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顺铂对人卵巢癌CAOV3细胞端粒酶活性和凋亡的影响 总被引:6,自引:1,他引:5
目的研究顺铂作用于卵巢癌CAOV3细胞后,端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期变化与细胞耐药性的关系。方法用顺铂处理卵巢癌CAOV3细胞,端粒酶重复序列扩增(TRAP)一银染法测定端粒酶活性,流式细胞仪观察细胞凋亡和细胞周期的改变。结果顺铂(DDP)处理卵巢癌CAOV3细胞后,CAOV3细胞端粒酶活性受到抑制,细胞周期受阻于G2/M期,未见细胞凋亡峰改变。结论CAOV3细胞对顺铂的耐药性通过多因素起作用,DDP对端粒酶活性具有抑制作用,可以改变细胞周期,但对细胞凋亡无明显影响。 相似文献
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苦参碱对肝癌细胞HepG2端粒酶活性调控的体外研究 总被引:2,自引:1,他引:2
目的 观察苦参碱对人肝癌细胞株HepG2体外增殖和端粒酶活性的影响,进一步探讨苦参碱的可能作用机制.方法 采用人肝癌细胞株HepG2作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性的变化.结果 苦参碱具有抗HepG2细胞增殖、阻滞细胞周期、诱导凋亡及抑制端粒酶活性的作用.结论 对端粒酶活性的抑制可能是苦参碱发挥抗肿瘤作用的机制之一. 相似文献
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苦参碱诱导人胃癌细胞凋亡及对端粒酶活性的影响 总被引:38,自引:3,他引:38
目的 研究苦参碱对人胃癌细胞诱导凋亡作用及端粒酶活性变化。方法苦参碱处理人胃癌细胞株SGC-7901后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制效应,显微镜下观察胃癌细胞形态变化,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期和凋亡,用PCR-ELISA法对胃癌细胞端粒酶活性进行检测。结果不同浓度的苦参碱对SGC-7901有明显抑制作用,且呈时间依赖性及剂量依赖性,形态学观察也发现大量神经细胞的染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,细胞即出现明显的凋亡形态特征,FCM检测结果显示苦参碱作用后,G0/G1期细胞比例增高,S期、G2/M期细胞比例下降,苦参碱在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调,且随苦参碱浓度增大和时间延长,抑制作用逐渐增强。结论苦参碱对人胃癌细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一。 相似文献
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目的研究Genistein与顺铂合用对肝癌细胞株HCCLM3的协同抑制作用.方法倒置显微镜观察Genistein与顺铂联用对肝癌细胞HCCLM3细胞形态的影响,MTT法检测两药联用对细胞增殖的影响,利用中效原理及公式计算联用是否具有协同作用;流式细胞术检测两药联用对细胞凋亡率和细胞周期的影响.结果倒置显微镜下Genistein与顺铂联用较单用组细胞密度降低,细胞相互分离,胞浆透亮度下降;Genistein与顺铂联用较单用组对HCCLM3细胞抑制率增加,Genistein与顺铂联用随着浓度增加对HCCLM3细胞增殖具有协同抑制作用;Genistein与顺铂联用较单用诱导细胞凋亡作用更明显,主要引起细胞G0/G1期阻滞.结论在体外Genistein与顺铂合用随着浓度增加对肝癌细胞能起到协同抑制作用;机制之一可能在于Genistein与顺铂联用较单用具有更强诱导肝癌细胞凋亡的能力. 相似文献
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苦参碱对肝癌细胞端粒酶活性调控及细胞周期的影响 总被引:27,自引:0,他引:27
目的:探讨苦参碱(Ma)对肝癌细胞株HepG2端粒酶活性的调控作用和细胞周期的影响.方法:将不同浓度的Ma加入肝癌细胞株HepG2细胞,以 TRAP-ELISA方法测定其端粒酶活性;采用Lipofect 脂质体转染法将携带人类端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子和报告基因的质粒转染至肝癌细胞株HepG2细胞,2 h后加入不同浓度的Ma,孵育48 h后,分别检测其报告基因荧光素酶活性;同时将不同浓度的Ma加入肝癌细胞株HepG2细胞,并于加药后第24 h、48 h、72 h分别收集细胞,流式细胞仪测定细胞周期各时相的百分比.结果:在750 μg /ml浓度,Ma可抑制端粒酶活性,明显下调hTERT启动子的表达;加药后第48 h、72 h,500 μg /ml、750 μg /ml组中肝癌细胞G0/G1期百分比明显增多,S期和部分G2/M期显著减少.结论:Ma可抑制肝癌细胞株HepG2细胞hTERT的表达并影响端粒酶活性和细胞周期. 相似文献
