黑皮素受体-1在自体中厚移植皮片中的表达

目的检测MC-1R在自体移植皮片中的表达,并与自身正常皮肤作对照,初步认识MC-1R在自体移植皮片过度色素沉着中的作用.方法利用免疫组织化学方法检测自体中厚移植皮片与供区及受区周围自体正常对照皮肤中MC-1R的表达,并行统计学分析.结果 MC-1R的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角朊细胞的胞浆及胞膜,在大部分自体中厚移植皮片中呈强阳性表达,其强阳性表达率为67.7%,与在自体正常对照皮肤中的表达差异有显著意义(P＜0.01);MC-1R在受区周围与供区正常对照皮肤中的表达差异无显著意义(P＞0.01).结论 MC-1R在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用.     

α-黑素细胞刺激素在自体移植皮片中的mRNA表达及意义

目的初步探索α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulatinghormone,α-MSH)在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法标本取自颈部自体中厚移植皮片术后1年,局部需再次矫正的18例患者。在切取颈部自体中厚移植皮片同时于每例移植皮片受区及原供区腹部周围分别切取正常皮肤作对照,切取范围1.0cm×0.5cm。分别利用RT-PCR、银染-丽春红染色法计算自体中厚移植皮片、原供区及受区周围自体正常对照皮肤中α-MSHmRNA电泳条带及表皮的灰度值,测定各组中α-MSHmRNA的半定量表达及黑色素的含量。结果α-MSH在自体中厚移植皮片中的mRNA表达明显高于自体正常对照皮肤,差异有统计学意义(P<0.01);自体中厚移植皮片表皮中黑色素含量较自体正常对照皮肤表皮中的黑色素含量明显增多,差异亦有统计学意义(P<0.01);且表皮中黑色素的含量与α-MSH的mRNA表达量呈正相关。结论α-MSH在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高,致皮片中黑色素含量升高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用。     

自体移植皮片中黑皮素-1受体mRNA的表达及意义

目的：探讨黑皮素-1受体在自体移植皮片过度色素沉着中的作用.方法：利用RT-PCR、Ma sson-Fontana stain方法检测人体自体中厚移植皮片与原供区及受区周围自体正常对照皮肤中黑皮素-1受体mRNA的表达及表皮中黑色素的含量,并行统计学分析.结果：黑皮素-1受体在自体中厚移植皮片中的mRNA表达明显高于自身正常对照皮肤,其表达差异有显著性意义（P＜0.01）;自体中厚移植皮片表皮中黑色素含量较自身正常对照皮肤表皮中的黑色素含量亦明显增多,其含量的差异亦有显著性意义（P＜0.01）;且表皮中黑色素的含量与黑皮素-1受体的mRNA表达量呈正相关.结论：黑皮素-1受体在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用.     

自体移植皮片中黑素细胞的密度和功能变化

目的：通过对自体移植皮片中黑素细胞密度和功能变化的测定,进一步认识黑素细胞密度变化在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法：利用免疫组织化学方法测定自体中厚移植皮片黑素细胞中特异性抗原显示黑素细胞,计算表皮中黑素细胞的密度,并与自体正常皮肤对照;利用银染-丽春红法检测自体中厚移植皮片和正常皮肤中黑素含量。结果：自体移植皮片与自体对照正常皮肤中黑素细胞的密度差异无显著性（P〉0.05）;自体中厚移植皮片中黑色素含量较自体正常对照皮肤中的黑色素含量明显增多,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：自体皮片移植后表皮中黑素细胞密度无明显变化,与皮片色素沉着程度无显著相关性。     

黑皮素受体-1在自体中厚移植皮片中的表达

目的　检测MC - 1R在自体移植皮片中的表达 ,并与自身正常皮肤作对照 ,初步认识MC - 1R在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法　利用免疫组织化学方法检测自体中厚移植皮片与供区及受区周围自体正常对照皮肤中MC - 1R的表达 ,并行统计学分析。结果　MC - 1R的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角朊细胞的胞浆及胞膜 ,在大部分自体中厚移植皮片中呈强阳性表达 ,其强阳性表达率为 6 7.7% ,与在自体正常对照皮肤中的表达差异有显著意义 (P <0 .0 1) ;MC - 1R在受区周围与供区正常对照皮肤中的表达差异无显著意义 (P >0 .0 1)。结论　MC - 1R在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高 ,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用。     

