成年猴中枢神经系统TGF-β1的分布及免疫组化研究(摘要)

目的:探讨TGF-β1在成年灵长类动物恒河猴中枢神经系统分布的区域及形态学证据.方法:成年雄性恒河猴(体重5kg)一只,氯胺酮1 5mg/kg复合安定1 5mg/kg肌肉注射麻醉后,开胸主动脉插管,灌注生理盐水及Zamboni液各2 0 0 0mL固定,取脑与脊髓后固定2 4h.将组织分为额叶、顶叶、枕叶、颞叶海马、间脑、中脑、脑桥、小脑、延髓、颈髓8、胸髓1 1、腰髓3共1 2部分,分别置于含3 0 %蔗糖0 1mol/L的PBS内( 4℃)直至组织块沉底.作2 0 μm连续恒温冰冻切片,隔1 0张取一张.用SP法进行免疫组织化学染色,对照试验用0 0 1mol/LPBS代替一抗,余步骤不变.…     

成年猴中枢神经系统TGF-β1的分布——免疫组化研究（摘要）

目的：探讨TGF-β1在成年灵长类动物恒河猴中枢神经系统分布的区域及形态学证据。方法：成年雄性恒河猴（体重5kg）1只，氯胺酮15mg／kg复合安定1．5mg／kg肌肉注射麻醉后，开胸主动脉插管，灌注生理盐水及Zam-boni液各200mL固定，取脑与脊髓后固定24h，将组织分为额叶、顶叶、枕叶、颞叶海马、间脑、中脑、脑桥、小脑、延髓8、胸髓11、腰髓3共12部分，     

成年猴中枢神经系统TGF-β1的分布--免疫组化研究(摘要)

目的:探讨TGF-β1在成年灵长类动物恒河猴中枢神经系统分布的区域及形态学证据.方法:成年雄性恒河猴(体重5 kg)1只,氯胺酮15 mg/kg复合安定1.5 mg/kg肌肉注射麻醉后,开胸主动脉插管,灌注生理盐水及Zam-boni液各200mL固定,取脑与脊髓后固定24h.     

表皮生长因子免疫阳性神经元在成年猴中枢神经系统的分布

目的 :探讨表皮生长因子 (EGF)在成年猴中枢神经系统的分布规律及功能 .方法 :健康成年雄性恒河猴 (体重 5kg) 1只 ,肌肉注射麻醉后开胸 ,Zamboni液 (4 %多聚甲醛 - 15 %苦味酸 -PBS ,pH 7 2～ 7 4 )心脏灌注固定后 ,取脊髓及脑组织各部位入Zamboni液后固定 ,再放入 30 %蔗糖溶液至组织块沉底 ,2 0 μm厚连续冰冻切片每10张取 1张 ,漂洗后经 3%H2 O2 处理 30min以封闭内源性过氧化物酶活性 ,0 3%TritonX - 10 0 /0 1%封闭用羊血清 (0 0 1MPBS配 )室温封闭 1h后 ,与一抗EGF特异性抗体 (工作浓度为 1∶10 0 )置 4℃冰箱孵育 2 4h ,…     

人体的最高司令部——脑

中枢神经系统是人体的最高司令部。它由大脑、小脑、间脑、中脑、桥脑和延脊六部分组成。其中大脑是司令部的领导者,统帅着整个中枢神经系统和周围神经系统.延脊,桥脑、中脑合在一起,叫做脑干,脑干是脊髓和大脑、小脑之间的桥梁.它上     

第十二讲 神经系统(二)

第二节脑和脑神经脑位于颅腔内、分为大脑、间脑、小脑、中脑、脑桥和延髓。通常将延髓、脑桥和中脑又称为脑干。和脑相连的周围神经叫脑神经。顺序排列共十二对一、脑 (一) 脑干 1.脑干的位置与外形:脑干大部位于枕骨的斜坡上,上接间脑、下续脊髓。从下而上依次为延髓、脑桥、中脑。脑干的背侧为小脑,小脑与脑于之间有小空腔为第四脑室。     

