安宫牛黄丸对脑梗死大鼠血清乳酸脱氢酶同工酶的影响

背景：安宫牛黄丸因含有汞、砷成分，其安全性受到关注，有必要进行有效性和安全性评价研究。目的：研究生理、病理状态下安宫牛黄丸对机体作用的差异。设计：以实验动物为研究对象的随机对照实验。单位：一所大学的临床药理研究所。材料：实验于2001-03/04在广州中医药大学临床药理研究所完成，广东省医学实验动物中心提供体质量250～300g SD雄性大鼠24只。方法：SD大鼠随机分成4组：正常组；正常+安宫牛黄丸组；脑梗死模型组(光化学诱导大鼠大脑中动脉闭塞)；脑梗死模型+安宫牛黄丸组。每组6只。给药方法：每天胃饲1次，0．13g／kg，共7d。主要观察指标：血清乳酸脱氢酶同工酶LDH1-5含量。结果：正常+安宫牛黄丸组大鼠血清LDH1-3含量比正常组显著升高(P&;lt;0．01)，其中正常+安宫牛黄丸组LDH1，LDH2，LDH3的值分别为(17．02&;#177;0．46)，(14．70&;#177;0．18)，(15．47&;#177;013)％，正常组则为(11．25&;#177;0．70)，(8．26&;#177;0．90)，(12．86&;#177;0．90)％；模型+安宫牛黄丸组大鼠血清LDH，(15．51&;#177;2．60，％)比模型组(10．93&;#177;2．10，％)显著升高(P&;lt;0．01)，LDH4含量显著降低，其值分别为(22．62&;#177;3．00)％，(28．18&;#177;0．80)％(P&;lt;0．01)。结论：在局灶性脑梗死病理状态下安宫牛黄丸对机体的损伤作用比在正常生理状态下小，提示安宫牛黄丸在生理、病理状态下，对机体的作用方式存在差异。     

朱砂、雄黄对感染性脑损伤大鼠乳酸脱氢酶及其同工酶的影响

背景要提高含重金属和砷化物矿物药(如朱砂、雄黄)中药制剂的用药安全和排除该类药物的出口障碍,有必要对朱砂、雄黄进行有效性和安全性评价.目前,对复方中朱砂、雄黄的药效作用机制尚不清楚.目的研究生理、病理状态下安宫牛黄丸中的朱砂、雄黄对机体作用的差异,探讨其药理作用机制.设计随机对照研究.单位一所大学的临床药理研究所.材料实验于2003-01在广州中医药大学临床药理研究所完成.选用第一军医大学实验动物中心提供的体质量为250～300 g SD雄性大鼠51只.方法SD大鼠随机分成6组(8～10只/组)正常组,正常+安宫牛黄散(下简称整方)组(278 mg/kg);正常+除去朱砂、雄黄的安宫牛黄散(下简称拆方)组(222.7 mg/kg);脑水肿模型组(一侧大鼠颈总动脉注射百日咳杆菌250亿/kg);模型+整方组(造模前1 h给药278 mg/kg);模型+拆方组(造模前1 h给药222.7 mg/kg).一次给药后5 h(模型组注菌后4 h)采血、制备脑匀浆.主要观察指标脑组织、血清中乳酸脱氢酶(LDH)总活力,血清中乳酸脱氢酶同工酶LDH1-5百分酶活力.结果与正常组比较,正常+整方组、正常+拆方组LDH总活力显著升高32.4%～38.4%(P＜0.05),LDH1 2百分酶活力均显著升高(P＜0.01),LDH4,5百分酶活力下降(P＜0.01),但除LDH5外,两组同工酶酶活间无显著差异.与模型组比较,模型+整方组、模型+拆方组LDH总活力显著下降23.4%～38.5%(P＜0.01),LDH5百分酶活力显著升高(P＜0.01),但两组间无显著差异;模型+整方组LDH2,3百分酶活力显著下降(P＜0.01),LDH1,4百分酶活力无显著变化;模型+拆方组LDH1,4百分酶活力显著下降(P＜0.05,0.01),而LDH2,3百分酶活力变化不显著.结论正常生理状态下服用安宫牛黄散,对心肌、肾等有一定的损伤作用.感染性脑水肿病理状态下,整方和拆方均可抑制被过度激活的LDH酶,两者之间无显著差异;复方中的朱砂、雄黄对LDH同工酶水平有不同程度的影响.     

