模拟不同海拔高度和缺氧时间对大鼠下丘脑中神经肽Y mRNA表达的影响

目的探讨急性缺氧对大鼠下丘脑组织神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)mRNA表达的影响.方法 78只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和缺氧组.缺氧组大鼠被置于低压氧舱内模拟高原急性缺氧,其海拔高度分别为3 000、4 000、5 000、6 000 m,同一海拔高度观察的时相点分别为1、2、3 d.采用RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)方法,检测急性缺氧条件下大鼠下丘脑组织中NPY mRNA的表达.结果①缺氧组和对照组大鼠下丘脑组织中均存在NPY mRNA的表达;②在相同缺氧时间下,大鼠下丘脑组织中NPY的mRNA表达随着海拔高度的上升呈逐渐下降的趋势;③在相同海拔高度下,大鼠下丘脑组织中NPY的mRNA表达随着缺氧时间的增加呈逐渐下降的趋势.结论急性缺氧可降低大鼠下丘脑组织中NPYmRNA的表达.     

大鼠脑血管内皮细胞中神经肽Y的Y1受体

目的 对脑血管内皮细胞中神经肽Ｙ（ＮＰＹ）的Ｙ１受体进行精确定位。方法 用针对ＮＰＹ的Ｙ１受体Ｃ末端肽片段的一种纯化的抗血清,用免疫组织化学方法和包埋前免疫金－银加强法观察Ｙ１受体在脑血管内皮细胞中的分布。结果 大脑皮质和髓质、丘脑、下岳脑、小脑和脑干的微血管有散在的含Ｙ１受体免疫反应的（－Ｉｒ）内皮细胞,孤立的脑底动脉及其分支的一些内皮细胞也具有Ｙ１受体免疫反应性（－ＬＩ）,Ｙ１受体－ＬＩ分布于     

缺氧对大鼠下丘脑Ⅰ型大麻素受体表达和摄食量的影响

目的 研究缺氧大鼠下丘脑Ⅰ型大麻素受体(cannabinoid receptor type Ⅰ,CB1)的表达变化及其与摄食量的关系.方法 54只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组(每组18只):平原对照组、缺氧1d组和缺氧7d组.缺氧组大鼠置模拟海拔5000m低压舱中,平原对照组大鼠置平原饲养.记录各组大鼠摄食量,蛋白免疫印迹法和免疫组化法观察各组大鼠下丘脑CB1受体和c-Fos蛋白表达变化.结果 与平原对照组[(15.5±2.7)g]大鼠相比,缺氧1d组大鼠摄食量[(4.9±0.7)g]显著减少(P＜0.05),同时大鼠下丘脑CB1和c-Fos阳性细胞数量和蛋白表达量显著减少;缺氧1d组大鼠弓状核(arcuate nucleus,ARC)、下丘脑腹外侧区(later hypothalamic area,LH)和下丘脑腹内侧核(ventromedial hypothalamic nucleus,VMH)CB1受体、c-Fos表达较平原对照组显著降低;随着缺氧时间的延长,动物摄食量逐日增加,缺氧3～7d时的摄食量与平原对照组大鼠相当;缺氧7d组大鼠下丘脑CB1受体和c-Fos阳性细胞数量和蛋白表达量与平原对照组大鼠比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 急性缺氧大鼠摄食减少可能与弓状核、下丘脑腹外侧区和下丘脑腹内侧核CB1受体和c-Fos表达减少相关.     

雌激素对去势雌性大鼠下丘脑的神经肽Y神经元分布的影响

目的　观察雌激素对去势后雌性大鼠下丘脑区神经肽Y(NPY)免疫反应阳性神经元的影响。方法　采用免疫组织化学法 (SABC) ,在光学显微镜下对下丘脑视上核的NPY免疫反应阳性细胞进行形态学观察。结果　①正常雌性大鼠下丘脑区的NPY阳性神经元分布较广 ,以视上核反应较强 ,卵圆形细胞居多 ,密集成簇。②去势后雌性大鼠下丘脑视上核的NPY阳性神经元表达增多 ,胞内免疫反应产物着色增强。③去势后补充雌激素的大鼠下丘脑视上核的NPY阳性神经元比单纯去势组表达减少 ,着色略浅。结论　外源性雌激素对去势雌性大鼠下丘脑视上核的NPY阳性神经元的分布有影响。     

