香菇多糖及抗突变作用的研究

目的：本研究对香菇中的所含多糖进行了测定；根据体外原核与体内的真核细胞相结合的原则，对香菇取液中的多糖部分进行了抗突变作用的研究。方法：用硫酸-苯酚法测定多糖，采用鼠伤寒沙门氏菌／微粒体酶试验（Ames）方法；活体小鼠骨髓细胞微核试验方法，对香菇提取液（多糖部分）进行了抗突变试验。结果：香菇中多糖含量为0．252mg（干品计）。香菇提取液（多糖部分）的各剂量组在加与不加微粒体酶活化系统（S9）的条件下，均能抑制由敌克松（Dexon）；甲基甲烷磺酸酯（MMS）；2-乙酰氨基芴（2-AAF）所引起的TA98、TA100回变菌落数的增加；抑制率分别为37．7％、69．8％、70．3％、78．1％、39．0％、78．1％、83．0％、88．6％。抑制由环磷酰胺（CP）引起的小鼠微核率的增加。抑制率分别为31．80％、52．80％、63．10％。结论：香菇具有一定的抗突变作用。     

峨眉茶抗突变试验

峨嵋茶为四川峨嵋山生长的一种优质绿茶。本文采用小鼠微核试验、小鼠精子畸变试验、姊妹染色单体互换试验对峨嵋茶及其茶多酚的抗突变作用进行研究。结果：峨嵋菜水浸液浓度为１．２５％—２．５％时，对环磷酰胺诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核抑制率为４１％—４５％、小鼠精子畸变抑制率为７３．５％—８２．３％、每毫升培养液含峨嵋菜水浸液２０、２００ｍｇ、峨嵋茶茶多酚２、２０、２００ｍｇ时，对丝裂霉素Ｃ诱发人外周血淋巴细胞姊妹染色单体互换抑制率分别为３７．５％—４９．５９％；３６．１２％—６９．８１％。表明：峨嵋茶及其茶多酚对环磷酰胺诱发小鼠骨髓微核出现率、小鼠精子畸变率、丝裂霉素Ｃ诱发人外周血淋巴细胞姊妹染色单体互换率均有较好抑制作用。     

茶黄色素的毒理学研究

对茶叶提取物茶黄色素的急性毒性、蓄积毒性和致突变作用进行了研究。结果表明：茶黄色素属基本无毒类；无明显蓄积作用；但大鼠和小鼠经口染毒均可见明显中枢神经系统中毒症状和肺弥漫性出血灶；茶黄色素３７５、７５０、１５００ｍｇ／ｋｇ剂量组小鼠骨髓ＰＣＥ微核率分别为２．０‰，２．８‰．２．４‰，与阴性对照组（２．８‰）相比均无显著性差异；Ａｍｅｓ实验中３１２．５μｇ、６２５μｇ、１２５０μｇ、２５００μｇ５０００μｇ／皿各剂量组ＴＡ９７、ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１０２等不同菌株加与不加Ｓ９ＭＲ均小于２；茶黄色素３７５、７５０１５００ｍｇ／ｋｇ各剂量组小鼠睾丸级精母细胞染色体畸变率与对照组比较无明显差异，而１５００ｍｇ／ｋｇ剂量组小鼠睾丸初级精母细胞性染色体单价体（４．８％）和常染色体单价体（５．６％）与对照组（２．５％，２．５％）比较有显著差异。     

叶绿酸铜钠对卷烟焦油诱变性的抑制作用

选用小鼠骨髓细胞微核实验及小鼠睾丸染色体畸变实验探讨叶绿酸铜钠对卷烟焦油（ＴＰＭ）诱变性的抑制作用．结果表明．２５～１００ｍｇ／ｋｇ体重的叶绿酸铜钠可不同程度的降低ＴＰＭ诱导的微核率，抑制率为２８．５１％～５４．９７％，５０、１００ｍｇ／ｋｇ体重的叶绿酸铜钠对小鼠睾丸精母细胞染色体畸变的抑制率分别为４０．６３％、５６．２５％．提示：叶绿酸铜钠对卷烟焦油是一种抗诱变物质．     

