c-fos癌基因在喉鳞癌组织中的表达

目的 探讨c—fos癌基因在喉鳞癌(LSCC)组织中的表达及意义。方法 采用SABC免疫组化法检测42例LSCC及10例手术切缘正常组织中c—fos表达,并与LSCC发生部位、病理分级、临床分期及有无颈淋巴结转移相比较。结果 c—foS在LSCC中阳性率为69.0％,正常喉组织阳性率为10.0％,两者比较有统计学意义(P<0.05)。c—fos阳性率与肿瘤分级密切相关(P<0.05),但与肿瘤发生部位、分期及转移比较,两者比较有统计学意义(P>0.05)。结论 c—fos表达异常可能与喉鳞癌的发生有关。检测c—fos可作为判定喉鳞癌恶性程度的潜在指标之一。抗c—fos可能为肿瘤治疗提供一个新途径。     

bcl-2基因家族在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨与细胞凋亡相关基因bcl-2,bcl-xl,bcl-xr与bax在喉鳞癌组织中的表达及其临床意义.方法应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)、琼脂糖凝胶电泳技术检测48例喉鳞癌组织和30例声带息肉组织.结果 30例声带息肉组织中bcl-xl,bcl-xr,bax分别扩增6.67%(2/30),13.33%(4/30)与29.16%(14/30).喉癌组织中64.58%(31/48)有bcl-2扩增,83.33%(40/48)有bcl-xl扩增,75.00%(36/48)有bcl-xr扩增,33.33%(16/48)有bax扩增.bcl-2,bcl-xl,bax,bcl-xr扩增与喉癌的部位、病理分级、TNM分期无关(P>0.05),但bcl-xl,bax扩增与喉癌的淋巴结转移有关(P<0.05).bax与bcl-2,bcl-xl,bcl-xr在喉癌的表达两者比较,有统计学意义.结论与细胞凋亡相关基因bcl-2,bcl-xl,bcl-xr与bax在喉癌中的异常表达是喉癌发生的原因之一.抑制凋亡基因bcl-2,bcl-xl,bcl-xr在喉癌中高表达,促进凋亡基因bax在喉癌中低表达对喉癌的发生起着重要作用.bcl-xl,bax表达与喉癌淋巴结转移有比较密切的联系,且二者相比有统计学意义.Bcl-xl高表达,bax低表达可能预示着肿瘤具有较强的转移和增殖能力.     

P糖蛋白与Survivin在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的 探讨P糖蛋白、Survivin在喉鳞癌及喉黏膜正常上皮中的表达差异;两者在喉鳞癌中的表达与临床病理特征的关系;两者表达间的相关性.方法 应用免疫组化染色技术检测P糖蛋白和Survivin在86例喉鳞癌及32例喉黏膜正常上皮组织中的表达.结果 P糖蛋白及Survivin在喉鳞癌组织中阳性表达率均高于喉黏膜正常上皮组织(P<0.05);喉鳞癌组织中P糖蛋白、Survivin阳性表达率与肿瘤临床分期、组织学分级、淋巴结转移有关(P<0.05);P糖蛋白与Survivin在表达水平上呈正相关(r=0.411,P<0.01).结论 P糖蛋白和Survivin的高表达可能在喉鳞癌病情进展中起一定作用,均可作为评估喉鳞癌临床病理特征的有效生物学标志.     

喉鳞癌p21和p53蛋白表达及临床意义

本研究采用免疫组化法 ,观察 p2 1和 p53癌基因产物在不同部位、不同临床分期和不同细胞分化及有随访资料的喉鳞癌 ( LSC)中的表达情况 ,以探讨 LSC发生过程中癌基因的表达规律及与预后的关系。1　材料和方法1 .1 　 材料来源全部组织选自本院病理科 1 987～ 1 996年有完整随访     

p27基因在喉鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨喉鳞癌p27基因表达水平及其临床意义.方法用原位杂交方法检测49例喉鳞癌、19例声带息肉、12例癌旁增生组织及8例非典型增生组织中p27的表达.结果喉鳞癌组织p27阳性表达率12.24%(6/49),声带息肉63.16%(12/19),癌旁增生组织33.33%(4/12),非典型增生组织25.00%(2/8),喉鳞癌组织p27mRNA表达显著低于其他各组(P＜0.05),与临床分期有显著相关性(P＜0.05).结论喉鳞癌组织中存在p27基因的低表达,与喉癌临床分期显著相关.     