朱砂、雄黄对感染性脑损伤大鼠乳酸脱氢酶及其同工酶的影响

背景：要提高含重金属和砷化物矿物药(如朱砂、雄黄)中药制剂的用药安全和排除该类药物的出口障碍，有必要对朱砂、雄黄进行有效性和安全性评价。目前，对复方中朱砂、雄黄的药效作用机制尚不清楚。目的：研究生理、病理状态下安宫牛黄丸中的朱砂、雄黄对机体作用的差异，探讨其药理作用机制。设计：随机对照研究。单位：一所大学的临床药理研究所。材料：实验于2003—01在广州中医药大学临床药理研究所完成。选用第一军医大学实验动物中心提供的体质量为250～300gSD雄性大鼠51只。方法：SD大鼠随机分成6组(8～10只／组)：正常组，正常+安宫牛黄散(下简称整方)组(278mg／kg)；正常+除去朱砂、雄黄的安宫牛黄散(下简称拆方)组(222．7mg／kg)；脑水肿模型组(一侧大鼠颈总动脉注射百日咳杆菌250亿／kg)；模型+整方组(造模前1h给药278mg／kg)；模型+拆方组(造模前1h给药222．7mg／kg)。一次给药后5h(模型组注菌后4h)采血、制备脑匀浆。主要观察指标：脑组织、血清中乳酸脱氢酶(LDH)总活力，血清中乳酸脱氢酶同工酶LDH1—5百分酶活力。结果：与正常组比较，正常+整方组、正常+拆方组LDH总活力显著升高32．4％～38．4％(P&;lt;0．05)，LDH1.2百分酶活力均显著升高(P&;lt;0．01)，LDH4.5百分酶活力下降(P&;lt;0．01)，但除LDH5外，两组同工酶酶活间无显著差异。与模型组比较，模型+整方组、模型+拆方组LDH总活力显著下降23．4％～38．5％(P&;lt;0．01)，LDH5百分酶活力显著升高(P&;lt;0．01)，但两组间无显著差异；模型+整方组LDH2.3，百分酶活力显著下降(P&;lt;0．01)，LDH1.4百分酶活力无显著变化；模型+拆方组LDH1.4百分酶活力显著下降(P&;lt;0．05，0．01)，而LDH2.3百分酶活力变化不显著。结论：正常生理状态下服用安宫牛黄散，对心肌、肾等有一定的损伤作用。感染性脑水肿病理状态下，整方和拆方均可抑制被过度激活的LDH酶，两者之间无显著差异；复方中的朱砂、雄黄对LDH同工酶水平有不同程度的影响。     

运动对大鼠骨矿盐含量的影响

目的:分析运动对正常成年大鼠和切除双侧卵巢后的大鼠骨矿盐代谢的影响。方法:本实验于2002-10/2003-05在广东医学院生理学教研室完成。普通级4月龄SD雌性大鼠30只。随机分成5组:正常对照组;正常大鼠+运动组;假去卵巢组;去卵巢组;去卵巢+运动组。然后重复,每组6只。正常大鼠+运动组和去卵巢+运动组大鼠于术后第7天开始进行运动训练,5d/周,45min/d,16m/min,跑道倾角0°,持续10周。第10周末,麻醉状态下动脉放血处死各组大鼠,观察骨干重、骨干重/体质量、骨灰重、骨灰重/体质量、骨灰重/骨干重(%)代谢变化。结果:30只大鼠均进入结果分析。大鼠骨干重、骨干重/体质量、骨灰重、骨灰重/体质量、骨灰重/骨干重(%)各指标代谢变化:正常大鼠+运动组各指标均显著高于正常对照组犤(645±48),(567±32)mg;(1.97±0.06),(1.73±0.10)g/kg;(440±30),(374±21)mg;(1.35±0.04),(1.14±0.06)g/kg;(68.2±0.7)%,(65.9±0.9)%,t=3.46～6.92,P<0.01犦;去卵巢组各指标均明显低于假去卵巢组犤(504±24),(569±40)mg;(1.55±0.61),(1.83±0.19)g/kg;(293±14),(381±23)mg;(0.90±0.04),(1.21±0.14)g/kg;(58.6±0.8)%,(66.3±1.5)%,t=3.64～15.58,P<0.01犦;去卵巢+运动组各指标均较去卵巢组明显增加(627±70),(504±24)mg;(1.76±0.11),(1.55±0.61)g/kg;(409±43),(293±14)mg;(1.15±0.08),(0.90±0.04)g/kg;(65.2±1.2)%,(58.6±0.8)%,t=3.90～11.21,P<0.01)。结论:中等强度运动是增加成年大鼠骨矿盐含量和预防去卵巢大鼠骨矿盐丢失的有效措施。     

参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠学习记忆能力的干预效应

背景解放军总医院自行研制的参仙汤方,经临床初步观察28例脑血管性痴呆患者,其智能量表分值有明显提高.目的观察中药复方参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠学习记忆的影响,并对其抗自由基损伤能力进行分析.设计双盲随机对照实验.单位解放军总医院中医科.材料实验于1997-05/12在解放军总医院中医科完成.选取3个月龄SD大白鼠72只,随机分为6组正常对照组,痴呆模型组,阿尼西坦组,参仙汤30,15,7.5/g(kg·d)剂量组,12只/组.参仙汤由人参、仙灵脾、何首乌、地龙等组成.按传统煎药法煎取药液,以恒温水浴锅分别浓缩成含生药2.0,1.0,0.5g/mL.方法参仙汤30,15,7.5g/(kg·d)剂量组分别按成人每公斤体质量剂量的20,10,5倍给予参仙汤灌胃,剂量分别为生药30,15,7.5g/(kg·d);阿尼西坦组给予100 mg/(kg·d)阿尼西坦灌胃;痴呆模型组和正常对照组分别灌以等量生理盐水.连续给药7 d,第7天给药后1h开始造模.除正常对照组外,其余各组均造模.左心室注射液体石蜡栓子0.25 mL/kg,建立多发性脑梗死模型.造模后继续给药至42 d.然后采用水迷宫实验对大鼠学习记忆能力进行评估.实验结束后1h将各组大鼠脱臼处死,进行组织、脏器各项生化指标的测定.主要观察指标参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠水迷宫作业时间、作业正确次数、脏器生化指标的影响.结果实验纳入72只大鼠,操作过程中脱落9只,最后共63只大鼠进入结果分析.①参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠水迷宫作业时间的影响与痴呆模型组比较,参仙汤15,30g/(kg·d)剂量组于迷宫实验第5天均明显缩短[(24.1±13.3),(14.7±6.9),(13.7±7.5)s,P均＜0.05].②参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠水迷宫作业正确次数的影响与痴呆模型组比较,参仙汤15,30g/(kg·d)剂量组于迷宫实验第5天均显著增加[(1.70±2.07),(3.82±1.89),(4.36±1.75)次,P＜0.01].③参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠超氧化物歧化酶的影响与痴呆模型组比较,参仙汤15,30g/(kg·d)剂量组脑、肝组织超氧化物歧化酶活力均显著增加[(127.2±7.2),(171.3±11.5),(181.7±10.9)μkat/kg,P＜0.001;(168.0±23.7),(185.8±14.9),(200.7±15.4)μkat/kg,P＜0.05,P＜0.01].④参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠丙二醛含量的影响与痴呆模型组比较,参仙汤15,30g/(kg·d)剂量组脑、肝组织丙二醛含量均明显降低[(296.0±37.8),(204.6±43.5),(197.3±43.5)nmol/g,P＜0.001;(238.9±60.8),(160.3±29.4),(152.1±34.4)nmol/g,P＜0.01].⑤参仙汤对多发性脑梗死性痴呆大鼠丙二醛含量的影响与痴呆模型组比较,参仙汤15,30g/(kg·d)剂量组脑、肝组织脂褐素含量均明显降低[(10.88±1.95),(6.35±1.55),(5.85±1.23)μg/g,P＜0.001;(7.17±1.75),(4.38±1.54),(3.69±1.24)μg/g,P＜0.01].结论中药参仙汤具有提高多发性脑梗死性痴呆大鼠脏器组织超氧化物歧化酶活力、减轻脂质过氧化反应、降低组织丙二醛和脂褐素含量的作用,通过减轻脑缺血再灌注的自由基损伤,从而改善多发性脑梗死性痴呆大鼠的学习记忆能力.     