党参黄芪水提取物抗突变作用的研究

用间接诱变剂环磷酰胺诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核，进行抑制诱变试验，观察党参黄芪水提取物的抗诱变作用。实验结果表明，党参黄芪水提取物本身无诱变性，对环磷酰胺诱发的微核细胞率有明显的抑制作用。１０、２０、４０ｇ／ｋｇ剂量的药物，抑制诱变率分别为４５．８２％、５５．５８％、６２．５４％。说明党参黄芪水提取物具有抗诱变作用，消除自由基可能是其抗诱变作用的机理之一。     

YK保健液的毒性与动物移植性肿瘤试验研究

对ＹＫ保健液进行一、二阶段毒理试验和大、小鼠动物移植性肿瘤试验的结果表明：（１）雌雄两性大、小鼠的经口ＬＤ５０均＞１０ｇ／ｋｇ，属实际无毒类物质。小鼠骨髓微核试验和小鼠精子畸形试验各剂量组均未诱发微核增加和精子畸形率升高。Ａｍｅｓ试验结果表明，各受试剂量在加与不加活化系统（Ｓ９）的条件下不能诱发ＴＡ１００、ＴＡ９８、ＴＡ９７菌种发生突变。（２）Ｗ２５６瘤株的大鼠移植性肿瘤试验表明，中、高剂量组的瘤重抑制率＞３０％，经统计学处理差异显著（Ｐ＜０．０５），且呈剂量－效应关系。Ｓ１８０瘤株的小鼠移植性肿瘤试验，三个剂量组的瘤量抑制率均＞３０％，差异显著（Ｐ＜０．０５），具有一定的剂量－效应关系。可以初步认为ＹＫ保健液对Ｗ２５６、Ｓ１８０瘤株有一定的抑瘤作用。     

9种新鲜蔬菜抗诱变效应的研究

对９种新鲜蔬菜（胡萝卜、卷心菜、洋葱、大蒜、黄瓜、茄子、姜、菠菜、西红柿）进行了抗环磷酰胺诱导骨髓细胞微核试验及外周血微核试验。结果表明：除西红柿外，其它种蔬菜对环磷酰胺诱发小鼠骨髓细胞及外周血细胞染色体损伤均有抗诱变的能力。各实验组微核率明显低于阳性对照组微核率，有显著或极显著的差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。其中黄瓜的抗诱变能力又明显低于其它种蔬菜。     

镉染毒小鼠网织红细胞微核流式细胞术研究

目的通过流式细胞术(FCM)检测外周血微核方法，研究氯化镉(CdCl2)染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率，评价流式细胞术在微核检测中的应用价值及探讨氯化镉的致突变作用。方法采用转铁蛋白受体CD71荧光抗体和碘化丙啶(PI)染色，并以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核模式生物调校流式细肛仪．检测10～60mg／kg环磷酰胺染毒和50～400μg／kg氯化镉染毒对小鼠的外周血含微核网织红细胞率的变化。结果不同剂量环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率和骨髓含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠，且二者之间相关性良好(r=0．955)；不同剂量氯化镉染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率未见明显升高。结论FCM测定外周血含微核网织红细胞率可替代传统显微镜检查骨髓含微核网织红细胞率用于遗传毒性评价；在本研究条件下未观察到氯化镉有明显的诱导小鼠外周血含微核网织红细胞形成的作用。     

抗癌保健茶抗致突变作用试验研究

采用修改的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及修改的Ames试验研究了传统清热解毒中药为主要配方的抗癌保健茶抗致突变效果．结果：抗癌保健茶在剂量为16667mg／kg时，能明显地抑制由环磷酰胺诱发的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的发生率，在剂量为10000、5000和2500ug／皿时，能明显直接灭活致突变物TNF，降低TA98的回复突变菌落数；在剂量为10000、5000ug／皿时，能明显抑制TNT对TA98的致突变作用；在剂量为10000、50000ug／皿时，能明显地抑制已受TNF致突变作用的TA98的突变表达．上述结果均表现出良好的剂量－反应关系。     

