大鼠肺纤维化形成过程中IGF-Ⅰ和TGF-β1的表达

目的：研究大鼠肺纤维化形成过程中肺组织表达胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）和转化生长因子β₁（TGF-β₁）的变化。方法： 60只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组20只及模型组40只,分别用生理盐水和博莱霉素（5 mg•kg^-1）气管内灌注,于第7、14、21和28天处死,取肺组织,采用免疫组织化学方法检测肺组织中IGF-Ⅰ和TGF-β₁的表达情况。结果：实验组经博莱霉素诱导4周后,取肺组织行HE染色,病理符合肺纤维化改变;苦味酸-酸性品红染色可见肺间质胶原纤维生成,证实肺纤维化模型形成。免疫组化显示,模型组肺组织中表达IGF-Ⅰ、TGF-β₁阳性细胞分布于肺间质,阳性细胞百分率和表达强度与对照组比较差异有显著性（P<0.05）;在第1、2和3周IGF-Ⅰ的表达逐渐增强,第4周出现下降,但第1周分别与第3周和第4周比较,差异仍有显著性（P<0.05）;TGF-β₁的表达高峰出现在第2周,第3周开始出现下降,但至第4周时,TGF-β₁的表达水平仍高于第1周,第1周分别与第2、3周比较差异有显著性（P<0.05）。结论：IGF-Ⅰ和TGF-β₁的高水平表达,促进了肺纤维化的形成;IGF-Ⅰ和TGF-β₁共同参与了肺纤维化的形成,并可能存在协同作用。     

人胃癌组织TGF—β1蛋白的表达

探讨ＴＧＦ－β１的表达与胃癌的关系及作用。方法；采用免疫组织化学方法。对４５例胃癌，２０例萎缩性胃炎伴中，重度肠腺化生及１５例正常胃粘膜组织进行了ＴＧＦ－β１蛋白表达的检测。结果；胃癌组织中ＴＧＦ－β１表达明显增强，其阳性率明显高于正常胃粘膜对照组有萎缩性胃炎组织，并具有显著的统计学意义。     

博莱霉素损伤早期ECG，TGF—β1活性表达与肺泡泡炎病理分级

目的 定量测量小鼠肺泡炎肺泡灌洗液中EGF，TGF－β1的表达与同期肺泡炎的病理分级和肺泡Ⅱ型细胞超微结构的变化间的关系。方法 通过气管内灌注博莱霉素A5建立小鼠肺泡炎模型，按采集灌洗液的时间（1，3，7d)分为3组，分批直视下取肺泡灌洗液，采用夹心ELISA法定量检测灌洗液中EGF，TGF－β1表达，同时取各组的肺组织行常规HE染色，光镜观察肺泡的病理变化及炎症分级，电镜观察肺泡Ⅱ型细胞的超微结构变化。结果 实验组ELISA测定显示：1，3，7d组肺泡灌洗液中EGF的水平均低于正常对照组（P＜0．01），TGF－β1的水平有所升高，但与正常对照组比较无显性差异。病理学检查显示，各组病变以Ⅰ级肺泡炎为主，随病程进展逐渐向Ⅱ，Ⅲ级发展，肺泡Ⅱ型细胞变性坏死以3，7d组明显。将EGF和TGF－β1的水平与肺泡炎的分级对照组相比较，各组EGF水平变化与肺泡炎分级相关不显，但r值均为负值。TGF－β1水平升高与肺泡炎分级呈显正相关（P＜0．01）。结论 博莱霉素损伤早期肺泡Ⅱ型细胞变性、坏死、抑制了EGF自分泌的机制，诱导TGF－β1活性高表达是肺间质纤维化进程启动的重要因素之一。     

用RT—PCR方法动态分析博莱霉素致肺纤维化大鼠TGF—β1的基因表达

目的：探讨转化生长因子β1（TGF－β1）在肺纤维化中的作用。方法：采用博莱霉素（BLM）致肺纤维化大鼠模型,分离纯化肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage,AM）,用RT－PCR及图像分析方法,对不同时期AM以及肺组织释放的TGF－β1进行动态观察。结果：BLM组AM和肺组织中TGF－β1 mRNA第3天即明显增加（P＜0.05和P＞0.05）,第7天达到高峰（P＜0.01）,第14－28天逐渐下降,便仍高于对照组（P＞0.05）。结论：TGF－β1 mRNA在正常大鼠及肺纤维化大鼠中均有表达,后者表达明显高于前者,肺纤维化大鼠肺内TGF－β1 mRNA可能主要来源于AM。     