I型IP_3受体在自体中厚移植皮片中的表达

目的：检测I型1,4,5--三磷酸肌醇受体（type I inositol 1,4,5-t riphosphate receptor,IP3R1）在人自体中厚移植皮片中的表达,初步认识由IP3受体介导的钙信号转导在自体中厚移植皮片过度色素沉着发生机制中的作用。方法：利用免疫组化SP方法,检测IP3R1在自体移植中厚皮片、受区周围与供区正常皮肤中的表达并进行统计学分析。结果：IP3R1的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角质形成细胞胞浆,在大部分自体中厚移植皮片中呈强阳性表达,与自体正常对照皮肤中的表达差异有显著性意义（P〈0.05）;IP3R1在受区周围和供区正常对照皮肤中的表达差异无显著性意义。结论：IP3R1在自体中厚移植皮片中的表达比自体正常对照皮肤中显著提高,推测由IP3R1介导的胞内钙库钙离子释放参与了钙信号转导在自体移植皮片过度色素沉着中的调控作用。     

α-黑素细胞刺激素在自体中厚移植皮片中的表达

目的检测α黑素细胞刺激素(αmelanocytestimulatinghormone,αMSH)在人体自体中厚移植皮片中的表达,并与自身正常皮肤作对照,初步认识αMSH在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法利用免疫组织化学方法,检测人体自体中厚移植皮片与原供区及受区周围自体正常对照皮肤中αMSH的蛋白表达,并行统计学分析。结果αMSH的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角朊细胞胞浆,在大部分自体中厚移植皮片中呈强阳性表达,表达率为611%,与自体正常对照皮肤中的表达差异有非常显著性意义(P<001);αMSH在受区与原供区周围正常对照皮肤中的表达差异无显著性意义。结论αMSH在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用。     

刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中酪氨酸酶的活性影响

目的检测刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中酪氨酸酶的活性影响,进一步认识自体移植皮片过度色素沉着的原因.方法建立过度色素沉着的自体移植皮片的动物模型;利用免疫组织化学方法分别检测刺鼠信号蛋白作用前后自体移植皮片中酪氨酸酶的表达,并与对照治疗组及正常皮肤相比较.结果酪氨酸酶的表达定位于表皮基底部黑色素细胞的胞浆,在大部分组织中呈阳性表达,经刺鼠信号蛋白作用后酪氨酸酶在自体移植皮片中的表达明显减少,与在其他各对照组中的表达差异有极显著意义(P＜0.01).结论刺鼠信号蛋白在自体移植皮片中能竞争性拮抗α-MSH的黑色素合成,使皮片着色能力降低,从而证明皮片移植后表皮细胞中α-MSH的表达上调是皮片呈过度色素沉着的重要原因.     

刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中酪氨酸酶的活性影响

目的 检测刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中酪氨酸酶的活性影响,进一步认识自体移植皮片过度色素沉着的原因。方法 建立过度色素沉着的自体移植皮片的动物模型；利用免疫组织化学方法分别检测刺鼠信号蛋白作用前后自体移植皮片中酪氨酸酶的表达,并与对照治疗组及正常皮肤相比较。结果 酪氨酸酶的表达定位于表皮基底部黑色素细胞的胞浆,在大部分组织中呈阳性表达,经刺鼠信号蛋白作用后酪氨酸酶在自体移植皮片中的表达明显减少,与在其他各对照组中的表达差异有极显著意义（P＜0.01）。结论 刺鼠信号蛋白在自体移植皮片中能竞争性拮抗α-MSH的黑色素合成,使皮片着色能力降低,从而证明皮片移植后表皮细胞中α-MSH的表达上调是皮片呈过度色素沉着的重要原因。     

钙调蛋白在自体中厚移植皮片中的表达

目的 检测钙调蛋白在人自体中厚移植皮片中的表达,初步认识钙信号转导途径在自体移植皮片过度色素沉着发生机制中的作用.方法 利用免疫组织化学方法,检测钙调蛋白在受区移植皮片、受区周围与供区周围正常皮肤中的表达并进行统计学分析.结果 钙调蛋白的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角质形成细胞的胞浆中;在自体移植中厚皮片组中,其表达的平均光密度值为0.49±0.08,显著高于受区周围正常皮肤对照组的平均光密度值0.23±0.08和原供区周围正常皮肤组的平均光密度值0.17±0.06,并与自体正常皮肤对照组中的表达差异有显著的统计学意义(P <0.01);钙调蛋白在受区和供区周围正常皮肤对照组中的表达差异无统计学意义(P >0.05).结论 钙调蛋白在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤组中显著提高,推测钙信号转导途径在自体移植皮片色素过度沉着中起着重要的调控作用.     

