CVB3VP1蛋白和重组腺病毒单独及联合应用的免疫效果

[目的]观察柯萨奇病毒B3(coxsackievirus group B type3,CVB3)VP1蛋白和重组腺病毒Ad/vp1单独及联合应用的免疫效果。[方法]大量扩增重组腺病毒Ad/vp1,制备并纯化CVB3/VP1蛋白,肌肉注射免疫BALB/c小鼠。小鼠随机分为4组:腺病毒组:肌肉注射Ad/vp1,共2次;蛋白组:注射VP1蛋白,共3次;腺病毒/蛋白组:第1次注射Ad/vp1,第2、3次注射VP1蛋白;PBS对照组。各次注射间隔时间为3周。腺病毒每次接种4×107pfu/只,VP1蛋白每次接种100μg/只。用中和试验法和ELISA法分别检测每次免疫后血清中和抗体和IgG抗体滴度;CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和CTL杀伤活性;用致死量病毒感染后检测血中病毒滴度,并观察小鼠的生存情况。[结果]中和抗体滴度及血清特异性IgG抗体水平随免疫次数增加而提高,末次免疫后,蛋白组(71.26±1.31,33779.40±1.46)、腺病毒/蛋白组的(56.56±1.44,22286.09±1.36)中和抗体及IgG抗体滴度明显高于腺病毒组(16.82±1.37,800±1.63)(P﹤0.05);蛋白组、腺病毒/蛋白组、腺病毒组的CTL杀伤活性明显高于PBS组(P﹤0.05);用致死量CVB3感染后,蛋白组、腺病毒/蛋白组的血中病毒滴度低于其他组,而生存率高于其他组(P﹤0.05)。[结论]蛋白组、腺病毒/蛋白组免疫小鼠的效果明显优于腺病毒组和PBS组。     

热毒宁注射液治疗小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的实验研究

目的:观察热毒宁注射液对实验性小鼠柯萨奇B3病毒(CVB3)性心肌炎的疗效。方法:60只雄性BALB/c鼠随机分为正常对照组、模型组、病毒唑组和热毒宁组,每组15只。模型组、病毒唑组和热毒宁组小鼠腹腔接种柯萨奇B3病毒稀释液后当天,分别对病毒唑组和热毒宁组给予腹腔注射病毒唑0.135 g/kg、热毒宁注射液7.2 ml/kg,每日给药1次,共7日。将接种病毒当日定为第1天,小鼠饲养至第14天处死。观察小鼠生存率、心肌病变积分、心肌CVB3病毒滴度测定及血清CK-MB检测。结果:①14天生存率:模型组为46.7%,热毒宁组为80.0%,病毒唑组为66.7%。热毒宁组生存率明显高于模型组及病毒唑组。②心肌病变积分:热毒宁组(1.85±0.60)低于模型组(3.54±0.85)和病毒唑组(2.36±0.38),组间相比差异有统计学意义(P<0.05)。③心肌病毒滴度:热毒宁组(1.35±0.35)较病毒唑组(1.78±0.42)和模型组(3.43±0.53)有降低,组间相比差异有统计学意义(P<0.05)。④血清CK-MB检测:热毒宁组和病毒唑组CK-MB均较模型组显著降低,而二者相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:热毒宁可能成为一种治疗小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的有效药物,其治疗作用优于病毒唑。     

IL-10对CVB3病毒性心肌炎治疗作用的研究

目的 探讨外源性的白介素(IL)-10对柯萨奇B3病毒(CVB3)性心肌炎小鼠治疗作用的机制.方法 将84只Balb/c小鼠随机分为正常组、感染组和治疗组.感染组和治疗组用CVB3感染Balb/c小鼠制备病毒性心肌炎小鼠模型,然后治疗组给予重组小鼠(m)IL-10治疗5天,正常组和感染组在同一时间腹腔注射磷酸盐缓冲溶液,观察小鼠发病及死亡情况,在不同时间段,测定小鼠心肌病毒滴定度、病理积分及心肌组织中IL-2与肿瘤坏死因子的表达,并进行比较.结果 3组小鼠的生存率(χ2=10.562,P<0.01)、不同时期病理积分(F=3.587～5.794,均P<0.01)及心肌IL-2和肿瘤坏死因子-α的表达均具有显著性差异(均P<0.01).感染组和治疗组心肌病毒滴度无明显差异(F=8.389,P>0.05).结论 IL-10不能降低心肌病毒滴度,但能减少心肌组织中IL-2和肿瘤坏死因子-α的表达,对早期病毒性心肌炎有治疗作用.     