PEPT2 mRNA在博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织表达研究

目的:研究PEPT2(peptide transporter 2)mRNA在肺纤维化大鼠肺组织的表达.方法:(1)实验动物与分组:健康SD大鼠56只(200±20 g),雌雄各半,随机分为3组:①正常对照组(n=10),不作任何处理;②生理盐水组(n=10),气管内一次性滴入0·2 mL生理盐水,14 d后放血处死,检测羟脯氨酸含量;③博莱霉素(BLM)组(n=36),将BLM(日本化药株式会社)按5mg/kg溶于生理盐水中配成浓度为0·5%的BLM溶液,气管内一次性滴入0·2 mL复制肺纤维化模型,分别于给药后7 d、14 d和28 d检测羟脯氨酸含量.(2)评价肺纤维化方法:①HE染色光镜观察组织病理变化;②样本碱水…     

肺纤煎联合泼尼松对博莱霉素A_5致肺纤维化小鼠肺组织TGF-β_1 mRNA表达的影响

目的 :观察肺纤煎联合泼尼松对博莱霉素致小鼠肺纤维化的干预作用及机制。方法 :以腹腔注射博莱霉素A5复制肺纤维化模型 ,将小鼠随机分组并给予不同药物治疗 ,从病理改变、转化生长因子 (TGF) β1mRNA表达等方面 ,动态评价肺纤煎联合泼尼松对肺纤维化的治疗作用。结果 :肺纤煎联合泼尼松治疗后肺泡炎、肺纤维化明显减轻 ;TGF β1mRNA表达有不同程度的降低。结论 :肺纤煎联合泼尼松可通过调控TGF β1mRNA从而减轻博莱霉素A5致小鼠肺纤维化     

芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及机制探讨

目的探讨中药芪术合剂在博莱霉素诱导的实验性大鼠肺纤维化治疗中的作用及其机制。方法将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪术合剂组和强的松组。经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型，并分组予以治疗，于治疗3、7、21d分批处死各组大鼠，每次每组6只。用免疫组化法观察肺组织转化生长因子-βl的表达，并测定透明质酸（HA）含量及支气管肺泡灌洗液炎细胞水平。结果在3、7、21d模型组TGF—β1表达均较正常对照组明显增高（P〈0．01），芪术合剂组与同期模型组比较明显降低，芪术合剂3d组高于同期强的松组，而在7d、21d则明显低于强的松组。结论早期运用芪术合剂可抑制TGF—β1和HA的产生，从而预防和阻止实验性大鼠肺纤维化的形成。     

雾化吸入布地奈德对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用

目的:观察雾化吸入布地奈德对大鼠肺纤维化的干预作用并探讨其作用机制.方法:45只Wistar雌性大鼠随机分为生理盐水对照组、肺纤维化模型组、布地奈德干预组,每组15只.利用博菜霉素建立肺纤维化模型,24h后给予布地奈德干预,并分别于7、14、28天处死动物,观察其肺组织病理变化、肺系数、肺组织胶原含量及支气管肺泡灌洗液(BALF)转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达.结果:与模型组比较,布地奈德组的肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻,肺组织胶原含量、BALF中TGF-β1表达水平均降低(P<0.05).结论:雾化吸入布地奈德能够抑制致肺纤维化因素导致的肺部正常组织结构的破坏及肺组织胶原的沉积,从而有效阻止肺纤维化的进展.     

TGF—β1在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及其生物学意义

目的：通过研究大鼠肝纤维化模型肝组织中转化生长因子β1(Transforming growth factor β1,TGF－β1)的表达和分布规律，初步探讨TGF－β1在肝纤维化发病机制中的作用。方法：雄性SD大鼠32只，体重250－300克，皮下注射CCl4制备大鼠肝纤维化模型，分别于注射CCl4后1，4，8周处理动物，采用免疫组织化学方法检测肝组织中TGF－β1的表达及分布。结果：TGF－β1主要表达于肝脏间质组织中。CCl4注射诱导后，大鼠肝组织中TGF－β1的表达较正常对照明显增强（P＜0．01）。且CCl4注射1、4、8周组肝组织中TGF－β1的表达强度呈明显的逐级递增的趋势（P＜0．01）。结论：TGF－β1的表达水平与大鼠肝纤维化严重程度呈显正相关，可能与肝纤维化的发生发展有关。     