夏天无总碱提取物对痴呆大鼠脑内5-HT和DA含量的影响

目的　观察夏天无总碱提取物对痴呆大鼠脑内 5羟色胺 (5 HT)和多巴胺 (DA)递质含量的影响。方法　采用D 半乳糖腹腔连续注射 6周 ,制备大鼠痴呆模型。Y电迷宫法测试对大鼠的学习、记忆能力 ,采用荧光分光光度计测定大鼠脑内 5 HT ,DA的含量。结果　夏天无总碱提取物用量为 0 .5mg/kg ,1.0mg/kg时可显著改善模型大鼠的学习记忆能力 (P <0 .0 1) ,显著增加痴呆大鼠脑内 5 HT含量 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,夏天无总碱提取物用量为 0 .5mg/kg ,1.0mg/kg ,0 .2 5mg/kg时均可显著增加痴呆大鼠脑内DA含量 (P <0 .0 1;P <0 .0 5 )。 结论　夏天无总碱提取物提高痴呆大鼠学习记忆功能的作用 ,可能与增加脑内神经递质 5 HT和DA有关。     

神经病理性疼痛的脊髓上中枢神经机制

神经病理性疼痛的机制尚未阐明,传统观点认为CNS内调节疼痛信号传导的主要是脊髓背角和脑干,间脑和大脑皮层被认为是与疼痛体验(辨别、情感和情绪)或与疼痛相关运动有关.最近脑成像技术(如功能性磁共振成像fMRI)和新的示踪技术发展使得对脊髓以上中枢神经系统在疼痛控制中的作用有了新的认识.本文拟对脊髓上中枢神经系统在神经病理性疼痛动物模型中的研究进展作一综述.     

用辣根过氧化物酶(HRP)逆行输送法对猫腰以下脊髓小脑束神经元入小脑径路的研究

将9只小猫作一侧胸髓腹外侧索离断后按下列三组进行手术:A.切断对侧绳状体并在小脑后叶注射 HRP;B.切断对侧结合臂并作小脑后叶注射;C.切断对侧绳状体加小脑前叶注射。存活3—4天后分别观察上述实验动物在 L_3以下脊髓中的逆行酶标细胞,以此分析这些神经元向小脑投射的不同途径。实验结果表明:(1)Clarke 氏柱(见于 L_3—L_4)发出纤维行于脊髓同侧经绳状体进入小脑后叶;(2)后角Ⅳ—Ⅵ层脊髓小脑束神经元(L_3—L_5)的轴突行径与 CIarke 氏柱的相同;(3)背外侧核(L_3—L_5)发出轴突在脊髓越边经结合臂止于小脑前、后叶;(4)腹外侧核(L_4—L_5)的纤维行同背外侧核但只止于前叶;(5)灰质Ⅶ层外侧部脊髓小脑束神经元(L_3—L_4)的轴突行径同腹外侧核;(6)灰质Ⅶ层内侧部脊髓小脑束神经元(L_6—Cal)的投射在脊髓内交叉,可行经绳状体和结合臂达小脑前、后叶;(7)灰质Ⅷ层内侧部脊髓小脑采神经元(L_3—L_6)发出纤维不越边,经结合臂达小脑前叶;(8)腹内侧核(S_1—Cal)发出越边纤维但经绳状体进入小脑前、后叶。对结果的讨论表明,在猫腰以下脊髓中除有数群发出脊髓小脑前束的神经元外,还有应属于脊髓小脑后束的神经元。     

异氟醚诱导大鼠中枢神经系统c-fos基因的表达

目的 :观察异氟醚麻醉后大鼠中枢神经系统c-fos基因的表达 ,了解异氟醚在中枢神经系统的作用部位 ,探讨吸入全麻机理 .方法 :SD大鼠 4 0只 ,雌雄不拘 ,体重 (178 6± 18 0 )g ,日龄 (80± 15 )d ,随机分为对照组、 0 6 %异氟醚组 ,1 2 %异氟醚组和 1 8%异氟醚组 ,每组 10只 .实验组分别吸入 0 6 % ,1 2 %和 1 8%的异氟醚 1h ,对照组除不吸入异氟醚外 ,其余条件完全同实验组 .停止吸入后 ,每只动物腹腔注射 3%戊巴比妥钠 (4 0mg/kg)麻醉后开胸 ,经升主动脉灌注生理盐水 10 0mL洗去全身血液 ,继之灌注多聚甲醛液 (0 1mmol/L ,pH 7 4 ,含 4 %的多聚甲醛 ) 2 5 0mL ,固定 90min .取全脑石蜡包埋 ,切片 (片厚 5 μm) ,应用c-fos基因免疫组织化学方法 ,低倍显微镜 (× 10 )下观察染色阳性细胞的分布情况 ,高倍镜 (× 2 0 )下观察鉴别Fos染色免疫阳性细胞并作阳性细胞记数 .结果 :对照组中未发现Fos阳性细胞 ,实验组大鼠的皮质、丘脑、中脑、桥脑、延髓、小脑可观察到Fos蛋白阳性神经元 ,与对照组相比P <0 0 5和P <0 0 1,这些神经元的分布局限于某些区域 ;同时发现Fos蛋白阳性神经元随吸入异氟醚浓度的增加而增多 ,实验组间相比P <0 0 5和P <0 0 1.结论 :异氟醚能诱导大鼠皮质、丘脑、中脑、桥脑、延髓     