草血竭纯化部分对小鼠甲型H1N1流感的疗效

目的探讨草血竭纯化部分对于小鼠甲型H1N1流感的疗效。方法采用滴鼻法建立甲型H1N1流感病毒感染小鼠模型,通过灌胃途径给予不同剂量的草血竭,以给予奥司他韦者为阳性对照,以未给予药物者为病毒对照组。观察14d内小鼠生活状态,计算小鼠肺指数,检测肺组织内流感病毒核酸相对量和病毒滴度。结果甲型H1N1流感病毒对小鼠的半数致死量为10-6。阳性对照组和草血竭高、中剂量组小鼠的存活率均为100%,平均生存日数均为14d,草血竭低剂量组小鼠的存活率为42.86%,平均生存日数为9.14d,而病毒对照组小鼠的存活率及平均生存日数分别为0和3.57d。不同组别小鼠平均生存日数比较,差异有统计学意义(F=8.53,P=0.02);阳性对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠平均生存日数均高于病毒对照组(P0.05)。阳性对照组和草血竭高剂量、中剂量、低剂量组及病毒对照组肺指数分别为:(0.84±0.07)%、(0.81±0.07)%、(0.84±0.10)%、(0.84±0.10)%和(1.42±0.12)%,差异有统计学意义(P=0.03);病毒核酸相对量分别为:0.37±0.11、0.42±0.06、0.42±0.06、0.65±0.19和1.00±0.06,差异有统计学意义(P=0.04);病毒滴度分别为:2.49±0.12、2.35±0.29、2.43±0.15、2.46±0.12和2.80±0.16,差异有统计学意义(P=0.04)。阳性对照组和草血竭各剂量组的肺指数、肺组织内流感病毒核酸相对量和病毒滴度均低于病毒对照组(P0.05);而阳性对照组的上述指标与草血竭各剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论草血竭纯化部分在体内对甲型H1N1流感病毒具有抑制作用,能够改善甲型H1N1流感小鼠的肺组织的病变,降低病死率。     

番石榴叶水提取物对糖尿病小鼠胰岛形态结构和功能的影响

目的研究番石榴叶水提取物(WE)灌胃处理后,糖尿病小鼠胰岛形态结构及其胰岛素合成表达功能的改变。方法通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠模型,水提取物灌胃处理,4周后进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),HE染色观察胰腺组织病理形态学改变,免疫组化(IHC)和图像分析技术观察分析胰岛β细胞胰岛素表达量,试剂盒法检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果与糖尿病模型对照组(DM)相比,水提取物组糖尿病小鼠禁食3h空腹血糖水平下降33.4%,葡萄糖耐量明显改善;胰岛体积缩小、形状不规则及β细胞变性等病理改变明显减轻,β细胞数量增多,单位面积内胰岛素表达量明显上升;肝脏组织GSH水平显著升高。结论番石榴叶水提取物对糖尿病小鼠胰岛具有保护作用,作用机制可能是通过抗氧化作用减轻小鼠胰岛β细胞结构和功能的损伤。     

小鼠子宫腺肌病模型的建立及ER的表达

目的探索用ICR小鼠建立子宫腺肌病实验动物模型及其ER表达的可靠性和有效性。方法取已达到性成熟未曾受孕的7周龄雌性ICR小鼠开腹行异体脑垂体子宫内移植手术以建立子宫腺肌病模型,小鼠分别在垂体移植术4个月后（n=19）,6个月后（n=8）处死,取出子宫,计数其表面突出的子宫腺肌病结节,组织切片HE染色,ER免疫组化染色,评估子宫腺肌病的严重程度,并与对照组（n=8）及手术未移植组（n=6）比较。结果移植组4个月后,经大体结节观察及组织切片HE染色证实,89％经垂体移植术后可诱发子宫腺肌病形成;移植组6个月后,均诱发子宫腺肌病结节形成（100％）,且形成的结节比移植术后4个月更加明显;对照组及手术未移植组小鼠均未发现有子宫腺肌病的形成;但各组小鼠子宫大体结节数、HE评分及ER表达的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论选择ICR小鼠经垂体移植手术后4—6个月建立子宫腺肌病模型,其ER的表达很稳定;ICR小鼠是建立子宫腺肌病理想的实验动物模型。     

