幽门螺杆菌Tipα对胃癌细胞顺铂敏感性的影响

目的 基于磷酸肌醇-3激酶(PI3 K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路研究幽门螺杆菌肿瘤坏死因子-α诱导蛋白(Tipα)对胃癌细胞顺铂敏感性的作用机制.方法 使用Tipα刺激胃癌SGC-7901细胞,采用CCK8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白——PI3...     

片仔癀通过PI3K/Akt信号通路诱导人骨肉瘤U2OS细胞凋亡

目的探讨片仔癀诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）途径的关系。方法采用不同浓度片仔癀（0.4，0.8，1.2mg/mL）作用U2OS细胞，采用MTT法检测片仔癀对U2OS细胞增殖的影响；Hoechst 333258染色观察细胞凋亡情况；Western blot检测PI3K调节亚基p85α（PI3K p85α）、磷酸化PI3K调节亚基p85α（p-PI3K p85α）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、核多聚（ADP-核酶）聚合酶（PARP）、裂解PARP（Cleaved PARP）等PI3K/Akt途径相关蛋白的表达。结果片仔癀可明显抑制U2OS细胞的增殖，呈时间和浓度依赖性，诱导U2OS细胞凋亡；Western blot显示p-PI3K p85α、p-Akt蛋白表达明显下调，Cleaved PARP表达量增加，与空白对照组相比有明显差异（P<0.05）。结论片仔癀可通过抑制PI3K/Akt信号途径PI3K p85α、Akt磷酸化，促进PARP裂解，诱导骨肉瘤U2OS凋亡。     

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B和丝裂原活化蛋白激酶/细胞信号调节激酶1/2信号通路抑制剂对乳腺癌细胞缺氧诱导因子-2α表达的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶/细胞信号调节激酶1/2(MEK/ERK1/2)信号通路抑制剂对缺氧诱导的乳腺癌MCF-7细胞中缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达的影响.方法 乳腺癌MCF-7细胞常规培养24 h后,分为常氧组、缺氧组、缺氧+低剂量LY294002组...     

干扰素-γ通过PI3K/Akt/mTOR通路上调程序性死亡受体-配体1促进非霍奇金淋巴瘤细胞增殖

目的 探讨干扰素-γ(IFN-γ)调控程序性死亡受体-配体1(PD-L1)的表达对非霍奇金淋巴瘤(NHL)增殖的影响及其机制。方法 应用流式细胞术检测多种NHL细胞株中PD-L1的表达;利用IFN-γ处理NHL细胞株U937及Jeko-1后,通过流式细胞术及实时定量PCR(qRT-PCR)法检测PD-L1的表达水平;通过INF-γ及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路抑制剂共培养NHL细胞后,应用蛋白免疫印迹法及流式细胞术法检测NHL细胞PD-L1的表达水平;通过细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)和羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色掺入检测细胞增殖,应用Edu标记法检测细胞增殖率,并用流式细胞术检测细胞周期。结果 qRT-PCR法显示,多种NHL细胞株表面均表达PD-L1; IFN-γ处理后,U937及Jeko-1细胞PD-L1的mRNA及蛋白表达水平均升高;IFN-γ及信号通路抑制剂处理U937和Jeko-1细胞后,PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂抑制IFN-γ上调PD-L1的表达。IFN-γ及信号通路抑制剂...     

初步探讨乙型肝炎病毒X蛋白激活PI3K/Akt信号通路对肝癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)激活磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对肝癌细胞增殖和迁移的影响.方法 利用稳定表达HBx基因的肝癌细胞模型HepG2-HBX、Huh-7-HBX,运用阻断剂LY294002阻断PI3K/Akt信号通路后,采用Western blot方法分析HepG2-HBX和Huh-7-HBX细胞中p-Akt蛋白的表达水平的情况;采用CCK-8增殖实验和划痕愈合实验观测HepG2-HBX和Huh-7-HBX细胞的增殖和迁移能力.结果 与阴性对照肝癌细胞相比,稳定转染HBx基因的肝癌细胞中的p-Akt蛋白的表达增多(P<0.05),运用阻断剂LY294002阻断PI3K信号通路后,稳定转染HBx基因的肝癌细胞内的p-Akt蛋白表达降低(P<0.05).CCK-8增殖实验和划痕愈合实验结果均显示,与阴性对照肝癌细胞相比,稳定转染HBx基因的肝癌细胞的增殖能力和迁移能力增加(P<0.05).经阻断剂LY294002阻断PI3K/Akt信号通路后,稳定转染HBX的肝癌细胞的增殖和迁移能力减弱(P<0.05).结论 HBx可通过激活PI3K/Akt信号通路促进肝癌细胞增殖和迁移.     

