环孢素A对正常及自发性糖尿病仓鼠胰岛细胞分泌功能的短期影响

目的　探讨环孢素 A( Cs A )对胰岛α、β细胞的作用 ,为临床合理用药提供理论依据。方法　采用改良Kanatsuna及 knudsen柱细胞表面灌注系统 ,动态观察低浓度 ( 2 5～ 10 0 ng/ml) Cs A对正常及自发性糖尿病 ( DM)中国短尾黑线仓鼠离体胰岛α、β细胞分泌功能的短期影响。结果　 DM仓鼠胰岛β细胞无论在静态时或 16.7mm ol/L D-葡萄糖 ( G)刺激下胰岛素 ( Ins)的分泌量均较正常仓鼠明显降低 ( P<0 .0 5 ) ,而静态胰高糖素 ( Glc)分泌量则较正常仓鼠明显增高 ( P<0 .0 5 )。将小剂量 ( 2 5～ 10 0 ng/ml) Cs A加入胰岛细胞中培养 2 4h后 ,培养液 Ins和Glc含量与对照组 (未加 Cs A)相比无统计学差异 ( P>0 .0 5 ) ,但 Cs A处理 2 4h后的正常仓鼠胰岛β细胞对 16.7mm ol/L D-葡萄糖刺激的反应减弱。结论　 DM仓鼠发病可能与胰岛细胞分泌功能异常有关。小剂量 ( 2 5～ 10 0 ng/ml) Cs A对正常及 DM仓鼠离体胰岛α、β细胞分泌功能无明显直接影响。胰岛细胞与 Cs A作用 2 4h后β细胞储备功能降低。 Cs A在体外对 Ins释放的影响 ,除剂量因素外 ,还与作用时间有关     

腺病毒介导CTLA4Ig对舍格伦综合征小鼠涎腺分泌功能的影响

目的检测CTLA4Ig-重组腺病毒载体(Ad-CTLA4Ig)在小鼠舍格伦综合征中的治疗作用.方法采用完全弗氏佐剂 同种鼠颌下腺抗原激发诱导小鼠舍格伦综合征.实验组在激发后2 h予以Ad-CTLA4Ig腹腔注射,对照组激发后注射胸腺肽.比较各组动物颌下腺形态学改变,每周饮水量、静态唾液总流率的变化.结果CTLA4Ig-重组腺病毒实验组颌下腺病理学改变不明显,并且静态唾液总流率高于对照组(P＜0.05),而每周饮水量明显低于对照组(P＜0.05).结论Ad-CTLA4Ig可防治小鼠舍格伦综合征的发生,并对临床治疗舍格伦综合征提供了实验基础.     

颌下腺切除及术后注射人绒毛膜促性腺激素对小鼠精原细胞增殖的影响

目的 探讨切除颌下腺及术后给予人绒毛膜促性腺激素（HCG）对小鼠精原细胞增殖的影响。方法 雄性小鼠切除颌下腺和／或给予HCG后，用光镜观察不同期的生精小管精原细胞和静止期精母细胞数量。结果 去颌下腺组与假手术组相比，I－Ⅵ、Ⅶ-Ⅷ期生精小管的精原细胞和Ⅶ-Ⅷ期生精小管的静止期精母细胞明显减少（P＜0．05）。去颌下腺给药组与去颌下腺组相比，I－Ⅵ、Ⅶ-Ⅷ期生精小管的精原细胞和Ⅶ-Ⅷ期生精小管的静止期精母细胞明显增加（P＜0．05）。结论 （1）切除颌下腺导致体内表皮生长因子（EGF）缺少，抑制精原细胞增殖；（2）HCG可调节睾丸内EGF合成，以促进精原细胞增殖。     

