正常女性Botnia钳夹术的建立

目的:建立一种能同时独立评价胰岛B细胞功能和胰岛素敏感性的方法.方法:联合静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)与高胰岛素-正常葡萄糖钳夹术(简称正糖钳夹术)-即Botnia钳夹术,评估13例健康女性志愿者的胰岛B细胞功能与胰岛素敏感性,并与常规正糖钳夹术进行比较.结果:Botnia钳夹术与常规正糖钳夹术稳态期(150～180 min)葡萄糖代谢率分别为(13.11±1.71)mg/(kg·min)和(13.34±1.41)mg/(kg·min),P＞0.05;稳态期血糖浓度分别为(5.14±0.12)mmol/L和(5.15±0.14)mmol/L,P＞0.05.结论:IVGTT并不影响随后正糖钳夹术中稳态葡萄糖代谢率.Botnia钳夹术可同时评价胰岛B细胞功能和胰岛素敏感性,是一种值得推广的方法.     

高葡萄糖钳夹技术应用初探

目的 初步研究高葡萄糖钳夹技术的建立.方法 应用高葡萄糖钳夹技术对12例正常人进行方法 学的研究,评估胰岛β细胞功能.结果 （1）正常受试者在高糖钳夹开始后14 min内达到高糖目标值,并维持此水平至试验结束.（2）钳夹过程中血糖变异系数为4.6%.（3）观察到胰岛素双相分泌状态,1Ph为（256±17.89）mU/L,2Ph为（90.52 4±7.1）mU/L,最大Ins分泌量为（116.27±11.34）mU/L.结论 成功建立了高葡萄糖钳夹技术.     

高葡萄糖钳夹技术的建立

目的建立测定胰岛β细胞胰岛素(Ins)分泌功能的精确方法-高葡萄糖钳夹技术.方法应用高葡萄糖钳夹技术对12例正常人进行了方法学的研究.结果 (1)血浆葡萄糖浓度在钳夹开始后的指定时间内(14min)达到试验所要求的高糖平台,并能维持此水平至实验结束 (13.05±0.18)mmol/L;(2) 在持续高糖状态下Ins分泌呈双相,第1时相Ins分泌量(1Ph)为(295.38±20.92)mU/L ,第2时相Ins分泌量(2Ph)为(83.13±5.18)mU/L;(3)高糖钳夹稳态期Ins敏感性(ISI)为(13.23± 1.98)mg*kg-1*min-1/mU/L,较正糖钳夹值为高.结论 (1)高葡萄糖钳夹技术已成功建立;(2)高葡萄糖钳夹能测定双相Ins分泌及最大Ins分泌,评价胰岛β细胞功能;(3)高葡萄糖钳夹还能测定Ins敏感性,了解机体的Ins抵抗状况.     

口服补镁对实验性老年2型糖尿病大鼠胰岛素受体表达水平的影响

目的 观察口服补镁对老年2 型糖尿病大鼠胰岛素受体表达水平的影响.方法 将老年2 型糖尿病大鼠模型分为不同剂量的口服补镁组,测定大鼠空腹血糖、血清胰岛素及胰腺和骨骼肌组织胰岛素受体表达水平.结果 高剂量补镁组(2g/kg) 胰腺中胰岛素受体表达水平(MOD 值) 由0.331±0.003 提高至0.342±0.002 ;骨骼肌组织胰岛素受体表达水平由0.345±0.003 提高至0.355±0.002,差异均有统计学意义(P<0.05).同时,高剂量补镁组空腹血糖由(16.85±0.76)mmol/L 降至(15.49±0.57)mmol/L,而血清胰岛素水平由(20.35±0.52)μIU/ml 降至(19.05±0.62)μIU/ml.结论 口服补镁可显著提高老年2 型糖尿病大鼠胰岛素受体表达水平,改善胰岛素敏感性.     

