阿米洛利与哇巴因合用对心脏电生理的影响及机制

采用标准微电极技术记录豚鼠乳头状肌和家兔窦房结细胞动作电位;采用膜片钳技术记录电压依赖性的钠、钙电流、内向整流钾电流.研究阿米洛利(Amiloride)与哇巴因(Ouabain)合用对心脏电生理的影响及机制.结果发现在体实验中,静脉给予Amiloride能提高Ouabain致心律失常的阈剂量;离体实验中,如先加入10 μmol/L Amiloride后累积给予Ouabain至100 μgmol/L时,豚鼠乳头状肌和家兔窦房结标本搏动节律仍规则.预先分别加入不同浓度的Amiloride,Ouabain增加钠、钙电流及内向整流钾电流的作用不出现.提示Amiloride能对抗Ouabain的心脏毒性作用.     

七叶皂苷钠对感染性休克所致急性脑损伤大鼠的保护作用

目的 探讨七叶皂苷钠对感染性休克所致急性脑损伤大鼠的保护作用.方法 清洁级Wistar雄性大鼠75只适应性饲养7 d,随机取60只大鼠经尾静脉注射脂多糖(5 mg·kg-1)制备感染性休克模型,其余15只大鼠经尾静脉注射等量生理盐水(假手术组).将造模成功大鼠(56只)随机分为模型组、低剂量七叶皂苷钠组、高剂量七叶皂苷...     

改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离法及膜片钳应用

目的 改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法,为利用膜片钳技术研究膀胱疾病提供必要的技术平台.方法 采用木瓜蛋白酶和胶原酶Ⅱ,采用一步法和二步法,分别消化5只新生和成年Wistar大鼠膀胱组织,在膜片钳工作台上分别对平滑肌细胞钠钙交换体电流行全细胞记录.结果 建立了稳定的新生和成年大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法.新生大鼠钠钙交换体(Na+/Ca2+ exchanger,NCX)电流密度(pA/pF)为[(0.21±0.07),n=4],成年大鼠NCX电流密度为[(0.19±0.06),n=6],差异有统计学意义(P＜0.05).KB-R7943在5μm浓度下,有阻滞NCX正向模式的能力.结论 本方法改良了大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离,并成功应用于膜片钳技术检测.     

阿米洛利与哇巴因合用对心脏电生理的影响及机制

采用标准微电极技术记录豚鼠乳头状肌和家兔窦房结细胞动作电位;采用膜片钳技术记录电压依赖性的钠、钙电流、内向整流钾电流。研究阿米洛利（Amiloride)与哇巴因（Ouabain）合用对心脏电生理的影响及机制。结果发现：在体实验中,静脉给予Amiloride能提高Ouabain致心律失常的阈剂量;离体实验中,如先加入10μmol/LAmiloride后累积给予Ouabain至100μmol／L时,豚鼠乳头状肌和家兔窦房结标本搏动节律仍规则。预先分别加入不同浓度的Amiloride,Ouabain增加钠、钙电流及内向整流钾电流的作用不出现。提示Amiloride能对抗Ouabain的心脏毒性作用。     

硝普钠的痛敏效应及其作用机制分析

本文用血管扩张剂—硝普钠给Wistar大鼠行脊髓蛛网膜下腔(i.t]注射,用辐射热甩尾潜伏期(tail flick latoncy,TFL)作为测痛指标,进而探究硝普钠与疼痛的关系。实验结果表明:硝普钠可使大鼠的辐射热甩尾潜伏期缩短,痛阈下降,具有痛敏效应。     

高血压大鼠肿瘤坏死因子和一氧化氮/一氧化氮合酶系统相关性的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF)和一氧化氮(NO)/一氧化氮合酶(NOS)系统在应激性高血压发病中的作用。方法:以电击大鼠足底结合噪音复合刺激制作慢性应激性高血压大鼠(CSHR)模型,采用特异性放射免疫测定技术和化学比色法,检测CSHR和正常血压Wistar大鼠血清中TNF以及血清、心肌和主动脉血管组织NO及NOS的含量。结果:CSHR的尾动脉收缩压(CASP)明显高于Wistar大鼠(P<0.01)。CSHR的血清TNF明显高于Wistar大鼠(P<0.01),而血清、心肌和主动脉血管组织NO及NOS水平则低于Wistar大鼠(P<0.05)。结论:应激刺激作用下TNF增多和NO/NOS系统功能低下可能是造成慢性应激大鼠血压升高的重要因素。     

