荧光原位杂交（FISH）技术

荧光原位杂交是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法，探针首先与某种介导分子结合，杂交后再通过免疫细胞化学过程连接上荧光染料。ＦＩＳＨ具有敏感、快速、能同时显示多种颜色等优点，不但能显示于中期分裂相中，还能显示于间期核中。目前ＦＩＳＨ经不断丰富和完善，已衍生成一个技术系列，包括原位杂交显带（ＩＳＨＢ）；ＦＩＳＨ基固定位；染色体原位抑制性杂交（ＣＩＳＳ）；染色体涂色；全Ｃｏｓｍｉｄ和Ｙ     

染色体涂染技术及其在染色体病诊断中的应用

染色体涂染（ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｐａｉｎｔｉｎｇ）技术是用染色体特异性或染色体区带特异性ＤＮＡ文库作为探针池，与中期分裂相染色体（或间期核）进行荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）和染色体原位抑制（...     

用人鼠杂交细胞株探针进行染色体描绘

用人鼠杂交细胞株探针进行染色体描绘曾瑄，赵蓥，高春生，赵非非，刘国仰，杨焕明，程在玉荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｔｉｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前广泛应用的一种非同位素原位杂交技术，在基因定位、标记染色体的识别、染色体...     

荧光标记探针原位杂交技术

荧光标记探针原位杂交技术钟梅，吕亚利，张杰，陈乐真（北京解放军总医院病理科．北京１００８５３）荧光标记原位杂交技术（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ），国外曾多用于染色体异常的研究，近年来开始应用于实体肿瘤基因分...     

Her-2/neu基因扩增及其蛋白表达与乳腺癌分化和转移的关系

Ｈｅｒ－２／ｎｅｕ基因扩增及其蛋白表达与乳腺癌分化和转移的关系张杰陈乐真吕亚莉钟梅荧光标记原位杂交技术（ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕＨｙ－ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）曾多用于染色体异常的研究。近年，粘粒（Ｃｏｓｍｉｄ）单考贝基因探针开始...     

医学细胞遗传学检验的质量控制

随着医学科学的飞速发展 ,医学遗传学检验在临床诊断中的作用显得日益重要。而细胞遗传学检验是医学遗传学检验的基础 ,尤其是在细胞遗传学基础上发展起来的细胞 -分子遗传学技术比如 :荧光原位杂交 (ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉ ｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ,ＦＩＳＨ) ,染色体涂抹 (ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｐａｉｎｉｔｉｎｇ ,ＣＰ) ,引物介导的原位标记 (ｐｒｉｍｅｄｉｎｓｉｔｕｌａｂｅｌｌｉｎｇ ,ＰＲＩＮＳ) ,比较基因组杂交 (ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｇｅｎｏｍｉｃｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ,ＣＧＨ)等均需要获得质量优…     

G显带染色体脱色FISH技术在识别胃癌标记染色体中的应用

目的 应用一种能快速、准确识别胃癌标记染色体来源的技术,以提高对胃癌细胞复杂染色体畸变辨认的能力。方法 采用改良的Ｇ显带染色体标本脱色后进行荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ,ＦＩＳＨ）,分别对胃癌细胞系ＳＧＣ－７９０１的两条标记染色体（Ｍ１和Ｍ２）和一例原发性胃癌的标记染色体（Ｍ３）进行分析。结果 显示了Ｍ１、Ｍ２和Ｍ３有复杂的染色体结构畸变：ｄｅ     

染色质纤维荧光原位杂交

染色质纤维荧光原位杂交曾赵非非苏光高春生邹颖刘国仰黄尚志杨焕明荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｅｎｅｃｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前最重要的基因物理定位方法之一。但是其分辨率受到分裂期染色体高度凝聚的限制，最高分辨率约为１Ｍｂ［...     

荧光原位杂交法发现一例子宫平滑肌瘤新的染色体畸变

荧光原位杂交法发现一例子宫平滑肌瘤新的染色体畸变黄浩杰，张锡然，薛妹朗，陈宜峰，许争峰，王迅美近年来荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）技术发展迅速。尤其在肿瘤细胞遗传学研究中，ＦＩＳＨ技术克服了以...     