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目的 研究苦参碱对视网膜母细胞瘤(RB)细胞凋亡抑制蛋白survivin和端粒酶活性表达的影响,探讨苦参碱对Rb的作用机制.方法 体外培养视网膜母细胞瘤患者HXO-Rb细胞经不同浓度的苦参碱作用后,采用噻唑蓝比色法测定细胞生长情况,RT-PCR检测survivin RNA水平,聚合酶链法(PCR)检测端粒酶活性.结果 苦参碱在一定范围内可抑制HXO-Rb细胞的生长,使survivin mRNA表达下调.可明显观察到细胞凋亡的形态学改变,端粒酶活性明显下降,细胞凋亡率增加.结论 苦参碱可以增加HXO-RB细胞凋亡,可以减少RB细胞mRNA表达,减弱RB细胞端粒酶活性,影响其周期变化,抑制RB细胞系增殖.其对survivin的抑制,及端粒酶活性的下降可能是诱发RB细胞凋亡的原因. 相似文献
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顺铂诱导肝细胞性肝癌细胞凋亡及其临床意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨顺铂(CDDP)体内诱导肝细胞性肝癌(HCC)细胞凋亡的发生情况及其临床意义。方法:18例HCC患者随机分成2组,10例行CDDP诱导治疗,另8例作对照。用流式细胞仪(FCM)检测2且患者患者手术切除之肿瘤组织,作凋亡及细胞周期分析。结果:CDDP治疗组肝癌细胞凋亡率较对照组显著增高。CDDP治疗组肿瘤细胞G0-G1期对照组明显增加;而S期细胞有显著减少。细胞增殖指数(PI)在CDDP治 相似文献
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日的 :探讨顺铂 (CDDP)体内诱导肝细胞性肝癌 (HCC)细胞凋亡的发生情况及其临床意义。方法 :18例HCC患者随机分成 2组 ,10例行CDDP诱导治疗 ,另 8例作对照。用流式细胞仪 (FCM )检测 2组患者手术切除之肿瘤组织 ,作凋亡及细胞周期分析。结果 :CDDP治疗组肝癌细胞凋亡率较对照组显著增高 (P <0 .0 1)。CDDP治疗组肿瘤细胞G0 -G1 期较对照组明显增加 (P <0 .0 5 ) ;而S期细胞有显著减少 (P <0 .0 1)。细胞增殖指数 (PI)在CDDP治疗组显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :CDDP在体内能显著增加HCC细胞的凋亡。小剂量CDDP诱导治疗为肝癌辅助治疗可行方法之一 相似文献
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Gao RJ Liang YX Li DD Zhang HY Zhen YS 《Biomedical and environmental sciences : BES》2007,20(3):189-197
Objective To investigate the effect of lidamycin (LDM) on telomerase activity in human hepatoma BEL-7402 cells under the condition of LDM inducing mitotic cell death and senescence. Methods Chromatin condensation was detected by co-staining with Hoechst 33342 and PI. Cell multinucleation was observed by Giemsa staining and genomic DNA was separated by agarose gel electrophoresis. Fluorescent intensity of Rho123 was determined for mitochondrial membrane potential. MTT assay and SA-β-gal staining were employed to analyze the senescence-like phenotype. The expression of proteins was analyzed by Western blot. Telomerase activity was assayed by telomerase PCR-ELISA. Results Mitotic cell death occurred in LDM-treated cells characterized by unique and atypical chromatin condensation, multinucleation and increased mitochondrial membrane potential. However, no apoptotic bodies or DNA ladders were found. In addition, apoptosis-related proteins remained nearly unaltered. Senescence-like phenotype was identified by increased and elongated size of cells, growth retardation, enhanced SA-β-gal activity and the changes of senescence-related protein expression. Telomerase activity markedly decreased (P<0.01) in LDM-treated hepatoma BEL-7402 cells. Conclusion Mitotic cell death and senescence could be triggered simultaneously or sequentially after exposure of hepatoma BEL-7402 cells to LDM. The decrease in telomerase activity may play a key role in the defective mitosis and aging morphology. Further investigation of detailed mechanism is needed. 相似文献