骨髓间质干细胞对血管性痴呆大鼠长时程增强的影响

目的采用神经电生理方法观察静脉注射骨髓间质干细胞(marrowstromalcell,MSC)对血管性痴呆(vasculardementia,VD)大鼠脑长时程增强(long-termpotentiation,LTP)的影响。方法体外分离培养、扩增成年大鼠MSC。利用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型,检测注射MSC后30,60d海马齿状回LTP变化。结果造模30和60d后,VD大鼠LTP诱导率(25%,38%)、群体电位(PS)平均振幅犤(0.91±0.13),(1.02±0.11)mV犦与正常对照组犤88%,(1.31±0.12),(1.36±0.14)mV犦相比差异有显著性意义(χ2=4.2～16.25,P<0.01)。静脉注射MSC后30和60d,VD大鼠LTP诱导率(50%,63%)、LTP振幅犤(1.21±0.11),(1.32±0.18)mV犦较模型组有显著改善(P<0.01)。高频刺激后60min时各组间产生LTP的PS潜伏期分别为:正常组(4.8±1.0)ms,模型组(5.2±1.3)ms,MSC组(4.9±1.8)ms。模型组的潜伏期较正常组显著延长(P<0.05),MSC组潜伏期较模型组缩短(P<0.05)。结论静脉注射MSC可显著易化VD大鼠海马齿状回LTP。     

参麻益智胶囊对血管性痴呆大鼠体内过氧化状态的影响

背景血管性痴呆的发生和发展与氧自由基代谢的异常关系密切,在痴呆病的药效学实验中常以氧自由基的代谢作为主要指标.目的建立多发性脑梗死动物模型,测定大鼠血液与脑组织内的脂质过氧化物含量、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性,从而分析参麻益智胶囊对血管性痴呆大鼠体内过氧化状态的影响.设计随机对照单一样本实验.单位辽宁省基础医学研究所药理研究室.材料实验于1997-07/1998-11在辽宁省基础医学研究所药理研究室完成.选取健康Wistar大鼠96只,随机分为6组,即正常对照组、模型对照组、阳性药对照组、参麻益智胶囊高剂量组、参麻益智胶囊中剂量组、参麻益智胶囊低剂量组,16只/组.参麻益智胶囊由人参、天麻等中药总提取物组成,每克药粉含生药2.7 g,由中国中医研究院西苑医院提供.方法除正常对照组外,其余各组均建立多发性脑梗死动物模型.正常对照组及模型对照组均灌胃给予生理盐水0.5 mL;参麻益智胶囊高、中、低剂量组分别灌胃给药3.2,1.6,0.8g/kg;阳性药对照组灌胃给予双氢麦角碱1 mg/Kg.各组于栓塞后1周开始给药,1次/d,连续6周.脂质过氧化物含量按荧光法测定,超氧化物歧化酶活性应用邻苯三酚自氧化法测定,谷胱甘肽过氧化物酶活性按Hafenam方法测定.主要观察指标各组大鼠血浆与脑组织中脂质过氧化物含量、谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性的测定.结果实验纳入96只大鼠全部进入结果分析.①各组大鼠血浆中各项生化指标测定结果脂质过氧化物含量模型对照组及阳性药对照组明显高于正常对照组[(16.0±1.6),(16.0±1.7),(13.4±1.0)μmol/L,t=4.20～10.58,P均＜0.01],参麻益智高、中、低剂量组显著高于模型对照组[(13.1±1.5),(13.3±0.8),(13.9±1.0),(16.0±1.6)μmol/L,t=4.39～11.69,P均＜0.01];与正常对照组谷胱甘肽过氧化物酶活性比较,模型对照组、参麻益智高、中、低剂量组均明显降低[(5.0±1.6),(3.6±0.8),(3.6±1.1),(3.6±0.8),(3.7±0.9)μmol/(g·s),P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01];与正常对照组超氧化物歧化酶活性比较,阳性药对照组明显升高[(31.7±6.7),(38.4±8.4)μmol/(g·s),t=2.57～3.64,P＜0.05].②各组大鼠脑组织中各项生化指标测定结果脂质过氧化物含量模型对照组、阳性药对照组及参麻益智低剂量组均明显低于正常对照组[(140.0±20.0),(130.0±20.0),(102.0±12.0),(83.0±21.0)μmol/L,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05],参麻益智高、中、低剂量组显著高于模型对照组[(95.0±13.0),(96.0±32.0),(102.0±12.0),(140.0±20.0)μmol/L,t=4.28～11.87,P均＜0.01];与正常对照组谷胱甘肽过氧化物酶活性比较,模型对照组及阳性药对照组均明显降低[(0.5±0.1),(0.3±0.1),(0.4±0.1)μmol/(g·s),P＜0.01,P＜0.05],参麻益智中、低剂量组显著高于模型对照组[(0.5±0.2),(0.5±0.1),(0.3±0.1)μmol/(g·s),t=4.28～11.87,P均＜0.01];与正常对照组超氧化物歧化酶活性比较,模型对照组及阳性药对照组明显降低[(23.4±3.3),(16.7±3.3)(16.7±3.3)μmol/(g·s),t=4.45～10.69,P均＜0.01],与模型对照组比较,参麻益智高、中、低剂量组均显著升高[(16.7±3.3),(23.4±3.3),(21.7±6.7),(21.7±3.3)μmol/(g·s),t=4.28～11.87,P均＜0.01].结论血管性痴呆大鼠超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶抗过氧化活性降低,体内过氧化反应增强.参麻益智胶囊通过提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性而改善过氧化状态,对血管性痴呆具有治疗作用.     

