纳米银羟基磷灰石复合涂层的生物安全性研究

目的 研究纳米银羟基磷灰石的细胞毒性。方法 采用能快速、准确、敏感地评价细胞增殖率和细胞毒性的MTT比色法,以纳米羟基磷灰石为对照组,纳米银羟基磷灰石为实验组,在材料浸提液中,分别检测人牙周膜成纤维样细胞的相对增殖率。另观察细胞在扫描电镜中的形态,从而分析比较涂层表面对细胞的毒性。结果 与纳米羟基磷灰石相比,纳米银羟基磷灰石涂层中的纳米银粒子直径在200～400nm时体外细胞培养显示表现出较高的细胞增殖率,细胞毒性趋于0级,显示其具有良好的生物活性。结论 纳米银羟基磷灰石涂层无细胞毒性。     

胶原基纳米骨的遗传毒性及对体外培养细胞影响的研究

目的：体外研究胶原基纳米骨的遗传毒性,及对原代培养的人牙周膜成纤维样细胞、兔成骨细胞的影响。方法：采用Ames致突变试验、MTT法及碱性磷酸酶（ALP）检测法,测定不同浓度胶原基纳米骨（nHAC）的浸提液对鼠伤寒沙门菌的致突变比值的影响和对人牙周膜成纤维样细胞及兔成骨细胞的影响。结果：nHAC的浸提液各剂量组对鼠伤寒沙门菌的致突变比值均小于2,nHAC不会引起鼠伤寒沙门菌的回复突变数增加。不同时间点用不同浓度浸提液培养的人牙周膜成纤维样细胞正常增殖,浸提液不影响兔成骨细胞的功能表达。结论：胶原基纳米骨无遗传毒性,不影响人牙周膜成纤维样细胞的增殖活性和兔成骨细胞的成骨活性,是一种组织工程骨支架的良好材料。     

新型纳米羟基磷灰石根充糊剂的细胞毒性研究

目的　体外研究新型纳米羟基磷灰石(n-HA)根充糊剂的细胞毒性。方法　体外培养成骨细胞,采用碱性 磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原免疫组化染色鉴定成骨细胞;采用MTT比色法,以F12培养基为对照,选用3种不同浓度 的新型n-HA根充糊剂浸提液,分别检测浸提液与成骨细胞接触1、3、5、7 d的细胞相对增殖率(RGR),以评价其细 胞毒性。结果　与对照组相比,新型n-HA根充糊剂表现出较高的细胞相对增殖率,随着浸提液浓度的降低和培养 时间的延长,细胞毒性趋于0级;相同时间点不同浓度的新型n-HA根充糊剂浸提液的吸光度值无显著性差异(P> 0·05)。结论　新型纳米羟基磷灰石根充材料无细胞毒性。     

羧甲基壳聚糖锌多肽复合材料对人牙周膜成纤维细胞的毒性

目的:研究羧甲基壳聚糖锌多肽复合材料(carboxymethyl chitosan zinc and peptide,CMC-Zn+-P)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)的细胞毒性,为材料的安全使用提供依据.方法:体外培养人牙周膜成纤维细胞,并进行形态学及免疫组织化学鉴定.使用含不同浓度材料浸提液的细胞培养液培养细胞,并进行分组,1～4组为实验组,材料浸提液浓度分别为100％、75％、50％和25％,第5组为对照组,不含材料浸提液.采用CCK-8法测定复合材料不同浓度浸提液对细胞增殖活性的影响,通过细胞相对增殖率进行细胞毒性评级.采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析.结果:原代培养的细胞呈成纤维细胞形态,免疫组织化学染色结果显示细胞波形丝蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性,属中胚层组织来源.不同浓度材料浸提液对细胞均有促进增殖的作用,相对增殖率均大于100％,细胞毒性分级为0级.结论:CMC-Zn+-P复合材料对体外培养的HPDLCs无细胞毒性,符合国家标准的要求.     

钇-羟基磷灰石纳米微粒对人牙周膜细胞生物学行为的影响

目的:评价Y-HA纳米微晶对人牙周膜细胞的影响.方法:通过人牙周膜细胞的体外培养技术,采用MTT法、透射电镜、细胞免疫化学检测方法,评价Y-HA纳米微晶对人牙周膜细胞增殖、亚细胞结构、Ⅰ型胶原合成的影响.结果:Y-HA和HA纳米微晶对牙周膜细胞均具有促进细胞早期增殖,促进Ⅰ型胶原合成的作用,Y-HA纳米微晶对细胞的早期增殖作用比HA纳米微晶更明显;人牙周膜细胞大量吞噬纳米微晶,细胞的体积和形态无变化,但与细胞代谢有关的一些亚细胞结构发生了一定的变化.结论:Y-HA纳米微晶比HA纳米微晶具有更好的细胞相容性.     

