镉对心肌细胞动作电位的影响及硒的保护作用

目的探讨镉（Ｃｄ）对心肌的毒性作用机制及硒的保护效应。方法在培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞上观察了镉对膜电位活动的影响及亚硒酸钠和硒代蛋氨酸的保护作用。结果镉使心肌细胞动作电位幅值（ＡＰＡ）、超射（ＯＳ）、阈电位（ＴＰ）、最大舒张电位（ＭＤＰ）及最大除极速率（Ｖｍａｘ）显著降低；复极化时程（ＡＰＤ）明显缩短；动作电位发放频率（ＡＰＦ）明显加快。硒与镉按等摩尔浓度加入（１０μｍｏｌ／Ｌ），亚硒酸钠和硒代蛋氨酸均可减轻镉对心肌细胞动作电位参数ＡＰＡ、ＴＰ、ＭＤＰ、Ｖｍａｘ等的影响，但两种硒化合物对动作电位复极化时程的影响表现不一致，前者延长ＡＰＤ，后者未能改变镉对ＡＰＤ的影响。结论镉能抑制心肌细胞的跨膜电位；亚硒酸钠和硒代蛋氨酸均可不同程度地减轻镉对心肌细胞动作电位的影响。     

丁烯酸内酯对心肌细胞跨膜电位的影响及硒的保护作用

丁烯酸内酯对培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞动作电位呈双相性效应，即在１００ｍｇ·Ｌ－１以下时使动作电位幅值、超射、阈电位、最大舒张电位、最大除极速率以及复极化时程一致增大；在２００ｍｇ·Ｌ－１以上时使这些参数减小。提示丁烯酸内酯在低剂量时能激活Ｃａ２＋通道，而在高剂量时能抑制Ｃａ２＋通道。含硒０５ｍｇ·Ｌ－１的亚硒酸钠和硒代蛋氨酸能减轻丁烯酸内酯（５００ｍｇ·Ｌ－１）对心肌细胞动作电位的抑制作用。     

硒多糖、亚硒酸钠对大鼠血硒浓度和肝细胞色素P_(450)单加氧酶系的影响

研究了一次和连续７天腹腔注射硒多糖、亚硒酸钠对大鼠血硒浓度及肝细胞色素Ｐ４５０、ｂ５、ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ－细胞色素Ｃ还原酶、谷胱甘肽硫转移酶（ＧＳＴ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的影响；并比较了硒多糖与亚硒酸钠的作用。结果表明：一次腹腔注射Ｓｅ０．６ｍｇ／ｋｇ体重的硒多糖和亚硒酸钠后，血硒浓度迅速增加，在注射后２小时血硒浓度达到高峰，随后血硒浓度逐渐下降。亚硒酸钠在大鼠体内的吸收和排出均较硒多糖快。连续７天腹腔注射０．２ｍｇ／ｋｇ体重剂量硒多糖和亚硒酸钠后，硒多糖和亚硒酸钠组大鼠血硒浓度分别为对照组的２．６倍和２．１倍，其中硒多糖组的血硒含量显著高于亚硒酸钠组（Ｐ＜０．０５）；硒多糖和亚硒酸钠在体内、外均降低肝细胞色素Ｐ４５０、ｂ５的含量，抑制ＧＳＴ的活性，硒多糖的作用尤为显著，分别为对照组的５７％、７０％和６２％（Ｐ＜０．０５）。两种硒化合物对ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ－细胞色素Ｃ还原酶无明显影响。硒多糖和亚硒酸钠均能显著增强ＧＳＨ－Ｐｘ的活性（Ｐ＜０．０５）。     

