变异对HBeAg表达的影响较CP双变异更大 ,对病情的影响也更明显     

慢性重型乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒C基因启动子和前C基因变异及与e抗原系统的关系

目的 研究慢性重型乙型肝炎患血清的HBV C基因启动子(CP)和前C基因变异情况。方法 通过DNA扩增、基因序列分析检测75例慢性乙型肝炎(CHB)和14例慢性重型乙肝(CSH)患血清的EIBV CP和前C基因序列,通过微粒子发光法定量检测血清中HBeAg的含量及通过荧光定量PCR技术定量检测血清中的HBV DNA。结果 (1)前C终止变异(nt1896G→A)在CASH组中的发生率显高于CHB组(71．4％和26．7％);CP双变异(nt1762A→T和1764G→A)则在CASH组和CHB组的发生率无显差异(42．9％和48．0％)。(2)CSH组的HBeAg含量显低于CHB组;CSH组的HBeAb阳性率则显高于CHB组(71．4％和32．0％)。(3)CSH组和CHB组的HBV DNA定量则无明显差异。结论 前C终止变异,对e系统有明显影响,与CSH的发病有关。     

抗HBe阳性乙型肝炎和无症状携带者的HBVC基因启动子和前C基因变异

目的 研究抗HBe阳性乙型肝炎病人和抗HBe阳性无症状携带(AsC)的乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(CP)和前C基因变异。方法 通过DNA扩增、基因序列分析检测34例抗HBe阳性和55例抗HBe阴性乙型肝炎病人及28例抗HBe阳性AsC的血清HBVCP和前C基因序列。结果 (1)抗HBe阳性肝炎组的前C终止变异(nt1896G→A)的发生率显高于抗HBe阴性肝炎组(61．8％和14．5％);而CP双变异(nt1762A→T和1764G→A)则在两组中无明显差异(50．0％和45．5％);(2)同抗HBe阳性AsC组比较,抗HBe阳性肝炎组的HBVDNA定量呈高水平,前C终止变异的发生率也显增高(61．8％和28．6％);(3)同抗HBe阳性慢性乙型肝炎(CHB)组比较,抗HBe阳性重型乙型肝炎(CSH)病人的前C终止变异发生率和CP双变异发生率无明显差异(70．0％和58．3％,50．0％和50．0％),HBV DNA定量也无明显差异,而CPnt 1752A→G变异发生率则显增高(80．0％和29．2％)。结论 前C终止变异、nt1846突变和病毒复制可能与抗HBe阳性乙型肝炎发病有关;而Cpnt1752突变则可能与抗HBe阳性CSH发病有关。     

乙型肝炎病毒前C／C基因变异的临床意义

乙型肝炎病毒（HBV）感染后可发生广泛的疾病谱，与宿主的免疫应答、也与病毒的变异有关。宿主的免疫应答是年龄、性别、遗传素质、营养状况等的综合反映；病毒变异是在长期受宿主的免疫压力后发生。与病变相关的HBV变异的热点，有前C区的A83和C基因的C289。前C区A83点突变使AA     

乙型肝炎病毒DNA疫苗的免疫效果

用已构建的不同载体乙型肝炎s基因疫苗 (pCR3.1 S ,pcDNA3 S)和乙型肝炎C基因疫苗(pCR3.1 C)分别给Balb/c小鼠多点肌肉注射 ,2周后追加免疫一次 ,用ELISA法及MTT法分别检测小鼠血清抗 HBs、抗 HBc抗体及脾细胞对HBsAg或HBcAg的特异性增殖反应。结果 ,免疫接种 2周后小鼠血清抗 HBs及抗 HBc抗体OD值分别为 0 .8373和 0 .7961均明显高于对照组 (0 .1 2 56) ,载体 pCR3.1 S的表达效力稍高于 рсDNA3 S ,但同一基因不同载体间无显著差异。不同靶基因血清抗体滴度及脾细胞对HBsAg或HBcAg的刺激指数均明显高于对照组 ,pCR3.1 C组刺激指数 (1 .935)明显高于 pCR3.1 S组 (1 .658)。结果提示 ,HBVS和C基因疫苗均可诱导较强的体液和细胞免疫应答强度 ;C基因以细胞免疫增高为主     