低剂量γ射线对胎鼠中枢神经系的影响

大鼠受孕后的第13 d;分别用25 R、50 R、100 R的~(60)Co-γ射线(19.6R/min)进行一次全身照射。受孕20 d的大鼠脱臼断髓处死,即刻取出胎鼠固定,探讨上述剂量照射对胎鼠中枢神经系(脑和脊髓)发育的影响。以正常受孕20 d的胎脑(带脊髓)作对照。光镜观察结果表明;从总体看照射组与对照组中枢神经系各部基本处于同一发育阶段,脊髓、脑干、间脑、小脑、端脑的灰白质配布及皮质分层、各脑部的一些主要结     

褪黑素对戊四氮致痫大鼠海马Bax和Bcl-2的影响

目的:探讨褪黑素对癫痫发作中Bax和Bcl-2的影响。方法:将24只成年Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组、戊四氮(PTZ)组和褪黑素(MT)组;PTZ组和MT组腹腔注射PTZ(60 mg/kg),诱导癫痫发作。MT组按体重10 mg/kg于注射PTZ之前20min、注射0,1,2 h分别经腹腔注射MT并观察1 h。然后处死大鼠取脑,应用SP法检测海马神经元Bax和Bcl-2的表达。结果:大鼠海马神经元Bax的表达:MT组明显低于PTZ组,但高于NC组;大鼠海马神经元Bcl-2的表达:MT组明显高于PTZ组,也高于NC组。结论:MT可以通过增强海马神经元Bcl-2的表达和降低Bax的表达而对抗癫痫中细胞的凋亡。     

窖蛋白-1在脑与脊髓中的分布

目的 探讨窖蛋白-1在脑与脊髓中的分布.方法 用免疫组化ABC法及Western blot法研究窖蛋白-1在成年SD大鼠脑与脊髓中的分布与定位.结果 窖蛋白-1广泛分布在成年SD大鼠的大脑皮质、小脑、脊髓和海马;主要表达于微血管壁,在胶质细胞中也多有散在的阳性细胞分布.结论 窖蛋白-1在脑与脊髓中较为广泛的分布提示窖蛋白-1在脑与脊髓的功能活动中可能起重要作用.     

甲基莲心碱对有机磷酸酯抑制的小鼠脑胆碱酯酶的重活化作用

目的　研究甲基莲心碱 (Nef)对有机磷酸酯中毒小鼠脑胆碱酯酶 (Ch E)的重活化效应。方法　采用微量二巯基双硝基苯甲酸 (DTNB)法测定敌敌畏 (DDVP)体内、体外抑制小鼠脑 Ch E活力 ,观察 0 .0 0 1～ 0 .0 3mg/LDDVP在体外对小鼠脑 Ch E活力的抑制作用 ,比较 Nef和氯磷定体内、体外给药对 DDVP中毒小鼠脑 Ch E的重活化效应。结果　不同浓度的 DDVP显著地抑制试管内小鼠脑 Ch E活力 ,呈现明确的量效关系 ,IC50 为 0 .0 0 3m g/L。 Nef (2 .4 ,4 .8m g/L )与氯磷定 (5 ,12 .5 mg/L )对 0 .0 2 m g/L DDVP体外抑制的小鼠脑 Ch E重活化效应随着浓度增高而加大。对 sc DDVP(10 mg/kg)的小鼠分别 ip Nef或氯磷定 ,其脑 Ch E活率分别为 (4 1.6± 10 .9) %、(5 6 .5± 12 .4 ) % (Nef 15 ,30 mg/kg)和 (2 4 .1± 17.4 ) %、(2 8.4± 11.9) % (氯磷定 2 5 ,5 0 m g/kg) ,两者相比差异显著 (P<0 .0 1)。结论　 Nef比氯磷定有更为显著的重活化 Ch E的作用 ,这与 Nef能进入中枢复活脑中毒酶有关。     