低钠对血管紧张素促进大鼠中枢组织中肾上腺素能传递的影响

本文用正常和限制钠大鼠研究了血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)促进刺激所致~3H-去甲肾上腺素(~3H-NE)从中枢两个心血管调节区释放的作用。AngⅡ(10~(-7)M)促进~3H-NE从Sprague-Dawley和Wistar大鼠的孤束核A_2区释放,但不促进从前下丘脑释放。用限钠饲料喂养大鼠,则阻滞AngⅡ促进~3H-NE释放的作用。同时给予Captopril和低钠饲料,可部分恢复AngⅡ的促进作用。慢性静脉输注AngⅡ,与限制钠引起同样的对AngⅡ促进~3H-NE释放作用的阻滞。这些结果表明,低钠饲料能通过与肾素-血管紧张素系统相互作用而改变AngⅡ促进~3H-NE释放的作用。     

钠氢交换蛋白1抑制剂对脓毒症大鼠心脏损伤保护作用的实验研究

目的:观察钠氢交换蛋白1(NHE1)抑制剂对脓毒症大鼠心脏损伤的保护作用,并探讨其可能的机制。方法:常规方法建立大鼠脓毒症模型诱导心脏损伤。将SD大鼠随机分为对照组、脓毒症组和脓毒症治疗组,脓毒症治疗组大鼠注射钠氢交换蛋白1抑制剂卡立泊来德,于伤后12h检测左心室射血分数(LVEF)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和丙二醛(MDA)水平。结果:脓毒症组大鼠心脏损伤高于对照组,表现为LVEF值的降低和LDH、CK、CK-MB值的升高;脓毒症治疗组大鼠较脓毒症组大鼠心脏损伤显著减轻,表现为LVEF值的升高、LDH、CK和CK-MB值的降低。脓毒症组大鼠TNF-α、IL-6、MPO、MDA水平高于对照组,差异有统计学意义;SOD、CAT和GPx水平低于对照组,差异有统计学意义;治疗组大鼠上述指标显著改善。结论:NHE1抑制显著减轻脓毒症诱导的心脏损伤,其部分机制可能是抑制了炎症反应和氧化应激。     

羧甲基纤维素钠在预防术后腹膜粘连中的作用

目的:探讨羧甲基纤维素钠(SCMC)对术后腹膜粘连的预防作用.方法:将30只Wistar大鼠随机分A、B、C组,制作肠粘连模型,取A组为对照组,B、C组在腹腔内损伤部位分别滴入透明质酸钠及SCMC.术后14 d处死动物,观察各组腹膜粘连情况.结果:A组粘连广泛、致密,C组轻微粘连,B组介于二者之间.结论:SCMC减轻术后腹膜粘连程度的作用明显优于透明质酸钠.     

氨氯吡咪抑制血管内皮细胞生长因子mRNA表达对K562细胞凋亡的影响

目的:探讨氨氯吡咪(Amiloride)通过抑制血管内皮细胞生长因子mRNA(VEGF mRNA)表达,观察VEGF mRNA与K562细胞凋亡是否有关。方法:将不同浓度Amiloride与K562细胞共同孵育,采用Annexin VFITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡。同时采用RT-PCR技术观察Amiloride对K562细胞VEGF mRNA表达的影响,免疫组化方法观察Amiloride对K562细胞VEGF蛋白表达的影响。应用MTT法观测Amiloride对K562细胞增殖的影响。结果:不同浓度Amiloride作用K562细胞24h后,K562细胞的增殖受到抑制,VEGF mRNA表达强度的相对系数及VEGF蛋白呈浓度依赖性下降,并且可以观察到随着VEGF mRNA表达强度的相对系数的降低,K562细胞凋亡率增加,二者之间显著负相关(P<0.05)。结论:氨氯吡咪可能通过抑制VEGF mRNA表达促进K562细胞凋亡。     

Cariporide和维拉帕米防止家兔快速心房起搏所致电重构

目的 探讨家兔快速心房起搏所致的心房肌电重构的机制及钠氢离子交换体抑制剂Cariporide和L型钙通道阻断剂维拉帕米的防治效果。方法 36只家兔随机分为3组:快速心房起搏对照组(对照组)、快速心房起搏 Ca-riporide组(Cariporide组)、快速心房起搏 维拉帕米组(维拉帕米组),每组12只。经颈内静脉将电极置入右心房,以600次/min行快速心房起搏,测定基础状态、给药后0.5 h和起搏后0.5、1、2、4、6、8 h的心房有效不应期(AERP200、AERP150和AERP130),取起搏8 h的兔右心耳组织,观察超微结构。结果 快速心房起搏后对照组的AERP缩短,AERP的频率适应不良,同基础状态比较差异有显著性意义(P<0.01),心房肌细胞损伤的超微结构变化明显。Cariporide组和维拉帕米组上述改变得以逆转和减轻。结论 心房肌细胞内钙水平的增高在快速起搏导致的心房肌电重构中起作用,钠氢离子交换体活化是引起钙超载的原因之一。     

丙戊酸钠对精神分裂大鼠CREB/BDNF/TrkB通路及神经元损伤的影响

目的 探讨丙戊酸钠对精神分裂大鼠环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BD-NF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)通路及神经元损伤的影响.方法 将50只雄性Wistar大鼠按随机数表法分为对照组、模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组,每组10只.模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂...     

