冰冻人血浆醛固酮标准物质的研制

目的 研制冰冻人血浆醛固酮国家二级标准物质,用于血浆醛固酮的量值溯源、室内质量控制、实验室能力验证、相关试剂和方法的评估及验证等,促进血浆醛固酮检测标准化进程,实现结果互认。方法 收集无肉眼可见溶血、乳糜和黄疸的混合血浆材料,经过浓度配比、过滤、分装后,-70℃保存。参照JJG 1006-1994和JJF 1343-2012文件要求用常规测量方法评价标准物质的均匀性和稳定性。6家通过JCTLM认可和/或CNAS认可的实验室采用醛固酮ID-LC/MS/MS候选参考测量方法联合定值。分析不确定度来源并进行不确定度评定,定值结果用“认定值±不确定度”表示。参照美国国家临床实验室标准委员会EP14-A3文件要求评价互通性。结果 研制了2个浓度水平标准物质,均匀性良好(P>0.05),瓶间变异均<4%。-70℃以下条件可稳定半年;冰袋运输可稳定5d;复融后室温条件下可稳定4 h, 2～8℃条件下可稳定168h。2个浓度水平标准物质的定值结果分别为56.9±4.3和147±12pg/mL,k=2。标准物质在ID-LC/MS/MS法和2个常规方法间与临床血浆样本具有良好的互通性。结论 研...     

冰冻人血浆醛固酮标准物质在量值传递中的效果评价

目的 评价冰冻人血浆醛固酮国家二级标准物质在临床实验室血浆醛固酮量值传递中的效果。方法 采用同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC/MS/MS)和A、B、C 3种免疫法测量原理的常规系统同时测量2个浓度醛固酮标准物质和20份无肉眼可见溶血、乳糜和黄疸的临床单人份血浆样本。以标准物质各常规系统的测量结果为X轴,标准物质的认定值为Y轴作直线回归并计算临床样本经量值递后的值。以ID-LC/MS/MS法测量临床样本结果为X轴,分别以量值传递前后临床样本在A、B、C常规系统与ID-LC/MS/MS法之间结果的相对偏倚为Y轴,绘制改良Bland-Altman图,评价常规系统量值传递前后测量结果的正确性。通过比较量值传递前后平均偏倚及偏倚范围的变化评价醛固酮标准物质在量值传递中的效果。结果 根据正确性评价标准判断,A、B、C常规系统量值传递前后测量结果均不正确。量值传递前临床样本在A、B、C常规系统与ID-LC/MS/MS法之间结果的平均偏倚分别为39.34%、41.45%和97.71%,偏倚波动范围分别为16.93%～95.71%、-3.11%～101.5%和4.55%～319.85%。量值传递...     

不同评价方法对胱抑素C标准物质互换性评价结果的影响

目的 观察不同评价方法对胱抑素C标准物质互换性评价结果的影响.方法 收集无溶血、无乳糜的单人份血清42份,将4个浓度的胱抑素C标准物质穿插其中,选用九强公司、迈克公司、迈瑞公司、罗氏公司、中元公司、积水公司、德赛公司、瑞源公司、景源公司9种市场占有率较高的检测方法,对评价样本重复测量3次,采用EP-14A3和IFCC互...     

血浆醛固酮检测对充血性心力衰竭的意义

充血性心力衰竭 (ＣＨＦ)的基本发病机制是心肌细胞的异常 ,即不同因素诱导心肌细胞的基因表达异常 ,引起细胞的肥大、细胞的死亡 (包括凋亡 )及间质成分的改变及纤维化 ,这是ＣＨＦ呈进行性发展的本质所在。醛固酮 (ＡＬＤ)是肾上腺皮质球状带合成和分泌的类固醇激素 ,是电解质排泄的重要调节因子 ,其作用是保钠排钾 ,因此在维持机体内环境的稳定中起着重要作用。研究表明 ,ＡＬＤ作为独立因素参与了心室重塑 ,并在ＣＨＦ进程中引起严重的临床问题。本文测定了充血性心力衰竭患者血浆ＡＬＤ的水平 ,并探讨ＡＬＤ在ＣＨＦ发病机理中的作用及…     

冰冻人血清胱抑素C标准物质的制备

目的 研制人血清基质的胱抑素C标准物质。方法 收集无溶血、黄疸、乳糜的血清样本,去除血清中的不稳定成分,经过浓度配比、过滤、混匀、分装后制成4个浓度的胱抑素C标准物质。在单一实验室内采用10种免疫透射比浊法测量原理的常规方法同时测量系列浓度ERM-DA471/IFCC溶液和各标准物质中胱抑素C浓度,以经过ERM-DA471/IFCC量值传递后的胱抑素C浓度均值作为标准物质的认定值。依据文件分别评估胱抑素C标准物质的均匀性、稳定性及互换性。结果4个水平的胱抑素C标准物质定值结果为0.89±0.10mg/L、1.82±0.13mg/L、3.55±0.28mg/L、5.25±0.29mg/L。制备的标准物质均匀性良好。-70℃以下条件可稳定半年,2～8℃条件可稳定144h,复融后室温条件可稳定8h。常规测量系统中的互换性良好。结论 该标准物质符合国家二级标准物质的要求,现已通过全国标准物质管理委员会的审批,编号为GBW(E)091173-091176,可用于临床实验室胱抑素C的质量评价。     