口服胰岛素后非肥胖性糖尿病小鼠胰岛组织病理改变

目的　研究非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠口服胰岛素后,小鼠胰岛组织病理学的改变。方法　5周龄雌性NOD小鼠随机分成3组,分别口服1mg胰岛素、0.1mg胰岛素和PBS,小鼠13周龄宰杀。以免疫组化方法检测各组小鼠胰岛炎性浸润程度。结果　口服1mg胰岛素、0.1mg胰岛素和PBS,3组小鼠胰岛炎性浸润程度各为0.8974±0.3336、1.2288±0.4948和2.1213±0.3916,口服1mg胰岛素小鼠炎性浸润程度最轻,其次是口服0.1mg胰岛素小鼠,两个实验组炎性浸润程度与口服PBS的对照组相比,都有统计学意义。结论　口服胰岛素自身抗原,能诱导免疫耐受,有效减轻胰岛组织的炎性浸润程度     

瑞格列奈对肥胖及非肥胖2型糖尿病的疗效对照

目的:对应用瑞格列奈对患有2型糖尿病的肥胖患者和非肥胖患者治疗的临床效果进行研究分析。方法:抽取60例患有2型糖尿病患者的临床确诊病例,其中体重指数不足25分者30例(A组),体重指数在25分以上者30例(B组),采用瑞格列奈对其进行治疗。结果:B组用药治疗后所取得的临床效果明显优于A组;该组患者的不良反应发生率明显少于A组,差异具有统计学意义(P0.05);该组患者在治疗结束一段时间后临床症状表现的再次复发率明显低于A组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:应用瑞格列奈对患有2型糖尿病的肥胖患者进行治疗的临床效果明显优于非肥胖患者。     

db/db自发性糖尿病小鼠颌下腺EGFR的表达及细胞凋亡关系的研究

目的:观察db/db自发性糖尿病小鼠颌下腺中表皮生长因子受体(EGFR)的表达及其与细胞凋亡的关系. 方法: 选取3,4,6,8,10月龄db/db糖尿病小鼠及相应月龄的db/ m正常小鼠颌下腺,应用SP免疫组织化学方法染色及TUNEL原位标记后进行图像分析,统计EGFR及凋亡细胞在颌下腺组织内表达(分布)的细胞阳性率. 结果:EGFR及凋亡细胞在对照组及糖尿病组颌下腺中均有表达(分布). db/db糖尿病小鼠颌下腺EGFR及凋亡细胞阳性率随病程延长均呈增高趋势,且显著高于对照组. 结论:EGFR表达增多,说明糖尿病时EGFR作为多效应受体,被激活后可能诱导了颌下腺的细胞凋亡. 凋亡细胞阳性率的显著增高,提示糖尿病是加剧颌下腺腺体萎缩,功能受损的原因.     

吡格列酮对非肥胖性糖尿病小鼠糖尿病的预防作用及机理探讨

目的　探讨吡格列酮对非肥胖性糖尿病 (NOD)小鼠胰岛炎和糖尿病的影响及其作用机理。方法　 4周龄NOD雌性小鼠随机分为 3组 ,分别摄食 0 0 1% (小剂量组 ,2 3只 )和 0 0 4 %(大剂量组 ,2 5只 )的吡格列酮混合饲料和普通营养饲料 (对照组 ,2 5只 )。每周检测尿糖 1次 ,发现阳性后用血糖仪测血糖 ,连续 2次血糖≥ 16 7mmol/L即诊断为糖尿病。各组取 12周龄未患病的小鼠胰腺组织切片HE染色后计算胰岛炎积分 ,取脾后制成脾细胞悬液行细胞培养 72h ,酶联免疫吸附试验法测定血清、脾细胞培养液上清干扰素 γ(IFN γ)和白介素 (IL) 4水平 ;抽提胰腺总RNA后行反转录 聚合酶链反应半定量检测IFN rmRNA水平。结果　 (1) 30周龄时 ,对照组、小剂量组和大剂量组糖尿病发病率分别为 80 0 %、6 0 9%和 6 0 0 % (P >0 0 5 ) ;但在下列时点药物组与对照组发病率之间差异有显著意义 (P <0 0 5 ) :小剂量组 :① 10 0d时发病率 0 %对 16 % ;185d时发病率 39%对6 8% ;②大剂量组 :110d时 :0 %对 16 % ;12 0d时 :4 %对 2 4 % ;135d时 :12 %对 36 %。 (2 ) 12周龄时 ,小剂量组、大剂量组和对照组胰岛炎积分分别为 1 0 1± 0 6 8、1 19± 0 84和 1 99± 0 75 (P >0 0 5 ) ;但总药物组和对照组相比差异有显著意义 (     