间断高浓度葡萄糖对胰岛β细胞的损伤机制研究

目的探讨间断高浓度葡萄糖对培养的胰岛β细胞(HIT-T15细胞)的损伤机制。方法实验分为对照组(葡萄糖5.5mmol/L)、持续高浓度葡萄糖组(葡萄糖16.7mmol/L)、间断高浓度葡萄糖组(葡萄糖16.7mmol/L培养2h后更换为5.5mmol/L的葡萄糖3h,每天重复共3次,夜间9h维持在5.5mmol/L的培养基中)、抗氧化剂(NAC1.0mmol/L) 持续高糖组和NAC 间断高糖组。放免法测定胰岛素分泌水平;罗丹明123染色线粒体,激光共聚焦显微镜测量线粒体膜电位(MMP);荧光素酶方法检测细胞内ATP含量;硫代巴比妥酸法测量脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平;流式细胞仪测定活性氧簇(ROS)的水平。结果高糖刺激后胰岛素分泌量在间断高糖组〔(3.13±1.11)μIU/mL〕和持续高糖组〔(5.18±0.95)μIU/mL〕分别较对照组〔(9.33±0.62)μIU/mL〕均明显减少(P<0.05);MDA水平、ROS水平明显升高(P均<0.05),并且间断高糖组较持续高糖组产生更多的ROS(P<0.05);间断高糖组和持续高糖组细胞内ATP含量、MMP水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论间断高浓度葡萄糖与持续高糖均使培养的β细胞线粒体氧化应激水平增高,且间断高糖组较持续高糖组产生更严重的氧化应激,从而使β细胞分泌胰岛素功能受损,其机制可能是由于氧化应激使线粒体的膜电位下降,细胞ATP含量减少所致。     

高胰岛素-正常葡萄糖钳夹技术的建立

目的：建立能精确测定胰岛素敏感性的高胰岛素一正常葡萄糖钳夹技术．方法：应用高胰岛素-正常葡萄糖钳夹技术对10名正常体质量、正常糖耐量的健康志愿者进行方法学研究．结果：钳夹试验开始后,血浆胰岛素浓度迅速上升并维持在100mU／L左右,空腹血糖维持在正常水平（5．0mmol／L）,试验过程中内源性胰岛素和肝糖源输出得到完全抑制,血液升糖激素浓度（包括皮质醇和生长激素）与基础值相比无明显上升．钳夹稳态期,葡萄糖输注率为（11．56±1．74）mg／（kg·min）．结论：高胰岛素-正常葡萄糖钳夹技术已成功建立．在高胰岛素．正常葡萄糖稳态条件下,葡萄糖输注率等于机体的葡萄糖利用率,葡萄糖输注率可以作为评价组织对外源性胰岛素敏感性的指标．     

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术的建立

目的:建立高胰岛素-正常葡萄糖钳夹技术.方法:应用高胰岛素-正常葡萄糖钳夹技术对8例正常体重、正常糖耐量者进行了方法学的研究.结果:在优势胰岛素浓度、血浆葡萄糖浓度稳定在正常空腹水平状态下,内源性胰岛素释放和肝糖产生被抑制,升糖激素(皮质醇、生长激素、胰高糖素)无明显增高.(2)在高胰岛素-正常葡萄糖钳夹稳态期,葡萄糖利用率为9.25±0.25mg/(kg.min).结论:高胰岛素-正常葡萄糖钳夹技术已成功建立.在外源性胰岛素-葡萄糖代谢的稳定状态下,机体葡萄糖利用率显著增加.     