硒对氟引起脾脏损伤保护作用的实验研究

采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠６０只，分别饮用含氯化钠１５０ｍｇ／Ｌ（折算每日剂量为１５ｍｇ／ｋｇ）及氟化钠１５０ｍｇ／Ｌ加不同剂量亚硒酸钠的水，二个月后断头处死，取脾脏作光镜、组织化学观察。结果：氟化钠组脾小结与周围界线不清，红髓充血，淋巴细胞核固缩，免疫细胞反应程度降低，糖原ＰＡＳ反应，ＤＮＡ（Ｆｅｕｌｇｅｎ）反应减弱。脾门肥大细胞少。氟化钠加亚硒酸钠２０ｍｇ／Ｌ组（亚硒酸钠折算每日剂量为０２ｍｇ／ｋｇ）脾小结结构清楚，有的可见生发中心，动脉鞘、红髓结构正常。淋巴细胞膜、核结构完整。免疫细胞分布成群，糖原ＰＡＳ反应、ＤＮＡ（Ｆｅｕｌｇｅｎ）反应呈强阳性。脾门肥大细胞多。提示：亚硒酸钠２０ｍｇ／Ｌ对氟引起脾脏损伤有一定的保护作用     

不同浓度硒拮抗氟致肾脂质过氧化和微量元素影响的研究

给雄性ＳＤ大鼠饮用含氟化钠（１５０ｍｇ／Ｌ）及同时分别加入不同浓度亚硒酸钠（０．５、２．０和４．０ｍｇ／Ｌ）的饮水共１０周，观察氟及硒与氟联合作用对肾脏的脂质过氧化作用和微量元素铜、锌、铁含量的影响，以找出硒对氟毒性拮抗作用的最佳水平。结果表明，氟可使大鼠血清和肾组织脂质过化物含量明显增加，微量元素铜、锌、铁代谢紊乱。２．０ｍｇ／Ｌ亚硒酸钠对氟诱导的脂质过氧化具有显著的拮抗作用，对微量元素的改变也有明显的作用，而０．５和４．０ｍｇ／Ｌ时对氟毒性的拮抗作用均较差。因此，可以认为２．０ｍｇ／Ｌ亚硒酸钠是本实验条件下拮抗氟致肾损害的最佳水平。     

膳食维生素B_6对硒的生物利用率影响的研究 Ⅰ．对补硒大鼠组织硒含量的影响

研究膳食维生素Ｂ６（ＶＢ６）对大鼠组织中硒水平的影响。喂饲４周龄断乳雄性大鼠缺ＶＢ６缺硒的酪蛋白蔗糖基础膳食，２周后按体重把动物分成１０组。实验是２×２×２析因设计，２个水平ＶＢ６（每克膳食含０和２．５０μｇ盐酸吡哆醇），２种形式硒（亚硒酸钠和ＤＬ－硒蛋氨酸），２个硒水平（每公斤膳食含０．５和５．０ｍｇ硒），加上２个缺硒组（缺ＶＢ６和补ＶＢ６）。实验期为４周。结果在饲硒蛋氨酸的缺ＶＢ６组，血浆硒水平高于对应的补ＶＢ６组，但是缺ＶＢ６各组的红细胞中硒含量均显著低于补ＶＢ６各组。缺ＶＢ６时，饲亚硒酸钠动物的骨骼肌和心肌中硒水平均显著低于补ＶＢ６的动物；饲硒蛋氨酸大鼠的骨骼肌、心肌、脾、肝和肾脏中硒含量均显著高于补ＶＢ６组。提示ＶＢ６参与了硒在体内的转运以及硒蛋氨酸在肝脏中的代谢过程。     

维生素B6对硒的生物利用率影响的研究：IV.对大鼠体内不同化学形式硒…

４周龄雄性大鼠饲缺维生素Ｂ６（ＶＢ６）缺硒酪蛋白蔗糖基础饲料，３周后按体重把动物分成１０组，即基础饲料组、基础饲料中补充含硒０．２５ｍｇ／ｋｇ饲料的硒酸钠组、亚硒酸钠组、ＤＬ－硒蛋氨酸组或硒胱氨酸组，在此基础上每种饲料又分成补充或不补充盐酸吡哆醇２．５０μｇ／ｇ饲料两组。实验期为４周。补ＶＢ６各组的红细胞、骨骼肌和心肌中硒水平和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性均显著高于相应缺ＶＢ６各组，ＶＢ     