一种新型纳米羟基磷灰石材料应用于牙周组织工程的可行性研究

目的:对一种新型纳米羟基磷灰石材料 -纳米羟晶 -胶原仿生骨材料 (nHAC)进行细胞相容性和细胞毒性的研究,以初步探讨其应用于牙周组织工程的可行性。方法:将体外培养的人牙周膜细胞(PDLCs)接种于nHAC三维支架上复合培养,采用细胞计数和扫描电镜观察PDLCs在nHAC支架上的附着、生长情况,并通过MTT测试法和碱性磷酸酶(ALP)活性检测法研究nHAC浸提液对PDLCs增殖和功能表达的影响。结果:人PDLCs在nHAC支架上形成良好贴附并增殖,扫描电镜可见nHAC具有良好的多孔网状结构,细胞在nHAC上生长旺盛,伸展充分,而PDLCs在不同浓度的材料浸提液中的生长、增殖及ALP活性与空白对照组相比无显著性差异。结论:nHAC具有良好的三维空间结构和细胞相容性,且无细胞毒性,有望成为牙周组织工程的支架材料。     

含银羟基磷灰石种植体的细胞毒性研究

目的：在钛种植体表面构筑羟基磷灰石钠米银涂层并进行生物学评价。方法：采用恒电位电化学法在纯钛表面构建纳米级羟基磷灰石／纳米银（HAp／Nanosilver）涂层。采用扫描电镜（SEM），检测手段对涂层进行理化性能的表征。考察了涂层的结构组分和表面的微观形貌，而后将人牙周膜成纤维样细胞培养于涂层表面，采用细胞毒性评价及其形态观察，分析比较不同表面涂层对牙周膜成纤维样细胞粘附率及增殖率的影响。结果：羟基磷灰石纳米银涂层体外细胞培养显示其具有良好的生物活性。结论：本实验构筑的涂层具有良好的生物相容性和细胞粘附性，应用前景广阔。     

3种义齿粘附剂的体外细胞毒性研究

目的:体外研究3种商品化义齿粘附剂的细胞毒性。方法:采用MTT法检测不同浓度义齿粘附剂浸提液对人原代口腔黏膜角质细胞、成纤维细胞和小鼠成纤维细胞系L929的细胞毒性。结果:3种义齿粘附剂对人原代口腔黏膜角质细胞有1~2级细胞毒性,对人原代口腔黏膜成纤维细胞有1级细胞毒性,对L929细胞却无毒性。高浓度义齿粘附剂浸提液一般比低浓度浸提液具有更强的细胞生长抑制作用。结论:义齿粘附剂对人原代口腔黏膜角质细胞和成纤维细胞有细胞毒性,对L929细胞却无细胞毒性,提示在义齿粘附剂的细胞毒性测试方面,人原代口腔黏膜细胞可能会提供更有价值的信息。     

GuttaFlow根管充填材料对人牙周膜成纤维细胞的毒性

目的:比较GuttaFlow常温流动牙胶根管充填材料与临床常用的两种根管封闭剂AH-Plus和Endomethasone的细胞毒性。方法:制备GuttaFlow、AH-Plus和Endomethasone浸提液,并将100%原液分别稀释至50%、25%和12.5%。组织块法培养人牙周膜成纤维细胞,将上述不同材料、不同浓度的浸提液与细胞共同培养,于1、3、5、7 d镜下观察细胞形态,MTT法分别检测各组细胞增殖情况,并计算相对增殖率(RGR)以评价细胞毒性。结果:AH-Plus和GuttaFlow各浓度组在各时点的细胞OD值均与对照组无明显差异,RGR分别为77.1%～14.1%和79.8%～115.9%,毒性评级均为0～Ⅰ级,评价结果为无细胞毒性,优于Endometha-sone。结论:GuttaFlow对人牙周膜成纤维细胞无明显细胞毒性。     