药膳类佛菇食疗配方的实验研究

以“食药兼性”药品组成膳食类佛菇食疗配方，进行营养成份分析及试验。结果表明，三大产热营养素产热比分别为：蛋白质１２．３４％、脂肪５．６２％、碳水化合物８２．０％；本方水提取物对胃癌７９０１和Ｋ５６２细胞系集落形成的ＩＣ５０分别为３．５９ｇ／Ｌ和２５．７４ｍｇ／Ｌ，对７９０１和Ｋ５６２细胞的最大抑制率为５３．２％和５８．９％；水提取物对小鼠移植性肿瘤ＨｅｐＡ和Ｓ１８０最大抑制率为３５．３％和３５．０％。     

轮叶党参总皂苷抗突变作用的实验研究

[目的]探讨轮叶党参总皂苷的抗突变作用。[方法]用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、Ames试验及单细胞凝胶电泳试验，在体内和体外研究了轮叶党参总皂苷对直接或间接诱变剂遗传毒性损伤的保护作用。[结果]轮叶党参总皂苷可以明显抑制由环磷酰胺诱发的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核，并呈剂量-效应关系。体外培养的大鼠淋巴细胞同时用轮叶党参总皂苷和环磷酰胺处理时，DNA损伤细胞明显减少，且随着总皂苷浓度的升高，DNA损伤细胞逐渐减少。在未加S9时，3种浓度的轮叶党参总皂苷均明显抑制1FA98和TA100回复突变，其作用强度随浓度增高而逐渐增强。在加S9后，抗突变作用大于未加S9。[结论]轮叶党参总皂苷是抗突变活性成分。     

苦瓜对环磷酰胺致突变活性的影响

Inhibitory effects of balsam pear on the mutagenic activity of cyclophosphamide were studied in the cells of bone marrow of mouse in vivo. It was found that balsam pear juice itself showed no effect on the incidence of sister chromatid exchanges (SCE) and of micronuclei (MN) on the cells of bone marrow. But balsam pear juice reduced the incidence of SCE (from 29.1 times/cell to 13.27-28.38 times/cell) and MN (from 60.0% to 27.0%-50.0%) induced by cyclophosphamide respectively. The inhibitory effects showed a dose-dependent relation, which was statistically significant.     

流式细胞术检测体外微核方法的建立

目的 探讨基于流式细胞术(FCM)和细胞高内涵筛选技术(HCS)的两种高通量体外微核试验方法应用于化学品遗传毒性评价的可行性。方法 参考经济合作与发展组织(OECD)TG487推荐的程序方法,采用化学品遗传毒性评价的典型阳性剂环磷酰胺(CP)、丝裂霉素C(MMC)为受试物,CP剂量范围为5~20 mg/L,MMC剂量范围为0.25~1.0 mg/L,分别设3个剂量组,短时处理(4 h)体外培养的CHL细胞模型,分别建立基于FCM和HCS的高通量体外微核测试方法。平行采用传统胞质分裂阻断微核法,在加/不加代谢活化系统条件下,检测各剂量组细胞的微核形成情况,并分析微核细胞率。实验同步设置阴性对照组(无血清MEM培养液)。结果 经常规人工显微镜阅片和高通量方法的FCM及HCS得到的CP、MMC体外微核试验结果均为阳性：经CP诱导产生的微核细胞率(CP浓度由低到高)依次为1.9%、7.6%、10.4%(人工阅片),2.8%、2.6%、7.8%(FCM),2.8%、6.2%、9.1%(HCS);经MMC诱导产生的微核细胞率(MMC浓度由低到高)依次为5.9%、11.4%、16.7%(人工阅片),3.2%、3.7%、5.1%(FCM),7.9%、10.1%、10.2%(HCS)。受试物各剂量组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P < 0.05),且呈现剂量-反应关系。结论 在本试验条件下,流式细胞术、高内涵体外微核检测的方法与传统人工阅片的方法得到的检测结果均一致,提示体外微核高通量方法可以实现细胞微核形成的自动化检测,提高检测效率,可为将高通量体外微核测试方法纳入化学品遗传毒性评价相关标准提供数据支持。     