IL-1β对兔下丘脑前列腺素受体EP3 mRNA表达的影响

目的 观察IL-1β对兔下丘脑前列腺素受体EP3 mRNA表达的影响.方法 用IL-1β复制新西兰免发热模型,在此基础上用原位杂交法观察EP3 mRNA的表达,并用图像分析系统进行定量分析.结果 静脉注射IL-1β后1 h,免体温升高达发热高峰,此时EP3 mRNA表达增强,iOD值高于对照组(P＜0.01),主要分布在内侧视前核区(MPO)和正中视前区(MnPO).结论 IL-1β能促进MPO和MnPO神经元内EP3 mRNA的表达,EP3 mRNA的表达增加是IL-1β诱导发热的可能机制之一.     

糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑神经肽Y mRNA的影响

目的:研究糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑中神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)mRNA表达的影响。方法:高脂饲料构建肥胖大鼠模型,肥胖大鼠和普通大鼠分别随机分为生理盐水组、小剂量组和大剂量组,分别连续20天腹腔注射生理盐水0.2 ml/100 g、琥珀酸氢化可的松5 mg/kg和15 mg/kg。并观察其摄食变化,用实时荧光定量PCR方法,检测大鼠下丘脑中NPY mRNA的表达水平。结果:应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的摄食量低于盐水组(P<0.05);应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组(P<0.01);应用小剂量糖皮质激素后普通大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组(P<0.01)。结论:大剂量糖皮质激素使普通大鼠和肥胖大鼠食欲下降,抑制肥胖大鼠和普通大鼠NPY mRNA的表达;小剂量糖皮质激素抑制普通大鼠NPY mRNA的表达,NPY在食欲调节中起重要作用。     

高脂血症对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y免疫阳性神经元的影响

目的　观察高脂饮食对下丘脑神经肽Y(NPY)的影响 ,探讨弓状核与脂质代谢的关系。方法　采用免疫组化ABC方法 ,结合计算机图像分析系统对高脂血症大鼠下丘脑弓状核NPY免疫阳性神经元的光密度进行测定 ,并将平均光密度 (MOD)值与平均血清总胆固醇 (TC)浓度的关系作以描述。结果　血清TC :对照组 (1 2 95± 0 398)mmol/L ,高脂饮食 4周组升高为 (1 941± 0 493)mmol/L(与对照组比较 ,P <0 0 1 ) ,8周组降低为 (1 92 9± 0 51 9)mmol/L(与对照组比较 ,P <0 0 1 ) ,1 2周组降至 (1 350± 0 2 1 0 )mmol/L ,1 2周组接近于正常对照组的水平 (P >0 0 5)。NPY免疫阳性神经元的MOD ,对照组为 0 2 0 2 2± 0 0 1 0 2 ,高脂饮食4周组为 0 1 2 3 5± 0 0 36 5 ,8周组为 0 1 34 7± 0 0 2 4 8,1 2周组为 0 2 34 6± 0 0 31 6(与 4、8周比较 ,P <0 0 1 ;与对照组比较 ,P <0 0 5)。经曲线拟合后发现血清TC浓度与弓状核NPY阳性神经元MOD值呈负相关关系。结论　高脂血症可影响下丘脑弓状核神经元内NPY的表达 ,提示下丘脑弓状核可能通过其NPY免疫阳性神经元参与脂质代谢的调节     

大鼠心脏中神经肽Y的Y1受体样免疫反应物质的定位

目的 为在细胞水平精确地确定神经肽Y（NPY）的Y1受体样免疫反应物质（-LI）在大鼠心脏中的分布。方法 用免疫组织化学方法对Y1受体-LI细胞进行了检测。结果 （1）一些心肌细胞含有Y1受体-LI,可见清晰的Y1受体免疫反应性（-Ir)条纹,此类细胞在心脏呈斑点状分布,接近外膜侧和室间隔的内膜侧分布较多,Y1受体-LI主要分布于心肌细胞膜、横小管膜和小泡上;（2）心脏内有Y1受体=LI的心内神经元,此类细胞有较长的突起呈离散分布,与Y1受体-LI心肌细胞或血管相邻,Y1受-LI神经元的外膜和胞质内有较强的Y1受体-LI,尤以其突起明显。结论 NPY对心脏作用的复杂性可能与Y1受体在心脏中多种细胞的广泛分布有关。     