盐敏感性高血压患者胰岛素抗性的表现

目的:观察盐敏感性高血压患者胰岛素抗性。方法:对96例高血压患者,通过急性盐水负荷试验,确定盐名敏感(SS)性高血压和非盐敏感(NSS)性高血压后,分别测空腹及口服75g葡萄糖后1h的血糖及血胰岛素水平。结果:SS性高血压患者空腹血糖与血胰岛素水平比NSS性高血压患者显著增高[空腹血糖为(5.34±2.04)mmol/L对(4.65±0.57)mmol/L(P<0.05),空腹血胰岛素为(27.2±21.7)μIU/ml(P<0.01)];SS性高血压患者糖负荷后血糖水平及血胰岛素水平比NSS性高血压显著增高,胰岛素敏感指标显著降低[血糖为(9.00±3.26)mmol/L对(7.86±1.83)mmol/L(P<0.01),血胰岛素为(87.1±35.6)μIU/ml对(33.2±20.5)μIU/ml(P<0.01),胰岛素敏感指数为0.0091±0.0014对0.0056±0.0034(P<0.01)];且以上变化在肥胖和非肥胖的SS性高血压患者中均能观察到。结论:盐敏感性高血压患者胰岛素抗性比盐不敏感性高血压患者严重,无论肥胖与这种变化均存在。     

烧伤后胰岛素抵抗的实验研究

目的:探讨大鼠烧伤后葡萄糖耐量,胰岛素敏感性指数和正常血糖高胰岛素钳夹的变化情况,证实烧伤后存在胰岛素抵抗.方法:6周龄SD大鼠(体质量160～170 g)随机分为假烫伤组和烫伤组,每组8只.烫伤组大鼠制成烧伤面积为30%的Ⅲ度烫伤模型,伤后第3天禁食12 h后采血,用自动血糖仪测定血糖;用大鼠胰岛素ELISA试剂盒测血浆胰岛素水平和胰岛素敏感性指数(ISI);测0、30、60、90、120 min血糖值,观察葡萄糖耐量的变化;伤后第4天观察正常血糖高胰岛素葡萄糖钳夹技术10%葡萄糖总输注率的变化情况.结果:与假烫伤组相比,大鼠烫伤后第3天血糖和血浆胰岛素水平显著升高[血糖(8.94±2.22)vs(6.10±0.62)mmol/L,血浆胰岛素浓度(3.14±1.08)vs(1.06±0.45)ng/ml,P＜0.01],而ISI显著下降[(0.58±0.23)vs(1.23±0.16),P＜0.01].烫伤后第3天葡萄糖耐量实验显示烫伤大鼠对于外源性葡萄糖耐受性在各时间点均明显降低.烫伤后第4天正常血糖高胰岛素钳夹技术检测显示10%葡萄糖输注率较假烫伤组显著下降[(7.23±1.35)vs(12.31±0.54)mg/(kg·min),P＜0.01].结论:大鼠烧伤后可引起糖代谢异常并导致胰岛素抵抗发生.     

内脂素基因过表达对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响

目的 探讨内脂素基因过表达对高脂诱导胰岛素抵抗(IR)大鼠胰岛素敏感性的影响.方法 构建大鼠内脂素基因真核表达质粒,并用该质粒转染高脂喂养诱导的IR大鼠模型.在转染前后采用两次高胰岛素-正糖钳夹技术评价大鼠胰岛素敏感性的变化.结果 成功构建了内脂素真核表达载体pcDNA3.1内脂素.实验组大鼠在pcDNA3.1内脂素质粒注射后3 d血浆内脂素水平较注射前明显升高(2.19 ±0.36 vs 0.98±0.27,P＜0.01);在两次胰岛素钳夹中,pcDNA3.1内脂素质粒注射后葡萄糖输注率较注射前明显升高[(32.6 ±1.2)mg·kg-1·min-1 vs(24.0±1.2)mg·kg-1·min-1,P＜0.01];总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇则较质粒注射前明显降低[(2.36±0.22)mmol/Lvs(1.60±0.21)mmol/L和(1.41±0.24)mmol/L vs(0.88±0.11)mmol/L,均P＜0.05];在转染前后基础血糖和胰岛素水平无明显变化.结论 内脂素质粒转染使IR大鼠血浆内脂素水平升高,胰岛素敏感性增强.     