糖尿病大鼠外周神经病变与胰岛素样生长因子-1基因表达异常的关系

目的探讨肝组织胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)基因表达异常及其与糖尿病外周神经病变的关系.方法实验选用清洁级SD雄性大鼠64只.将64只大鼠按初质量匹配随机分成正常对照组16只和糖尿病组48只.用四氧嘧啶诱发糖尿病大鼠模型,并进一步将糖尿病大鼠按血糖水平分成3组(胰岛素治疗1,2,3组),与正常大鼠组进行实验比较.反转录一多聚酶链扩增反应半定量分析坐骨神经IGF-1 mRNA含量;酶联免疫吸附法分析组织IGF-1肽含量;诱发肌电图测定坐骨神经电生理指标;光镜,电镜下观察坐骨神经形态学改变.结果糖尿病2周时,胰岛素治疗2,3组大鼠肝组织IGF-1mRNA含量明显低于正常对照组,且随病程发展进一步下降(P＜0.01).糖尿病3个月时,胰岛素治疗2,3组大鼠肝组织IGF-1mRNA含量与正常对照组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01).肝组织IGF-1肽含量与IGF-1mRNA几呈平行变化趋势.此变化趋势与肝组织IGF-1肽含量变化一致(r=0.99,P＜0.001).糖尿病2周时,糖尿病组与正常对照组间电生理差异无显著无意义(P＞0.05).糖尿病2,3个月时,胰岛素治疗2,3组大鼠电生理指标与正常对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01).糖尿病2,3个月时,胰岛素治疗3组与胰岛素治疗2组比较,差异有显著性意义(P＜0.01),胰岛素治疗1组与正常对照组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).糖尿病3个月时,与正常对照组及胰岛素治疗1组的髓鞘面积、轴突面积、神经纤维密度[(20.98±0.89),(21.28±1.14)μm2;(25.1±2.94),(27.31±3.21)μm2;(12.17±1.2),(2.14±0.9)×103 mm-2]比较,胰岛素治疗2组和胰岛素治疗3组轴突面积[(18.35±1.00),(14.80±0.76)μm2],髓鞘面积[(22.93±3.13),(18.34±0.90)μm2],神经纤维密度[(10.11±0.32),(8.68±0.30)×103 mm-2]均显著减少或下降.血清IGF-1呈一致性下降(r=0.99,P＜0.001).其变化与坐骨神经功能改变(感觉神经r=0.54,P＜0.025,运动神经r=0.49,P＜0.05)、组织形态异常关系密切(神经纤维密度r=0.68,P＜0.025),血糖正常糖尿病组大鼠与正常对照组间上述指标无显著差异性意义(P＞0.05).结论糖尿病早期即出现肝组织IGF-1基因表达下降,程度依糖尿病严重状态而异并随疾病进程加重,血清IGF-1水平相应地出现变化,提示肝组织为血循环IGF-1的主要来源,这种表达异常可能导致外周神经病变发生和发展.     