高原急性缺氧对大鼠心肌结构的影响

为明确早期高原实地缺氧对大鼠心肌结构的影响 ,对携至不同海拔高原地区大鼠心肌组织的光、电镜标本进行了观察。结果 :光镜下大鼠各室壁心肌细胞均可见不同程度的浊肿、空泡变性、溶解坏死及间质水肿等 ;电镜下可见心肌细胞线粒体肿胀 ,肌浆网扩张 ,肌原纤维溶解 ,细胞内外水肿等 ,上述改变右室壁较左室壁明显 (P <0 .0 1 )。结果提示 :高原急性缺氧造成大鼠以右心室为主的全心性损伤 ,应重视高原缺氧早期的全心性防护。     

神经肽Y及其Y1受体在遗传性癫痫大鼠脑内的表达及意义

目的 探讨遗传性癫痫大鼠(TRM)海马和颞叶皮质中神经肽Y(NPY)及其Y1受体(Y1R)的表达和分布.方法 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NPY和Y1R mRNA表达.ELISA试剂盒法检测TRM和Wistar大鼠海马和颞叶皮质中NPY浓度.Western blot检测Y1R蛋白表达.免疫荧光双标记法分析TRM及Wistar大鼠海马CA1、CA3和DG区以及颞叶皮质中NPY与Y1R的分布和共定位.结果 ELISA和RT-PCR结果均显示,TRM海马和颞叶皮质中NPY表达明显上调,与Wistar大鼠比较差异有统计学意义(P＜ 0.01).Western blot结果证实,TRM海马中Y1R蛋白表达明显低于Wistar大鼠,而在颞叶皮质中显著高于Wistar大鼠.免疫荧光分析发现NPY与Y1R在TRM海马CA1、CA3区神经元细胞和DG区颗粒细胞以及颞叶皮质神经元细胞中分布广泛,并存在共定位且主要定位在细胞膜上.结论 在TRM海马和颞叶皮质中,NPY及其Y1R表达出现异常变化,而这种异常表达可能与TRM癫痫发生机制有关.     

低氧习服对模拟高原低氧大鼠肺组织的影响

目的 观察低氧习服对模拟高原肺水肿大鼠肺组织结构及低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响.方法 56只Wistar大鼠随机分为7组:常氧对照组(N组)、急性低氧对照组(H0组)、急性低氧组(H1组)、3 000 m低氧习服组(C3.0组)、3 000 m低氧习服 急性低氧组(C3.1组)、5 000 m低氧习服组(C5.0组)、5 000 m低氧习服 急性低氧组(C5.1组),每组8只.习服完成后,将大鼠置于模拟海拔6 000 m急性低氧24 h.采用Western blot和RT-PCR方法检测动物习服完成后肺组织HIF-1α蛋白和mRNA的表达情况,光镜和电镜下观察大鼠急性低氧后肺结构变化.结果 H1组肺组织显微和超微结构出现明显间质性肺水肿,低氧习服后间质性肺水肿明显减轻.Western blot方法未检测到大鼠肺组织表达HIF-1α,但HIF-1α mRNA在N组有一定量表达,C3.0组和C5.0组HIF-1α mRNA表达均明显高于N组(P均＜0.01).结论 低氧习服可以减轻低氧大鼠肺间质水肿程度,提高肺组织HIF-1α mRNA表达.HIF-1可能介导参与了大鼠肺低氧习服过程.     