钩端螺旋体感染的ICR小鼠模型与豚鼠模型的比较分析

[目的]通过比较钩端螺旋体感染的ICR小鼠模型与豚鼠模型,分别探讨慢性非致死性感染与急性致死性钩体感染的病理及免疫应答特点.[方法]分别于小鼠和豚鼠腹股沟皮下注射致病性钩端螺旋体赖型有毒株Lai株,观察感染后不同阶段此各组织脏器的病理改变;用免疫组化法检测钩端螺旋体在各脏器中的分布;应用ELISA法检测ICR小鼠血清与豚鼠血清中抗体水平的动态变化.[结果]钩端螺旋体Lai株感染豚鼠后引发典型的钩体病病变并可致死,但在藤染的ICR小鼠中仅见局限性病变,免疫组化显示小鼠组织中的钩体抗原阳性反应程度较豚鼠轻.两种动物感染后均未见明显炎症反应.二者血清中抗体IgG水平的动态变化相似.[结论]小鼠感染钩体后发病轻微呈慢性带菌状态,而豚鼠作为钩体感染敏感动物表现为急性发病且可死亡,可能与二者的天然免疫机制的差异有关.小鼠感染模型在钩体感染的天然免疫机制、致病机制研究及流行病学研究中可能发挥更多作用.两种动物模型可互补共同用于钩体感染的相关研究中.     

乙型肝炎孕妇巨细胞病毒感染的分析

目的:探讨孕妇巨细胞病毒(CMV)的感染是否受乙型肝炎病毒的影响以及乙型肝炎孕妇CMV的感染方式。方法:采用ELISA法检测342例乙型肝炎孕妇和484例非乙型肝炎孕妇CMV-IgG、CMV-IgM。对于CMV-IgM阳性血清采用倍比稀释法检测CMV-IgG的滴度,3周后抽血复检CMV-IgM,同时采用倍比稀释法检测CMV-IgG的滴度,并与之前的滴度进行比较。结果:乙型肝炎孕妇组与非乙型肝炎孕妇组的CMV-IgG、CMV-IgM阳性率相近,差异无统计学意义(P>0.05)。乙型肝炎孕妇组的复发感染率明显高于非乙型肝炎孕妇组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:孕妇CMV的感染不受乙型肝炎病毒的影响,乙型肝炎孕妇CMV的感染以复发感染为主。     

浙江省病毒性脑炎病原柯萨奇B1病毒分子特征研究

目的:为了查明引起2008-2009年浙江省疑似病毒性脑炎的病原,分析病原的分子特征。方法:采用Hep-2和RD细胞从疑似患者脑脊液样本中分离肠道病毒,对分离株扩增VP1基因,测序并进行同源性与进化分析。结果:从患者11份脑脊液样本中分离到4株柯萨奇B1病毒(CVB1);测得VP1基因全长为834核苷酸(nt),无插入和缺失,推导编码278个氨基酸(aa)。4株浙江CVB1分离株(ZJ/CVB1)之间在VP1区nt和aa的同源性分别为96.3%~99.9%和100%。浙江CVB1分离株BLAST比对nt同源性最高的毒株为2006年山东株(SD/168/06),同源性为98.7%;与CVB1原型株(Conn-5/86)的nt同源性为78.9%。VP1区氨基酸进化树显示浙江CVB1分离株在CVB1 Clade3进化支上,与浙江株亲缘关系最近的毒株为山东CVB1株,均在同一进化支上。结论:从病毒分离结果证实浙江省疑似病毒性脑炎是由肠道病毒CVB1引起,2008-2009年在浙江循环的CVB1病毒之间没有明显差异,浙江CVB1流行株与山东株亲缘关系最近。     