围绝经期非器质性失眠妇女肝郁与PI3K/Akt信号通路的相关性研究

[目的]探讨肝郁影响围绝经期非器质性失眠的可能免疫学机制。[方法]收集围绝经期非器质性失眠妇女150例,通过四诊信息的采集获得患者的肝郁证素积分、肝郁分级及匹兹堡睡眠质量指数(PSQI),运用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测外周血单个核细胞(PBMC)中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(pAkt)的蛋白表达量,实时荧光定量PCR法(RT-QPCR)检测PBMC中PI3K、Akt的mRNA含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素1-β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。观察围绝经期非器质性失眠妇女的肝郁分级、PI3K/Akt信号通路各指标(PI3K、Akt、pAkt的蛋白表达量,PI3K mRNA、Akt mRNA含量;IL-1β、TNF-α水平)和PSQI之间的相互关系。[结果] 1)围绝经期非器质性失眠妇女中,肝郁分级与PSQI、PI3K/Akt信号通路各指标均呈正相关(P0.01);IL-1β、TNF-α均与PSQI呈正相关(P0.01);PI3K、Akt与其相应的基因水平分别呈正相关(P0.01)。2)PSQI、PI3K/Akt信号通路各指标在不同肝郁分级间的差异均具有统计学意义(P0.01),且肝郁分级越高,PSQI和PI3K/Akt信号通路各指标含量越高。[结论]肝郁是诱发或加重围绝经期非器质性失眠的病因之一。是通过影响PI3K/Akt信号通路,促使PBMC中PI3K mRNA和Akt mRNA含量增加,经基因表达后使PI3K、Akt和pAkt蛋白含量上升,经一系列级联反应后,进一步提高血清中IL-1β与TNF-α的含量,最终影响围绝经期妇女非器质性失眠。故今后研究可考虑通过阻断PI3K/Akt信号通路以改善围绝经期妇女非器质性失眠。     

PI3K/Akt和MAPK信号通路在缺血性脑损伤中的保护作用

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路是细胞内重要的信号转导通路。研究发现PI3K/Akt和MAPK信号通路经下游多种靶点,即内皮型一氧化氮合酶、糖原合成酶激酶3、核因子κB、细胞外信号调剂激酶等促进脑缺血后神经细胞的存活PI3K/Akt和MAPK这两条信号通路在缺血性脑损伤中发挥重要的作用,在一定条件下,这两条信号通路的激活可以通过上述途径有效抑制神经元细胞的凋亡而发挥脑保护的作用。     

天麻素通过调节miRNA-221/PI3K/Akt通路对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响

目的 探索天麻素(gastrodin,GAS)及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)通路在脂多糖(LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法 将人肺泡上皮细胞A549分为正常对照组、LPS组、GAS组、miR-221 siRNA组、control siRNA组,采用RT-qPCR实验检测miRNA-221 mRNA的表达水平;ELISA实验检测细胞培养液中炎性因子的含量;MTT实验检测细胞活力;Western blot实验检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)、蛋白激酶B (Akt)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤基因-2 (Bcl-2)及半胱氨酸/天冬氨酸蛋白酶9 (Caspase9)蛋白的表达情况。结果 与LPS组比较,GAS组中GAS可明显降低LPS诱导的A549细胞中miRNA-221 m RNA的表达,升高p-Akt蛋白的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05);与LPS组比较,miRNA-221 siRNA组抑制miRNA-221的表达后,可促进LPS诱导的A549细胞中PI3K、p-Akt...     