模拟高原缺氧对慢性牙周炎大鼠血清中MMP-2表达的影响

目的研究常氧与缺氧条件下慢性牙周炎大鼠血清中基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)的表达变化,探讨MMP-2与高原牙周病的关系。方法模拟高原缺氧建立大鼠慢性牙周炎模型,采用ELISA法测定正常对照组、常氧牙周炎组、缺氧对照组、缺氧牙周炎组大鼠血清中MMP-2表达。结果正常对照组、常氧牙周炎组、缺氧对照组、缺氧牙周炎组血清中MMP-2浓度分别为(92.00±21.78)、(118.09±25.01)、(102.03±21.30)、(159.19±34.13)ng/ml,常氧牙周炎组与正常对照组、缺氧牙周炎组与缺氧对照组、缺氧对照组与正常对照组、缺氧牙周炎组与常氧牙周炎组比较均有统计学意义(P<0.01)。其中缺氧牙周炎组血清中MMP-2浓度升高最为显著(P<0.01)。结论缺氧上调血清中MMP-2的表达,进而促进大鼠牙周组织的破坏。     

谷氨酸在模拟高原梭曼中毒性脑损伤的作用研究

目的 探讨谷氨酸（Chutamic acid.Glu)在缺氧复合梭曼中毒脑损伤的作用机制。方法 采用氨基酸分析和放免技术，研究高原缺氧，梭曼中毒单一与复合致伤后12、24、48h脑组织Glu和CaM含量的变化以及钙／钙调蛋白激酶Ⅱ（Ca^2 /CaM-PKⅡ）活性的影响及其机制。结果 缺氧复合梭曼中毒组脑组织Glu,CaM含量在中毒后24h明显高于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组；缺氧中毒组脑组织Ca^2 /CaM-PKⅡ活性在中毒后24h明显低于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组；而N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）受体损坏抗剂地佐环平（MK－801）和钙通道拮抗剂尼莫地平（Nimodipine)可对抗这种改变。结论 高原缺氧复合梭曼中毒后Glu的兴奋毒引起脑损伤和Ca^2 /CaM-PKⅡ的活性下降，主要由NMDA受体介导和胞外Ca^2 内流增加有关。     

急进高原缺氧对大鼠肝脏孕烷X受体表达的影响

目的: 研究急进高原缺氧环境对大鼠肝脏孕烷X受体（PXR）表达的影响及相关机制。方法: Wistar雄性大鼠40只,随机分为对照组和急进高原缺氧12、24、36、48 h组,每组8只。待预定缺氧时间完成,采集各组大鼠腹主动脉血,全自动血气分析仪进行血气分析;HE染色观察肝组织病理变化状况;实时定量PCR测定各组大鼠肝组织中PXR mRNA水平;蛋白质印迹法测定各组大鼠肝组织中PXR和蛋白酶SUG1的表达。结果: 与对照组比较,急进高原缺氧12 h后大鼠血液酸碱度值降低;缺氧24 h后动脉血氧饱和度（SaO₂）低于80%,动脉氧分压（PaO₂）低于60 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）;缺氧48 h后动脉二氧化碳分压（PaCO₂）增加（P < 0.05）。对照组大鼠肝组织结构完整,急进高原缺氧12、24 h组肝组织中央静脉有明显水肿,缺氧36、48 h组大鼠肝组织见炎性浸润。大鼠肝脏内PXR mRNA表达从急进高原缺氧12 h时即显著下调,缺氧12、24、36、48 h组分别降低了63%、96%、86%、85%（均P < 0.05）;其蛋白表达从缺氧36 h后显著上调,缺氧36、48 h后分别上调93%、99%（均P < 0.05）。蛋白酶SUG1的表达从缺氧24 h开始降低,缺氧24、36、48 h后分别下降14%、34%、46%（均P < 0.01）。结论: 急进高原缺氧可对大鼠肝脏中核受体PXR表达产生影响,蛋白酶SUG1可能是影响急进高原缺氧下PXR表达的调控因素。     