雷公藤多甙对非肥胖糖尿病小鼠胰腺和脾脏Fas及其配体表达的影响

目的 观察雷公藤多甙(TWP)对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠1型糖尿病的早期干预作用及探讨可能的机制.方法 用环磷酰胺加速发病的NOD小鼠1型糖尿病动物模型,TWP组(30只)小鼠于实验第0～3天和第13～16天每日2次、第4～12天和第17～26天每日1次腹腔注射TWP,每次5 mg/kg;对照组(33只)腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液.监测血糖,记录糖尿病发病率,采用末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测胰岛细胞凋亡,免疫组织化学法检测B细胞胰岛素含量,半定量逆转录聚合酶链反应检测胰腺和脾脏Fas及其配体(FasL)mRNA的表达.结果 TWP组实验结束时的糖尿病发病率为43.3%,显著低于对照组的69.7%(P<0.05).TWP组的凋亡指数为(5.06±0.85)%,显著低于对照组的(9.04±1.02)%(P<0.01).TWP组胰岛素表达阳性细胞所占百分比为(57.25±11.69)%,略高于对照组的(46.50±11.25)%(P>0.05).TWP组的胰腺组织Fas mRNA半定量值为0.30±0.11,略低于对照组的0.35±0.05(P>0.05);TWP组的胰腺组织FasL mRNA半定量值为0.80±0.11,显著低于对照组的1.33±0.17(P<0.05).TWP组的脾脏组织Fas和FasL mRNA半定量值分别为0.40±0.,9和1.29±0.17,均显著高于对照组的0.27±0.06和1.06±0.10(P值均<0.05).结论 TWP可预防NOD鼠糖尿病的发生,其机制可能与增加脾脏T淋巴细胞Fas和FasL表达及凋亡,降低胰腺Fas和FasL表达,减少胰岛B细胞凋亡有关.     

糖尿病大鼠下颌下腺内AQP2和AQP4表达的变化及意义

目的通过观察AQP2和AQP4在糖尿病大鼠下颌下腺内的表达变化,探究糖尿病患者口渴的可能机制。方法 24只SD大鼠分为对照组、糖尿病组和治疗组三组,每组各8只。糖尿病组和治疗组复制糖尿病模型,同时,治疗组给予胰岛素治疗。造模3个月后处死各组大鼠并取下颌下腺组织,利用免疫组化染色、免疫印迹及实时荧光定量PCR检测其内AQP2和AQP4表达情况。结果免疫组织化学显示AQP2和AQP4免疫阳性反应物主要沉积于大鼠下颌下腺纹状管上皮细胞胞质内,对照组呈棕黄色,糖尿病组呈浅黄色;免疫印迹及实时荧光定量PCR检测显示糖尿病大鼠下颌下腺内AQP2和AQP4蛋白与mRNA表达明显下降。结论下颌下腺内AQP2和AQP4表达下降,可能是导致糖尿病患者口渴多饮的原因之一。     

环孢素A对体外循环心脏手术患者炎症介质的影响

目的:探讨环孢素A(CsA)对体外循环(CPB)心脏手术患者炎症介质的影响及其减轻CPB术后全身炎症反应的机制.方法:将50例CPB下心脏手术患者随机分为对照组(n=25)和实验组(n=25).实验组患者术前预充液中加入CsA,2 mg/kg,其他药物与对照组相同.分别于手术麻醉前、CPB开始后及CPB结束0,12,24,48 h测定两组患者的IL-1B,IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.建立CPB前和CPB结束时在右心耳切口缘取心肌,Western blot测定心肌pAkt、核转录因子kB(NF-kBp65)表达.结果:两组TNF-α,IL-1β,IL-6水平在CPB开始后上升,CPB后12 h达高峰;CsA治疗组TNF一α,IL-1β,IL-6水平从CPB后12 h显著低于对照组(P<0.05).CPB后两组pAkt表达与CPB前相比均显著增加(P<0.05),CsA治疗CPB后pAkt表达较常规治疗组显著降低(P<0.05).两组CPB后NF-kBp65表达与未干预组相比均显著增加(P<0.05);CsA治疗CPB后NF-kBp65表达较常规治疗组显著降低(P<0.05).结论:CsA可减轻CPB心脏手术患者术后全身炎症反应,可能是通过抑制Akt活化、减弱NF-kB的活化实现的.     