蛋白激酶B抑制剂在乳腺癌治疗中的研究进展

磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)—蛋白激酶B(protein?kinase?B,Akt/PKB)—哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian?target?of?rapamycin,mTOR)信号通路在乳腺癌发生发展过程中处于异常激活状态,诱导乳腺癌细胞的增殖...     

蛇床子素通过激活 PI3K/Akt 通路减轻谷氨酸诱导的海马神经元损伤

目的：研究蛇床子素(osthole,OST)减轻谷氨酸诱导的HT22细胞损伤的机制。方法：建立谷氨酸诱导的 HT22细胞损伤模型;HT22损伤细胞经OST处理,MTS法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放 实验检测HT22细胞LDH漏出率;caspase-3活性检测试剂盒测定各组caspase-3活性;Western印迹法测定细胞内磷脂酰肌 醇(-3)激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K),蛋白激酶B(protein kinase B,Akt),磷酸化PI3K(p-PI3K)和磷酸化Akt(p- Akt)蛋白表达情况。结果：OST在0~10 mmol/L范围内呈剂量依赖性提高谷氨酸诱导的HT22细胞活力,降低LDH漏出 率,改善HT22细胞损伤。此外,OST显著上调谷氨酸损伤细胞p-PI3K和p-Akt蛋白表达,而PI3K抑制剂LY294002明显 抑制OST谷氨酸损伤细胞p-Akt蛋白表达的上调作用。结论：OST对谷氨酸损伤的HT22细胞具有保护作用,其保护作 用机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。     

罗哌卡因调控PI3K/Akt信号通路对肝癌细胞功能的作用研究

目的 探究罗哌卡因对人肝癌细胞黏附、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响及对磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的调控作用。方法 体外培养人肝癌MHCC97H细胞，分为对照组(不做干预),实验组(200、400、600和800 μmol/L罗哌卡因)和抑制剂组(200 μmol/L罗哌卡因+30 μmol/L PI3K/Akt通路抑制剂LY294002),干预24 h。用细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定细胞活力，采用细胞黏附实验测定黏附细胞数，用Transwell小室测定细胞的迁移和侵袭能力，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹(WB)法对细胞EMT和PI3K/Akt通路相关因子表达水平进行分析。结果 与对照组比较，800μmol/L罗哌卡因的细胞活力降低(P<0.05);200、400和600μmol/L罗哌卡因的细胞黏附数、迁移数、侵袭数以及p-PI3K、p-Akt、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和纤连蛋白(FN)表达量减少(P<0.05),E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA和蛋白表达量增加(P<0.05);与200μmol/L罗哌卡因组相比，抑制剂组上述指标变化更为显著(P<0.05)。结论 罗哌卡因可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路来抑制人肝癌MHCC97H细胞的黏附、迁移、侵袭和EMT进程。     

CTGF诱导的人胚肺成纤维细胞转分化中PI3K/Akt与p38MAPK磷酸化的关系

目的 探讨结缔组织生长因子(CTGF)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)转分化中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路的活动状态以及相关性的研究.方法 将体外培养的HFL-I分成4组:(1)CTGF处理组(20 ng/ml);(2) LY294002(10 μmol/L)预处理60min,再行CTGF刺激(20 ng/ml):(3)SB203580 (10 μmol/L)预处理60 min,再行CTGF刺激(20 ng/ml); (4)LY294002(10 μmol/L)和SB203580(10 μmol/L)联合作用60 min,再加入CTGF(20 ng/ml).选取不同时相点,Western blot测定平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、p-Akt和Akt的蛋白表达:RT-PCR检测PI3K和p38MAPKmRNA表达.结果 与对照组相比,CTGF诱导15 min后p-Akt水平升高,30 min时达至顶峰(P＜0.01).CTGF诱导24h后α-SMA表达显著升高(P＜0.01),可被LY294002阻断.LY294002和SB203580单独或联合预处理后,显著抑制CTGF诱导的p-Akt活化(P＜0.01).结论 CTGF诱导的成纤维细胞-肌成纤维细胞转分化中有PI3K/Akt通路的激活,PI3K和p38MAPK均可以调节Akt的活性,其特异性抑制剂均可阻断Akt的磷酸化.     