促吸收剂癸酸钠对黄连素在大鼠肠道吸收的促进作用

目的:探讨黄连素(Ber)在大鼠肠道的吸收动力学,阐明癸酸钠(SC)对Ber在小肠段吸收的影响.方法:雄性Wistar大鼠建立在体肠段灌流模型,HPLC法测定不同浓度Ber(50、100和200 μmol·L-1)和Ber与质量浓度为0.2%SC合用在小肠的吸收情况;测定肠灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,观察SC对肠...     

钠氢交换抑制剂对兔髂动脉球囊损伤后血管狭窄干预作用研究

目的:建立兔髂动脉球囊损伤模型,观察钠氢交换(NHE)抑制剂(Amiloride)对血管狭窄的干预作用。方法:32只新西兰白兔随机分为干预组(12只)、对照组(10只)及假术组(10只);建立兔髂动脉球囊损伤模型。干预组于术前3d予Amiloride[5mg(kg·d)]、对照组以相同剂量NS腹腔注射,至术后28d取材;取髂动脉行苏木精伊红染色、αactin免疫组化染色、Masson三色染色,观察血管管腔、中膜与内膜面积变化、平滑肌细胞增殖、细胞外基质(ECM)变化情况。结果:兔髂动脉球囊损伤后4周出现明显管腔狭窄,新生内膜生长,平滑肌层增生;干预组、对照组、假术组髂动脉管腔面积各为(0.91±0.23)mm2、(0.68±0.19)mm2、(1.08±0.17)mm2,F=7.631,P<0.01;新生内膜面积各为(0.27±0.15)mm2、(0.67±0.24)mm2、(0.05±0.03)mm2,F=36.974,P<0.01;内膜中膜面积比各为1.21±0.24、1.39±0.26、0.15±0.08,F=7.562,P<0.01;经Amiloride干预后管腔面积明显增大,内膜面积显著下降,内膜中膜面积比下降。干预组与对照组内膜比较,αactin染色阳性面积减小[(4164.15±1788.37)μm2vs.(16328.31±6220.27)μm2,P<0.01];Masson染色绿色面积下降[(8910.62±7041.62)μm2vs(333558.76±7290.17)μm2,P<0.01],提示干预组内膜平滑肌增生及ECM增生均减轻。结论:Amiloride可抑制球囊损伤兔髂动脉所致血管管腔缩小、内膜增生、分泌ECM,减轻血管狭窄,提示其可能在预防经皮冠状动脉内成形术术后血管再狭窄起一定作用。     

钠钙离子交换体介导的钙超载对造影剂诱导NRK52E细胞损伤的影响

目的:本研究探讨钠钙离子交换体(NCX)是否参与了造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤及反向模式钠钙离子交换体抑制剂KB-R7943对造影剂诱导的肾小管上皮损伤的影响。方法:鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)被分成6组:正常对照组、造影剂组、甘露醇组、钙离子拮抗剂(CCB)组、KB-R7943(10-5mol/L)和KB-R7943(10-6mol/L)组。造影剂作用1 h后,细胞损伤采用LDH检测,细胞形态变化及细胞凋亡分别由倒置显微镜和流式细胞仪检测;细胞内钙采用共聚焦微镜测定;钠钙离子交换体mRNA表达采用RT-PCR测定。结果:造影剂作用1 h后,细胞损伤、细胞凋亡、细胞内钙进行性增加,显著高于相同渗透压甘露醇组;KB-R7943显著改善了上述异常,且较相同浓度CCB具有更好的效果并显示出剂量效应;钠钙离子交换体mRNA表达没有变化。结论:经反向模式钠钙离子交换体导致的细胞内钙超载参与了造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤;反向模式钠钙离子交换体抑制剂KB-R7943以呈剂量方式对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。     