三种细胞形态学分析方法在体外微核检测中的比较研究

【目的】探讨基于流式细胞术(FCM)和细胞高内涵筛选技术(HCS)的两种高通量体外微核试验方法应用于化学品遗传毒性评价的可行性。【方法】参考经济合作与发展组织(OECD)TG487推荐的程序方法,采用化学品遗传毒性评价的典型阳性剂环磷酰胺(CP)、丝裂霉素C(MMC)为受试物,CP剂量范围为5~20 mg/L,MMC剂量范围为0.25~1.0 mg/L,分别设3个剂量组,短时处理(4 h)体外培养的CHL细胞模型,分别建立基于FCM和HCS的高通量体外微核测试方法。平行采用传统胞质分裂阻断微核法,在加/不加代谢活化系统条件下,检测各剂量组细胞的微核形成情况,并分析微核细胞率。实验同步设置阴性对照组(无血清MEM培养液)。【结果】经常规人工显微镜阅片和高通量方法的FCM及HCS得到的CP、MMC体外微核试验结果均为阳性:经CP诱导产生的微核细胞率(CP浓度由低到高)依次为1.9%、7.6%、10.4%(人工阅片),2.8%、2.6%、7.8%(FCM),2.8%、6.2%、9.1%(HCS);经MMC诱导产生的微核细胞率(MMC浓度由低到高)依次为5.9%、11.4%、16.7%(人工阅片),3.2%、3.7%、5.1%(FCM),7.9%、10.1%、10.2%(HCS)。受试物各剂量组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),且呈现剂量-反应关系。【结论】在本试验条件下,流式细胞术、高内涵体外微核检测的方法与传统人工阅片的方法得到的检测结果均一致,提示体外微核高通量方法可以实现细胞微核形成的自动化检测,提高检测效率,可为将高通量体外微核测试方法纳入化学品遗传毒性评价相关标准提供数据支持。     

秋水仙素和环磷酰胺诱发微核的多色荧光原位杂交研究

目的 分析秋水仙素和环磷酰胺诱导的小鼠骨髓红细胞微核的染色体组成。方法 用着丝粒和端粒ＤＮＡ探针多色荧光原位杂交检测微核的染色体组成。结果 水仙素诱导的微核８３．５％既含着丝粒信号又含端粒信号,环磷酰胺诱导的微核７４．５％只含端粒信号。结论秋水仙素诱导的微核主要由整条染色体组成,环磷酰胺诱导的微核则主要由染色体继片组成。着丝粒和端粒ＤＮＡ探针多色荧光原位杂交是一种较为精确的分析微核染色体组成的方法     

贵州桐梓方竹笋提取液抗突变作用的试验

目的研究贵州桐梓方竹笋抗突变作用,为更好利用方竹笋提供科学依据。方法采用方竹笋提取液进行小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验及Ames试验,观察方竹笋对体内真核细胞、生殖细胞试验及体外原核试验的抗突变作用。结果方竹笋提取液低、中、高3个剂量组的微核率和精子畸形率均低于阳性对照环磷酰胺组,差异有统计学意义(P<0.01),微核抑制率分别为44.41%、45.39%和54.28%;精子畸形抑制率分别为31.74%、46.58%和74.66%;Ames试验采用A、B两种方法进行,结果显示,在加S9活化系统的条件下,A(受试物直接灭活致突变物)、B(受试物间接灭活致突变物)两种方法方竹笋液均能抑制由二乙酰氨基芴(2-AAF)所引起的TA98、TA100的回变菌落数增加,当剂量为20 mg/皿时抑制率均达到93.29%以上,并呈现剂量-反应关系。在不加S9的条件下,方法 A方竹笋液可一定程度的直接灭活致突变物敌克松(Dexon)和甲基甲烷磺酸酯(MMS)引起的回变菌落数的增加,20 mg/皿时抑制率分别为31.75%、40.37%。结论方竹笋具有一定的抗突变作用。     