宫内生长迟缓大鼠成年期胰岛β细胞功能受损和胰岛素抵抗

目的:研究子宫胎盘功能不足所致宫内生长迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠成年期胰岛β细胞功能及外周组织胰岛素敏感性,初步探讨IUGR大鼠发生2型糖尿病的机制.方法:结扎妊娠17 d孕鼠(n=14)双侧子宫动脉(uterine artery ligation,UAL)建立IUGR大鼠模型,对照组(n=8)行平行开腹术.以UAL组新生鼠出生体重低于对照组均值的2个标准差为IUGR.选取两组子代成年雄鼠为研究对象进行葡萄糖耐量实验和高胰岛素正常血糖钳夹实验,计算胰岛β细胞功能指数(modified beta-cell function index,MBCI)和稳态葡萄糖输注率(glucose intake rate,GIR),对大鼠胰岛β细胞分泌功能及外周组织胰岛素敏感性进行评价.结果:(1)UAL组仔鼠平均出生体重(4.49±0.56)g明显低于对照组仔鼠体重均值(6.16±0.30)g的2个标准差以下,P＜0.001;UAL组仔鼠成年后(12周)体重(382±37.51)g已显著超过对照组(339±24.06)g,P＜0.01;(2)UAL组雄仔鼠12周时糖耐量实验各时点血糖水平[0 min,(3.96±0.25)mmol/L;30 min,(6.61±0.57)mmol/L;60 min,(7.34±0.47)mmol/L;120 min,(6.27±0.37)mmol/L]明显高于对照组[0 min,(3.56±0.22)mmol/L;30 min,(5.74±0.32)mmol/L;60 min,(5.89±0.29)mmol/L;120 min,(3.89±0.25)mmol/L],P＜0.05,糖负荷后胰岛素分泌高峰延迟,120 min胰岛素值(84.65±11.79)mU/L明显高于对照组(50.01±7.43)mU/L,P＜0.05;UAL组雄仔鼠MBCI值(26.42±5.59)较对照组(55.88±10.20)明显降低,P＜0.001;(3)高胰岛素正常血糖钳夹实验结果示UAL组雄仔鼠GIR值[16.86±1.59 mg/(kg·min)]明显低于对照组[20.35±2.38 mg/(kg·min)],P＜0.05.结论:子宫胎盘功能不足所致IUGR雄鼠成年期出现肥胖趋势,并发生胰岛细胞功能受损和胰岛素抵抗,是其发生2型糖尿病的危险因素.     

Botnia葡萄糖钳夹技术的建立和临床评价

目的 通过对糖耐量正常者建立Botnia葡萄糖钳夹技术(Botnia钳夹术),评价在一次试验中同时测定胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗方法的临床价值.方法 选择60例糖耐量正常者,分为正常体质量组(30例)和肥胖组(30例),每组又按照钳夹术的不同分为正常Botnia钳夹组、正常正糖钳夹组、肥胖Botnia钳夹组和肥胖正糖钳夹组,各15例.正常Botnia钳夹组和肥胖Botnia钳夹组进行Botnia钳夹术,即将静脉注射葡萄糖耐量试验(IVGTT)与高胰岛素-正葡萄糖钳夹(正糖钳夹)试验联合,先进行IVGTT(0～60 min),随后进行正糖钳夹术(60～180 min);正常正糖钳夹组和肥胖正糖钳夹组进行正糖钳夹试验;对两种试验进行比较,评价Botnia钳夹术的价值.以正糖钳夹稳态期胰岛素介导的葡萄糖利用率(Rd)来判定周围组织胰岛素敏感性,以IVGTT测定的第一时相胰岛素分泌量(FPIR)与Rd值的乘积,即处置指数(DI)来判定β细胞功能.结果 正常Botnia钳夹组和正常正糖钳夹组受试者的Rd值间差异无统计学意义(P=0.475);肥胖Botnia钳夹组和肥胖正糖钳夹组受检者的Rd值间差异亦无统计学意义(P=0.388);肥胖Botnia钳夹组受试者的Rd值显著低于正常Botnia钳夹组,差异有统计学意义(P=0.009).两组受试者的FPIR值间差异无统计学意义(P=0.126),但对其用Rd校正之后,肥胖Botnia钳夹组受试者的DI值显著低于正常Botnia钳夹组,差异有统计学意义(P=0.005).结论 Botnia钳夹术中首先进行的IVGTT并不影响随后进行的正糖钳夹术,Botnia钳夹术能够实现在一次试验中同时测定胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗.     