龙胆苦苷对H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长抑制及抗血管生成的分析

目的探讨龙胆苦苷对H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及抗血管生成机制。方法右腋皮下注射H_(22)细胞悬液建立H_(22)肝癌小鼠模型,并随机分为模型组、龙胆苦苷低、高剂量组(50 mg/kg、100 mg/kg)及环磷酰胺组(20 mg/kg),每组10只;另选取10只健康小鼠,作为正常组;给药14 d后,检测体重、瘤重、抑瘤率、胸腺指数、脾指数、血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)含量及瘤组织碱性成纤维生长因子(b FGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达水平。结果与H_(22)肝癌模型组比较,龙胆苦苷低、高剂量组小鼠体重无明显变化(P0.05),而瘤重明显降低(P0.01),其抑瘤率分别为30.43%及42.93%;与H_(22)肝癌模型组比较,龙胆苦苷低、高剂量组小鼠胸腺指数、脾指数及血清IFN-γ、IL-2含量明显升高(P0.05或P0.01),而瘤组织b FGF、TGF-β、VEGF、p-PI3K及p-Akt表达明显降低(P0.05或P0.01)。结论龙胆苦苷对H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长及血管生成均有抑制作用,该作用与提高免疫力,增加血清IFN-γ、IL-2含量及抑制PI3K/Akt信号通路的活化有关。     

PI3K、p-Akt蛋白在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶( phosphoinositide 3-kinase, PI3K) 和蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)在人喉鳞状细胞癌组织中的表达特征及临床意义.方法 应用免疫组化S-P法检测40例喉鳞癌、20例声带息肉和20例喉乳头状瘤组织中PI3K和p-Akt的蛋白表达,显微镜下计数阳性细胞,对结果进行统计学分析.结果 PI3K和p-Akt在声带息肉组织中均呈低表达;在喉乳头状瘤中,PI3K高表达,而p-Akt呈低表达;在喉鳞状细胞癌组织中,PI3K和p-Akt均呈高表达.喉鳞状细胞癌中PI3K和p-Akt的表达与喉癌临床分期、颈部淋巴结转移及肿瘤的原发部位均无明显差异(P＞0.05).PI3K和p-Akt蛋白的阳性表达率随喉鳞癌分化程度的降低而降低,差异有统计学意义(P＜0.01).同一标本中PI3K和p-Akt的表达有显著的相关性(r=0.687, P＜0.01).结论 喉鳞癌存在PI3K和Akt蛋白的异常表达并与癌细胞的病理分级关系密切,PI3K/Akt途径的异常活化可能在喉鳞状细胞癌发生过程中起重要作用.     

PI_3K/Akt与血液恶性肿瘤关系的研究进展

在肿瘤的发生发展中,细胞的凋亡受抑在细胞生存中起着主要的作用。磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路与肿瘤发生发展中的许多细胞生物学过程存在着密切联系,这些生物学过程包括:细胞凋亡、转录及细胞周期的调控等。因此,探讨PI3K/Akt作用的分子机制并揭示其与肿瘤的关系将为抗肿瘤药物的研究提供新靶点。     

膀胱癌PI3K/Akt/mTOR信号通路与免疫抑制性细胞的相关分子机制研究

目的探讨膀胱癌磷脂肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路与CD4~+CD25~+Treg细胞及其免疫功能的相关分子机制。方法通过N-甲基亚硝基脲(MNU)经尿道膀胱灌注法建立SD大鼠膀胱癌模型。PI3K抑制剂Wortmannin处理膀胱癌大鼠。Western-blot检测PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白表达;流式细胞仪检测大鼠组胸腺、脾脏CD4~+CD25~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分比分;Real time-PCR检测大鼠血浆中白细胞介素-2(IL-2)和IL-10 mRNA表达。结果相对于生理盐水对照组,Wortmannin组中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和转化生长因子-β(TGF-β)的表达明显降低(P均0.05),而且CD4~+CD25~+Treg细胞数量显著降低(P0.05),同时IL-10 mRNA表达水平明显下降(P0.05),而IL-2表达水平明显上升(P0.05)。结论膀胱癌中PI3K/Akt/mTOR信号通路调控CD4~+CD25~+Treg细胞的增殖和分泌功能。     