柯萨奇病毒B3感染大鼠心室肌钙通道基因表达及其功能变化

目的探讨柯萨奇病毒B3(CoxsackieviruB3,CVB3)感染大鼠心室肌钙通道的基因表达特点及其功能改变。方法取1~3日龄新生SD大鼠15只行心室肌细胞原代培养,将培养48 h且已形成规律搏动的心室肌细胞随机分为病毒感染组(CVB3株感染培养,n=8)与正常对照组(n=7),比较两组大鼠的细胞形态、结构变化特点等;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组大鼠L型钙通道亚单位mRNA的表达;应用全细胞膜片钳技术对CVB3感染前后心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)变化进行测定,记录细胞膜电容(Cm)、电流密度、电压依赖性激活与失活等动力学参数。结果正常心室肌细胞主要表现为三角形、梭形、多边形等形态,搏动规律有力,搏动细胞百分比>95%;接种CVB3培养3 d后细胞搏动开始减慢且呈不规律搏动,细胞变圆、扁梭,折光性增强,最终停止搏动、脱落、死亡;CVB3感染3 d后,溶酶体增多,线粒体空泡变形,细胞核肿胀,核膜破裂。病毒感染组心室肌细胞L型钙通道α1和β亚单位mRNA表达水平分别为(4.02±0.07)、(2.08±0.06)均高于正常对照组(P<0.05);而两组α2/δ亚单位mRNA表达水平差异无统计学意义。在-20~+10 mV测试电压下,病毒感染组ICa-L密度为(-8.65±0.99),较正常对照组明显增加(P<0.05);但CVB3感染培养对大鼠心室肌细胞Cm、电压依赖性激活与失活特性无显著影响。病毒接种后第4天,病毒感染组CVB3特异蛋白基因片段RNA均为阳性,正常对照组CVB3特异蛋白基因片段RNA均为阴性,差异有统计学意义(P<0.05),病毒感染组病毒接种1~4 d CK-MB浓度均高于正常对照组(P<0.05)。结论 CVB3感染大鼠心室肌细胞L型钙通道α1和β亚单位mRNA表达上调,ICa-L密度增大,可能是CVB3感染对心室肌细胞产生损伤作用的病理机制。     

肠道菌群失调对流感病毒感染小鼠急性肺损伤的影响

目的 探讨肠道菌群失调对流感病毒感染小鼠急性肺损伤的影响及作用机制。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、流感病毒对照组、甲硝唑模型组,每组12只。甲硝唑模型组小鼠用甲硝唑（18 mg/mL）连续灌胃8 d,于d9滴鼻甲型流感病毒A/PR/8/4稀释液（103pfu/鼠）,构建肠道菌群失调小鼠感染流感病毒的模型。观察各组小鼠肺组织及盲肠的病理变化,检测肺组织中脂多糖LPS及炎性相关因子肿瘤坏死因子 - α（Tumor necrosis factor - α,TNF - α）、白介素 - 1β（Interleukin - 1β, IL - 1β）、白介素 - 6（Interleukin - 6,IL - 6）、干扰素 - β（Interferon - β,IFN - β）水平,并采用免疫组织化学染色法定位肺组织Toll样受体4（Toll - like receptor 4, TLR4）表达情况。结果 甲硝唑模型组小鼠肺及盲肠组织炎症损伤和病理改变情况较比病毒对照组更加严重,同时小鼠肺组织中LPS含量显著增加,差异有统计学意义（P＜0.05）,TNF - α、IL - 1β、IL - 6、IFN - β水平明显升高（P＜0.05）。TLR4在甲硝唑模型组小鼠肺组织中的表达明显高于病毒对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 肠道菌群失调引起LPS/TLR4通路激活,从而上调小鼠肺组织流感病毒所致的炎性风暴,进一步加重流感病毒引起的组织病理改变。     

Vaccination with coxsackievirus B3 virus-like particles elicits humoral immune response and protects mice against myocarditis