不同浓度硒对大鼠尿氟排泄及氟致肾损害影响的研究

给雄性ＳＤ大鼠饮用含氟化钠（１５０ｍｇ／Ｌ）及同时分别加入不同浓度亚硒酸钠（０．５、２．０和４．０ｍｇ／Ｌ）的饮水共１０周,观察氟及硒氟联合作用对大鼠尿氟排泄及肾脏损害的影响,以找出硒拮抗氟毒性的最佳水平。结果表明,氟暴露大鼠血清氟和尿氟水平明显升高,并引起肾脏病理、酶组织化学和超微结构显著异常。２．０ｍｇ／Ｌ亚硒酸对尿氟排泄的促进作用,及氟致肾脏损害的拮抗作用最强,０．５ｍｇ／Ｌ时对氟致肾损害的     

补硒对低硒居民血小板活化状态的影响

应用１２５Ｉ标记放免法测定血浆血栓素（ＴＸＡ２）、前列环素（ＰＧＩ２）和血小板ＴＸＡ２生成，以比浊法和ＥＬＩＳＡ分别测定血小板聚集性和β－血小板球蛋白（βＴＧ），电镜观察血小板形态，对比研究补硒（２００μｇＳｅ／ｄ，亚硒酸钠，１２周）和未补硒低硒居民上述参数的变化。用２，３－二氨基萘荧光法和谷胱甘肽还原酶偶联法测定硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性。结果表明，补硒使红细胞硒和ＧＳＨ－Ｐｘ活性显著增高（Ｐ＜０．０１）；血浆ＴＸＡ２、ＴＸＡ２／ＰＧＩ２比值及血小板ＴＸＡ２生成和聚集性均显著低于未补硒组（Ｐ＜０．０１或０．０５），但血浆ＰＧＩ２和βＴＧ含量以及血小板βＴＧ含量和释放率无显著改变（Ｐ＞０．０５）；补硒可明显减轻病区低硒居民血小板的形态变化，使α－颗粒数显著高于未补硒组（Ｐ＜０．０１）；红细胞硒或ＧＳＨ－Ｐｘ活性分别与血浆ＴＸＡ２和血小板ＴＸＡ２生成呈显著负相关（ｒ＝－０．６９６，－０．７８０；－０．６７６和－０．７９６，Ｐ＜０．０１），与ＡＤＰ诱导的血小板聚集性显著负相关（ｒ＝－０．３９０，－０．３７２，Ｐ＜０．０５）；与凝血酶诱导的聚集性呈不显著的负相关（ｒ＝－０．２７９，－０．３０９?     

低硒并低铬对大鼠心肌细胞电生理的影响

为进一步阐明克山病心肌细胞损害的机理,用细胞内微电极技术分别观察了正常对照、低Ｓｅ、单纯低Ｃｒ、低Ｓｅ低Ｃｒ饲料饲养１４周后大鼠心肌细胞电生理的改变。结果表明：单纯低铬组无变化;单纯低硒组静息电位（ＲＰ）,电位幅度（ＡＰＡ）降低,电位时程（ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０）延长;低硒并低铬组ＲＰＡＰＡ降低,ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０明显延长。提示：缺硒并低铬可明显改变心肌细胞的电生理特性     