电纺左旋聚乳酸和左旋聚乳酸羟基磷灰石纳米纤维细胞相容性的比较研究

目的：用MTT法检测电纺左旋聚乳酸和左旋聚乳酸/羟基磷灰石PLLA和PLLA/HA纳米纤维材料,对人牙周膜细胞生长曲线的影响,评价两种材料的细胞相容性。方法：通过电纺技术制备PLLA、PLLA/HA纳米纤维材料,体外分离、培养并鉴定人牙周膜细胞,用MTT法检测人牙周膜细胞在两种材料上的生长曲线,评价两种材料的细胞相容性及其用于口腔组织工程的可能性。结果：成功分离、培养了人牙周膜细胞,通过免疫组织化学染色鉴定细胞来源于中胚层,为牙周膜细胞。电纺法制备的PLLA、PLLA/HA纳米纤维材料具有三维网状空间结构,与人牙周膜细胞共培养,MTT检测结果显示,细胞能够在材料上生长增殖,在第七天时PLLA/HA组细胞增殖好于PLLA组和对照组。结论：电纺PLLA和PLLA/HA纳米纤维材料生物相容性良好,PLLA/HA组较单纯PLLA组能够促进细胞的增殖,有望成为良好的新型口腔组织工程支架材料。     

聚甲基丙烯酸缩水甘油酯预浸润石英纤维的细胞毒性和生物相容性研究

目的    对聚甲基丙烯酸缩水甘油酯（PGMA）预浸润石英纤维进行体外细胞毒性和生物相容性研究,以便对该材料应用于口腔临床提供实验依据。方法    使用CCK8法测定小鼠成纤维细胞（L929）以及小鼠牙龈上皮细胞（GE1）在不同材料（非聚合状态PGMA预浸润石英纤维、聚合状态PGMA预浸润石英纤维）浸提液中培养2、4、7 d的吸光度（A值）,计算细胞相对增殖率（RGR）,判断细胞毒性的级别。结果    非聚合状态PGMA预浸润石英纤维100%浸提液、50%浸提液细胞组在不同时间点相对增殖率为44.59%～65.66%（L929）和52.06%～62.86%（GE1）,其细胞毒性程度为2～3级。而聚合状态PGMA 预浸润石英纤维100%浸提液、50%浸提液细胞组的相对增殖率为90.56%～100.89%（L929）和89.99%～101.21%（GE1）,其细胞毒性为0～1级。结论    聚合状态PGMA预浸润石英纤维安全可靠,具有良好的临床应用前景。     

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??Objective    To evaluate the cytotoxicity?? biocompatibility and biological safety of PGMA pre-impregnated quartz fiber in vitro?? providing scientific basis for clinical application. Methods    According to standard of GBT16886.5-2003 and YYT0268-2008 documents?? the cellular cultivation and cytotoxicity test in vitro were conducted to evaluate the target materials on the morphology?? growth and proliferation of cultured cells ??L929 and GE1??. Results        The range of cell relative growth rate ??RGR?? of 50% and 100% extraction of non-polymerized composite were 44.59%-65.66% ??L929?? and 52.06%-62.86% ??GE1???? and the cytotoxicity was grade 2-3. The range of cell relative growth rate ??RGR?? of 50% and 100% extraction of polymerized composite were 90.56%-100.89% ??L929?? and 89.99%-101.21% ??GE1???? and the cytotoxicity was grade 0-1. Conclusion    Polymerized PGMA pre-impregnated quartz fiber is safe and fit for the clinical application.     

根管桩用石英纤维复合材料及其树脂基体的细胞毒性研究

目的：研究白行研制的根管桩用复合材料及其环氧树脂基体的体外细胞毒性,以初步评价材料的生物安全性。方法：采用四唑盐比色法（MTT法）,分别用50％和100％的石英纤维复合材料以及50％和100％环氧树脂的浸提液培养小鼠成纤维细胞L-929细胞2d、4d、7d后,测定吸光度值（OD值）,并计算细胞相对增殖率,以6级毒性分类法评级,采用单因素方差分析法对各实验组及对照组的OD值进行统计学分析,显微镜观察细胞的生长状况。结果：各观察期细胞生长良好,形态正常,复合材料及其环氧树脂基体的细胞毒级为0—1级。结论：自行研制的根管桩用复合材料及其树脂基体无细胞毒性。     