银杏叶提取物改善学习记忆障碍老龄大鼠痴呆模型的作用途径

背景近年研究显示,银杏叶提取物是一种天然的自由基清除剂,可保护机体免受自由基引起的损害,改善脑循环障碍和神经元的功能,而关于银杏叶提取物对认知功能等高级神经功能活动影响的实验或临床研究相对滞后.目的探讨银杏叶提取物对中枢神经系统高级功能活动的作用,为临床应用银杏叶提取物治疗认知功能障碍提供实验依据.设计随机对照实验.单位华中科技大学同济医学院附属精神病医院老年科,华中科技大学同济医学院病理生理教研室,华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科.材料实验于2002-06在华中科技大学同济医学院基础部完成.选择Wistar大鼠40只,随机分为5组正常老龄对照组、模型组、银杏叶提取物75 mg/kg组、银杏叶提取物150 m/kg组,银杏叶提取物500 mg/kg组,每组8只.方法采用东莨菪碱致老龄大鼠学习记忆障碍的拟老年性痴呆动物模型,其中正常老龄对照组和模型组以相同体积的生理盐水灌胃,银杏叶提取物各组分别按75,150,500 mg/kg银杏叶提取物灌胃,50～400g/次,单次连续给药5 d,于第6天测试水迷宫及避暗试验,测试期间停止灌药,以水迷宫和避暗实验等学习记忆行为训练及生化检测方法,观察用药前后动物学习记忆行为和脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量的变化.主要观察指标①各组大鼠游迷宫所需时间.②各组大鼠游迷宫错误次数.③各组大鼠避暗试验所需时间及错误次数.④各组大鼠脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量.结果银杏叶提取物150 mg/kg组中除1只大鼠不明原因死亡外,银杏叶提取物75,500 mg/kg组各有1只大鼠在灌胃时逃走,最终进入结果分析大鼠为37只.①银杏叶提取物各剂量组造模大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数均明显少于模型组(P＜0.05或P＜0.01),模型组大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数明显高于正常老龄对照组(P＜0.01).②银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组大鼠为达到暗环境被动回避试验内容,学习过程明显短于模型组[(156.78±25.97),(172.66±13.56),(198.54±17.12),(208.34±28.56)s,P＜0.05或P＜0.01].模型组学习时间较正常老年对照组显著延长[(208.46±28.56),(127.46±11.03)s,P＜0.01];银杏叶提取物500,150,75 m/kg组发生电击的错误次数也明显少于模型组[(3.41±0.26),(6.97±0.35),(7.23±0.62),(8.38±0.92)次,P＜0.01],银杏叶提取物500mg/kg组电击次数显著少于150mg/kg组(P＜0.01),150mg/kg组明显少于75mg/kg组(P＜0.05).③银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组造模大鼠海马乙酰胆碱含量明显高于模型组[(421.89±36.32),(387.45±32.76),(380.17±41.25),(36528±11.42)mg/g,P＜0.05或P＜0.01],而银杏叶提取物500 mg/kg组的海马乙酰胆碱含量显著高于银杏叶提取物150,75 mg/kg组(P＜0.01).另外,与正常老龄对照组比较,东莨菪碱致学习记忆障碍模型组大鼠海马脑区的蛋白质含量显著降低[(41.75±3.82),(95.13±6.34)mg/kg,P＜0.01],在给予银杏叶提取物后,造模后的实验大鼠海马脑区蛋白质含量虽有所增加,但差异无显著性意义(P＞0.05).结论银杏叶提取物呈剂量依赖性显著改善实验动物的学习记忆能力,并显著增加海马脑区乙酰胆碱含量.     

葡萄籽原花青素对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察不同剂量葡萄籽原花青素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其作用的不同途径。方法:实验于2004-10/2005-07在安徽医科大学神经生物实验室完成。取SD大鼠160只随机分成假手术组、模型组和葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组5组,每组32只。①缺血前30min模型组大鼠腹腔注射1mL生理盐水,葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组腹腔注射相应浓度的葡萄籽原花青素液1mL,6h后重复给药一次;假手术组不给药。②采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型,假手术组不栓塞动脉。各组随机取8只大鼠在再灌注12h断头处死测脑组织含水量;其余大鼠在再灌注24h断头处死取脑,分别检测脑梗死体积比、缺血侧脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。结果:160只大鼠全部进入结果分析。①脑梗死体积比:葡萄籽原花青素100,200mg/kg组显著低于模型组(0.3077±0.0206,0.2972±0.0248,0.4594±0.0399,P<0.01)。②脑含水量:葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组均低于模型组[(79.97±0.76)%,(79.63±0.92)%,(79.67±0.51)%,(81.41±1.28)%,P<0.01]。③超氧化物歧化酶活性:葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组均高于模型组[(64.35±2.29),(64.52±2.20),(64.43±2.38),(39.72±6.94)NU/mg,P<0.01]。④丙二醛含量:葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组均低于模型组[(1.15±0.07),(1.11±0.16),(1.01±0.13),(1.42±0.23)μmol/g,P<0.01]。结论:①葡萄籽原花青素≥100mg/kg时可使局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积减小,发挥有效的脑保护作用。②≥50mg/kg时即能增强抗氧化酶活性,减轻脂质过氧化损伤,减轻脑水肿程度。     

醒脑静注射液与安宫牛黄丸对脑梗死急性期患者神经功能缺损程度的影响

背景临床实际中,发现以醒脑开窍并益气养阴为治则,标本兼治可明显改善脑梗死急性期患者的神经功能恢复情况.目的观察醒脑静注射液与安宫牛黄丸对脑梗死急性期患者神经功能障碍的影响.设计以患者为观察对象,随机对照.单位中国人民武装警察部队广东总队医院.对象研究对象为武警广东总队医院神经内科1998-09/2003-09住院的脑梗死患者.方法将脑梗死急性期患者120例随机分为醒脑静注射液组和安宫牛黄丸组及丹参粉组,各40例,治疗14 d后分别观察患者的疗效、神经功能改善情况.主要观察指标各组患者神经功能改善情况比较.结果醒脑静注射液组、安宫牛黄丸组、丹参粉组总有效率分别为95%,90%,65%,醒脑静注射液组、安宫牛黄丸组肢体瘫痪的恢复明显优于对照组,醒脑静注射液组疗效显著.结论醒脑静注射液与安宫牛黄丸对脑梗死急性期有较好的治疗作用,而且前者对神经功能缺损的恢复效果更为明显.     