高原低氧环境对睡眠的影响

目的:观察初次由平原进入高原的30名健康青年男性的睡眠状况,分析高原睡眠紊乱与急性高山病的关系。方法:通过自身对照研究,30名健康青年男性在平原及高原进行多导睡眠监测(PSG),填写急性高山病(AMS)评分表。结果:高原睡眠时间显著减少(355.22±56.02minvs401.48±68.87min,P<0.01);睡眠期转换次数增加显著(71.51±12..60次vs53.17±15.47次,P<0.01);浅睡眠及觉醒显著增加(52.65±10.65%vs41.92±12.45%,P<0.01),(11.38±8.43次/hvs9.10±11.30次/h,P<0.01);深睡眠减少及快动眼睡眠显著减少(3.14±4.70%vs11.24±7.46%,P<0.01);出现周期性呼吸,夜间血氧饱和度及呼气末CO2显著下降(96.44±0.98%vs85.32±0.17%,P<0.01),(22.61±7.69mmHgvs33.13±7.85mmHg,P<0.01);觉醒指数、SaO2与AMS评分呈明显相关。结论:健康青年男性在初进高原时出现表浅、片断状睡眠,频繁周期性呼吸及严重的去氧饱和,睡眠质量下降,影响日间工作效率,睡眠紊乱与AMS的发生相关。     

模拟高原缺氧条件下梭曼中毒的神经毒作用

通过模拟高原缺氧复合梭曼中毒，观察缺氧，梭曼中毒复合效应的神经毒作用。方法：通过低压舱模拟３０００ｍ高原缺氧；梭曼皮下注射中毒造成不同程度的高原缺氧复合梭曼中毒的实验动物模型，以惊厥活动的定量分析为指标，观察神经毒效应，通过梭紧中毒有，无惊厥大鼠血气变化的对比研究，探讨惊厥与缺氧，代谢性酸中毒的关系。结果：１．单纯模拟３０００ｍ米高原缺氧６ｈ在小鼠未诱发严重惊厥；２．梭曼皮下注射中毒５０ｍｇ／ｋｇ     

The expression of TRPA1 mRNA in the rat brain

Objective： To investigate the distribution of TRPA1 （one kind of the TRP-like ion channel family） channel in the hippocampus and cerebral cortex of rat. Methods： RT-PCR was used to amplify the fragment of TRPA1 in the DRG （dorsal root ganglion）, hippocampus and cerebral cortex of adult SD rat. In situ hybridization staining was used to show the distribution of TRPA1 mRNA in the hippocampus and cerebral cortex of adult rat brain. Results： Both RT-PCR and in situ hybridization staining showed that TRPA1 mRNA was expressed in hippocampus and cerebral cortex of the adult rat brain. Conclusion： Our results suggest that there is expression of TRPA1 mRNA both in the hippocampus and cerebral cortex of the adult rat brain.     

大鼠前庭内侧核γ-氨基丁酸受体mRNA的表达

γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid, GABA)是前庭传入神经系统的抑制性神经递质,GABA的A受体或B受体的拮抗剂都能改变前庭神经元的放电[1],提示前庭神经核内存在着GABA的两种受体.然而,前庭中枢究竟存在着哪些GABA受体的亚基/亚型,目前少见报道.本研究旨在探明前庭核内GABA的受体亚基/亚型,以进一步明确其神经化学基础.     

模拟高原缺氧环境对家兔慢性牙周炎龈下菌群种类分布的影响

目的模拟高原缺氧环境,构建兔牙周炎动物模型,研究其龈下菌斑中的主要牙周致病菌与平原组的差异。方法选取清洁级家兔40只完全随机设计分成4组:平原实验组、平原对照组、高原实验组、高原对照组各10只,实验组采用正畸结扎丝结扎双下颌前牙,并给予高糖饮食;高原组置模拟海拔5 000 m的低压氧舱,每天缺氧23 h,持续饲养8周。8周后提取龈下菌斑基因组DNA,用PCR扩增细菌16S rDNA片段方法检测标本中6种牙周炎致病菌包括牙龈卟啉单胞菌(Dorhyromonas gingivalis,Pg)、福赛斯坦纳菌(Bacterides forsythus,Bf)、伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetem-comitans,Aa)、中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi)、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)和齿垢密螺旋体(Trepone-ma denticola,Td)的检出率。结果与平原实验组相比,高原实验组的牙龈出血指数、菌斑指数和牙周袋深度均有统计学差异(P<0.05)。牙周可疑致病菌Pg、Bf、Aa、Pi、Fn和Td在高原实验组和平原实验组都可检出,其中高原实验组Fn的检出率80%高于平原实验组20%(P<0.05);平原实验组Pi的检出率70%高于高原实验组15%(P<0.05)。结论高原低氧环境是牙周炎加重的主要原因,Fn与高原牙周炎病变程度加重有一定关系。