乙型肝炎病毒C基因启动子热点变异的检测及分析

目的　探讨乙型肝炎病毒C基因启动子 (CP)热点变异的临床意义。方法　应用克隆测序的方法检测 2 0例HBV感染者HBVCP序列 ,并结合临床进行分析。结果　 10例HBeAg(+)患者中 ,CP的T176 2、A176 4联合变异有 2例 (2 0 % ) ;10例HBeAg(- )患者中T176 2、A176 4联合变异有 7例 (70 % ) ,χ2 =6 73,P <0 0 5 ,有显著性差异。结论　T176 2、A176 4联合变异多见于HBeAg(- )的慢性乙型肝炎患者。     

乙型肝炎病毒携带者产妇血清乙型肝炎病毒DNA含量对胎儿宫内感染的影响

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）携带产妇血清HBV DNA含量对胎儿宫内感染的影响,以指导HBV携带者孕期处理. 方法 选择经产前血清学检测诊断为HBV携带者的产妇145例,在产妇分娩后采用荧光定量聚合酶链反应技术对同时进行母婴血清HBV DNA检测,并将产妇血清HBV DNA浓度分级,分析产妇血清不同HBV DNA浓度级对新生儿宫内感染情况. 结果 74例血清HBV DNA＜500拷贝/ml的产妇分娩的新生儿中检出HBV DNA阳性者1例（1.4%）;30例血清HBV DNA 500～1×10^6拷贝/ml的产妇分娩的新生儿中检出HBV DNA阳性者1例（3.3%）;41例HBV DNA＞1×10^6拷贝/ml的产妇分娩的新生儿中HBV DNA阳性者3例（7.3%）,不同血清HBV DNA浓度的产妇,其新生儿宫内感染率差异无统计学意义（P＞0.05）. 结论 产妇血清中HBV DNA浓度对胎儿宫内感染率影响不大,孕期抗病毒于预对预防HBV宫内传播意义不大.     

慢性HBV感染患者HBV DNA前C区变异的临床意义

目的:探讨慢性HBV感染患者HBVDNA前C区变异的临床意义。方法:采用ELISA测定99例HBV感染患者血清肝炎病毒标志物,并采用RT-PCR检测HBVDNA前C区变异。结果:99例HBV感染患者中,乙型肝炎病毒携带26例,慢性乙型病毒性肝炎61例,慢性重型病毒性肝炎(乙型)11例和急性乙型病毒性肝炎1例。乙型肝炎病毒携带,慢性乙型病毒性肝炎和慢性重型病毒性肝炎中,变异株组HBVDNA前C区变异发生率与混合株组、野生株组相比,差异均无显著性(P>0.05)。与混合株和野生株两组相比,HBVDNA变异株组肝功能变化差异均无显著性(P>0.05)。结论:HBVDNA前C区变异可发生于HBV感染的不同临床状态。HBVDNA前C区变异可能与肝炎程度和病情进展无明显关系。     

拉米夫定治疗中HBeAg阳性慢性乙型肝炎病人发生前C区变异

目的:分析在服用拉米夫定过程中,HBeAg阳性的慢性乙型肝炎病人出现前C区变异的临床特点。方法:回顾性分析在服用拉米夫定过程中发生前C区变异的13例慢性乙型肝炎病人,口服拉米夫定100 mg·d-1,44～160 wk先后出现ALT复常后反跳,HBV DNA再次升高。结果:前C区变异可导致病人肝功能明显损害,ALT平均(544±s 324)U·L-1,180～1 249 U·L-1。HBV DNA随即复升(108～1010)拷贝·L-1,其中9例为109拷贝·L-1,2例为1010拷贝·L-1。结论:在拉米夫定治疗中,HBV DNA正常后再次上升,肝功能复常后又明显异常且HBeAg阴性者,首先要考虑前C区变异的可能,应引起高度重视。     

