利用细茎石斛种子胚繁育试管苗的不同培养基研究△

目的:建立细茎石斛Dendrobium moniliforme(L.)Sw.种子胚的组织培养和快速繁殖方法.方法:在相同的培养条件下,种子胚接种于8种不同培养基上,选择长势相近的试管苗转接于添加不同浓度激素的1/2 MS培养基上,对不同生长状况的试验结果进行统计和分析.结果:比较适合诱导细茎石斛种子萌发的培养基是1/2 MS+1.0 mg·L-1 NAA,生根的培养基是1/2 MS+1.0 mg·L-1 NAA,壮苗的培养基1/2 MS+1.2 mg·L-1 IBA.结论:适合的培养基对细茎石斛种子胚的生长发育结果有很大差异.     

石斛的试管苗快速繁殖

本文报道了几种石斛的种胚和茎尖的离体培养及快速繁殖。胚培养的最适培养基为改良N_6 NAA0.2mg/L,茎尖培养的最适培养基为MS NAA0.2mg/L 6-BA0.5mg/L,生根壮苗培养基以改良N_6 10％香蕉汁较佳,蔗糖最佳浓度为2％。在商品苗生产中,用蛋白陈及食用精配制培养基可降低成本。     

细茎石斛的生药学研究

目的：对中药石斛中的细茎石斛进行生药学研究。方法：采用性状、组织横切面及粉末显微鉴别方法。结果与结论：细茎石斛茎和气生根的横切面、维管束鞘纤维、硅质块、草酸钙针晶束等可作为鉴定依据，为中药石斛中的细茎石斛的质量标准的制订和开发利用提供科学依据。     

细茎石斛的生药学研究

目的:对中药石斛中的细茎石斛进行生药学研究.方法:采用性状、组织横切面及粉末显微鉴别方法.结果与结论:细茎石斛茎和气生根的横切面、维管束鞘纤维、硅质块、草酸钙针晶束等可作为鉴定依据,为中药石斛中的细茎石斛的质量标准的制订和开发利用提供科学依据.     

细茎石斛不同部位有效成分及分布规律研究

目的 :探索多糖、生物碱、微量元素等有效成分在细茎石斛不同部位中的含量分布情况以及加工处理工艺对石斛质量的影响。方法 :分析细茎石斛茎的上、中、下部及根部中的多糖、生物碱、必需微量元素含量。应用硫酸 苯酚法测定多糖 ;氯仿 溴甲酚绿法测定总生物碱 ;ICP等离子体发射光谱法测定微量元素。结果 :细茎石斛含有较高的多糖、总生物碱和钾、钙、镁、铁、锰、锶、钛、铜等微量元素 ,不同部位含量存在较为显著差异 ;干燥工艺对细茎石斛多糖含量及不同部位的多糖、生物碱分布有较大影响。结论 :细茎石斛含有较高的多糖、生物碱、微量元素等活性物质 ;石斛干燥加工以高温杀青后 60℃烘干为宜。     

曲茎石斛组织培养研究

目的:提供药用石斛可脱瓶移栽的粗壮试管苗,以提高移栽的成活率。方法:采用种子苗与茎段外植体苗不同培养基的双向培养,并对二者的生长特点进行比较。结果:外植体苗繁殖快,粗壮,但需原植株量大,种子苗生长周期长,细弱,但培养基数高。结论:二者结合培养对快速繁殖,提高成活率有利。     

激素对曲茎石斛试管苗生长的影响

曲茎石斛(Dendrobium flexicaule Z.H.Tsi,S.C.Sun et Z.G.Xu)是中药西枫斗的原植物之一。因其生长在悬崖峭壁上,采挖十分困难,采收时连根拔起,使自然资源日益减少。为解决种源供人工栽培,近年来,我们对其进行了无性快速繁殖、培养出了大量试管苗。但大多数苗及根细小,成活困难,为解决这一问题,我们进行了选择不同激素对曲茎石斛试管生长的影响试验。现将结果报告如下。     

细茎石斛多糖DMP2a-1的结构分析

 目的研究从细茎石斛[Dendrobium moniliforme(L)Sw]中分离纯化得到的一种相对分子质量为60×10³的多糖DMP2a1的化学结构。方法应用紫外、红外、高碘酸氧化、甲基化分析、质谱及¹H,¹³CNMR等化学和光谱方法研究该多糖的结构特征。结果多糖DMP2a-1主链由1,4连接的α-D-吡喃葡萄糖基组成,β-D-甘露糖以端基糖的形式位于1,4α-D-吡喃葡萄糖基的O6位上,每6个1,4连接的葡萄糖残基上有1个O6位发生了取代。结论细茎石斛多糖DMP2a-1是一新结构多糖,为首次从该植物中分离得到。     