Coxsackievirus B3 (CVB3), along with other enteroviruses, is involved in about 50% of myocarditis cases and in the pathogenesis of dilated cardiomyopathy. Prevention of CVB3 infection is therefore highly desirable. Virus-like particles (VLPs) are structurally similar to native virus particles and therefore are far better immunogens than any other subunit vaccines. Recombinant baculoviruses carrying either the intact, entire coding region of CVB3 or the four individual coding regions for virus proteins 1-4 (VP1-4) were constructed. Expression of CVB3 capsid proteins in insect cells infected with recombinant baculovirus was detected by immunofluorescence and Western blot analysis. Sucrose gradient ultracentrifugation fractions of the infected cell lysates contained peaks of CVB3 antigen with an approximate density of 1.14g/ml. Electron microscopy demonstrated the presence of VLP in these sucrose fractions. The CVB3 VLP was non-infectious in tissue culture. SWR (H-2(q)) mice vaccinated with CVB3 VLP developed antibodies to CVB3 capsid proteins after the first boost. Antibody titre was comparable to the level induced by an attenuated CVB3 vaccine. Vaccinated animals were protected from myocarditis when subsequently challenged with cardiovirulent CVB3 (chimera-2). Vaccination with VLP produced from the complete CVB3 coding region gave a greater immune response and afforded better protection than with VLP from the quadruple expression vector. These results demonstrate that CVB3 capsid proteins expressed in insect cells have the intrinsic capacity to assemble into non-infectious VLP, which afforded protection from CVB3 infection to mice when used as a vaccine.     

西布曲明对肥胖小鼠葡萄糖代谢的影响

目的:探讨西布曲明干预对高脂饮食诱导肥胖ICR小鼠葡萄糖代谢的影响。方法:高脂饲料喂养雄性ICR小鼠8周,建立肥胖小鼠模型。西布曲明(7 mg.kg-1.day-1)灌胃干预8周。然后行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)、胰岛素耐量试验(ITT)及microPET显像;测量小鼠的体重、脂肪组织重量及血生化指标;实时荧光定量RT-PCR方法检测肌肉组织中糖代谢相关基因的相对表达量。结果:西布曲明干预组小鼠体重显著减轻(P<0.05),皮下脂肪、内脏脂肪重量显著降低(P值均小于0.01),空腹血糖显著降低(P<0.05)。ITT试验中,西布曲明干预组小鼠各时间点血糖均低于对照组,差异在90分钟时有显著性(P<0.05);血糖的曲线下面积也显著低于对照组(P<0.05)。另外,西布曲明干预组小鼠的棕色脂肪摄取葡萄糖增多(P<0.05),但肌肉组织内糖代谢相关基因GLUT4、GYS1、HK2、PGC1、IRS1和MSTN的表达量没有显著改变。结论:西布曲明可以减轻小鼠体重,减少白色脂肪重量,增加棕色脂肪代谢能力并在一定程度上改善肥胖小鼠的胰岛素敏感性;西布曲明改善肥胖小鼠葡萄糖代谢的作用可能与肌肉组织中的GLUT4、GYS1、HK2、PGC1、IRS1和MSTN的表达水平无关。     

Attenuation of coxsackievirus B3 by VP2 mutation and its application as a vaccine against virus-induced myocarditis and pancreatitis

Coxsackievirus B3 (CVB3) is a common agent of viral myocarditis, a major cause of sudden cardiac death, and ultimately dilated cardiomyopathy. However, there is no vaccine in clinical use. In this study, we identified the conserved amino acid sequences in the C-terminal region of the VP2 of the coxsackievirus B group and some echoviruses. The mutant virus, YYFF, with phenylalanines substituted for two tyrosines in these conserved sequences was highly attenuated in vivo and could induce a high neutralizing antibody titer and a cytotoxic T-lymphocyte response against CVB3. Thereby, mutant-virus-immunized mice showed a 100% survival rate and protection against inflammation of the heart and pancreas after lethal dose challenge. Thus, this mutant virus is a good candidate for an attenuated CVB3 vaccine.     

