精子DNA微波Feulgen染色及意义

目的，提高精子染色质量，增强染色效果。方法：参考Ｆｅｕｌｇｅｎ染色方法，采用ＹＷＹ７８１型医用微波仪。结论：精液涂片染色后精子形态清晰，核染成紫红色，尾染成淡绿色，精子正面呈卵圆形，侧面呈锥体形，核染色强度由前向后渐增，其它细胞清晰可见。结果：通过其高频率的电磁波，在其热效应、化学效应和生物效应作用下，使染色时间明显缩短，方法简便快速，且能获得良好的染色结果，与传统Ｗｒｉｇｈｔ染色法比较，染色更加清晰，结果突出，能使精子、白细胞及生精细胞一并染色一并观察     

微波辐射技术在癌细胞DNA染色中的应用

传统的Ｆｅｕｌｇｅｎ染色方法存在着染色时间长、结果不稳定等缺点，影响对癌细胞ＤＮＡ含量的准确测定及诊断。我们利用微波辐射技术与常规Ｆｅｕｌｇｅｎ染色法相结合，对各种癌细胞进行了ＤＮＡ染色实验。结果表明，微波用于ＤＮＡ染色，具有快速、简便、重复性好等优点。组织浸染Ｓｃｈｉｆｆ液由常规法的１ｈ左右可缩短为６ｍｉｎ，而且癌细胞核内ＤＮＡ显示十分鲜明，背景清晰，结果稳定，显著提高了ＤＮＡ染色质量，为癌细胞     

盐酸水解对Feulgen染色效果的探讨

在常规病理诊断过程中,单靠病理组织细胞形态判断肿瘤良恶性有时仍较困难,须借助一些辅助手段,如免疫组织化学染色法等.其中Feulgen染色由于显示细胞核DNA相对含量时较精确,且该法与图像分析相结合进行倍体分析在肿瘤诊断及预后方面具有一定的特异性,已逐渐成为临床重要辅助手段.常规Feulgen染色时间和染色效果易受盐酸水解时间和温度影响,染色步骤较为繁杂,需耗时2 h.我们选用目前临床常用的3种不同染色方法进行比较,旨在寻求一种快速、简便的染色方法,提高染色质量[1,2].     

冷酸解法及热酸解法对Feulgen染色结果的影响

正DNA倍体分析在肿瘤诊断及预后方面具有重要意义[1]。1987年VanDriel-Kulker首次提出在显微镜下细胞核光密度测量判断DNA含量的方法[2],其中Feulgen染色能够精确的显示细胞核DNA相对含量,其已逐渐成为临床检测的重要辅助手段。Feulgen染色由Feulgen和Rossenbrek等在1924年提出,作为细胞核DNA特异性经典染色方法之一,在病理学及细胞化学领域一直沿用至今[3]。近年来Feulgen染色在染     

以天青A染料显示DNA的染色方法

对肿瘤细胞核中的脱氧核糖核酸（DNA）含量进行测定,根据其倍体及细胞周期情况对肿瘤细胞的良恶性,恶性程度以及预后加以判断,称为DNA定量分析,能进行这种测定的主要有流式细胞仪和图像细胞仪两种,图像细胞仪分析由于具有直观,标本适用性广等特点深受广大病理工作者的青睐,DNA图像细胞分析首先必须进行DNA染色,传统的染色方法是Feulgen法,所用染料为碱性品红,我们采用天青A作为染料,替代碱性品红,取得了良好的DNA染色效果。     

形态定量分析及DNA含量测定在乳腺增生性疾病与乳腺癌鉴别的应用

目的　探讨形态定量分析及DNA含量测定在乳腺增生性病变与乳腺癌的鉴别诊断中的实用价值。方法　应用HE和Feulgen染色法对乳腺腺病 4 0例、乳腺癌 5 0例进行染色后 ,采用MPILAS 5 0 0多媒体病理彩色图文分析系统选择胞核面积 ,胞核周长 ,胞核直径 ,胞核体积 (包括胞核S 体积和胞核L 体积 ) ,形状因子 ,胞核圆形度 ,胞核圆球度、C 异形指数共 9项参数和DNA指数 (DI值 )进行测量 ,所获数据采用U检验进行分析。结果　乳腺增生与乳腺癌两组间细胞形态定量测定的 9项参数差异显著 (C 异形指数P <0 0 5 ,其余 8项参数均为 P <0 0 1 )。结论　细胞形态定量测定和DNA含量测定在乳腺增生性病变与乳腺癌的鉴别诊断中具有实际应用价值     