经腹腔暴露2，5-己二酮致大鼠脊髓组织细胞凋亡的研究

目的：观察经腹腔暴露2,5-己二酮（2,5-HD）大鼠脊髓组织细胞凋亡及相关调控蛋白的表达,探讨其致毒机制。方法将40只SD大鼠按体重随机分为4组,每组10只。将2,5-HD溶于0．9％生理盐水,经腹腔注射染毒。低剂量组,中剂量组和高剂量组染毒剂量分别为100 mg/kg,200 mg/kg和400 mg/kg,注射量为0．3 mL/100 g,对照组以相同剂量的生理盐水腹腔注射,每天1次,每周5 d,共染毒5周。染毒过程中,每周对大鼠进行神经行为学评价。通过TUNEL-Hoechst 双染技术观察脊髓组织细胞凋亡;Western Blot检测脊髓组织凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达。结果神经行为学观察显示,在染毒第5周,100 mg/kg,200 mg/kg和400 mg/kg 2,5-HD染毒组大鼠的步态评分值分别为1．80,2．80和3．94,明显高于对照组（P＜0．01）。 TUNEL-Hoechst 双染结果显示,在染毒组大鼠脊髓切片可见绿色阳性细胞,其凋亡指数（AI）高于对照组（P＜0．01）,且随着染毒剂量增高而增加。Western Blot 检测结果显示,2,5-HD染毒大鼠脊髓组织Bax蛋白表达明显高于对照组（P＜0．01）,而Bcl-2蛋白表达明显低于对照组（ P＜0．01）。结论经腹腔暴露2,5-HD可诱导大鼠脊髓组织细胞凋亡,其机制与上调Bax蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达有关。     

二氢石蒜碱对大鼠高碳酸性脑缺氧损伤的保护作用

目的 :探讨二氢石蒜碱 (DL)对大鼠高碳酸性脑缺氧损伤的影响。方法 :将在体高碳酸性缺氧模型大鼠分为生理盐水组、尼莫地平组、DL 2 0mg/kg组和DL 40mg/kg组 ,记录并比较 4组动物停止、恢复人工呼吸后脑电图(EEG)出现、消失的时间及幅度。结果 :停止人工呼吸 2min后复氧 1 0min时EEG恢复幅度分别为 (32 .1 5± 33 .68) %、(75 .40± 1 7.1 2 ) %、(62 .50± 1 5 .81 ) %、(80 .0 0± 1 2 .2 6) % ,尼莫地平组、DL 2 0mg/kg组、DL 40mg/kg组与生理盐水组均有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,但尼莫地平组、DL 2 0mg/kg组、DL 40mg/kg组之间无显著性差异 (P >0 .0 5)。结论 :DL对高碳酸性脑缺氧损伤有保护作用     

脊髓损伤大鼠细胞凋亡、自噬程度的评估及阿魏酸的干预作用研究

目的:研究脊髓损伤大鼠细胞凋亡、自噬程度的评估及阿魏酸的干预作用。方法:选择成年雄性SD大鼠并分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组)、阿魏酸干预组(FA组),通过动脉夹夹持的方法建立脊髓损伤模型,给予100mg/kg的阿魏酸灌胃、2次/日干预。干预后7、14d时,测定脊髓组织中凋亡分子、凋亡抑制分子、细胞自噬分子的表达量。结果:SCI组大鼠脊髓组织中PARP-1、AIF、ASK-1、mTOR、PI3K、Akt、Beclin1、LC3-Ⅱ的蛋白表达量显著高于Sham组,Survivin、NAIP、Bcl-2的蛋白表达量显著低于Sham组;FA组大鼠脊髓组织中PARP-1、AIF、ASK-1、mTOR、PI3K、Akt、Beclin1、LC3-Ⅱ的蛋白表达量显著低于SCI组,Survivin、NAIP、Bcl-2的蛋白表达量显著高于SCI组。结论:阿魏酸对脊髓损伤过程中的细胞凋亡、自噬具有抑制作用。     