细茎石斛多糖的提取分离纯化和性能分析

 目的提取分离细茎石斛水溶性多糖，并研究其结构性质。方法经提取、离心、沉淀、脱蛋白后的粗多糖，进一步用DEAE-纤维素，Sephacryl S-400HR,Sephacryl S-200HR凝胶渗透柱色谱分离纯化，对分离到的主要多糖应用高碘酸氧化、高效凝胶渗透色谱(HPGPC),TLC,GC,GC-MS，IR等方法进行组成结构分析。结果从细茎石斛水溶性多糖提取物中分离到8种均一多糖，DMP1a-1,DMP1a-2,DMP2a-1,DMP3a-1,DMP4a-1,DMP5a-1,DMP6a-1和DMP7a 1,其中DMP1a-1的相对分子质量(Mr)为28 000，葡萄糖、甘露糖组成摩尔比为1：4.798，分子中1→3、1→4(或1→2)、1→6连接的糖苷键数比为8.75∶23.59∶1，红外光谱数据显示为β-D-吡喃甘露聚糖。结论8种均一多糖首次从细茎石斛中分离得到，其中DMP1a-1为β-D-吡喃型葡萄甘露聚糖。     

铁皮石斛试管种苗产业化生产的技术因素分析

目的:研究铁皮石斛组织培养及栽培过程中的重要技术因素。方法:用铁皮石斛的茎段及种胚组织培养物,测定试管苗的分化、生根与生长状况。结果:通过胚培养了原球茎产生,通过茎段培养获得了丛生芽;在适当激素配比的基础上,椰子汁对促进芽的分化、丛芽及原球茎的增殖,香蕉提取物对促进苗的生根与生长起到重要的作用。结论:掌握铁石皮斛组织培养的关键技术要素可实现种苗产业化生产。     

铁皮石斛无性系繁育培养基专用性的研究

以浙江雁荡山×云南广南种质的杂交组合茎段为外植体,筛选出1/2MS +IBA1.0 mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1腋芽诱导培养基与1/2MS+IBA1.5 mg·L-1+6-BA0.5 mg·L-1芽增殖培养基,在浙江、云南、广西、湖南等159个铁皮石斛野生与人工种质中应用,腋芽诱导率达94.3％,具有较好的通用性;芽增殖培养时,不同种质分化出单芽、丛芽、原球茎3种增殖途径,增殖效果存在显著差异.研究结果表明,不同种质铁皮石斛的增殖对培养基有专用性需求,开发铁皮石斛无性系繁育专用培养基具有紧迫性和重要的应用价值.     

铁皮石斛试管苗壮苗培养基的研究

目的:研究铁皮石斛试管苗生产中,壮苗阶段的适宜培养基。方法:对基本培养基、天然提取物、香蕉提取物浓度和激素种类的选择进行了研究。结果:基本培养基以B₅或1/2MS为好;天然提取物应选用香蕉水提物,香蕉水提物浓度为10%;植物激素是2mg/L的NAA较好。结论:以上培养基组成是铁皮石斛试管苗壮苗的适宜培养基。     

细茎石斛多糖DMP4a-1的结构特性及免疫活性研究

 目的研究从细茎石斛中分离纯化得到的酸性多糖DMP4a-1的结构性质,初步鉴定其免疫调节活性。方法 应用高效 凝胶渗透色谱(HPGPC),TLC,GC,GC．MS,IR,高碘酸氧化等方法进行组成结构分析,采用双抗夹心ELISA法检测巨噬细胞TNF-α 分泌水平、用CCK-8试剂进行脾淋巴细胞增殖实验。结果 细茎石斛水溶性酸性多糖DMP4a-1平均相对分子质量为3 049,主 要由葡萄糖,甘露糖,鼠李糖,阿拉伯糖和半乳糖组成,其分子摩尔数之比为2．873:2．850:1．762:1．279:l,糖链结构中存在1→ 4,1→3及1→6糖苷键,且摩尔数比为1．194:2．430:1。体外实验证明,DMP4a-1可明显刺激巨噬细胞分泌TNF-α,促进脾淋巴细 胞增殖。结论细茎石斛多糖DMP4a-1是一种β-D-吡喃杂多糖,在结构上与抗肿瘤多糖类似,富含1→3糖苷键,具有免疫增 强功能。     

曲茎石斛快速繁殖研究

石斛是常用名贵中药材,为挽救物种,扩大药源,多家研究单位对品质较高的石斛品种进行增殖和快速繁殖研究,但往往处在实验室组织培养或原植株放养增殖阶段,未能将二者有机地结合起来实现产地的大规模快速增殖。为此,我们选用曲茎石斛为原料,进行组织培养与产地放养一体化的实验研究,放养成活率达到95 .5 %～97.0 %。1　材料与方法1.1　实验材料河南伏牛山产曲茎石斛Dendrobium flexicaule的野生植株与果实[1] ,其中植株为春、秋两....     