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《中国现代医生》2020,58(19):29-32
目的 探讨三氧化二砷(ATO)对肝癌(HCC)细胞对顺铂(CDDP)化疗敏感性的调节作用。方法 采用HCC细胞(HepG2细胞),根据处理方法,将细胞分为3组:采用5μM的ATO联合20μM的CDDP联合(联合组)或单独采用20μM的CDDP处理(CDDP组)HCC细胞(HepG2细胞)48 h,对照组采用生理盐水处理细胞。采用MTT法检测各组HepG2细胞的增殖率。采用流式细胞仪检测各组HepG2细胞凋亡情况。比较ATO对CDDP处理后肝癌细胞增殖率及凋亡率的影响。结果 经过48 h处理,联合组细胞增殖率明显低于CDDP组[(0.48±0.05)vs.(0.62±0.06)](P=0.0002)。经过48 h处理,联合组细胞凋亡率明显高于CDDP组[(44.32±3.59) vs.(34.63±3.25)](P=0.0001)。结论 ATO联合CDDP处理可以通过降低HCC细胞增殖率并促进细胞凋亡增加HCC细胞对CDDP化疗的敏感性,增强CDDP对肝癌细胞的杀伤力。 相似文献
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目的研究睾酮对人喉癌HEP-2细胞株分裂增殖及端粒酶表达活性的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法研究不同浓度睾酮对Hep-2细胞株分裂增殖的影响,用免疫细胞化学检测10-8mol/L睾酮作用48 h细胞雄激素受体及端粒酶的表达活性。结果10-8mol/L睾酮作用48 h,人喉癌细胞Hep-2细胞OD值由作用前的0.150±0.008增至0.281±0.010,其他实验浓度组均不能明显促进Hep-2细胞的分裂增殖。睾酮作用前后Hep-2细胞均强表达雄激素受体,表达率分别为95.73%和93.84%,差别无统计学意义。端粒酶表达率由睾酮作用前的52.35%增至89.21%,端粒酶强阳性细胞爬片由2张增至8张,差异有统计学意义。结论HEP-2细胞株为雄激素敏感型细胞,睾酮可能通过上调端粒酶的表达促进喉癌Hep-2细胞的分裂增殖,这对研究喉癌的激素疗法及开发端粒酶抑制剂有重要的意义。 相似文献
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目的 研究化疗药物顺铂对人舌癌Tca8113细胞的抑制作用和对端粒酶活性的影响及其抗癌机制、并初步探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法 应用顺铂处理的人舌癌Tca8113细胞为用药组,相同条件培养但不用药的细胞为对照组。MTT法研究细胞的生长和增殖情况,双层琼脂培养法研究细胞的克隆形成率,透射电镜观察细胞的超微结构,应用流式细胞术检测细胞周期,TRAP-PCR—ELISA法检测人舌癌Tca8113细胞端粒酶活性。结果 顺铂对人舌癌Tca8113细胞有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性;能明显改变细胞大体形态和超微结构;抑制端粒酶活性且有一定的时间依赖性;细胞周期改变不明显。结论 顺铂可以明显抑制Tca8113细胞的增殖活性及其转移复发倾向、还可作用于线粒体,抑制端粒酶活性,对细胞周期的改变不明显。 相似文献
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苦参素对胃癌SGC-7901细胞凋亡及细胞骨架改变的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨苦参素对胃癌细胞株SGC-7901的抑制增殖效应及凋亡诱导作用。方法 用苦参素处理SGC-7901细胞,采用MTT法检测苦参素对细胞的抑制作用,透射电镜观察微丝的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果 苦参素使SGC-7901细胞呈凋亡改变,细胞的活力下降,微丝几近消失,不同浓度的苦参素均可导致细胞凋亡和细胞周期阻抑。结论 苦参素能抑制胃癌细胞增殖,能诱导胃癌细胞凋亡。 相似文献
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目的 探讨反义人端粒酶RNA( human telomerase RNA,hTR)基因对肝癌细胞株Bel-7402凋亡的诱导作用及其分子生物学机制.方法 利用前期实验成功转染人端粒酶正、反义RNA基因的肝癌细胞,分为正义转染组(Bel-7402-hTR-EcoRI)、反义转染组(Bel-7402-hTR-BamHI)和空白对照组(Bel-7402).PCR鉴定转染结果,hoechst 33258荧光染色观察3组细胞的变化,实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测凋亡相关基因p53、Bcl-2和Bax的mRNA和蛋白的表达水平.结果 与正义转染组及空白对照组细胞相比,反义转染组部分细胞出现凋亡特征性改变,p53、Bax的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 反义端粒酶RNA可诱导肝癌细胞凋亡,其机制可能是通过上调p53和Bax的表达并下调Bcl-2的表达. 相似文献