PEPT2 mRNA在博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织表达研究(摘要)

目的:研究PEPT2(peptide transporter 2)mRNA在肺纤维化大鼠肺组织的表达.方法:(1)实验动物与分组:健康SD大鼠56只(200±20g),雌雄各半,随机分为3组:①正常对照组(n=10),不作任何处理;②生理盐水组(n=10),气管内一次性滴入0.2 mL生理盐水,14 d后放血处死,检测羟脯氨酸含量;③博莱霉素(BLM)组(n=36),将BLM(日本化药株式会社)按5mg/kg溶于生理盐水中配成浓度为0.5%的BLM溶液,气管内一次性滴入0.2 mL复制肺纤维化模型,分别于给药后7 d、14 d和28d检测羟脯氨酸含量.     

16,16二甲基前列腺素E2对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用

目的 :探讨 1 6 ,1 6二甲基前列腺素E2 (dmPGE2 )在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化进程中对结缔组织生长因子 (CTGF)表达水平的影响。方法 :通过苏木素伊红 (HE)染色及Ⅰ型胶原 (Col Ⅰ )、Ⅲ型胶原 (Col Ⅲ )免疫组化染色评价纤维化程度 ,用原位杂交方法检测结缔组织生长因子 (CTGF)的mRNA在肺内的表达情况 ,用免疫组化法检测转化生长因子 β1 (TGF β1 )及cAMP依赖性磷脂酶A(PKA)的表达。结果 :①模型组中TGF β1 、CTGFmR NA、Col Ⅰ、Col Ⅲ表达水平较空白组明显增高 ;②实验组中CTGFmRNA和Col Ⅰ、Col Ⅲ水平与模型组比明显下降 ,较正常组稍高。结论 :PGE2 可减轻博莱霉素所诱导的肺间质纤维化程度 ,这种作用可能部分通过抑制CTGFmRNA转录实现     

TGFβ1和TGFβRⅠ在煤工尘肺大鼠模型肺组织中的表达

目的:探讨转化生长因子β1 (TGFβ1)和转化生长因子βⅠ型受体(TGFβRⅠ)在煤工尘肺(CWP)发病机制中的作用.方法:对CWP高发病区和低发病区煤尘进行氨基酸含量分析,用不同病区煤尘建立CWP大鼠动物模型,用免疫组化法观察TGFβ1和TGFβRⅠ在肺组织中的表达,观察动物模型形成不同时间肺组织的病理变化.结果:TGFβ1和TGFβRⅠ在CWP大鼠肺组织各种细胞中的表达明显高于对照组(P<0.01),其表达的数量及染色强度与肺纤维化程度一致;高发病区煤尘中大多数氨基酸含量比低发病区明显增高,但两组之间TGFβ1和TGFβRⅠ表达无差异,两组CWP大鼠模型肺泡炎及肺纤维化形成的时间和程度也无明显区别.结论:TGFβ1和TGFβRⅠ与CWP发病密切相关,在其肺纤维化形成过程中可能发挥重要作用.CWP发病率高低与煤尘中氨基酸含量无关.     

肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1和前胶原基因的表达

急性肺泡炎是肺纤维化病变基础,在肺泡炎形成过程中涉及炎性细胞、免疫效应细胞和细胞因子。体外试验证明肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1（TGF-β1）可上调人胚肺成纤维细胞前胶原mRNA的表达［1,2］,提示急性肺泡炎时这些细胞因子与肺纤维化发生有一定的因果关系。我们用博莱霉素A5诱发大鼠肺纤维化,并制成动物模型,对大鼠肺组织中TGF-β1,前胶原Ⅰ和前胶原 Ⅲ的mRNA进行观察,以探讨它们与大鼠肺纤维化的关系。 　　一、材料与方法 　　1. 动物与动物模型: 25只 Wistar雄性大鼠,体重140～170 g,购自中国医学科学院动物中心。将大鼠随机分为5组,每组5只。以乙醚麻醉大鼠,其中1组为正常对照组经气管内一次性灌注生理盐水;其余各组经气管内一次性灌注博莱霉素A5 5 mg/kg,博莱霉素3 d组,7 d组,14 d组,30 d组。于灌注后3、7、14、30 d处死大鼠,取右侧肺液氮速冻待检,左侧肺于100 g/L的中性甲醛液中固定,HE染色。 　　2.分子杂交及材料来源：分子杂交按参考文献［3］介绍的方法进行。cDNA 探针片段由北京阜外心血管病医院杨方博士惠赠,此片段是由含编码人的前胶原Ⅰ和前胶原Ⅲ重组质粒菌种PH CAL1 TU,PHFS3 中提取的;TGF-β1 cDNA片段由北京市肿瘤研究所高崇峰提供,β-肌动蛋白（β-actin）cDNA 片段购自中山生物技术公司。     