铁镍软磁合金细胞毒性研究

目的探讨铁镍软磁合金应用于临床的生物安全性。 方法将5种材料（纯钛、铁镍合金、电镀Cr⁶⁺的铁镍合金、钴铬合金、PVC）制成2 cm × 2 cm × 0.2 cm的方块,消毒灭菌后制取材料浸提液。取5块无菌96孔板,每孔加入100 μl浓度为6 × 10⁴个/ml对数生长期L-929细胞悬液,贴壁生长24 h后置换各组材料浸提液。培养1、2、3、4、5 d后各取出1块板,于倒置显微镜下观察各组细胞形态和贴壁情况,然后向每孔加入10 μl CCK-8试剂,避光培养1.5 h后用酶标仪测定各孔吸光度（A）值。利用各组之间A值计算细胞相对增殖率（RGR）,并对各组实验材料细胞毒性进行分级评价。 结果在倒置显微镜下,除PVC出现大量细胞溶解、固缩外,其余各组细胞均形态正常、贴壁生长良好。根据各组材料细胞RGR进行毒性分级可知,除外PVC组为3级,其余各实验组材料毒性级别均为0~1级,可以应用于人体。 结论铁镍合金原样和电镀Cr⁶⁺后的细胞毒性均在安全范围。     

壳核型n-HA／ZrO2支架材料对L929细胞增殖活性的影响

目的研究核壳型纳米羟基磷灰石包覆二氧化锆（壳核型n-HA／ZrO2）复合生物陶瓷支架材料对L929细胞增殖活性的影响及细胞毒性反应。方法将L929细胞接种于96孔板,随机分为3组进行培养,实验组用壳核型n-HA／ZrO2支架材料浸提液处理,阳性对照组用苯酚溶液,阴性对照组用聚乙烯浸提液,于24、48、72h后观察细胞生长形态,通过MTT比色法检测各组细胞的相对增殖率（relative growth rate,RGR）,按GB／T16175-1996标准评价材料的细胞毒性。结果实验组L929细胞24、48、72h后的RGR随时间延长而升高,分别为95.86％、98.29％和102.73％,与阴性对照组L929细胞在增殖活性方面的差异无统计学意义,两组受试材料细胞毒性评级为0-I级。结论核壳型n-HA／ZrO2支架材料不影响L929细胞的增殖活性,无细胞毒性。     

控释性可注射牙槽骨修复材料聚磷酸酯的体外细胞毒性研究

目的:研究控释性可注射牙槽骨修复材料聚磷酸酯交联物的体外细胞毒性.方法:用细胞培养液浸提聚磷酸酯24 h,配置不同浓度的聚磷酸酯浸提液 (0.1～100 mg/mL),将小鼠成纤维细胞(L-929)在不同浓度的聚磷酸酯浸提液中分别培养24 h,通过MTT比色法和Alamar Blue比色法,检测聚磷酸酯对L-929细胞相对增值率的影响,评价其细胞毒性.结果:两种测定方法均呈现高的细胞增值率,各浓度聚磷酸酯交联物浸提液之间差异无显著性意义(P>0.05),其细胞毒性为0～1级.结论:高分子交联聚合物聚磷酸酯无明显的细胞毒性,具有较好的生物相容性.     

两种新型玻璃陶瓷材料的体外细胞毒性评价

为了初步检测两种新型玻璃陶瓷材料Hypress和Hycam的生物相容性,本实验采用间接接触法检测了它们对L-929细胞的细胞毒性。结果显示:随着细胞培养时间的延长,(1)光吸收度(OD)值呈增长趋势且与阴性对照走势相同,两者间无显著性差异(P>0.05);(2)细胞增殖率(RGR)逐渐增加;(3)Hypress材料组表现为极轻微的细胞毒性,Hycam材料组未见明显的细胞毒性。     

窝沟封闭剂Densply的体外细胞毒性研究

目的：研究临床常用的窝沟封闭剂Densply的体外细胞毒性。方法：用细胞培养液浸提窝沟封闭剂Den-sply24h,配置不同浓度的浸提液（0.1～100 mg/mL）,将小鼠成纤维细胞（L-929）在不同浓度的窝沟封闭剂Densply浸提液中分别培养24 h,通过Alamar Blue比色法,检测窝沟封闭剂Densply对L-929细胞相对增殖率（RGR）的影响,评价其细胞毒性。结果：L-929细胞呈现高的细胞增殖率,各浓度窝沟封闭剂Densply浸提液之间差异无显著性意义（P〉0.05）,其细胞毒性为0～1级。结论：高分子交联聚合物聚磷酸酯无明显的细胞毒性,具有较好的生物相容性。