皮肌炎继发干燥综合征伴肺间质病变的血清人Ⅱ型肺泡细胞表面抗原变化1例

SUMMARY Interstitial lung diseases (ILDs) are a diverse group of pulmonary disorders characterized by various patterns of inflammation and fibrosis in the interstitium of the lung. The underlying pathogenesis of ILDs is complex and associated with multiple rheumatologic conditions, such as systemic sclerosis, rheumatoid arthritis, pollymyositis and dermatomyositis, Sjögren’s syndrome, and systemic lupus erythematosus. As the disease progresses, excessive pulmonary fibrosis impairs alveolar gas exchange and damages pulmonary function. The common methods to diagnose ILDs, such as clinical manifestations, pulmonary function test, and radiological examinations are not specific for ILDs and not able to diagnose ILDs at the early stage due to their low sensitivity. So, the easy way is important to diagnose ILDs. One important biomarker for ILDs is the high-molecular-weight glycoprotein, Krebs von den Lungen-6(KL-6). KL-6 encoded by the MUC1 gene is a mucin-like glycoprotein with high molecular weight and expressed predominantly on the cell surface of type Ⅱ alveolar epithelial cells, and is detectable in the serum of patients with ILDs. We here report a case of ILDs associated with dermatomyositis and secondary Sjögren’s syndrome. A 60-year-old woman was admitted to our hospital with the chief complaints of debilitation, dry mouth, dyspnea and astasia. ILDs associated with dermatomyositis and secondary Sjögren’s syndrome was diagnosed clinically when the following criteria were satisfied: (1) development of dyspnea within 2 months of presentation, (2) pulmonary dispersion dysfunction, (3) bilateral infiltrative shadows on chest high resolution computed tomography (HRCT). She was treated with prednisone 50 mg/d prior to admission, but the result of therapy was not good. In our hospital she was treated with intravenous methylprednisolone and cyclophosphamide and oral hydroxychloroquine sulfate. Subsequently, her serum KL-6 levels gradually decreased after treatment, pulmonary diffuse function improved, and the improvement in the clinical manifestation and HRCT findings were observed. Nevertheless, the combination treatment of glucocorticoid and cyclophosphamide had contributed to the favourable outcomes. In conclusion, detection of serum KL-6 levels in ILDs associated with connective tissue diseases may be be-neficial to making a definitive diagnosis, predicting the prognosis and monitoring the disease activity, which would be of great help in clinical practice. However, a well-designed clinical study with more patients and a longer follow-up period are required to arrive at a more conclusive judgment on the role of serum KL-6 in patients with ILDs.     

ApoE基因敲除高脂血症小鼠下颌下腺超微结构及上游刺激因子1表达观察

目的 观察载脂蛋白 E ( ApoE )基因敲除高脂血症( HLP)对小鼠下颌下腺超微结构以及上游刺激因子 1 (USF1)表达影响. 方法 10只野生型小鼠予普通饲料喂养作为对照组,10只ApoE基因敲除子鼠予高脂饲料喂养作为高脂组. 造模6个月后,取眼眶血检测血脂;取小鼠下颌下腺组织分别进行光镜、电镜和免疫组织化学观察. 结果 与对照组比较,高脂组胆固醇、三酰甘油和极低密度脂蛋白含量明显升高( P<0. 05 ). HE染色观察到,高脂组小鼠下颌下腺的腺泡明显萎缩,细胞排列紊乱. 电镜下,可见高脂组小鼠导管上皮内线粒体嵴断裂,腺细胞内粗面内质网囊状扩张,结构松散零乱. 免疫组化显示,高脂组USF1表达下降;平均光密度值与对照组比较差异有统计学意义( P<0. 05 ).结论 HLP可导致小鼠下颌下腺超微结构出现病理改变, USF1表达减少.     