术中冷冻切片快速免疫组化染色及其应用

随着免疫组化技术的不断改进和标准化试剂盒的出现使免疫组化染色的质量不断提高 ,染色时间大大地缩短 ,同时也使术中冷冻切片的快速免疫组化染色成为可能。笔者尝试用标记的葡聚糖聚合物法 (labeleddextranpolymer,LDP)对 4 4例术中冷冻组织样本进行快速免疫组化染色 ,旨在探讨术中冷冻样本快速免疫组化染色在冷冻组织的快速病理诊断中的作用及其可操作性和实用性。1　材料与方法1.1　材料　收集四川大学华西医院病理科 2 0 0 2年 2～ 3月部分术中冷冻切片快速诊断的组织标本 ,包括 16个解剖部位共 4 4例病变组织。其中乳腺 13例 ,腹腔或…     

微波-EDTA快速脱钙技术及其在免疫组化染色中的应用

在临床病理诊断和一些动物实验研究中,常常需要对骨组织进行脱钙处理,硝酸脱钙液的pH值低,对骨组织的抗原性影响大,给免疫组织化学染色造成不良影响,乙烯二胺四乙酸(ethylene diamine tetraceticacid,EDTA)脱钙液的pH值近中性,对组织结构、抗原     

TUNEL与免疫组织化学双染色技术的应用

TUNEL作为一种敏感性高、使用方便的检测细胞凋亡的技术方法早已被广泛应用。但是,我们在实际工作中往往还要使用多种其他技术方法展开多层次的研究,以解决凋亡细胞的组织来源、形态学定位和其调节机制等诸多问题。对此,笔者参考文献[1,2],在同一组织切片上进行TUNEL和免疫组织化学双重染色,获得了比较理想的结果。     

DNA芯片技术及其医学应用

遗传学的中心任务是认识遗传、变异及其与表型的关系,而对于人类而言,遗传学对于认识人类健康及其疾病有着重要的意义,与人类疾病相关的基因病因学、基因病理学以及这类疾病的诊断预防和治疗,正成为现代分子医学(ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｄｉｃｉｎｅ)的主要内容。随着人类基因组制图与测序的完成,致病基因及其表达模式的鉴定,群体中多态性的鉴定,使检测ＤＮＡ作为了解人类健康与疾病的时代终于到来,然而人从前迫切需要一种有效的手段能一次检测成千上万ＤＮＡ数据,于是,ＤＮＡ芯片诞生了。ＤＮＡ芯片(ＤＮＡｃｈｉｐ)又被称为生物集成模片、…     

DNA芯片技术原理及在遗传学研究中的应用

人类基因计划的提出促进了许多新的分子生物学技术的产生和发展，ＤＮＡ芯片技术是在固相支持物上寡核苷酸联合合成，照相平版印刷样模具制造、共聚焦显微镜的荧光自动扫描等技术基础之上发展起来的，能够在且水平进行基因表达研究     

卵巢肿瘤细胞DNA及RNA含量的定量分析及其临床意义

本资料对９３例不同性质的卵巢肿瘤细胞ＤＮＡ及ＲＮＡ含量进行了定量研究，其中５０例良性、４３例恶性。并对患者进行１～５年的随访。结果是卵巢良性肿瘤的异倍率（假阳性）为４４％，恶性肿瘤异倍率为８６．０％。以“标准ＤＩ”及“标准ＲＩ”为指标判断卵巢肿瘤性质的准确率较以“异倍性”为高，且双指标同时应用高于任一单指标：对卵巢良恶性肿瘤的诊断准确率分别为９０％和９５．３％。提出“标准ＤＩ”和“标准ＲＩ”是判断卵巢肿瘤性质的理想指标。且ＤＮＡ及ＲＮＡ含量与卵巢癌预后有密切关系。     

人乳腺正常和癌变细胞DNA原位定量的研究

标本来自外科手术取出的新鲜乳腺涂片,经病理学确诊后获得32例。应用显微分光光度计技术,对各种乳腺疾患的单个细胞的间期核进行DNA含量测定。以2例正常人耳血和4例乳腺疾患的淋巴细胞,作为二倍体细胞的DNA含量的对照参考值。测得正常淋巴细胞DNA平均值为11.22±0.2 A.U和10.98±1.3 A U。乳腺病灶旁组织10例,其上皮核DNA平均值为12.5±1.3 A U;乳腺增生5例,为21.36±1.6 A U;乳腺纤维瘤9例,为22.61±1.0 A.U;乳腺癌8例,为31.9±2.3 A.U。本文认为,乳腺癌细胞的DNA值表现不正常,多倍体细胞增多,组方图右移,带双峰或多峰的非整倍体分布图形。良性乳腺病的DNA含量,比癌细胞低得多,但比正常细胞高,它们的DNA峰值位于二倍体～四倍体之间。我们认为,应用DNA原位定量技术,对癌变细胞的早期和预后诊断,以及抗癌药物疗效的判断,有重要的参考价值。     