镰刀菌毒素DON对心肌细胞膜电位的影响及硒的保护效应

目的 观察镰刀菌毒素单端孢霉烯族化合物脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对培养心肌细胞动作电位的影响及亚硒酸钠的保护效应。方法 取新生1～2d龄Wistar大鼠,分离心肌细胞,培养基为80％DMEM与20％小牛血清,于37℃,在含5％CO2与95％空气的培养箱内进行培养,于培养后第4天,引导心肌细胞动作电位为加入毒素前对照,然后向培养基中分别加入50、100和200mg／L DON,以观察不同剂量DON对心肌细胞动作电位的影响。在培养基中加入含0．5mg／L硒的亚硒酸钠,继续培养16h后,观察硒对DON致心肌细胞膜电位改变的保护作用。结果 DON使心肌细胞去极化过程发生改变,动作电位(APA)、最大除极速度(Vmax)、超射(OS)及阈电位(TP)均减小,部分参数指标存在较明显的剂量效应关系。OS在DON为50mg／L时出现增高现象。复极化过程的变化,复极动作电位时程(APD)明显延长;最大舒张电位(MDP)减小;动作电位发放频率(APF)受到明显的抑制,且存在明显的剂量依存关系。在培养基中加入含0．5mg／L硒的亚硒酸钠,继续培养16h后,200mg／LDON对其心肌细胞动作电位的抑制作用明显减弱,但部分参数(APA、Vmax、OS、TP、APD90及APF)没有完全保持在正常对照组水平,亚硒酸钠不能完全对抗DON引起的心肌细胞动作电位的改变。结论 DON能抑制大鼠培养心肌细胞的跨膜电位,初步表明亚硒酸钠可减轻DON对心肌动作电位的影响,呈现明显的保护作用。     

镉对心肌细胞Ca^2＋通道的阻滞作用及硒的保护效应

目的探讨镉（Ｃｄ）对心肌细胞Ｃａ２＋通道阻滞作用的机制,比较亚硒酸钠（ＮａＳｅ）与硒代蛋氨酸（ＳｅＭｅｔ）两种硒化合物的保护效应。方法在培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞上观察Ｂ、Ｌ、Ｔ三型Ｃａ２＋通道的单通道电活动。结果Ｃｄ浓度为１０μｍｏｌ／Ｌ时,心肌细胞Ｂ、Ｌ型Ｃａ２＋通道受到明显阻滞;而对Ｔ型Ｃａ２＋通道没有影响。在加入Ｃｄ的同时,分别加入等浓度的ＮａＳｅ和ＳｅＭｅｔ,ＮａＳｅ能拮抗Ｃｄ对Ｂ、Ｌ型Ｃａ２＋通道的阻滞作用,ＳｅＭｅｔ仅能减轻Ｃｄ对Ｌ型Ｃａ２＋通道的阻滞,而且使Ｔ型Ｃａ２＋通道的关闭时间延长。结论Ｃｄ对心肌细胞Ｂ、Ｌ型Ｃａ２＋通道具有明显的阻滞作用,而对Ｔ型Ｃａ２＋通道没有影响;两种硒化合物均可影响Ｃｄ致心肌细胞膜Ｃａ２＋通道的阻滞作用,ＮａＳｅ的保护作用比ＳｅＭｅｔ更有效。     

Dietary selenium and arsenic affect DNA methylation in vitro in Caco-2 cells and in vivo in rat liver and colon

Selenium is an essential trace element for human health, and it has received considerable attention for its possible role as an anticarcinogenic agent. The purpose of the present study was to determine whether changes in the amount and the chemical form of selenium would affect DNA methylation and whether this effect would be modified by arsenic. Caco-2 cells, a human colon cancer cell line, were exposed to 0, 1 or 2 micromol supplemental selenite/L and 0, 1 or 2 micromol supplemental arsenite/L for 7 d. DNA isolated from Caco-2 cells not treated with selenite was significantly (P: < 0. 0001) hypomethylated compared with that from cells treated with 1 or 2 micromol selenite/L. DNA isolated from Caco-2 cells not treated with arsenite was significantly (P: < 0.0001) hypomethylated compared with DNA isolated from cells treated with 1 or 2 micromol arsenite/L. In addition, methylation of the p53 promoter region of Caco-2 cells decreased when cells were cultured in the absence of selenite and in the absence of arsenite. Sixty weanling male Fischer 344 rats were fed a torula yeast-based diet supplemented with 0, 0.1 or 2 mg selenium/kg diet as either selenite or selenomethionine in the presence or absence of 5 mg arsenic/kg diet as arsenite for 6 wk. Similar to the results with Caco-2 cells, rats fed selenium-deficient diets had significantly (P: < 0.0001) hypomethylated liver and colon DNA compared with rats fed 0.1 or 2.0 microg selenium/g diets as either selenite or selenomethionine. Thus, alterations in DNA methylation may be a potential mechanism, whereby deficient dietary selenium increases liver and colon tumorigenesis.     