大鼠离体肺血管反应性的品系差异

采用改进的离体肺灌流方法,比较 Wistar与 Hilltop 大鼠缺氧性肺血管收缩反应(HPV)的差异及其与前列腺素(PGs)和白三烯(LTs)的关系。结果显示:缺氧时 Hilltop 大鼠肺动脉压增值(△Ppa)(0.88±0.13kPa),高于Wistar大鼠(0.42±0.03kPa)。灌流血中加消炎痛使Hilltop大鼠△Ppa降低43.8％,Wistar大鼠变化不明显,两者之间差异消失,灌流血中加乙胺嗪抑制LTs生成后,Hilltop和Wistar大鼠△Ppa下降率分别为38.9％和37.9％。结果表明:Hilltop 大鼠的HPV 比Wistar 大鼠强与其在缺氧时产生缩血管性PGs有关。     

泡状棘球蚴感染大鼠排斥同种异体移植心脏的初步观察

目的 :用 SD大鼠对 Wistar大鼠心脏移植模型 ,观察大鼠感染泡球蚴后 ,免疫系统的变化对移植心脏的影响。方法 :16只健康的 SD大鼠心脏作供心 ,8只未感染泡球蚴的 Wistar大鼠及 8只感染泡球蚴的 Wistar大鼠作受者。建立 SD大鼠对 Wistar大鼠心脏移植模型。实验分组 :(1)对照组 :SD大鼠→ Wistar大鼠 (未感染泡球蚴 ) (n =8) ;(2 )泡球蚴组 :SD大鼠→ Wistar大鼠 (感染泡球蚴 ) (n =8)。 结果 :感染泡球蚴组移植心脏平均存活时间为 (11.63± 6.0 2 ) d,对照组移植心脏平均存活时间为 (6± 0 .5 3 ) d,感染泡球蚴组移植心脏存活时间较对照组移植心脏存活时间明显延长 ,两者差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论:泡状棘球蚴感染能造成 Th2 类细胞因子偏移 ,从而有利于同种异体移植物的存活 ,嗜酸性粒细胞的浸润可能是造成移植排斥的原因之一。     

天麻素对戊四氮致痫模型大鼠的治疗作用及对细胞自噬、凋亡机制的研究

目的 探讨天麻素对戊四氮致痫模型大鼠的治疗作用及对细胞自噬、凋亡机制的研究.方法 2018年11月—2019年11月于贵州中医药大学实验室进行实验.将Wistar雄性大鼠以戊四氮(PTZ)32 mg·kg-1·d-1腹腔注射诱导癫痫模型,通过筛选将造模成功的100只大鼠按随机数字表法分为戊四氮致痫模型组、丙戊酸钠(VP...     

阿米洛利对甲状腺素诱发大鼠肥厚心肌的瞬时外向钾电流的作用

目的研究阿米洛利对甲状腺素诱发大鼠肥厚心肌瞬时外向钾电流(Ito)的作用,观察正常组、肥厚组及阿米洛利处理组心肌细胞Ito特性的不同,以阐明肥厚大鼠心肌细胞动作电位的变化及阿米洛利抗心肌肥厚的电生理机制。方法大鼠ipL-甲状腺素造成心肌肥厚模型后,用标准微电极技术记录大鼠右心室乳头状肌动作电位;用膜片钳技术记录大鼠单个心室肌细胞的Ito。结果肥厚大鼠心肌细胞动作电位时程(尤其是APD20)明显延长,阿米洛利可使过度延长的APD20恢复或接近于正常值。肥厚组心肌细胞Ito幅度和密度均增加,激活动力学特性无改变。Amiloride[0.5mg/(kg·d),p.o]能抑制Ito电流幅度及电流密度的增加。结论在甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚模型中,Ito特性发生了变化,这是造成肥厚心肌电生理异常的离子基础。Amiloride能对抗甲状腺素致肥厚的心肌细胞Ito的变化,这可能与其抗心肌肥厚的作用有关。     

内皮素拮抗剂对大鼠硝酸甘油耐药性的影响

目的: 探讨内皮素受体拮抗剂Bosentan对大鼠硝酸甘油耐药的改善作用.方法: Wistar 大鼠28只,随机分成对照组(C组,n=10),硝酸甘油组(NTG组,n=6), Bosentan组(n=6),硝酸甘油+Bosentan组(NTG+Bosentan组,n=6).观察各组大鼠对硝普钠(SNP)的降压反应.用放射免疫方法测定各组血浆和血管组织的内皮素-1(ET-1) 含量.结果: NTG组大鼠对SNP的降压反应最弱,NTG +Bosentan组大鼠对SNP的降压反应明显强于NTG 组大鼠, NTG +Bosentan组大鼠离体主动脉环对不同浓度SNP的舒张反应较NTG组大鼠有明显的改善. NTG +Bosentan组大鼠血浆及血管组织ET-1含量与NTG组大鼠比较差异无显著性,均明显高于C组大鼠.结论:内皮素受体拮抗剂Bosentan可以改善NTG耐药的发生.