一个新的微卫星多态标记(D14S1435)的FISH定位

目的将从人染色体１４ｑ２４．３显微切割制备的ＤＮＡ文库中分离得到的一个新的微卫星多态标记（Ｄ１４Ｓ１４３５，ＣＡ重复序列，人群中存在１１种等位形式，ＰＩＣ值为０．８５）进行染色体荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）返回定位。方法以此多态标记筛选人Ｌａｍｂｄａ／ＤＡＳＨ基因组文库，得到的阳性重组噬菌体ＤＮＡ，通过ＢａｍＨⅠ完全酶切，低熔点胶电泳回收插入片段，再经Ｓａｕ３ＡⅠ酶切，接头捕获ＰＣＲ（ｌｉｎｋｅｒ－ｃａｔｃｈＰＣＲ）法标记探针进行ＦＩＳＨ。结果将这一新的ＳＴＲ精确地定位于人染色体１４ｑ２４．３，证实了从染色体显微切割探针池分离染色体区带特异性遗传标记的可靠性。结论经染色体显微切割、ＰＣＲ及微克隆方法所得到的遗传标记，通过染色体荧光原位杂交证实其确实来自所切割区域，增加了这一区域可用于连锁分析的遗传标记，为定位在１４ｑ２４．３区带内若干遗传病的基因诊断和基因克隆，提供一个新的有价值的遗传标记。     

用双色荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体率

目的检测人精子染色体非整倍体率。方法采用双色荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）方法,取少量精标本经洗后制片,用二硫苏糖醇（ＤＴＴ）和二碘水杨酸锂（ＬＩＳ）处理,使精子头部染色质去凝集。然后,与生物素标记的α卫星Ｘ染色体特异ＤＮＡ探针（ＤＸＺ１）和地高辛标记的α卫星Ｙ染色体特异ＤＮＡ探针（ＤＹＺ３）进行原位杂交。用ＣＹ３－链亲和素、山羊抗链亲和素检测Ｘ染色体探针杂交信号;用鼠抗地高辛抗体、与荧光素结合的兔抗鼠抗体检测Ｙ染色体探针杂交信号。结果在Ｎｉｋｏｎ荧光显微镜下可以清楚看到精子头部的杂交信号,头部有１个红色荧光杂交信号的精子为Ｘ染色体精子（Ｘ精子）,有１个绿色荧光杂交信号的精子为Ｙ染色体精子（Ｙ精子）。精子头部有２个荧光杂交信号的精子为染色体数目异常精子。若用１条常染色体探针和１条性染色体探针进行ＦＩＳＨ,可以区别头部有２个相同颜色荧光杂交信号的精子属非整倍体精子或二倍体精子。结论双色荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）方法,可以用于测定接触致突变剂和非整倍体诱导剂后,人精子染色体非整倍体率的变化。     

21号染色体特异性柯斯质粒DNA克隆区域定位

为提高检测２１号染色体数目和结构异常的精确性，应用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ－１１－ｄＵＴＰ通过缺口平移法标记Ｄ１３Ｚ１／Ｄ２１Ｚ１和６个柯斯质粒（Ｃｏｓｍｉｄ）ＤＮＡ克隆，将标记后的Ｄ１３Ｚ１／Ｄ２１Ｚ１和６个柯斯质粒ＤＮＡ克隆双探针与正常二倍体细胞系染色体进行荧光原位杂交（ＦＩＳＨ），结合Ｑ显带方法将６个柯斯质粒ＤＮＡ克隆定位于２１ｑ２２；用柯斯质粒ＤＮＡ克隆探针与两个已知的平衡易位细胞系ＧＭ９５４２和８３２７Ｌ的染色体进行荧光原位杂交，检测并分析杂交信号在两个平衡易位细胞系染色体上的分布，结果表明柯斯质粒ＤＮＡ克隆精确定位于２１ｑ２２．２，６个柯斯质粒ＤＮＡ克隆定位结果一致。     

同时显示杂交信号和荧光R带的FISH技术

目的建立直接将ＤＮＡ探针定位于显示Ｒ带染色体上的简便方法。方法正常人外周血淋巴细胞培养６７小时，同时加入Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８和ＢＵｄＲ继续培养５～６小时，常规方法制片。标本浸于２×ＳＳＣ中，在距其１０ｃＭ的２０Ｗ紫外灯下７５℃照射２０分钟。此标本以生物素标记的ｃｏｓｍｉｄ和ＹＡＣ克隆以及ｐＢａｍＸ７进行原位杂交，Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩＴＣ和Ａｎｔｉａｖｉｄｉｎ进行信号的检测与放大，ＰＩ复染。于Ｏ１ｙｍｐｕｓＢＸ６０型荧光显微镜下，通过ＷＩＢ滤光镜同时观察显示Ｒ带的染色体和杂交信号。结果在显微镜下，黄绿色杂交信号直接定位于红色并显示Ｒ带的染色体上。结论该方法可用于快速并准确地进行ＤＮＡ片段的染色体定位     