铁皮石斛试管苗栽培技术研究

目的:提高铁皮石斛试管苗移栽成活率,以实现产业化生产。方法:采用不同基质、不同来源种苗及在不同海拔高度栽培试验。结果:原球茎增殖超过4代或者茎段增殖超过6代的试管生根苗的移栽成活率显著下降;海拔高度对移栽成活率没有显著影响,但生长质量及石斛多糖含量有明显的差异;移栽的基质以松树皮与碎石、花生壳与碎石综合效果较好,移栽成活率达到95%以上。结论:种苗质量及适当的栽培基质是实现铁皮石斛组培苗产业化生产的根本保证,采用“平地育苗,高山栽培”是保证铁皮石斛药材质量的有效方式。     

铁皮石斛带节茎段的组培快繁体系研究

目的：建立铁皮石斛带节茎段为外值体的快速繁殖体系,保护和合理利用铁皮石斛资源.方法：以铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的带节茎段作外植体,比较不同培养基、激素等因素对铁皮石斛诱导、增殖及生根的影响.结果：最适茎段诱导腋芽的培养基为1/2MS＋ 2.0mg L-1 6-BA＋ 0.2mgL-1 NAA,腋芽诱导率可达93.3％;最适丛生芽增殖的培养基为1/2MS＋ 1.5mgL-1 6-BA ＋0.5mgL-1 NAA,平均增殖系数达到5.46;最适的生根培养基是1/2MS＋0.5mgL-1 IBA ＋0.5mgL-1 NAA＋ 0.2％ AC,组培苗生根多,生根率达到72％.以上各种培养基琼脂粉浓度均为0.8％,蔗糖浓度均为2％,pH5.6 ～5.8.同时研究发现,组培苗的移栽基质以细木屑为优,具有疏松透气、排水良好等优点,成活率可达88％.结论：利用带节茎段能够实现铁皮石斛快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.     

环草石斛试管苗生长节律及分级标准研究

目的 对不同生长时期的环草石斛试管苗进行生长动态及分级标准的研究,为试管苗各生长发育时期合理调控技术措施的确定提供科学依据.方法 采用常规方法,测定不同生长时期试管苗的生长指标、多糖及蛋白质的量,确定试管苗出瓶时间及分级标准.结果 播种生长12个月的时间内,5～8个月是环草石斛试管苗苗高和茎粗增长最快的时期;7～8个月时的试管苗生物量积累速率最高.环草石斛试管苗根与茎叶之比(R/T)相对较小,比值小于1.生长8个月时的试管苗多糖的量和可溶性蛋白质的量较高,7～8个月时的试管苗生长代谢旺盛.从干物质积累动态、多糖及蛋白质的量变化、试管苗活力和生产成本等方面综合考虑,环草石斛生长8～10个月的试管苗出瓶移栽较为合适.试管苗出瓶后分级再利用能够切实保证移栽成活率.以苗高、茎粗和根数作为分级指标,环草石斛试管苗可以分为3个等级.结论 环草石斛的种子质量对试管苗的生长影响较大,生长8～10个月的环草石斛试管苗出瓶移栽较为合适,以苗高、茎粗和根数作为分级指标,试管苗可以分为3个等级加以利用.     

金钗石斛的茎段组织培养与植株再生

目的：为了有效加速贵重药用植物金钗石斛的人工繁殖。方法：以带侧芽的金钗石斛茎段作外殖体；不同种类的培养基、同种培养基用于不同配比的激素进行培养，结果：以MS培养基附加6－BA（0.5mg/L）、NAA（0.2mg/L）诱导分化最佳，附加6－BA（3．0mg/L）、NAA（0．5mg/L），增殖最适，附加IBA（0．3mg/L）、NAA（0．1mg/L）对生根最适（生根率95％）。生根小苗在以椰渣，碎火山石块，碎砖块（1：1：1）的基质中覆以蕨长势良好，结论：为确保金钗石斛资源的保持和可持续利用提供有效途径。     

金钗石斛试管苗繁育技术操作规程(草案)

1范围本部分规定了金钗石斛试管苗的繁育、炼苗环境、适宜条件及出瓶苗、出圃苗的质量分级。本标准适用于云南省西双版纳州金钗石斛种植单位及种植户。2规范性引用标准下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。本标准操作实施时,所参照的标准均有效。在参照时作修     

金钗石斛试管苗炼苗技术研究

模拟金钗石斛野生生长环境,设置不同基质、不同季节及试管苗的大小等对成活率和生长影响实验。结果表明:树皮块 碎树皮屑的基质组合,炼苗成活率最高,且长势好;在西双版纳地区,最佳炼苗季节为春季和仲秋至冬初;在最佳炼苗时期,苗的大小对成活率影响不大。