糖尿病大鼠下颌下腺内nNOS和NT-3表达变化及意义

目的 观察不同病程糖尿病大鼠下颌下腺内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和神经营养因子-3(NT-3)的表达变化,探讨其对糖尿病下颌下腺结构和功能的影响.方法 48只SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组和治疗组.糖尿病组和治疗组给予腹腔注射链脲佐菌素复制2型糖尿病模型,治疗组给予胰岛素治疗,于造模后3个月和6个月每组分别处死8只大鼠,测定空腹血糖,并取下颌下腺组织,分别进行HE染色、免疫组织化学染色和计算机图像分析.结果 糖尿病组血糖较同期对照组升高且随着病程的延长显著,治疗组血糖较同期糖尿病组下降.光镜下,与对照组相比,糖尿病组下颌下腺腺泡萎缩加重,颗粒曲管数目减少,管腔变窄,治疗组无明显变化;免疫组织化学法检测显示,nNOS在糖尿病组表达较同期对照组增强,在造模3个月表达最强,治疗组表达较同期糖尿病组降低;NT-3在糖尿病组表达较同期对照组降低且随病程的延长减少,治疗组较同期糖尿病组增强.结论 糖尿病大鼠下颌下腺内nNOS表达升高和NT-3表达下降,可能是引起糖尿病下颌下腺结构和功能紊乱的重要原因;胰岛素治疗可能与nNOS和NT-3的表达改变有关.     

Disease phenotype and diagnostic delay in Saudi patients with primary Sjögren’s syndrome: An exploratory cross-sectional study

Objectives:To describe primary Sjögren’s syndrome (pSS) cohort in Saudi Arabiain view in of clinical/serological/histopathological phentotype, and, diagnostic delay.Methods:A cross-sectional study conducted between October 2018 and May 2019. Diagnostic delay was calculated from symptoms onset to clinical diagnosis. The European League Against Rheumatism (EULAR) Sjögren’s Syndrome Disease Activity Index (ESSDAI) and EULAR Sjogren’s Syndrome Patient Reported Index (ESSPRI) were calculated.Results:Forty-one patients were included in the study. There were predominantly females (78%) with a mean (±SD) age of 58.76±12.7 and disease duration of 4.6±2.28 years. The mean diagnostic delay was 2.2±2.4 (range 1-11) years. Minor salivary gland biopsy was performed on 38 (92.7%) patients with a mean focus score of 2.3± 1.2 points. Interstitial lung disease and arthritis were the most common extra-glandular manifestations (EGM) affecting 27 (65.9%) patients for both. The mean ESSDAI was 9.95±7.73 and ESSPRI was 5.17±2.4.Conclusion:Saudi primary Sjogren’s syndrome patients have a high prevalence of EGM predominantly arthritis and ILD. The diagnostic delay is variable in our cohort.     

百令胶囊联合环孢素A治疗肾病综合征疗效及对凝血和免疫功能的影响

目的探讨百令胶囊联合环孢素A治疗肾病综合征疗效及对凝血和免疫功能的影响。 方法随机将84例肾病综合征患者分为两组,对照组42例采用环孢素A治疗,联合组42例采用百令胶囊联合环孢素A治疗。比较两组疗效、凝血功能[纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)]、T淋巴细胞亚群(CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋)、肾功能[血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、血白蛋白(ALB)、24 h尿蛋白定量]及不良反应发生率。 结果联合组总有效率显著高于对照组(P＜0.05)。联合组治疗后PT、APTT均较对照组明显延长,FIB较对照组降低(P＜0.05)。联合组治疗后CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋均明显高于对照组,CD8＋显著低于对照组(P＜0.05)。联合组治疗后BUN、SCr、24h尿蛋白定量均明显低于对照组,ALB水平明显高于对照组(P＜0.05)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论百令胶囊联合环孢素A治疗,肾病综合征患者的凝血功能和免疫功能均得到显著改善,疗效明显,且联合治疗未增加不良反应发生风险,值得临床推广。     