高糖对INS-1细胞线粒体呼吸链功能的影响

目的 探讨高糖对INS-1细胞线粒体呼吸链功能的影响.方法 将INS-1细胞随机分为正常对照组(葡萄糖5.5mmol/L培养)、高糖组(葡萄糖16.7 mmol/L培养)、N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)+高糖组(NAC 1.0mmol/L+葡萄糖16.7 mmol/L培养),均干预72 h.分光光度计测定呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅲ活性,荧光素酶方法检测细胞内ATP含量,放免法测定胰岛素分泌水平.结果 高糖组的呼吸链酶复合物Ⅰ活性[(1.53±0.24)μmol/(mg·min)]、Ⅲ活性[(1.08±0.22)μmol/(mg·min)]分别较正常对照组的呼吸链酶复合物I活性((2.31±0.33)μmol/(mg·min)]、Ⅲ活性[(1.92±0.39)μmol/(mg·min)]下降,差异有统计学意义(P<0.01).细胞ATP含量及胰岛素分泌水平在高糖组也较正常对照组明显减少(P<0.01).使用抗氧化剂NAC干预高糖组,其线粒体酶复合物Ⅰ、Ⅲ活性、细胞ATP含最及胰岛素分泌水平均显著增加(P<0.05).结论 高糖损伤INS-1细胞的胰岛素分泌可能与损伤线粒体呼吸链功能有关,高糖可能通过氧化应激损伤INS-1细胞线粒体呼吸链功能.     

智能化葡萄糖钳夹技术评价及护理

目的 探讨和评价智能化高胰岛素-正常葡萄糖钳夹技术的临床实用性和重复性；总结护理配合经验，提高实验成功率。方法 应用智能化葡萄糖钳夹技术对20例实验对象（正常糖耐量16例，糖耐量异常（IGT）4例，其中合并多囊卵巢综合征(PCOS)各2例）行正糖钳夹试验,其中3例正常糖耐量者在1月内重复实验。结果 ①23例次钳夹实验进入稳态期时间平均为(105.57±26.72)min；②稳态期平均血糖离散值为(0.10±0.06)mmol/L；血清胰岛素平均水平(94.64±13.72)pmol/L；③3例正常个体重复试验稳态葡萄糖利用率（Gu）差值平均为(-0.19±0.91)mg/(kg·min)（t=0.385,p=0.754）；④正糖钳夹测定的Gu与HOMA1-IR的线性相关系数R=0.614(P=0.011),与HOMA2-IR线性相关系数R=0.593 (P=0.02)；医护配合默契，顺利完成实验。结论：智能化葡萄糖钳夹操作相对简捷，较快进入稳态，血糖钳夹精确性高，稳定性和重复性好。HOMA-IR指数与钳夹技术测定的Gu有显著的线性关系；护理配合在各环节衔接良好，确保结果准确、可靠。     

肥胖的Ⅱ型糖尿病患者短期节食可改善其糖耐量

肥胖的Ⅱ型糖尿病患者长期限制热卡(节食7天以上或限制某些食物)可显著降低血糖,是Ⅱ型糖尿病治疗方法之一。作者的研究在于探讨短期节食对糖耐量的影响。Ⅱ型糖尿病患者10例,均为肥胖的妇女,节食前、后3天时分别作饮食糖耐量试验。节食3天后,血清葡萄糖从15.2±0.9mmol/L降至9.5±0.7mmol/L(即从273±17mg/d1降至135±13mg/d1,P<0.001)对试餐的血糖反应(以葡萄糖曲线下的面积表示)改善31％。基础和膳食后胰岛素水平     