麻醉剂量异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

背景:在临床实践中异丙酚可以收缩脑血管,降低脑血流量,减少脑代谢耗氧量,从而达到降低颅压的目的。实验证实异丙酚对活性氧损伤的内皮细胞具有良好的保护作用,对实验性大鼠脑缺血的神经损害有保护作用。目的:观察异丙酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。设计:随机对照实验。单位:西安交通大学医学院第二附属医院麻醉科。材料:实验于2004年西安交通大学医学院药理实验室完成。选取健康清洁级SD雄性大鼠40只,鼠龄三四个月,体质量200～300g。随机分为模型组、对照组、尼莫地平组及异丙酚组,每组10只。方法:分别在大鼠腹腔内注射氯胺酮及异丙酚,待其翻正反射消失后,分离并结扎颈外动脉,对照组仅将尼龙线放在颈外动脉残端处,但不结扎。模型组:在缺血前10min腹腔注入生理盐水10mL;对照组:在术毕后腹腔注入生理盐水10mL;尼莫地平组:在缺血前10min腹腔注入10g/L尼莫地平1mg/kg;异丙酚组:在缺血前10min腹腔注入10g/L异丙酚110mg/kg。除对照组外其余各组缺血3h再灌注3h,眼眶取血,开颅取脑,观察麻醉剂量异丙酚对脑缺血再灌注损伤的保护作用。主要观察指标:大鼠脑梗死范围,脑组织含水量,血清乳酸脱氢酶、肌酸激酶,脑组织超氧化物歧化酶活性,丙二醛含量,钙离子含量,电镜下脑细胞超微结构。结果:①异丙酚组梗死范围明显小于模型组[(10.45±3.65,19.68±4.03)%,(t=3.493,P<0.01)]。②异丙酚组肌酸激酶含量明显低于模型组[(471±200,1930±917)IU/L,(t=3.493,P<0.01)];乳酸脱氢酶含量为(8240±2580)U/L,与模型组[(15470±2680)U/L]比较差异有显著性意义(t=3.441,P<0.01);异丙酚组脑组织含水量明显低于模型组[(78.2±2.4,82.9±2.9)%,(t=3.321,P<0.01)]。③异丙酚组大鼠死亡率为13.6%,与模型组47.6%比较有显著性差异(t=6.21,P<0.05)。④异丙酚组超氧化物歧化酶活性为(1690±780)U/g,与模型组(830±110)U/g比较差异有显著性意义(t=3.420,P<0.01);丙二醛含量明显低于模型组[(0.058±0.014,0.115±0.047)μmol/g,(t=3.336,P<0.01)]。结论:麻醉剂量异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制与抑制钙离子超载和抑制脂质过氧化反应有关。     

黄芪干预缺血缺氧性脑损伤幼鼠脑组织一氧化氮及丙二醛含量的变化

背景幼鼠脑缺氧缺血后,脑组织水肿加重,脑组织中一氧化氮及丙二醛水平增高.黄芪具有增强免疫、耐缺氧以及改善心肌缺血再灌注损伤等药理作用.目的观察黄芪对缺血缺氧性脑损伤幼鼠脑组织一氧化氮及丙二醛含量的影响.设计随机对照实验.单位河北医科大学第二医院儿科,河北医科大学中医药研究院内科,河北医科大学病理生理教研室.材料实验于2004-02/04在河北医科大学病理生理学教研室完成.选取新生7 d龄SD大鼠40只,随机分为正常对照组、造模组、黄芪低剂量组、黄芪高剂量组,10只/组.黄芪注射液每10 mL相当于生药20g(由成都地奥九泓制药厂生产,批号0005028,河北医科大学中医药研究院医院提供).方法除正常对照组外,其余各组新生大鼠在清醒局麻状态下,行右侧颈总动脉结扎术建立缺氧缺血性脑损伤幼鼠模型.正常对照组给予生理盐水0.1 mL腹腔内注射;造模组每天腹腔注射质量浓度为9g/L的盐水0.1 mL;黄芪低剂量组与黄芪高剂量组每天分别腹腔注射黄芪注射液0.1,0.5 mL/次.各组于注射后即刻、第2,4天测头部血流量后断头取脑,进行脑组织含水量、一氧化氮及丙二醛含量的测定.主要观察指标[1]各组脑组织含水量.[2]各组头部血流量、一氧化氮及丙二醛含量测定结果.结果实验纳入40只大鼠全部进入结果分析.[1]各组脑组织含水量与正常对照组比较,造模组在造模即刻明显增加[(87.316±0.275),(88.259±0.297)%,P＜0.05],第2天仍未恢复正常水平[(86.973±0.265),(88.173±0.445)%,P＜0.05];与造模组比较,黄芪高剂量组第2天明显降低[(88.173±0.445),(86.542±0.141)%,P＜0.05].[2]各组头部血流量测定结果与正常对照组比较,造模组在造模即刻明显降低[(231.88±13.33),(139.54±10.58)mV,P＜0.05],至第4天仍未恢复正常水平[(234.57±14.38),(145.38±13.33)mV,P＜0.05];与造模组第4天比较,黄芪低、高剂量组均明显增加[(145.38±13.33),(288.45±12.89),(313.82±21.74)mV,P＜0.01].[3]各组头部一氧化氮及丙二醛含量测定结果造模组在造模即刻均明显高于正常对照组[(26.55±5.23),(19.67±7.17)μmol/L,P＜0.05;(7.88±2.55),(4.22±0.12)μmol/L,P＜0.01],第4天均显著高于正常对照组[(48.65±17.06),(18.65±2.12)μmol/L,P＜0.01;(5.29±0.68),(4.06±0.39)μmol/L,P＜0.05];与造模组比较,黄芪低、高剂量组第4天均明显降低[(48.65±17.06),(23.77±12.79),(24.67±11.54)μmol/L,P＜0.01;(5.29±0.68),(4.51±2.30),(3.68±0.39)μmol/L,P＜0.01].结论黄芪可明显消除缺氧缺血性幼鼠脑组织水肿,增加其脑组织血流量.通过降低一氧化氮及减少自由基损伤代谢产物丙二醛的含量,从而发挥抑制脂质过氧化损伤的作用.     