白细胞介素6基因敲除对阿尔茨海默病5×FAD模型小鼠β淀粉样蛋白沉积和认知的影响

目的 探讨白细胞介素6(IL-6)基因敲除对阿尔茨海默病5×FAD转基因小鼠认知及脑组织病理变化的影响。方法 IL-6^+/-小鼠与5×FAD小鼠杂交,构建5×FAD;IL-6^-/-小鼠模型,并选用3、10月龄子代小鼠进行实验。采用行为学实验对小鼠的认知记忆功能进行分析;采用HE染色和β淀粉样蛋白(Aβ)免疫组织化学染色检测小鼠脑组织病理变化。结果 得到5×FAD;IL-6^-/-模型小鼠(3月龄n=20,10月龄n=5)及5×FAD同窝对照小鼠(3月龄n=26,10月龄n=24),子代小鼠数量符合孟德尔定律。新物体识别实验结果显示,与同月龄5×FAD小鼠相比,3月龄5×FAD;IL-6^-/-小鼠的探索指数显著升高,差异有统计学意义(q=3.890,P=0.002)。Morris水迷宫空间探索结果显示,与同月龄5×FAD小鼠相比,3月龄5×FAD;IL-6^-/-小鼠目标象限停留时间及穿台次数增加,差异有统计学意义(q=3.797,P=0.012;q=2.505,P=0.017)。免疫组织化学染色结果显示,IL-6基因敲除显著减少3、10月龄5×FAD小鼠海马(q=13.490,P=0.002;q=45.680,P<0.001)及皮层(q=16.830,P=0.001;q=14.180,P=0.001)的Aβ沉积,差异有统计学意义。结论 IL-6基因敲除可明显改善阿尔茨海默病5×FAD模型小鼠的空间记忆能力,减少小鼠大脑Aβ沉积。     

Cystic lymphoid hyperplasia of the parotid gland as the initial manifestation of HIV infection

We report the case of a patient who presented with cystic lymphoid hyperplasia of the right parotid gland as the index diagnosis of HIV infection. Histological examination of the excised parotid gland revealed a solid-cystic lymphoepithelial lesion with a non-keratinous squamous epithelium, which grew into the lymphoid component via anastomosing cords and islands. These anastomosing cords and islands contained variably abundant B cells, several subepithelial multinucleated histiocytes, salivary ducts infiltrated by small lymphocytes, and a dense lymphoid infiltrate containing lymphoid follicles with enlarged, irregular germinal centres.     

牛磺酸和环孢素A对氯化锰致大鼠肝脏线粒体氧化损伤作用的影响

目的:观察牛磺酸(taurine,Tau)和环孢素A(cyclosporine A,CSA)对锰(Mn)致大鼠肝脏线粒体氧化损伤作用的影响,并探讨Mn致肝脏毒性的细胞分子学机制。方法:24只雄性SD大鼠按体重随机均分为4组。第1组为对照组,皮下注射生理盐水;第2组为单纯染Mn(MnCl₂)组,皮下注射生理盐水;第3、4组为预处理(Tau+MnCl₂组和CSA+MnCl₂组),分别皮下注射Tau(100 mg/kg)和CSA(1 mg/kg)。皮下注射2 h后,第1组腹腔注射生理盐水,第2~4组腹腔注射MnCl₂溶液(32 mg/kg),染Mn 30天,Tau和CSA隔日注射1次,共干预15次。最后1次染Mn后24 h,切取肝组织。测定肝线粒体膜肿胀度、膜电位、PT孔和SDH活性、细胞色素C含量以及GSH-PX活性、OH.含量。结果:大鼠单纯染Mn 30天后,与对照组比较线粒体膜肿胀度光密度降低(P<0.05),PT孔、线粒体膜电位光密度降低,GSH-PX和SDH活性降低,细胞色素C和OH.含量升高(P<0.05~P<0.01);Tau+MnCl₂组与MnCl₂组相比,线粒体膜肿胀度光密度、PT孔、线粒体膜电位光密度升高(P<0.05~P<0.01),GSH-PX和SDH活性升高,细胞色素C和OH.含量降低(P<0.01);CSA+MnCl₂组与MnCl₂组相比,PT孔、线粒体膜电位光密度升高,GSH-PX和SDH活性升高,细胞色素C含量降低(P<0.01)。结论:Tau和CSA对Mn引起的肝脏线粒体氧化损伤有不同程度的拮抗作用。