喉鳞癌组织中p15蛋白表达的研究

1994年 ,美国 Beach研究小组克隆了 p1 5基因。它定位于 9号染色体 p2 1 ,是一种能抑制细胞过度增殖的细胞周期调节基因 ,在白血病、神经胶质瘤、肺癌、黑色素瘤、骨肉瘤、非霍奇金淋巴瘤等多种肿瘤中 ,发现 p1 5基因的纯合子缺失或过度甲基化导致该基因的失活。本研究采用 LSAB免疫组化方法 ,检测了 p1 5基因在喉鳞癌组织和声带息肉良性组织中的蛋白表达情况。1　材料和方法1 .1 　 研究对象55例喉鳞癌标本及 1 0例声带息肉标本均取自华西医科大学第一临床医学院病理科 1 988～1 995年手术切除喉鳞癌组织石蜡标本 ,均有完整临床病理资料…     

喉鳞癌血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的　研究喉鳞癌组织中血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达及其临床意义。方法　用免疫组化ABC法对 33例喉鳞状细胞癌和 15例声带息肉标本进行血管内皮生长因子测定和肿瘤微血管密度 (microvesseldensity ,MVD )记数。结果　喉癌组织中VEGF的表达程度与MVD呈正相关(P <0 .0 1) ;喉癌组织中 ,VEGF阳性表达率高于声带息肉组织中的VEGF阳性表达率 (P <0 .0 1) ;VEGF表达与病人年龄、病变部位和喉鳞癌细胞分化程度无关 (P >0 .0 5 ) ;VEGF表达与喉鳞癌T分期和颈淋巴结转移呈正相关 (P <0 .0 1) ,而与病人预后呈负相关 (P <0 .0 1)。结论　VEGF在喉鳞癌中有高表达 ,VEGF的表达与新生血管密切相关 ,VEGF的表达程度与喉鳞癌T分期和颈淋巴结转移有关 ,可作为判断喉鳞癌病人预后的参考指标。     

p63基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

p63基因是由Osada于1998年发现的另一个p53基因家族成员，定位于3q27-3q29。p63与p53蛋白具有非常相似的结构和功能，目前已被认为是一个候选抑癌基因。我们应用原位杂交方法分别检测喉鳞状细胞癌、癌旁增生组织、非典型增生组织和声带息肉中的p63基因表达程度，藉以探讨     

喉鳞癌P53基因突变与癌恶性度的关系

应用结合聚合酶链反应的单链多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及ＤＮＡ序列分析（ＰＣＲ－ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）方法。检测６０例喉鳞癌石蜡包埋组织中Ｐ５３基因第５～第８外显子的突变。发现１９例发生Ｐ５３基因的点突变或碱基缺失，均引起氨基酸改变临床ＩＩＩ，ＩＶ期的突变检出率为５０％，远高于Ｉ、ＩＩ期检出率（１２．５％，２２．２％）；低分子癌突变检出率为６６．６％，高于中、高分化癌（４０．９％、１３．８     

树突细胞在喉鳞癌中的浸润及其临床意义

目的定量分析喉鳞癌组织中浸润性树突细胞的密度,探讨树突细胞(DC)在喉鳞癌患者临床分级、分期、淋巴结转移、预后中的作用. 方法重新制备40例喉鳞癌及10例喉正常黏膜的石蜡标本,应用免疫组织化学LSAB法检测S100阳性树突细胞的浸润密度,并与临床因素进行统计学分析. 结果 喉鳞癌中S100DC细胞的阳性率为77.5%,正常黏膜的阳性率为10%,差异有显著性(P<0.05);S100阳性DC浸润程度与喉鳞癌分化程度及分期差异有显著性(P<0.05);与淋巴结转移、预后差异无显著性(P>0.05).结论浸润性树突细胞的密度反映了喉鳞癌患者的抗肿瘤免疫状况,是判断临床分级、分期的重要指标.     