C5aR和P38-MAPK在脓毒性休克大鼠心肌损伤中的作用

目的 研究补体C5a受体与P38-MAPK在脓毒性休克情况下诱导心肌损伤的关系.方法 采用盲肠结扎剪切法构建早期脓毒性休克大鼠动物模型,实验地点在武汉大学人民医院麻醉科实验室.30只Sprague-Dawley大鼠随机(随机数字法)分为正常对照组6只和模型组24只(12 h组12只,24 h组12只).12 h组于术后12 h时点检测血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)水平,12 h后麻醉处死大鼠,迅速开胸取出心脏组织,行HE染色、应用免疫组织化学方法检测C5a受体和P38-MAPK的表达情况.24 h组亦于术后24 h时点检测血清LDH和CK值,24 h后处死大鼠取心肌组织行HE染色、检测C5a受体和P38-MAPK的表达情况.结果 模型组(12 h组和24 h组)与正常对照组相比,LDH值和CK值均明显升高(P＜0.05).24 h组LDH值和CK值与12 h时间点相比,差异具有统计学意义[(2 568.9±280)vs.(2 201.2±149),(5 029.7±458)vs.(2 629.4±140),P＜0.05].C5aR和P38-MAPK灰度值分析显示,模型组与正常对照组相比,均有显著性增高(P＜0.05),24 h组较12 h组相比,差异具有统计学意义[(702.77±122)vs.(388.36±113),(646.40±181)vs.(307.32±61),P＜0.05].相关分析显示C5aR和P38-MAPK存在显著正相关关系,(P＜0.05),P38-MAPK与LDH和CK均存在显著正相关关系(P＜0.05).结论 C5a受体和P38-MAPK在诱导脓毒性休克心肌损伤中有着强大的协同效应.

Abstract：

Objective To investigate effects of complement C5a receptor and P38-MAPK on myocardial injury brought about by septic shock in rats. Method The early septic shock models were established by the method of cecal ligature and incision (CLI). A total of 30 Sprague-Dawley rats were randomly( random number) divided into normal control group ( n = 6 ) and model group ( n = 24 ) and the model group was further 12 hours later divided into 12 h subgroup (n = 12) and 24 h subgroup (n = 12). The arterial blood samples were collected 12 hours later for detecting the levels of lactate dehydrogenase (LDH) and creatine kinase (CK), and then the rats were sacrificed and the myocardial tissues were taken to assay the expressions of C5a receptor and P38-MAPK by using immunohistochemistry after HE staining. And the above procedure as did in 12 h subgroup was done 24 hours later. Results Compared with the control group, the levels of LDH and CK in rats of Model group were significantly higher (P ＜ 0. 05). There were significant differences in LDH and CK between 24 h subgroup and 12 h subgroup [(2 568.9 ± 280) vs. (2 201.2 ± 149)] and [(5 029.7±458) vs. (2 629.4±140)] ,P＜0. 05, P＜0.05. The analysis of C5aR and P38-MAPK gray values showed that there were significant differences between the model group and normal control group [(702.77 ±122) vs. (388.36±113)], P＜0. 05 and [(646.40±181) vs. (307.32 ±61)] ,P＜0.05,and those differences also found between the 24 h subgroup and 12 h subgroup. There was a significant positive correlation between C5aR and P38-MAPK (P＜0.05 ), and also the P38-MAPK had significant positive relationships with LDH(P＜0.05) and CK (P＜0.05). Conclusions The C5aR strongly potentiates the P38-MAPK to induce myocardial injury by septic shock.     

亚低温对大鼠缺血再灌注脑组织的保护作用

背景:近年来亚低温对脑缺血组织的保护作用以及亚低温治疗对脑缺血再灌注后的炎症反应已越来越引起重视。目的:探讨亚低温对大鼠脑缺血区炎性细胞因子的影响,及其再灌注损伤的脑保护机制。设计:以动物为观察对象的随机对照试验。单位:湖北省人民医院。材料:实验于2004-10/2005-02在武汉大学人民医院实验中心进行,选取健康清洁级SD大鼠50只。方法:将SD大鼠50只,先随机选取10只分正常组和假手术组,每组5只;余下的40只随机分为常温脑缺血组和亚低温脑缺血组,每组20只。除正常组5只外,其余大鼠均采用Longa改良线拴法建立可逆的大鼠左侧大脑中动脉线栓模型。假手术组及常温组置于20℃室温,肛温稳定在37℃左右;亚低温组将大鼠置于4℃环境中,全身采用亚低温方法,控制大鼠肛温在(33.0±1.0)℃,缺血结束后立即自然复温,脑缺血3h后开始再灌注过程。所有造模大鼠均进行神经功能缺失评分(0分为无神经缺损症状;1分为不能伸展对侧前爪;2分为行走时向偏瘫侧转圈;3分为向偏瘫侧倾倒;4分为不能自发行走,意识丧失)。主要观察指标:观察缺血脑组织大鼠的肿瘤坏死因子和白细胞介素-1的表达,脑梗死灶体积百分比和神经功能评分。结果:实验过程中有15只大鼠因颅内出血、麻醉意外、神经功能缺失评分不满足要求而被剔除,随机补充15只造模成功大鼠,进入结果分析大鼠保持50只大鼠。①肿瘤坏死因子免疫组化染色阳性细胞数:正常组和假手术组差异无显著性意义(3.54±1.24,3.71±1.50)个/视野;亚低温脑缺血组明显比常温脑缺血组低(31.94±7.23,69.20±9.43)个/视野,F=179.16,P<0.001。②白细胞介素-1免疫组化染色阳性细胞数:正常组和假手术组差异无显著性意义(3.20±1.34,3.89±2.08)个/视野;亚低温脑缺血组明显比常温脑缺血组低(28.95±4.97,55.79±7.93)个/视野,F=174.95,P<0.001。③梗死灶体积百分比:亚低温脑缺血组明显比常温脑缺血组低(21.06±2.42)%,(30.32±2.71),F=374.87,P<0.001。④神经功能评分:亚低温脑缺血组明显比常温脑缺血组低(1.35±0.27)%,(2.04±0.34)%,F=117.17,P<0.001。结论:①亚低温脑缺血组大鼠脑梗死灶体积较常温脑缺血组明显缩小,提示亚低温对缺血神经元具有保护作用。②正常组和假手术组仅见少许肿瘤坏死因子和白细胞介素1阳性表达,而缺血后再灌注24h脑缺血区即有较多阳性细胞表达,提示脑缺血启动了炎性细胞因子表达,诱发炎症级联反应,从而加重脑缺血再灌注损伤,因此对炎症级联反应的抑制是发挥脑保护作用的重要机制之一。     