氯胺酮诱导的热休克蛋白70在不同鼠龄大鼠海马中的表达

目的　探讨氯胺酮导致神经损害的可能机制。方法　 35只成年大鼠分别给予生理盐水和氯胺酮2 0 .0、4 0 .0、6 0 .0、80 .0、1 0 0 .0、1 2 0 .0 mg/ kg腹腔内注射 ;另取 0～ 1 0 ,1 1～ 2 0 ,2 1～ 30 ,31～ 4 5 ,4 6～ 6 0 ,6 1～ 90 ,91～1 2 0 d各年龄段大鼠共 35只 ,分别腹腔内注射氯胺酮 80 .0 mg/ kg。2 4 h后取鼠脑 ,应用免疫组化染色检测大鼠海马中热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达 ,并用 MIAS- 2 0 0 0图像分析系统分析大鼠海马 HSP70阳性细胞百分率、密度和灰度值。结果　氯胺酮可诱导成年大鼠海马神经细胞表达 HSP70。氯胺酮剂量在 80 .0 m g/ kg以内 ,随剂量的增加 ,HSP70阳性细胞密度、百分率和反应强度均显著增加 (P<0 .0 1 ) ;氯胺酮剂量在 80 .0 m g/ kg以上 ,随剂量的增加 ,HSP70阳性细胞密度、百分率和反应强度显著降低 (P<0 .0 1 )。氯胺酮不能诱导 2 0 d以下的幼鼠神经细胞表达HSP70 ;2 0～ 90 d大鼠 ,随着年龄的增加 ,HSP70表达增强 ;90 d以上的大鼠神经细胞 HSP70的阳性表达无显著性差异。结论　氯胺酮可诱导 HSP70在大鼠海马中表达 ,提示海马的神经元可能受到损害 ;随剂量的增加 ,其损害作用加强 ;氯胺酮对成年大鼠的脑损害作用较幼鼠强     

砷染毒大鼠生精细胞Bcl-2表达的变化

目的观察不同剂量的三氧化二砷（As2O3）对成年大鼠生精细胞Bcl-2表达的影响。方法40只健康雄性SD大鼠随机分成4组，分别为0．375mg/kg、0．75mg/kg、1．5mg/kg 3个染毒组和对照组，灌胃法连续给药16w后对各组大鼠计算睾丸脏器系数、精子头计数，并计算每日精子生成量（DSP）。采用免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2表达的情况。结果①中剂量组（0．75mg/kg）和高剂量组（1．5mg/kg）睾丸精子头计数和DSP均低于对照组（P〈0．05）；②与对照组相比，中、高剂量组大鼠生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低（P〈0．01）；③生精细胞Bcl-2阳性率与每日精子生成量呈正相关（r=0．589,P〈0．01）。结论一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2的表达而导致精子生成量的减少，产生雄性生殖毒性。     

猕猴脑动脉硬化自由基损伤机制

目的 :研究脑动脉硬化与自由基损伤关系。方法 :2 5只健康猕猴 ,其中 6只成年猴、3只老年猴饲以含 1%胆固醇的混合高脂饲料 16mon～ 2 8mon ,13只成年猴和 3只老年猴作对照 ,测定血浆和动脉壁胆固醇、MDA、SOD ,扫描电镜和透射电镜观察大脑中动脉及中央支损害。结果 :模型组脑动脉壁总胆固醇每 5 0mg湿重为 1 10 9±0 0 2 9mg ,MDA每 10 0mg湿重组织 1 918± 0 330mol,SOD每 10 0mg湿重组织 180 715 9u ,明显高于对照组 (总胆固醇0 0 5 5± 0 0 2 7mg ,MDA0 2 88± 0 370nmol,SOD6 14± 6 7 5u)。模型组大脑中动脉内皮水肿 ,表面胞浆突起增多 ,微绒毛消失 ,局部内皮破裂 ,血细胞、血小板粘附。随造型时间延长 ,病损加重。老年猴中央支也呈现出较严重的动脉硬化改变。结论 :高脂血症可导致脂质过氧化 ,自由基损害能加重脑动脉硬化发展