米饭及米粥对糖耐量异常患者餐后血糖的影响

目的在糖耐量异常患者中观察进食大米粥及大米饭后对餐后血糖及胰岛素分泌的影响。方法对35例糖耐量异常患者仅进行饮食及运动控制血糖达标（不予药物治疗）。早餐先后给予等量大米烹调成的大米粥和大米饭,并以等能量的葡萄糖作对照,观察0、30、60、120和180min血糖、胰岛素和C肽变化情况。结果进食葡萄糖受试者餐后120min血糖受试者工作特征曲线（ROC曲线）下面积（AUC）比进食大米粥及大米饭者略高（〉0.05）。进食大米饭的餐后血糖最大波动值明显低于大米粥和葡萄糖[（3.01±0.71）（4.69±0.95）mmol/L,（3.01±0.71）（5.51±0.92）mmol/L,均〈0.05]。进食大米饭30min血糖值明显低于大米及葡萄糖[（7.43±0.90）（9.11±1.36）mmol/L（,7.43±0.90）（9.78±1.04）mmol/L,均〈0.05]。进食大米饭后30 min胰岛素、C肽水平低于进食大米粥和葡萄糖（均〉0.05）。进食大米饭后180 min胰岛素略高于其他两种饮食;进食大米饭餐后胰岛素最大波动值低于大米粥和葡萄糖,但差别无统计学意义[（13.5±8.14）（16.5±8.02）mmol/L,（13.5±8.14）（17.4±7.24）mmol/L,均〉0.05]。结论在糖耐量异常患者中,进食等量大米做成的大米粥比大米饭餐后血糖波动更大;早期胰岛素和C肽分泌略有增加,但差别无统计学意义。进食大米粥餐后胰岛素最大波动值略有增加,但差异无统计学意义。     

陈旧性心肌梗死血葡萄糖、胰岛素分泌变化的临床意义

目的:探讨冠心病心肌梗死患者血糖、胰岛素分泌变化。方法:来自住院的52例心肌梗死患者和71例对照,进行葡萄糖糖耐量试验和胰岛素释放试验,运用稳态模式法评价胰岛素敏感性与心肌梗死的关系。结果:心肌梗死组糖尿病患病率(46.2%)明显增多(P<0.01),胰岛素敏感指数HOMAIS(237.19±162.35比415.52±272.64)明显降低(P<0.05)。服糖后60min血糖[(12.55±4.58)mmol/L],120min血糖[(12.18±5.50)mmol/L],180min血糖[(9.13±4.65)mmol/L]水平升高有统计学意义(P<0.01)。同时,空腹胰岛素[(14.85±10.60)mU/L],服糖后30min胰岛素[(54.32±42.33)mU/L],60min胰岛素[(76.36±49.30)mU/L]分泌减低有统计学意义(P<0.05)。结论:陈旧性心肌梗死患者存在血糖、胰岛素分泌异常。     

肝移植后糖尿病发病原因分析

目的:观察肝移植后糖尿病的发病率。方法:测量对肝移植病人移植前后胰岛素,空腹血糖水平。结果:移植前的胰岛素,空腹血糖水平为63.45±2.78IU/ml,4.08±015 mmol/L;移植后一月的胰岛素,空腹血糖水平54.85±1.09 IU/ml,5.21±1.78 mmol/L,移植后二月后的胰岛素,空腹血糖水平46.76±1.55,IU/ml,6.01±1.92 mmol/L;移植后三月的胰岛素,空腹血糖水平42.38±1.95 IU/ml,6.78±2.75 mmol/L。结论:肝移植后糖尿病的发病率会增高,其胰岛素含量下降,空腹血糖水平升高。     