PI3K/Akt/mTOR信号通路相关lncRNA在非小细胞肺癌发展中的最新进展

肺癌是目前全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和病死率较高。肺癌的发病机制涉及多条信号通路,其中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在非小细胞肺癌(NSCLC)的发展过程中具有重要作用,而长链非编码RNA(lncRNA)作为抑癌或促癌因子能够通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路影响NSCLC细胞的生长、增殖、凋亡、迁移、侵袭、转移和耐药。因此,进一步深入研究lncRNA与PI3K/Akt/mTOR信号通路在NSCLC发生发展中的调控作用,不仅对探索NSCLC的发病机制具有重要意义,还可为改善NSCLC的治疗现状提供新的指导。     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在骨性关节炎中的研究进展

骨性关节炎(osteo arthritis, OA)为临床多发的慢性退行性病变,由生物学和力学等多个因素共同作用形成,复发率及致残率高,病程长且预后差,给社会和家庭带来严重负担。软骨细胞凋亡是OA软骨退变的典型病理特征及主要作用机制,磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol3-kinase/proteinkinase B, PI3K/Akt)是体内公认的调节细胞凋亡过程的信号通道;蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(protein kinase B/mammalian target of rapamycin, Akt/mTOR)通路是自噬的重要负调控途径,自噬在细胞凋亡中有双重影响作用。OA发展是多因素、多阶段的过程,其发病机制涉及多种信号途径,PI3K/Akt/mTOR信号通路广泛参与了体内细胞增殖、凋亡和自噬等各种生理病理进程,是现阶段国内外研究OA的重要靶点之一。本文基于近年相关文献,总结了PI3K/Akt/mTOR在骨性关节炎中的具体作用及其调节机制,认为PI3K/Akt/mTOR信号通路可能是通过调节相关蛋白水平成为OA治疗和干预的潜在靶点,为OA的防治提供新方向。     

心肌细胞凋亡与PI 3K/Akt信号途径表达及其调控机制的研究

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/ protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一, 通过影响下游多种效应分子的活化状态, 在细胞内发挥着抗凋亡、促细胞生存等功能.     

β-谷甾醇对结肠癌细胞HCT116增殖和凋亡的影响

目的 探究β-谷甾醇对结肠癌细胞HCT116增殖和凋亡的影响及其对磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,又称Akt）信号通路的调控作用。方法 体外培养结肠癌细胞HCT116并分为β-谷甾醇高（240μmol/L）、中（120μmol/L）、低剂量（60μmol/L）组,设置空白对照组（0μmol/L）。应用不同浓度的β-谷甾醇处理HCT116细胞。24h后应用细胞计数试剂盒8（cell counting kit-8,CCK-8）法检测β-谷甾醇对HCT116细胞增殖的影响,并在显微镜下观察细胞的形态变化;应用Hoechst 33342细胞核染色法检测β-谷甾醇对HCT116细胞凋亡的影响;应用细胞克隆集落形成实验检测HCT116细胞的集落形成能力;应用蛋白质印迹技术检测HCT116细胞中PI3K、磷酸化Akt、Akt、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax等相关蛋白的表达情况;利用AutoDock软件实现β-谷甾醇与PI3K和Akt蛋白的分子对接。结果 与对照组比较,β-谷甾醇可浓度依赖性地抑制结肠癌细胞HCT116的增殖,抑制细胞的集落形成能力,促进细胞的凋亡;抑制HCT116细胞中磷酸化Akt、PI3K、Bcl-2蛋白的表达,促进Bax蛋白的表达;β-谷甾醇与PI3K、Akt蛋白的结合均较为稳定。结论 β-谷甾醇可通过抑制PI3K/Akt信号通路调节HCT116细胞的增殖与凋亡。