瓜蒌薤白汤对肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子β1表达的影响

目的探讨瓜蒌薤白汤防治肺纤维化作用及机理.方法用平阳霉素复制大鼠肺纤维化模型后,用药组每天灌胃瓜蒌薤白汤,28d后处死,观察、比较各组大鼠肺部病理组织学改变及肺组织中转化生长因子(TGF-β1)表达.结果模型组大鼠肺泡炎及纤维化程度、肺组织中TGF-β1表达均明显高于正常对照组及用药组(P＜0.05).结论瓜蒌薤白汤能明显减轻平阳霉素所致的大鼠肺泡炎及纤维化程度,抑制肺组织中TGF-β1过度表达.     

阿魏酸钠对博来霉素肺纤维化大鼠肺组织TGF β RⅡmRNA表达的影响

目的观察阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织TGFβRⅡmRNA表达的影响,探讨其治疗肺纤维化的作用及机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组,肺纤维化模型组和阿魏酸钠治疗组,每组10只。模型组和治疗组以气管内滴入博来霉素（5mg/kg）建立肺纤维化动物模型,治疗组采用阿魏酸钠（150mg/kg体重）灌胃治疗。HE染色检测肺组织病理改变,免疫组化检测Ⅰ型胶原纤维,原位杂交检测转化生长因子β受体ⅡmRNA（TGFβRⅡmRNA）。结果与对照组比较,肺纤维化模型组肺组织Ⅰ型胶原纤维显著增加（P〈0.001）。阿魏酸钠治疗组与肺纤维化模型组比较,肺组织内1型胶原纤维表达减弱（P〈0.001）,TGFβRⅡmRNA表达降低（P〈0.05）。结论阿魏酸钠能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度,其机制可能与其抑制肺内TGFβRⅡmRNA的表达,从而阻止Ⅰ型胶原过度沉积有关。     

阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1信号通路分子mRNA表达的影响

目的观察阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）信号通路分子mRNA表达的影响，探讨其防治肺纤维化的作用及机制。方法气管内滴入博来霉素（5mg／kg）建立大鼠肺纤维化模型。将30只SD大鼠随机分为三组（每组10只）：对照组、肺纤维化模型组和阿魏酸钠组。HE染色检测肺组织病理改变，胶原纤维染色检测胶原纤维表达，原位杂交技术检测肺组织TGF-βRⅡ及Smad4 mRNA表达，实时荧光定量RT-PCR技术检测TGF-β1 mRNA表达。结果胶原纤维染色显示模型组大鼠肺内胶原纤维表达显著高于对照组和阿魏酸钠组（P〈0．001）。大鼠肺内TGF-β1、TGF-βRⅡ和Smad4的mRNA表达在模型组显著高于对照组（P〈0．01），在阿魏酸钠组显著低于模型组（P〈0．05）。结论阿魏酸钠能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度，其作用机制主要是通过抑制TGF-β1、TGF-βRⅡ和Smad4的mRNA表达上调，从而干扰TGF-β1／Smad4信号通路对靶基因的激活来实现的。     

博莱霉素诱发大鼠肺间质纤维化时肺内V型胶原的…

采用免疫组化技术和Ｑ５２０图象分析仪对大鼠气道内注入博莱霉素Ａ５后肺内Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型胶原（ＣｏｌⅠ、ＣｏｌⅢ、ＣｏｌⅤ）的动态变化进行了定量分析。结果发现在大鼠肺纤维化病灶中ＣｏｌⅤ的变化与ＣｏｌⅠ、ＣｏｌⅢ不同，其增生出现早，在整个实验周期中呈双峰状曲线，提示在肺纤维化早期和晚期增生的ＣｏｌＶ具有不同的来源。ＣｏｌＶ的沉积可能是使使肺纤维化发生、病变长期存在、甚至进行性进展的重要因素。     