慢性乙型肝炎乙肝病毒基本核心启动子变异的实验与临床研究

目的 研究乙型肝炎基本核心启动子(BCP)变异与慢性乙型肝炎病情的关系.方法 通过PCR及其产物直接检测128例慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV,同时检测患者HBV定量及血清生化指标.结果 128例标本中nt1762、1764变异(双变异)共检出56例,nt1753、1762、1764变异(三变异)共检出10例,肝炎肝硬化(LC)组中双变异明显高于其他CHB组(P＜0.05);双变异组的HBeAg、ALB明显低于无变异组(P＜0.05),三变异组HBeAg明显低于双变异组(P＜0.05).结论 BCP区双变异可减少HBeAg的表达,引起肝功能受损严重并导致肝硬化的发生,BCP区尚有新发现的变异如三变异也可影响HBeAg的表达.     

慢性乙型肝炎患者表面抗原水平与乙型肝炎病毒DNA载量关系分析

目的多角度分析慢性乙型肝炎（乙肝）患者血清乙肝表面抗原（HBsAg）水平与乙肝病毒（HBV）．DNA载量之间的定量关系,为HBsAg定量结果的临床应用提供实验依据。方法回顾性分析有肝病理活检,同时检测HBsAg定量与HBV—DNA的182例慢性乙肝患者临床资料。从3个角度分组分析各组HBsAg水平与HBV—DNA载量的线性关系：依据182例患者HBV．DNA载量结果（0．000～5．745）的分布规律,分为低载量组（0．000-1．915）、中载量组（〉1．915～3．830）和高载量组（〉3．830～5．745）,即相当于原始结果的0～104、〉104～106、〉106-108U／mL;依据乙肝e抗原（HBeAg）结果分为阴性组和阳性组;依据纤维化病变的程度分为无明显纤维化组（S0-S1期）、明显纤维化组（S2-S3期）和早期肝硬化组（s4期）。结果HBV．DNA低、中、高载量组间HBsAg水平差异比较：总体水平以及HBV．DNA高载量组与低、中载量组间比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;HBV．DNA低、中载量组间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。HBV．DNA载量与HBsAg水平的线性关系：总体呈负相关『相关系数（r）=-0．448,P〈O．01];HBV—DNA低、中栽量或HBeAg阴性时,二者均无相关性（P〉0．05）;HBV．DNA高载量、HBeAg阳性及肝纤维化病变各组二者呈高到低度负相关（r=-0．553、-0．635、-0．459,P〈O．01）;随肝纤维化病变程度的进展,二者相关性下降（r=-0．535、-0．459、-0．218,P〈O．05）,HBeAg阳性时的相关性最高（r=-0．635,P〈O．01）。结论慢性乙肝患者HBsAg水平与HBV—DNA载量呈负相关,但不能直接反映HBV复制的状态．实际工作中对HBsAg定量结果应依据病程和HBeAg等相关检查进行分析和合理应用。     

乙肝病毒前S1抗原与乙肝病毒血清标志物联合检测的临床意义

目的探讨乙肝病毒前S1抗原(PreS1-Ag)与乙肝病毒血清标志物(HBV-M)联合检测在临床应用中的意义。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定328例乙型肝炎患者血清中PreS1-Ag和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)5项HBV血清标志物。结果 PreS1-Ag在HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)组和HBsAg(+)、HBeAg(+)组的阳性率显著升高,分别为87.3%和80.0%;在HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)组和HBsAg(+)、HBcAb(+)组及HBsAg(+)组的PreS1-Ag阳性率分别为47.5%、63.9%和25.0%;PreS1-Ag在HBeAg(+)组的阳性率为86.2%,明显高于在HBeAg(-)组的52.1%(χ2=21.33,P<0.01);328例乙型肝炎患者中,PreS1-Ag阳性率为61.9%,HBeAg阳性率为28.7%(χ2=73.098,P<0.01)。结论 PreS1-Ag能较好地反映HBV的复制情况,且对HBV感染的早期诊断和判断治疗效果具有重要的临床意义。     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床应用

目的 探讨乙型肝炎病毒前S1( PreSl)抗原检测在乙型肝炎诊断中的临床意义。方法 采用ELISA检测HBV血清标志物,取其中阳性标本254份,并按不同模式分为三组,分别检测各组乙肝前Sl抗原、HBV DNA和ALT并进行比较分析。结果 前S1抗原和HBV-DNA在HbsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)的检...     