硒对氟中毒致大鼠肾脏损伤的干预作用

目的探讨硒对氟致大鼠肾脏损伤的干预作用。方法实验以雄性SD大鼠为动物模型分为预防试验、治疗试验。预防试验以先水后氟为对照组,即大鼠先饮用自来水后饮用50mg/L的氟化钠溶液,3个先硒后氟组分别先饮用0.375、0.75、1.5mg/L的亚硒酸钠溶液,再饮用50mg/L的氟化钠溶液,先后暴露的时间各为6个月。治疗试验与预防试验喂养顺序相反,以先氟后水为对照组,3个先氟后硒组,氟化钠和亚硒酸钠溶液浓度与预防试验相同,先后暴露时间也各为6个月。染毒完毕后测定大鼠肾脏组织的氧化水平和核因子κB(NF-κB)的表达水平。结果预防试验中,与先水后氟对照组相比,先低硒后氟组和先中硒后氟组GSH-Px活性显著升高(P<0.05);先低硒后氟组丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),NF-κB的表达水平显著降低(P<0.05)。治疗试验各项指标均无统计学差异(P>0.05)。结论硒对氟中毒致大鼠肾脏损伤的干预方式中,硒的预防效果好于治疗效果,其中0.375mg/L是本实验条件下硒对慢性氟中毒致大鼠肾脏损伤的较有效的预防作用剂量,NF-κB表达水平的变化可能是硒对氟中毒预防作用的关键环节之一。     

Toxicity of organic and inorganic selenium to mallard ducklings

The toxicity of selenomethionine and sodium selenite to mallard ducklings (Anas platyrhynchos) was measured by feeding each form from hatching to six weeks of age at dietary concentrations of 0, 10, 20, 40, and 80 ppm selenium. At 80 ppm selenium, sodium selenite caused 97.5% mortality by six weeks and selenomethionine caused 100% mortality. At 40 ppm, these two forms of selenium caused 25 and 12.5% mortality. No mortality occurred at 10 or 20 ppm. Diets containing 20, 40, or 80 ppm selenium in both forms caused decreases in food consumption and growth. The only statistically significant effect of 10 ppm selenium was with sodium selenite, which resulted in larger livers than controls. Selenomethionine was more readily stored in the liver than sodium selenite at levels above 10 ppm selenium in the diet. Based on comparisons of residues of selenium in livers of surviving and dead ducklings, concentrations in the liver were not diagnostic of death due to selenium poisoning. Because both forms of selenium resulted in severe reductions in food consumption, selenium-induced starvation may have been related to duckling mortality. It was not clear whether either form of selenium at 10 ppm in the diet resulted in a leveling off of selenium concentrations in the liver within six weeks.     

Vitamin B6 dependence of selenomethionine and selenite utilization for glutathione peroxidase in the rat.

The biological availability of selenium from sodium selenite and selenomethionine for glutathione peroxidase activity was studied. Rats were fed ad libitum for 2 weeks a basal diet deficient in both selenium and vitamin B6, and then for the subsequent 2 weeks the same diet supplemented with vitamin B6 (2.5 micrograms as pyridoxine-HCl/g diet) or selenium (2 microgram/g diet) or both. In the presence of vitamin B6, selenite and selenomethionine increased equally the glutathione peroxidase activity in both the liver and erythrocytes above that of selenium-unsupplemented controls. In the absence of vitamin B6, selenomethionine was less effective in the liver and ineffective in the erythrocytes while selenite was equally effective in both tissues and was as effective as in the presence of vitamin B6. These results indicate that selenite selenium is readily available for glutathione peroxidase induction as compared with selenomethionine, and establish that vitamin B6 is involved in the metabolism of selenomethionine to supply selenium for glutathione peroxidase.     