葡萄糖和胰岛素对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA表达的影响

目的本试验模拟糖尿病病程不同阶段患者体内葡萄糖和胰岛素浓度的变化,研究不同浓度的葡萄糖和胰岛素对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA表达的影响。方法体外常规培养Colon 26肿瘤细胞。根据所用培养液外加葡萄糖和胰岛素浓度的不同,将实验所用细胞共分12组：A组（对照组）RPMI 1640培养液;B组加5 mmol/L葡萄糖;C组加10 mmol/L葡萄糖;D组加25 mmol/L葡萄糖;E组加5μIU/ml胰岛素;F组加25μIU/ml胰岛素;G组加125μIU/ml胰岛素;H组加5 mmol/L葡萄糖＋5μIU/ml胰岛素;K组加5 mmol/L葡萄糖＋125μIU/ml胰岛素;L组加25 mmol/L葡萄糖＋125μIU/ml胰岛素;M组加25 mmol/L葡萄糖＋5μIU/ml胰岛素;N组加25 mmol/L葡萄糖＋1.25μIU/ml胰岛素。每组设3个复孔,置37℃5%CO2饱和湿度的培养箱培养48 h,收集细胞后抽提总RNA,RT-PCR同时扩增目的片段TGF-β1和内参照β-actin,琼脂糖凝胶电泳,扩增产物在凝胶成像系统上扫描分析,计算TGF-β1 mRNA相对表达量。整个实验过程均重复3次。结果D组TGF-β1 mRNA的表达（0.768±0.017）高于A组（0.540±0.012）,差异有显著性（P〈0.01）;而B、C组TGF-β1 mRNA的表达（0.545±0.033、0.558±0.035）与A组相比均无显著性差别（P〉0.05）。E、F、G组对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达（分别为0.566±0.039、0.549±0.030、0.531±0.022）与A组相比无显著性差别（P〉0.05）。L、M、N组的TGF-β1 mRNA表达（分别为0.889±0.028、0.764±0.027、0.752±0.035）均高于A组（0.540±0.012）,差异有显著性（P〈0.01）;而H、K组的TGF-β1 mRNA表达（0.550±0.037、0.537±0.025）与A组相比均无显著性差别（P〉0.05）。结论高浓度的葡萄糖能够上调Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达,不同浓度的胰岛素不影响Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达,高浓度的葡萄糖和胰岛素同时作用能够上调Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达     

胰岛素对高糖诱导人脐静脉内皮细胞分泌血栓调节蛋白的影响

[目的]研究胰岛素对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞可溶性血栓调节蛋白(solubility Thrombomodulin,sTM)分泌的影响和可能机制.[方法]将体外培养的人脐静脉内皮细胞分为葡萄糖组(5.5、20和40 mmol/L)、胰岛素组(10 IU/mL)、高糖(40mmol/L)环境下的胰岛素组(10 IU/mL)和对照组(不含葡萄糖和胰岛素),于0、6、24、48和72h等不同时间点收集细胞上清液,采用ELISA法双抗体夹心法检测sTM水平,同时将各时间的细胞上清液与正常血浆等比例混合后测定活化部分凝血活酶时间(Activated partial thromboplastin time,APTT).[结果]在培养的48 h内,高糖环境下(葡萄糖浓度40 mmol/L)内皮细胞分泌sTM的水平随着时间的延长逐渐升高且均高于对照组(P＜0.05),但培养72h后sTM的水平不再升高,反而下降(P＜0.05),高糖环境下(葡萄糖浓度40 mmol/L),APTT值逐渐降低且均低于对照组(P＜0.01)；胰岛素组内皮细胞在不同培养时间,分泌sTM的水平逐渐升高且均高于对照组(P＜0.05),与单独应用高糖(葡萄糖浓度40 mmol/L)相比较均降低(P＜0.05),APTT值随着培养时间的延长逐渐升高,但仍低于对照组(P＜0.01).[结论]生理浓度胰岛素可降低高糖环境下内皮细胞分泌sTM的水平,在一定程度内可以抵消高浓度葡萄糖对内皮细胞的损伤作用.