醛固酮（ALD）放射免疫分析的临床应用

醛固酮（Aldosterone,ALD）是肾上腺皮质球状带（Zona Glomerulosa）合成和分泌的一种调节机体水、盐代谢的皮质激素,称之为盐皮质激素或盐皮质类固醇（Mineralocorticoids）。ALD对机体能影响电解质、水的排泄及血容量,对调节机体内环境的恒定有着重要的临床意义。 1977年我国建立了血浆~3H-ALD放射免疫分析,以后又建立了血浆~（125）I-ALD免疫放射分析,经临床应用,表明对某些疾病中ALD分泌异常者,可提高其诊断符合率。 一、ALD的生理作用:ALD具有调节机体水、盐代谢,可促进肾远曲小管与集合管对Na~+的重吸收、K~+的排泄。随着大量吸收Na~+,水的重吸收也相应增加,以维持细胞外液容量。由此可见,ALD对机体起保钠、保水、排钾的作用。动物实验证实,完全切除两侧肾上腺皮质后,由于缺乏盐皮质激素而致使大量水和钠丢失,引起低容量性休克,在较短的时间即死亡,因此,说明ALD是维持生命所不可缺少的激素之一。 二、ALD分泌活动的调节:一般情况下,ALD分泌活动的调节基本上不受ACTH控制,其调节机制比较复杂,尚未完全阐明清楚。目前认为ALD分泌活动的调节与肾素、血管紧张素、血钠、血钾浓度有着密切关系。     

SMAO休克过程中血浆中分子物质含量研究

用改进的紫外吸收法测定ＳＭＡＯ休克及假手术对照组家兔血浆中分子物质含量的动态变化。结果表明，ＳＭＡＯ休克组家兔血浆ＭＭＳ含量显著升高；假手术对照组家兔血浆ＭＭＳ含量显著降低２。     

116例高血压病患者血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮的RIA

了解患者的血浆肾素、血管紧张素以及醛固酮的状况对可治疗性高血压的诊断，治疗以及与原发性高血压的鉴别诊断十分重要。本文就116例高血压病人的PRA、AT-Ⅱ、Aldo的RIA结果分析，现报告如下。     

强直性脊柱炎患者血浆P物质水平的检测及其临床意义

目的：探讨血浆Ｐ物质水平变化与强直性脊柱炎发病的关系。方法：采用放射免疫分析法。结果：强直性脊柱炎患者活动期与非活动期的血浆Ｐ物质水平显著高于健康对照组,较活动期患者的Ｐ物质水平明显增高。结论：增高的Ｐ物质可能在强直性脊柱炎的病理形成 起着重要作用。     

冠心病,高血压患者血浆P物质水平的临床观察

选择符合ＷＨＯ诊断标准的急 梗患者２０例心绞痛患者３０例，高现患者３０例，应用放射免疫分析动态观察血浆Ｐ物质含量变化，并以３０名政党 作为对照。     

Commutability of the First World Health Organization International Standard for Human Cytomegalovirus

Quantitative detection of cytomegalovirus (CMV) DNA has become a standard part of care for many groups of immunocompromised patients; recent development of the first WHO international standard for human CMV DNA has raised hopes of reducing interlaboratory variability of results. Commutability of reference material has been shown to be necessary if such material is to reduce variability among laboratories. Here we evaluated the commutability of the WHO standard using 10 different real-time quantitative CMV PCR assays run by eight different laboratories. Test panels, including aliquots of 50 patient samples (40 positive samples and 10 negative samples) and lyophilized CMV standard, were run, with each testing center using its own quantitative calibrators, reagents, and nucleic acid extraction methods. Commutability was assessed both on a pairwise basis and over the entire group of assays, using linear regression and correspondence analyses. Commutability of the WHO material differed among the tests that were evaluated, and these differences appeared to vary depending on the method of statistical analysis used and the cohort of assays included in the analysis. Depending on the methodology used, the WHO material showed poor or absent commutability with up to 50% of assays. Determination of commutability may require a multifaceted approach; the lack of commutability seen when using the WHO standard with several of the assays here suggests that further work is needed to bring us toward true consensus.     