DNA分析技术在法医学中的应用及进展

DNA分析技术在许多研究和应用领域发挥重要的作用，尤其在法医学领域具有重要意义。本文对DNA指纹技术、STR、mtDNA测序、SNP等主要DNA分析技术的应用和发展，以及建立DNA数据库的必要性和应用价值进行了系统的阐述。     

结核分枝杆菌DNA指纹技术研究及其应用

目的：建立限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)方法分析结核分枝杆菌DNA指纹并探讨其分子流行病学特点及与药物敏感性的关系。方法：提取结核分枝杆菌DNA,经内切酶PvuⅡ酶切、琼脂糖凝胶电泳、Southem转印后,与地高辛标记的IS6110探针杂交,以酶免疫试验检测信号,比较各临床分离株IS6110指纹。结果：根据IS6110指纹特征的同源性的高低,将所检测的127株结核分枝杆菌分为A、B、C和D4簇,4簇的株数(比例)分别为50(39．4％)、12(9．4％)、16(12．6％)和49(38．6％)。各簇菌株的IS6110指纹特征：A簇菌株间相似系数在70％以上,共同拥有1．3kb、1．9kb、2．1kb、2．7kb、3．3kb、4．5kb、5．0kb、6．5kb等位置的条带;B簇菌株间相似系数也在70％以上,与A簇菌株族间相似系数较高,为65％,与A簇相比,1．9kb以上条带与A簇相似,但缺乏1．9kb以下的条带;C簇带型分布散且较为平均,在1．3kb、2．2kb、3．3kb、5．5kb等位置都有共同拥有的片段;D簇菌株条带数目少,呈现高度多态性,所有菌株之间没有相同位置的条带,相互间同源性较低。其中A、B、C 3簇相似系数在55％以上,且有相同位置的片段,将它们称为“成簇菌株”。无共同条带的D簇称为“不成簇菌株”。30岁以上人群“不成簇菌株“所占比重高于30岁以下人群,低年龄组“成簇菌株”比例高,近期传播结核较为严重。检测菌株的多态性变化在结核分枝杆菌耐药与敏感株中的分布,A族菌株的耐药比例低于其它3簇菌株。未发现结核分枝杆菌DNA指纹特征与居住状况和职业之间的联系,也没有发现传播频率在男女性别之间存在差异。结论：深圳地区菌株基因型与北京地区菌株相似。深圳地区低年龄组(30岁以下)的结核病传播以近期传播为主。与北京地区相似菌株耐药比例低于其它型菌株。     

正常不同鼠龄及再生肝的肝细胞DNA含量分析

用细胞分光光度技术定量测定细胞学涂片中单个肝细胞DNA含量的方法,观察了不同龄正常大鼠及大鼠部分肝切除后再生肝的肝细胞DNA含量情况。结果表明:正常大鼠出生后,随着年龄的增长肝细胞核倍体逐渐从二倍体向四倍体发展;2/3肝切除术后48h,二倍体细胞和双核细胞明显减少,四倍体细胞增多,显示在增生刺激下促进了肝细胞多倍体化过程。最后,对肝细胞多倍体化的形成及其生物学意义进行了讨论。     

快速低成本全基因组DNA测序技术

人类个体的全基因组序列信息，是最为重要的生物医学信息，是实现未来个体化医疗的基础；实现个体全基因组DNA序列的快速低成本检测，是人类基因组计划完成后又一个重要的技术挑战。对该技术当前的发展现状进行回顾和分析，预计在不长的时间内人类个体全基因组的测序成本能够降低到1万元人民币以下。     

精子DNA损伤检测技术及临床应用

随着辅助生殖技术的广泛开展,精子评估已由传统的精液常规分析向细胞、分子水平深入发展。精子DNA损伤是反映男性生育力的一个新指标。精子染色质结构分析、单细胞凝胶电泳、末端转移酶介导的dUTP末端标记法等方法被应用于检测精子DNA的损伤程度。目前建立一种简单易行、易于标准化的临床检测方法等方面还需进一步的研究。精子DNA损伤可能会导致不育、反复流产和影响辅助生殖技术治疗结局。本文主要就精子DNA损伤检测方法的原理、方法及临床应用作一综述。     

应用微波辐射技术进行PAM染色的探讨

自Mayer 1970年首先创立微波辐射组织固定方法以来,他的应用范围不断得到拓宽。与常规方法相比,以其操作简便,省时快速等优点而为广大病理工作者所接受。目前,应用微波辐射技术的病理研究已逐步在光镜、电镜及免疫组化等领域内展开。但在PAM染色方面,尚未见报道。作者应用微波辐射技术对肾穿刺活检标本和含有霉菌的标