基质金属蛋白酶-2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨基质金属蛋白酶（MMP）-2在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测了63例LSCC及其中20例癌旁安全缘正常组织（ASM）和18例声带息肉（VCP）中MMP2的表达。结果：MMP2在LSCC、VCP和ASM中的阳性率分别是66．7％、33．3％、15．0％，3者之间均差异有统计学意义（均P〈0．05）；在I．SCC不同病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级间表达存在差异（均P〈0．05）；在LSCC淋巴结转移与非转移者间的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；在不同临床分期及不同年龄组间的表达差异无统计学意义。结论：MMP-2可能只在LSCC发生及发展中起重要作用，而与LSCC的转移无关。     

p73和PCNA的表达与喉鳞状细胞癌的预后

目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）中p73、增殖细胞核抗原（PCNA）基因的表达与患者临床、病理参数和预后的关系。方法：采用免疫组织化学SABC技术检测65例LSCC组织及23例癌旁组织中p73、PCNA基因的表达情况。结果：p73、PCNA蛋自在65例LSCC组织中的表达水平较23例癌旁组织明显增强（均P〈0．05）。65例LSCC组织中,p73蛋自在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、远处转移及复发患者中的表达水平较Ⅰ～Ⅱ期、无转移及初发患者表达增强（P〈O．05）。PCNA蛋自在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者、低分化癌、复发患者和有颈淋巴结转移及远处转移患者中的表达水平较Ⅰ～Ⅱ期、高中分化、初发患者和无转移患者中的表达增强（P〈O,05）。PCNA蛋白的表达与患者预后明显相关。经Cox比例风险模型进行分析,PCNA表达是患者预后不良的重要指标（其相对危险度RR=2.43,P〈0．05）。LSCC组织中p73、PCNA的基因表达存在正相关性（P〈0、05）。结论：p73蛋自在LSCC的发生、发展过程中可能扮演了癌基因的角色。PCNA蛋白的表达与LSCC的危险性存在密切关系,可作为判断LSCC患者预后的重要指标。LSCC中p73、PCNA的表达存在正相关关系。     

喉鳞状细胞癌组织中p63表达的临床意义

目的：探讨p63基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法：用免疫组织化学法检测63例喉鳞状细胞癌（喉癌组）及其45例癌旁组织（癌旁组）、24例转移淋巴结（转移淋巴结组）、40例未转移淋巴结（未转移淋巴结组）及25例喉非癌组织（非喉癌组）中p63基因的表达。结果：p63基因在喉鳞状细胞癌组织中均为细胞核阳性表达,喉癌组及转移淋巴结组的中、强阳性率为95．2％（60／63）和83．3％（20／24）;癌旁组及未转移淋巴结组中无中、强阳性表达;非喉癌组中1例乳头状瘤为弱阳性表达,其余均为上皮细胞或基底细胞核弱阳性表达。结论：p63可作为喉鳞状细胞癌有特异性的标记物,对喉鳞状细胞癌的早期诊断和鉴别诊断有重要意义。p63可能主动参与了调控喉鳞状细胞癌的发生过程,但在喉鳞状细胞癌的发展过程中处于被激活状态,可能在发展过程中发挥负反馈的作用。     

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

喉鳞状细胞癌中Survivin和PTEN基因的表达及临床意义

目的：探讨凋亡抑制基因Survivin和抑癌基因PTEN在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学Envision法检测71例LSCC标本中Survivin、PTEN蛋白的表达，并以10例声带息肉组织为对照。结果：Survivin蛋白在声带息肉中不表达；在71例LSCC中，53例（74．6％）表达阳性；Survivin阳性表达率与LSCC患者的年龄、性别、肿瘤大小均无相关性（均P〉0．05），均与肿瘤发生部位、临床分期、病理分级、淋巴结转移、预后有关（均P〈0．05）。PTEN蛋白在声带息肉中强表达（100%）；在71例LSCC中，33例（46．5％）表达阳性；PTEN阳性表达率与LSCC患者的年龄、性别、肿瘤大小、发生部位均无相关性（均P〉0．05），均与临床分期、病理分级、淋巴结转移、预后有关（均P〈0．05）。在LSCC组织中Survivin与PTEN的表达呈负相关（P〈0．05）。结论：Survivin、PTEN基凼的异常表达与LSCC的发生、发展及预后有关，可作为评价LSCC生物学行为的重要参考指标。二者在LSCC的发生、发展中起协同作用。     

表达HPV16-E6/E7基因的人喉鳞癌细胞系的建立

目的建立表达HPV16-E6/E7基因的人喉鳞癌细胞系。方法用阳离子脂质体基因转染技术将携带有HPV16-E6/E7DNA的真核表达质粒导入体外连续传20代的HPV阴性的Lscc-02喉鳞癌细胞系,采用PCR和Western blot检测HPV16-E6/E7基因在Lscc-02细胞系中的整合和表达。结果第22代和第35代细胞中,PCR和Western blot均分别检测出E6/E7基因和蛋白的存在,显示HPV16-E6/E7基因整合于Lscc-02细胞系中并能稳定表达。结论成功建立了表达HPV16-E6/E7基因的人喉鳞癌细胞系,为进一步研究HPV16-E6/E7基因在喉癌细胞中的作用机制以及喉癌的基因治疗奠定了基础。     