液体人血浆HCV-RNA质控品临床应用探讨

目的 探讨液体人血浆HCV-RNA质控品临床应用的可行性。方法 用实时荧光定量PCR检测液体人血浆HCV-RNA质控品在不同存放时间和温度下HCV-RNA含量的变化情况,同时对同一管质控品进行3个复孔检测,考察其管内RNA分布的均一性。结果 多批次质控品在4℃存放半个月后HCV-RNA含量均有将近1个数量级的下降;存放6个月以上有1～2个数量级的下降;质控品置-20℃存放较4℃稳定;同一质控品3个复孔管内RNA分布均一性检测结果表明最高值与最低值之间相差1～2个数量级。结论 液体人血浆HCV-RNA质控品稳定性和均一性欠佳,目前尚不适合作为HCV-RNA室间质控品广泛应用。     

慢性CHF患者BNP与AT-Ⅱ及ALD水平的探讨

目的：探讨慢性充血性心力衰竭患者血中脑利钠肽（BNP）与血管紧张素-Ⅱ（AT-Ⅱ）及醛固酮（ALD）的水平,并进行相关性分析,以提示其在充血性心力衰竭（CHF）发展中的临床意义和价值。方法：使用美国博适公司生产的Triage Meter Plus型免疫荧光定量心衰快速检测仪,检测全血BNP水平。采用放射免疫分析（RIA）受试者血浆AT-Ⅱ、ALD含量。结果：CHF组BNP、AT-Ⅱ、ALD均显著高于对照组,且BNP与AT-Ⅱ、ALD水平呈正相关（P〈0.05）,治疗后血中水平均下降与治疗前差异有显著性（P〈0.01）。结论：同步监测BNP、AT-Ⅱ、ALD有助于早期发现CHF,判断病情及预后。     

抗人血浆纤维结合蛋白单克隆抗体的初步研究

本文应用人血浆纤维结合蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合制备出一组(5株)人血浆纤维结合蛋白的单克隆抗体(HIFn1-5)。经免疫酶标和免疫组化检测,这组单抗仅特异地与人血浆纤维结合蛋白结合,而与血浆中的其它大分子糖蛋白如纤维蛋白原、凝血酶敏感蛋白和胶原等均无明显的交叉反应。与多种器官、组织的间质可发生特异性反应,而与组织中的细胞则无反应。间接免疫荧光测定,这组抗体与正常人的造血细胞及某些造血细胞系和部分白血病病人的细胞均无交叉反应。竞争试验的结果表明,这组抗体(除HITn5外)识别的抗原位点十分相近。通过双抗体夹心ELISA方法,测定了17例正常人血浆纤维结合蛋白,其平均含量为557±154mg/L。     

人精浆对抗原抗体反应免疫抑制作用的研究

本文采用体外实验的方法,研究人精浆对抗原抗体特异性反应的抑制作用。运用酶联免疫吸附试验原理检测人精浆对AsAb、A-dsDNA、A-TG、A-TM、RF五种自身抗体反应的抑制,抑制率分别为61.5±23.1(％)、57.1±19.4(％)、56.7±25.8(％)、42.0±28.2(％)、41.8±25.1(％),说明均有明显的抑制作用。经生育组与不孕组、流产组对比分析,发现不孕组精浆对RF反应的抑制率明显高于生育组,其它各组之间对比均无显著差异。本文还对精浆的免疫抑制作用进行了探讨。     

A Tissue type Transglutaminase in Human Seminal Plasma

PROBLEM: Initial studies from this laboratory of human seminal plasma (SePI) permitted the presumptive identification of the participation of transglutaminase (TGase) and prostaglandins as principal molecules contributing to the immunoregulatory activity of SePI. As a step toward confirmation and extension of these studies, SePI TGase has been partially purified, characterized, and localized. METHOD OF STUDY: An enzyme-enriched and partially purified preparation of SePI TGase obtained by molecular sieve and ion-exchange chromatography and the polyclonal antibody to this preparation were characterized by enzymatic analysis and evaluated by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE); immunoprecipitation and immunofluorescence (IF). RESULTS: A Ca²⁺ -dependent, thrombin-independent, TGase enzyme from SePI was identified. A pH of 7.5 and a concentration of 2 mM calcium chloride were determined to be optimal for ascertaining the SePI TGase activity in a filter paper assay. Immunoprecipitation using polyclonal antibody prepared with a semipurified TGase preparation, concurrently comparing increasing serum dilution and enzyme activity, revealed a predominant protein band on SDS-PAGE of 83 kDa. IF studies using the polyclonal antibody on human prostate tissue showed reactivity with a variety of epithelial and stromal components. A significant (P < 0.05) correlation between the biochemical, i.e., enzyme activity of the SePI TGase active preparation, and immunologic activity, i.e., indirect IF staining titre of antibody to acinar epithelial cells and luminal contents, was observed. CONCLUSIONS: The results confirm and extend initial studies of the presumptive identification of a tissue type TGase associated with the immunoregulatory activity of human SePl and permit the characterization and immunohistologic localization of this macromolecule to the prostate. These observations provide a basis for further investigation of the immunoregulatory role of SePl and prostate TGase in the biology of reproduction and associated pathoses.