3株TT病毒的基因组结构特点及其在肝炎病人中感染情况

目的：了解TT病毒(TTV)分离株基因组结构特点及其在各型病毒性肝炎患中感染情况。方法：对49株TTV相关病毒全基因组结构进行分子进化树分析，比较从我国分离的3株TTV全基因结构与原型株的同源性，并采用巢式聚合酶链反应法(nPCR)对各型病毒性肝炎患血清中TTV DNA进行检测。结果：3株TTV分离株基因组全长为3739bp，有2个读码框架（ORFs），ORF1编码770个氨基酸，位于589-2901核苷酸；ORF2编码202个氨基酸，位于107-715核苷酸。与TTV原型株TA278的核苷酸同源性为86％-96％，ORF1氨基酸同源性为88％-97％，ORF2氨基酸同源性为79％-96％。全基因组序列分子进化树分析表明，从我国分离的3株TTV属于原型组。在180例各型病毒性肝炎患中，检出TTV DNA阳性40例，阳性率为22.2％。在甲-戊型肝炎、非甲、戊型肝炎、慢性乙型肝炎患和正常人中，TTV DNA流行率分别为24.2％（29/120），18.3％（11/60），17.8％（106/595）和19.8％（19/96），4组无显性差异。结论：从我国分离的3株TTV的全基因结构特点与原型株相似，各型病毒性肝炎、慢性乙型肝炎和正常人群TTV DNA流行率相对较高。     

0.2 MeV中子照射洋葱萌发种子后根尖细胞微核诱发率的研究

目的 了解单能中子的相对生物效应。方法 通过由Schenkel型加速器产生的0.2 MeV单能中子以及⁶⁰Co γ射线照射洋葱萌发种子,观察单位剂量的两种辐射在洋葱根尖细胞中微核诱发率的差异。结果 0.2 MeV单能中子单位剂量的微核诱发率为(133.0±6.4)% Gy^-1;⁶⁰Co γ射线单位剂量的微核诱发率为(3.59±0.19)% Gy^-1。以⁶⁰Co γ射线为参考辐射,0.2 MeV单能中子照射洋葱萌发种子后在根尖细胞中诱发微核的相对生物效应(RBE)值为37.0±2.7。结论 以⁶⁰Co γ射线为参考辐射,0.2 MeV单能中子照射洋葱萌发种子后在根尖细胞中诱发微核的RBE值高达37.0±2.7。因此,为更好地解明具有高线能传输(LET)的中子的生物效应机制,以及放射治疗的基础研究提供了一种较好的手段。     

0.5 MeV单能中子照射洋葱干种子后在根尖细胞内诱发微核的相对生物效应

目的 了解0.5 MeV单能中子照射洋葱干种子后在根尖细胞中诱发微核的相对生物效应(RBE)。方法 通过由加速器产生的0.5M eV单能中子和⁶⁰Co γ射线照射洋葱干种子,观察这两种辐射在根尖细胞中微核诱发率的差异。结果 单位剂量0.5 MeV中子和⁶⁰Co γ射线的微核诱发率分别为4.36±0.17和0.031±0.002(% Gy^-1)。因此,0.5 MeV单能中子照射洋葱干种子后在根尖细胞中诱发微核的RBE值为141±11。结论 0.5M eV单能中子照射洋葱干种子后在根尖细胞中诱发微核的RBE值高达141±11,一方面是由于低氧效应,另一方面就是中子照射所致DNA损伤的修复效率可能远远低于?射线照射所致的DNA损伤的修复效率。