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奥沙利铂抗人肝癌细胞株QGY增殖及其机制的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的观察抗肿瘤药物奥沙利铂对人肝癌细胞株QGY体外增殖的影响并探讨其机制,为其能否应用于肝癌的临床治疗提供理论依据.方法采用人肝癌细胞株QGY作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的奥沙利铂对细胞增殖的抑制效应;光镜及透射电镜观察细胞形态和超微结构的改变;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡;免疫细胞化学法检测细胞周期蛋白及凋亡相关基因蛋白的表达.结果奥沙利铂对QGY细胞的增殖均有抑制作用而且呈时间和剂量依赖性.光镜观察发现细胞体积缩小,变圆,胞浆浓缩,核固缩深染,呈现凋亡早期的形态学改变.电镜可见凋亡细胞及凋亡小体.流式细胞仪检测到细胞阻滞于细胞周期的S期和G2/M期,G0/G1期细胞减少及凋亡峰.奥沙利铂作用72 h后,免疫细胞化学表明cyclin A、Bax表达增强,突变型P53蛋白(MTP53)、Bcl-2、Myc表达减弱,Fas表达无差异.结论奥沙利铂对QGY肝癌细胞的增殖都有一定的抑制作用,阻滞细胞周期于S期及G2/M期,它通过上调Bax的表达,下调MTP53、Bcl-2、Myc的表达而诱导细胞凋亡,该药可能不是通过Fas途径诱导细胞凋亡. 相似文献
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目的 观察顺铂对HeLa细胞增殖、端粒酶活性及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,以揭示顺铂抗宫颈癌的机理。方法 运用体外细胞培养技术,以不同浓度的顺铂作用于培养的HeLa细胞72小时,采用MTT法测定细胞代谢率,用端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP—ELISA)检测细胞端粒酶活性,以流式细胞术观察PCNA的表达。结果 顺铂能以浓度依赖方式减低细胞代谢率、下调端粒酶活性并降低PCNA的表达。细胞代谢率减低分别与端粒酶活性的下调(r=0.984)和PCNA表达的降低(r=0.996)均呈正相关,端粒酶活性的下调与PCNA表达的降低也呈正相关(r=0.993)。结论 顺铂能显著抑制HeLa细胞增殖、下调端粒酶活性并使PCNA的表达降低,这可能是顺铂抗癌作用的重要机理之一。 相似文献
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脂质体介导端粒酶反义RNA对人乳腺癌细胞MCF-7活性及增殖的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:探讨经脂质体介导转染端粒酶反义RNA对MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法:用脂质体介导法将pBBS212-hTR(反义端粒酶RNA真核表达载体)导入人乳腺癌细胞MCF-7中,采用TRAP-PCR-ELISA法测定端粒酶活性,四唑盐比色(MTT)法检测MCF-7细胞的增殖,FCM分析等方法观察其对MCF-7细胞的增殖影响。结果:端粒酶反义RNA能显著抑制MCF-7细胞的端粒酶活性,抑制MCF-7细胞的增殖并诱导其凋亡。结论:脂质体转染反义端粒酶RNA在封闭细胞端粒酶活性表达的同时,可促进MCF-7细胞凋亡。 相似文献
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白藜芦醇对人肝癌细胞SMMC-7721增殖影响的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的已有较多研究表明白藜芦醇能抑制多种肿瘤的生长和促进肿瘤细胞的凋亡,观察白藜芦醇对原发性肝癌(简称肝癌)细胞SMMC-7721增殖的影响,探讨其可能的调控机制。方法 MTT法观察不同浓度白藜芦醇(50、100μmol/L)对肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响;应用锥虫蓝拒染法检测白藜芦醇对肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒性作用;流式细胞术测定肝癌细胞SMMC-7721细胞周期的变化;Western blot法测定细胞周期相关蛋白(Cyclin D1、Cyclin E、P21)变化。结果白藜芦醇呈浓度和时间依赖地抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖(P<0.05)。100μmol/L白藜芦醇干预48 h后,可使G0/G1期肝癌SMMC-7721细胞比例升高,S期细胞比例下降,Cyclin D1和Cyclin E的蛋白表达水平均受到抑制,同时P21蛋白的表达水平上调(P<0.05)。结论白藜芦醇可能通过调控细胞周期来抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖。 相似文献