亚硒酸钠和硒蛋氨酸的毒性比较

目的　比较亚硒酸钠和硒蛋氨酸毒性差异以及探讨硒中毒的指标。方法　将断乳Wistar大鼠随机分为 7组 ,每组 14只 ,雌雄各半。其中一组为对照组 ,另外六组分别给予含硒 3、6、10mg kg的亚硒酸钠或硒蛋氨酸饲料 ,于第 12周将其处死。结果　当饲料硒水平达到 3mg kg时 ,动物肝脏出现病理变化 ,在Se6mg kg时 ,体重才出现下降。饲料硒水平为 6、10mg kg时 ,同一饲料硒水平的亚硒酸钠组大鼠体重小于硒蛋氨酸组。饲料硒水平为 3、6mg kg时 ,硒蛋氨酸组大鼠的肝脏病理改变轻于亚硒酸钠组 ,雄性大鼠轻于雌性。亚硒酸钠组较硒蛋氨酸组或雌性大鼠较雄性大鼠在肝脏体重比方面变化更为明显。除雌性大鼠肝脏谷胱甘肽过氧化物酶 (GPX)活性随硒水平升高而降低外 ,其它补硒各组肝、红细胞、血浆GPX活性具有随硒水平的升高而升高的趋势。结论　大鼠硒中毒的剂量为Se 3mg kg,硒蛋氨酸的毒性小于亚硒酸钠 ,雌性大鼠对硒毒性更为敏感     

亚硒酸钠对顺铂诱发人体淋巴细胞SCE作用的影响

目的 检测无毒性剂量的亚硒酸钠对顺铂诱发人体淋巴细胞姐妹染色单体交换(SCE)作用的影响。方法 植物血球凝集素，(PHA)刺激的人体外周淋巴细胞在培养24h后用顺铂(0．05、0．20、0．50mg／L)单独处理或与亚硒酸钠(0．05mg／L)联合处理，亚硒酸钠在细胞培养0h或48h时加入；细胞培养72h后分析SCE频率的变化。结果 细胞经0．05mg／L亚硒酸钠处理SCE频率未发生显性改变；0．05～0．5mg／L顺铂均显增加SCE，呈现明显的剂量—反应关系；预加或与顺铂同时加入0．05mg／L剂量的亚硒酸钠未显影响顺铂诱发SCE的作用。结论 0．05rng／L剂量亚硒酸钠无论预处理还是与顺铂同时处理细胞均不能拮抗顺铂诱发SCE的作用。     

硒对镉诱导的在体大鼠肝细胞DNA损伤、细胞凋亡和细胞增殖的影响

目的　研究亚硒酸钠对氯化镉诱导的大鼠肝细胞DNA损伤、细胞凋亡、细胞增殖周期变化以及DNA相对含量的影响。方法　选用雄性SD大鼠 ,每组 5只 ,用 5 μmol/kg亚硒酸钠分别与5、10和 2 0 μmol/kg的氯化镉联合作用 ,腹腔注射染毒。用单细胞凝胶电泳研究DNA损伤 ,用末端标记法 (TUNEL)和流式细胞术检测大鼠肝细胞凋亡 ,用流式细胞术研究细胞增殖周期和DNA相对含量。结果　 5 μmol/kg的亚硒酸钠对 5、10和 2 0 μmol/kg的氯化镉引起的DNA损伤和细胞凋亡显示出良好的拮抗作用 ,也可使DNA损伤率和细胞凋亡率显著下降。 5 μmol/kg的亚硒酸钠明显抑制5 μmol/kg氯化镉引起的G0 /G1期细胞减少 ,并使 10 μmol/kg和 2 0 μmol/kg氯化镉引起减少的G2 /M期细胞显著增多。 5 μmol/kg的亚硒酸钠还对 10 μmol/kg和 2 0 μmol/kg氯化镉引起的DNA相对含量的下降表现出拮抗作用。结论　一定剂量的亚硒酸钠对一定剂量的氯化镉诱导的DNA损伤、细胞凋亡、细胞增殖周期变化和DNA相对含量下降具有一定的拮抗作用