荧光原位杂交及其在肿瘤生物学中的应用

荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）是一种应用荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示ＤＮＡ序列位置的方法。ＦＩＳＨ具有快速、安全、经济、灵敏度高、特异性强等优点，在中期及间期细胞均可检测ＤＮＡ序列及其变化，广泛应用于细胞遗传学、产前诊断、肿瘤生物学、核组成、基因定位、基因扩增等领域。细胞内染色质含量的不平衡是引起肿瘤的根本原因，细胞遗传学上表现为染色体数目或结构异常，分子水平上表现为ＤＮＡ片段的扩增     

荧光原位杂交检测人淋巴细胞染色体数目的方法

荧光原位杂交检测人淋巴细胞染色体数目的方法顾峥张杰黄靖香陈乐真在肿瘤细胞遗传学领域中，荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓ－ｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）技术有广泛的应用价值［３］。由于人体外周血淋巴细胞染色体数目相对恒定，故在应...     

荧光原位杂交及其在肿瘤生物学中的应用

荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）是一种应用荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示ＤＮＡ序列位置的方法。ＦＩＳＨ具有快速、安全、经济、灵敏度高、特异性强等优点，在中期及间期细胞均可检测ＤＮＡ序列及其变化，广泛应用于细胞遗传学、产前诊断、肿瘤生物学、核组成、基因定位、基因扩增等领域。细胞内染色质含量的不平衡是引起肿瘤的根本原因，细胞遗传学上表现为染色体数目或结构异常，分子水平上表现为ＤＮＡ片段的扩增、缺失、碱基改变等。将ＦＩＳＨ应用于肿瘤生物学研究具有广阔前景。本文就ＦＩＳＨ基本技术及其在肿瘤生物学中的初步应用作一综述。     

用FISH方法验证YAC克隆重叠群的可靠性

用ＦＩＳＨ方法验证ＹＡＣ克隆重叠群的可靠性赵非非，曾瑄，高春生，杨焕明，刘国仰，黄尚志，程在玉酵母人工染色体（ｙｅａｓｔａｒｔｉｆｉｃａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ，ＹＡＣ）因其插入片段巨大而被广泛应用于基因组分析与基因克隆［１］．但ＹＡＣ克隆的嵌合体比率...     

荧光原位杂交新技术在恶性血液病听研究进展

荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）是以非放射性物质标记核酸探针，根据核酸杂交原理，在间期核和分裂中期染色体上检测特异性ＤＮＡ序列的一种新技术，由于它克服了放射性原位杂交（ＲＩＳＨ）的一些弊端，具有快速，准确，灵敏，经济等优点，现已应用于肿瘤生物学，产前诊断和基因突变等诸多领域，因恶性血液病常规制备染色较大难度，成功率不高，检出较低等问题，而ＦＩＳＨ技术既可以分析中期核染色体，又能用于间期染色质，故该技术对恶     

荧光原位杂交技术检测乳腺癌Her－2／neu基因

荧光原位杂交技术检测乳腺癌Ｈｅｒ－２／ｎｅｕ基因邓永江，皋岚湘，丁华野，田玉旺，吴霞，黄晓南，谈敏我们应用荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙ－ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）技术检测了乳腺癌组织中Ｈｅｒ－２／ｎｅｕ基因表达情况，...     

荧光原位杂交新技术在恶性血液病中的研究进展

荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）是以非放射性物质标记核酸探针，根据核酸杂交原理，在间期核和分裂中期染色体上检测特异性ＤＮＡ序列的一种新技术。由于它克服了放射性原位杂交（ＲＩＳＨ）的一些弊端，具有快速、准用、灵敏、经济等优点，现已应用于肿瘤生物学、产前诊断和基因突变等诸多领域。因恶性血液病常规制备染色体有较大难度，成功率不高，检出率较低等问题。而ＦＩＳＨ技术既可以分析中期核染色体，又能用于间期染色质，故该技术对恶性血液病研究有着特殊的应用价值，可发现一些新的染色体畸变包括染色数目、结构变化以及用以往一些常规细胞遗传学技术不能确认的微小染色体异常。现就ＦＩＳＨ在恶性血液病中的研究进展作一简要综述。