甘草酸二铵对博莱霉素致肺纤维化大鼠的治疗作用

目的 探讨甘草酸二铵治疗博莱霉素致肺纤维化大鼠的作用及其机制.方法 将清洁级大鼠40只随机分成对照组、博莱霉素所致大鼠肺纤维化组(模型组)、甘草酸二铵组和地塞米松(DXM)组.DXM组和甘草酸二铵组滴注博莱霉素致肺纤维化动物模型第28天开始,连续14 d腹腔内分别注射DXM注射液3 mg·kg-1·d-1和甘草酸二铵150 mg·kg-1·d-1;第15天取左肺下叶用于免疫组化检测转化生长因子β1(TGF-β1)、γ干扰素(IFN-γ)表达,右肺下叶经HE染色病理观察.用ELISA双抗体夹心法测定各组大鼠血清TGF-β1、白细胞介素4(IL-4)、IFN-γ含量.结果 (1)甘草酸二铵组与DXM组大鼠肺纤维化程度均较轻微;(2)模型组大鼠肺组织TGF-β1染色呈强阳性反应,IFN-γ染色较淡,而甘草酸二铵组与DXM组TGF-β1、IFN-γ染色及定量表达则相反(P<0.01);且甘草酸二铵组与DXM组相比,TGF-β1定量表达有差异(P<0.05).(3)模型组大鼠血清TGF-β1、IL-4含量较高,IFN-γ含量较低;而甘草酸二铵组和DXM组则相反(P<0.01).结论 甘草酸二铵可以下调大鼠肺组织TGF-β1、IL-4的表达,降低其血清含量;上调肺组织IFN-γ的表达,增加其血清含量,从而减轻肺纤维化.     

卡托普利对博莱霉素致小鼠肺纤维化的防治作用及其机制探讨

目的 研究血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利对博莱霉素致小鼠肺纤维化的防治作用.方法 7～10周龄雄性ICR小鼠45只分3组,分别为模型组、卡托普利组与正常对照组.模型组与卡托普利组经尾静脉注射博莱霉素10mg/(kg·d)14 d建立稳定的肺问质纤维化模型,卡托普利治疗组于注射博莱霉素前24 h予卡托普利(12.5 mg/kg·d)灌胃,并与正常ICR小鼠进行对照.第28天收获肺组织,左肺行HE和Masson染色,右肺组织应用Real-time PCR检测Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TGFβ1及结缔组织生长因子CTGF mRNA表达,行Western-blot检测CTGF蛋白表达.结果 卡托普利治疗组与模型组比较,小鼠肺泡炎、纤维化程度有所改善,但无统计学意义.卡托普利能显著下调模型组肺组织中升高的Collagen Ⅰ、TGFβ1的mRNA水平及CTGF的mRNA与蛋白水平.但Collagen Ⅲ的mRNA水平并无明显改变.结论 卡托普利有减轻BLM诱导的肺泡炎及肺纤维化程度的趋势,提示卡托普利有一定的抗肺间质纤雏化作用;抑制TGF-β1及CTGF在肺组织中的表达,可能是其作用机制之一.     

己酮可可碱对肺纤维化大鼠肺组织中 MCP-1和TGF-β表达的影响

目的研究大鼠肺纤维化中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和转化生长因子-β(TGF-β)的表达及己酮可可碱对它们的影响.方法采用气管内灌注博来霉素的方法建立大鼠肺纤维化模型,设对照组、模型组和己酮可可碱治疗组,每组12只,再各分为第7天和第28天组.测定28 d时肺组织中羟脯氨酸含量和溶胶原活性以判断纤维化程度及治疗效果,同时用免疫组化法观察7、28 d时MCP-1和TGF-β在肺组织中的表达变化.结果模型组羟脯氨酸含量显著增高、溶胶原活性下降,而己酮可可碱治疗组与对照组比较无明显差异.与对照组比较,模型组MCP-1和TGF-β的表达显著增高(均P<0.01),己酮可可碱治疗组也有所增高,但均明显低于模型组(均P<0.01).结论己酮可可碱可抑制鼠肺纤维化,调节MCP-1和TGF-β的表达可能是己酮可可碱抑制鼠肺纤维化的机制之一.