三七皂甙对脑水肿大鼠保护作用的机制

背景脑水肿使颅内压明显增高和神志障碍,严重可导致脑疝,这些病理变化是造成脑功能障碍的主要原因.应用三七皂甙治疗脑水肿是目前国内外研究热点,具有重大理论意义.目的探讨三七皂甙对百日咳菌液致大鼠脑水肿的治疗作用及机制.设计随机对照研究.地点和对象实验地点中南大学湘雅医学院机能实验室.健康SD大鼠40只,随机分为生理盐水组、百日咳菌液组、三七皂甙组、甘露醇组4组.干预采用百日咳菌液注入左颈内动脉导致大鼠脑水肿.主要结局观察指标各组大鼠左脑组织含水量、伊文思蓝、丙二醛水平、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、肿瘤坏死因子α(tumor necrosisfactor-α,TNFα)水平.结果左脑组织TNFα水平,三七皂甙组(457.9±92.6)Pg/g明显低于百日咳菌液组(725.6±76.3)pg/g和甘露醇组(686.4±102.1)Pg/g(q=3.52～4.18,P＜0.05).左脑组织的含水量生理盐水组(78.8±0.3)%、三七皂甙组(79.8±0.4)%和甘露醇组(82.2±0.3)%均较百日咳菌液组(83.9±0.2)%为低(q=3.64～4.56,P＜0.05),三七皂甙组较甘露醇组低(q=3.38,P＜0.05).左脑组织的伊文思蓝含量生理盐水组(1.9±0.7)μg/g、三七皂甙组(5.2±0.9)μg/g和甘露醇组(8.4±0.6)μg/g均较百日咳菌液组(12.1±0.5)μg/g低(q=3.82～4.45,P＜0.05),三七皂甙组较甘露醇组为低(q=3.66,P＜0.05).治疗各组均能降低丙二醛水平,提高SOD活性(q=3.42～4.19,P＜0.05).结论三七皂甙对百日咳菌液致大鼠脑水肿具有治疗作用,其机制与抑制脂质过氧化和减少TNFα生成有关.     

红景天对衰老小鼠脑过氧化脂质及线粒体超微结构的影响

背景衰老是生物体内各组织、器官的退行性改变,是诸多病理、生理过程综合作用的结果.红景天是一种天然药用植物,具有延缓机体衰老、防治老年病等功能,但是其确切机制仍不十分清楚.目的探讨藏药红景天提取物(诺迪康胶囊)抗衰老作用及其机制.设计以实验动物为研究对象,随机对照的实验研究.单位一所军医大学医院的神经内科.材料实验于2002-03/08在解放军第四军医大学药理学实验室完成.60只昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组、诺迪康1,,4 g/kg3个剂量组、维生素E阳性对照组0.1 mg/kg,每组10只.干预模型组、诺迪康组、维生素E阳性对照组均将30 g/L D-半乳糖生理盐水溶液,按每日150mg/kg颈后部皮下注射,连续8周,同时,诺迪康组、维生素E阳性对照组灌胃给药,次/d,连续8周.主要观察指标诺迪康胶囊对衰老小鼠脑乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,DH)活性、过氧化脂质(lipidperoxides,PO)含量,脑过氧化物歧化酶(superoxide dismutase,OD)活性、丙二醛(malondialdehyde,DA)含量以及海马神经元线粒体超微结构的影响.结果诺迪康胶囊1,,4 g/kg组均可降低脑组织LPO含量[(30.1±2.9),(27.8±3.1),26.9±1.9)nmol/g]和MDA含量[(110.2±13.5),(95.4±20.1),90.2±16.5)nmol/g],与模型组[(33.4±2.2),126.5±17.2)nmol/g]相比,差异均有显著性意义(P＜0.05);并明显升高LDH活性[(1.74±0.14),1.92±0.23),2.04±0.21)NU/g]和SOD活性[(119.1±2.2),121.3±0.9),126.4±2.0)NU/g],与模型组[(1.68±0.19),115.9±2.1)NU/g]相比,差异均有显著性意义(P＜0.05).电镜结果表明,诺迪康胶囊2, g/kg组对半乳糖引起的海马神经元线粒体退行性变具有明显的保护作用.结论诺迪康胶囊具有显著的抗衰老作用,此作用与其抗氧化损伤和保护神经元有关.