前S1抗原检测在乙型肝炎诊断中的应用

目的 通过对乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原与HBV血清标志物检测的对比分析,对HBV前S1抗原的临床意义进行探讨.方法 用酶联免疫吸附实验(ELISA)对HBV血清标志物和HBV前S1抗原进行检测.结果 对HBV血清标志物不同组合模式进行分析发现:HBV血清标志物传染性强(HBeAg阳性)的模式中,HBV前S1抗原的检出率为94.0%;HBV血清标志物传染性弱(HBeAg阴性)的模式中,HBV前S1抗原的检出率为15.6%;乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)均为阴性的模式中,HBV前S1抗原均是阴性.结论 HBV前S1抗原与HBeAg在很大程度上具有一致性,其阳性可作为HBV复制的重要依据和HBV存在的指标.     

HBV病毒复制机制及慢性乙型肝炎药物靶点

乙型肝炎病毒(HBV)感染是一种严重影响公共卫生与人体健康的全球性流行性疾病,尽管乙肝防治已有很大提高,但仍缺乏高效的药物与手段。研究表明,肝损伤、肝衰竭程度与HBV及宿主免疫系统相互作用存在复杂关系。因而详细地探明HBV生命周期和感染过程,为研究HBV药物靶点和制定新的抗病毒策略提供前期坚实的基础,意义重大。该文详细介绍HBV病毒复制机制,并系统地阐述近年来新发现的和潜在的药物靶点,为制备新型的抗HBV药物提供参考。     

乙型肝炎病毒感染者血清前S1抗原检测的临床意义

目的：分析乙型肝炎病毒（HBV）前S1抗原与其他HBV标志物的关系，并探讨其相应的临床意义。方法：用酶联免疫吸附试验方法（EHSA）检测95例HBV病毒感染者血清标志物和前S1抗原，并对结果进行分析。结果：前S1抗原在HBeAg阳性组合中的检出率明显高于HBeAg阴性组合者（P〈0．05）；HBV感染者抗HBc-IgM与前S1抗原检出率差异有显著性（P〈0．05），HbcAb-IgM与前S1抗原的关系不密切（r=-0．1045）。结论：前S1抗原是反映HBV感染、复制的指标，与HBV标志物联合检测可为乙型肝炎的诊断、治疗提供更可靠的依据。     

HBx蛋白对α干扰素诱导的MxA蛋白表达的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)HBx蛋白(HepatitisB virus X protein)对α干扰素(IFN-α)诱导的抗病毒蛋白的影响及相关机制。方法以表达HBx蛋白的重组质粒FL1-145HBx转染人肝胚瘤细胞株HepG2细胞,经IFN-α处理后,RT-PCR法分析细胞内抗病毒蛋白MxA和JAK-STAT信号转导途径分子STAT1 mRNA表达水平,同时运用免疫印迹检测细胞内HBx、p-ERK、p-STAT1和t-STAT1等蛋白的表达。结果转染细胞内MxA、STAT1的mRNA和p-STAT1、t-STAT1的蛋白表达水平明显减少(P<0.05);而ERK抑制剂PD98059预处理后,转染细胞内MxA、STAT1 mRNA水平能够恢复至转染前的表达水平。结论 HBx蛋白很可能通过影响IFN-αJAK-STAT信号转导途径分子而抑制抗病毒蛋白MxA的表达;ERK信号转导途径的活化可能参与这一抑制过程。