黑皮素-1受体在瘢痕疙瘩中的表达及基因沉默黑皮素-1受体对成纤维细胞增殖的影响

目的检测黑皮素-1受体(MC-1R)在瘢痕疙瘩中的表达,同时研究基因沉默黑皮素-1受体对成纤维细胞增殖的影响。方法用MTT法比较α-MSH对正常皮肤成纤维细胞(hDF)和瘢痕疙瘩成纤维细胞(hKF)增殖能力的影响;用qPCR法检测正常皮肤及瘢痕疙瘩组织中MC-1R的表达水平;用MTT法检测RNA干扰MC-1R基因后对α-MSH抑制hDF增殖能力的影响。结果α-MSH可抑制hDF的增殖,而未对hKF的增殖产生明显影响;与正常皮肤组织相比,瘢痕疙瘩组织中MC-1R的mRNA表达水平明显下降,而α-MSH的表达增加;最后,将hDF转染MC-1R siRNA后,α-MSH对其增殖能力的抑制程度显著降低。结论瘢痕疙瘩中MC-1R表达降低,导致α-MSH抑制hKF增殖的功能无法实现,促进了瘢痕疙瘩的形成。     

血管瘤组织中TRAIL蛋白及其mRNA的表达和意义

目的检测血管瘤组织中TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)蛋白及其mRNA的表达,并探讨其意义。方法采用免疫组织化学和原位杂交方法检测血管瘤增殖期、退化期、血管畸形和正常皮肤组织中TRAIL蛋白和mRNA的表达。结果TRAIL蛋白和mRNA在血管瘤增殖期和退化期中的阳性表达率分别为45.45%(15/33)和78.57%(22/28),66.67%(22/33)和89.29%(25/28),血管畸形和正常皮肤组织中均为阴性。秩和检验分别为Hc=54.03,Hc=71.82,四者之间差异均有统计学意义(P<0.01),两两之间比较,增殖期与退化期之间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论TRAIL可能通过诱导内皮细胞凋亡,促进血管瘤的消退。     

人增生性瘢痕组织内下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴成分的表达

目的 探讨增生性瘢痕组织中下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴成分的表达及意义.方法 应用实时荧光定量PCR法,检测人增生性瘢痕(12例)和正常皮肤(7例)组织中HPA轴的活性物质促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRH-R1)、阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)、黑素皮质素受体2(MC-2R)以及糖皮质激素受体α(GR-α)的mRNA表达差异,免疫组织化学法观察CRH、CRH-R1、促肾上腺皮质激素(ACTH)、MC-2R以及GR-α的分布差异.对数据进行独立样本t检验. 结果 PCR结果显示,增生性瘢痕组织标本中CRH、CRH-R1、POMC及GR-α的mRNA表达分别为3.1±0.8、0.05±0.03、0.020±0.007、0.0000±0.0010,均低于正常皮肤组织的20.6±4.7、0.30±0.12、0.060±0.020、0.0200±0.0070,差异有统计学意义(t值为2.10-4.75,P值均小于0.05);但2种组织中MC-2R mRNA表达水平接近(t=1.48,P=0.15).免疫组织化学法检测结果显示,CRH,CRH-R1、ACTH、MC-2R以及GR-α分布于瘢痕组织的表皮基底层、真皮层的Fb和汗腺管壁中.在正常皮肤组织中阳性细胞除分布于上述部位外,还可见于毛囊和皮脂腺. 结论 增生性瘢痕形成与组织中HPA轴的活性物质表达降低有关.     

瘢痕疙瘩中Smads表达的研究

目的 探讨不同类型Smads在瘢痕疙瘩、正常瘢痕和正常皮肤中的差异表达及其意义.方法 采用RT-PCR和Western Blot法分别对10例瘢痕疙瘩、10例正常瘢痕及10例正常皮肤组织,以及体外培养瘢痕疙瘩、正常瘢痕及正常皮肤成纤维细胞中的Smads mRNA及蛋白的表达水平进行检测.用t检验比较其表达差异,P<0.05为差异具有统计学意义.结果 在瘢痕疙瘩组织及瘢痕疙瘩成纤维细胞中,Smad7的mRNA及蛋白水平表达明显低于正常瘢痕(P<0.05)和正常皮肤(P<0.05),而Smad2、3的mRNA及蛋白水平表达以及磷酸化的Smad2、3的蛋白水平表达并无明显改变(P>0.05).结论 在瘢痕疙瘩中,存在有Smad7的表达缺陷,这可能是增高的转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号传导不能被自身负反馈循环终止的重要原因.