喉鳞状细胞癌中BAG-1和 p53基因的表达及其临床意义

目的：研究BAG-1和p53基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达,探讨BAG-1在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用及与p53的关系。方法：运用免疫组织化学SP技术,检测40例喉鳞状细胞癌组织,27例喉癌旁正常组织及20例声带息肉组织中BAG-1与p53的表达。结果：BAG-1在喉癌中表达阳性率为72．5％,较喉癌旁组织（18．5％）、声带息肉组织（20．0％）高（P〈0．05）,其表达与预后呈负相关（P〈0．05）;p53在喉癌中表达阳性率为65．0％,而在喉癌旁组织和声带息肉组织中均无表达,与在喉癌组织中的表达相比差异有统计学意义（P〈0．05）;其表达与病理分化程度、颈淋巴结转移及预后呈负相关（P〈0．05）;在喉癌组织中BAG-1与p53表达之间未见显著性相关（P〉0．05）。结论：BAG-1和p53基因的过度表达与喉鳞状细胞癌的发生、发展存在一定的关系。BAG-1可作为早期诊断喉癌的一种生物标记,尤其是细胞核BAG-1定位可作为一种不良预后的预测因子;p53表达与喉癌颈淋巴结转移有关,可单独作为喉癌的预后指标。     

喉鳞状细胞癌和喉乳头状瘤中Survivin表达的意义

目的：探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌和成人喉乳头状瘤中的表达及其意义。方法：应用免疫组化方法对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和20例喉乳头状瘤以及16例正常喉粘膜标本中Survivin的表达进行检测。结果：Survivin蛋白在喉癌组织、癌旁组织和喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71.74%（33/46）、33.33%（8/24）和40.0%（8/20）,在正常黏膜组织中没有表达,喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织及喉乳头状瘤中的表达率（均P〈0.01）。且发生恶变的喉乳头状瘤Survivin蛋白均为阳性表达。但Sur-vivin阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论：Survivin在喉癌组织中过度表达,参与了喉癌的形成,是喉癌形成的一个早期事件,可望成为预测成人喉乳头状瘤恶变的一个诊断方法。     

6种基因蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨p15、p16、Rb、p27、p53及PCNA基因蛋白在不同分期、不同部位和不同分级的喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达和临床意义。方法:用免疫组织化学染色SP法对65例LSCC进行染色,30例正常黏膜为对照组,检测p15、p16、Rb、p27、p53及PCNA基因蛋白的表达,并进行统计学分析。结果:6种基因蛋白的表达在正常黏膜和LSCC中的差异有统计学意义(均P<0.01)。且p15和p27表达不仅和LSCC生长部位相关,而且和临床分期、分化程度相关。p16蛋白表达与LSCC的病理分级呈负相关,PCNA蛋白的表达与LSCC的病理分级呈正相关,两者的表达均与临床分期和肿瘤生长部位无关。而LSCC生长越晚期,Rb、p53蛋白的表达,前者呈下降,后者呈上升状态,且p53蛋白的表达和恶性程度呈正相关。结论:p15和p27基因表达的缺失是LSCC发生发展的重要过程,对两者的检测在LSCC的治疗和预后方面有一定意义。p16和PCNA反映肿瘤细胞的增殖状态,与肿瘤的发生有关,与肿瘤的发展过程无关。而Rb、p53基因表达多与肿瘤的发展过程相关。     

复发喉鳞状细胞癌相关基因表达谱研究

目的：筛选与复发喉鳞状细胞癌相关的基因。方法：用包含18000个cDNA的基因芯片法检测2例复发喉鳞状细胞癌标本的癌组织及喉正常黏膜组织mRNA表达谱，通过对比分析寻找与复发喉鳞状细胞癌相关的基因。结果：①重复且相差3倍以上差异表达基因共218个，其中喉癌组织表达上调的基因137个，表达下调的基因81个；②表达相差10倍以上的基因4个，分别为U02570、AW863712、AA523939和NM_014381。结论：复发喉鳞状细胞癌的发生是一个多基因表达失调的过程，可能主要与GTP酶活化蛋白及DNA错配修复有关。