金黄色葡萄球菌感染乳腺炎小鼠T淋巴细胞亚群水平变化

目的探讨金黄色葡萄球菌感染乳腺炎小鼠T淋巴细胞亚群水平变化。方法采用金黄色葡萄球菌乳头管灌注法制备乳腺炎模型小鼠;将小鼠分为空白组(B)、对照组(C)、感染24 h(M1)、感染72 h(M2)、感染120 h(M3)5个试验组,于试验结束时观察各试验组小鼠健康状况、乳腺组织病理变化,并测定各试验组小鼠体温、体质量、外周血细胞分类数量、乳腺组织菌落数,测定白细胞介素-6(IL-6)、IL-17A、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平。结果模型小鼠(M1、M2、M3)的健康状况、病理切片观察和乳腺组织学指标均低于B、C组,体质量、细菌菌落数、炎症细胞数目与B、C组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且随着感染天数增多,细菌菌落数与炎症细胞数目呈增长趋势(P<0.05);模型小鼠(M1、M2、M3)乳腺组织IL-6、IL-17A、TGF-β1、TNF-α蛋白表达水平和Th17/Treg细胞亚群数目及比例高于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论金黄色葡萄球菌感染致产后小鼠实验性乳腺炎模型小鼠的乳腺状况、相关细胞因子表达水平、Th17/Treg细胞亚群数目及比例随感染天数增加。     

不同培养基对阪崎肠杆菌侵袭作用影响的分析

目的分别使用脑心培养基、普通肉汤培养基、CAYE培养基增菌的阪崎肠杆菌新疆分离株侵袭ICR乳鼠,对其组织器官病变特征进行分析。方法阪崎肠杆菌新疆分离株经不同培养基培养后,对3-4日龄ICR乳鼠灌胃4 d、7 d后,无菌解剖取乳鼠肠、肝、脾、肾等组织,石蜡切片,HE染色,光镜观察。结果脑心培养液组、普通肉汤组病变特征相似,均出现肝组织弥漫性点状坏死,肾组织可见鲍曼囊消失,近曲管上皮细胞嗜酸性变化较轻;CAYE培养基组肝组织病变与脑心培养液组、普通肉汤组病变特征相似,肾组织有明显的近曲管上皮细胞嗜酸变性、崩解,结肠、直肠黏膜上皮细胞嗜酸变性,黏膜下层血管扩张充血。结论阪崎肠杆菌新疆分离株经CAYE培养后,对乳鼠器官产生损伤较为严重,尤以肝广泛点状坏死为著,推测其对人体具有潜在危害。     

HCMV AD_(169)感染小鼠模型的建立

目的探讨用HCMVAD169病毒株建立小鼠感染动物模型的可行性。方法 BALB/c近交系小鼠30只,随机分为三组,分别为病毒感染组、免疫抑制病毒感染组、正常对照组,病毒接种途径为腹腔注射。观察动物的变化,取各组小鼠全血分离有核细胞,用直接荧光免疫法检测CMVpp65早期抗原,以病理学方法检测动物组织器官的损伤特点。结果接种了病毒的二组小鼠都出现了明显体重不增、皮毛稀松、生长迟缓等病症,肺、肠、涎腺等组织器官发生了广泛病理损害,免疫抑制病毒感染组小鼠血液有核细胞内发现了pp65抗原阳性细胞。结论将HCMVAD169株接种BALB/c近交系小鼠建立感染模型是可行的,在机体免疫抑制状态HCMV可激活感染。     

Copper deficiency increases the virulence of amyocarditic and myocarditic strains of coxsackievirus B3 in mice

Deficiency in several trace elements, including copper and selenium, is associated with increased levels of oxidative stress. Copper deficiency also has been shown to impair immune function. Previous work by others demonstrated that passage of an amyocarditic or myocarditic strain of coxsackievirus B3 (CVB3) through selenium- or vitamin E-deficient mice led to increased cardiac pathology. To determine whether a copper deficiency would similarly alter the pathogenesis of CVB3 infections, Swiss outbred dams and their litters were fed copper-deficient diets from birth and received either deionized water or water with 0.315 mmol/L copper as copper sulfate. At 4 wk of age, copper-adequate or -deficient male and female offspring were infected with an amyocarditic or myocarditic strain of CVB3. Heart titers were elevated at d 3 and 7 postinfection in copper-deficient mice infected with the myocarditic CVB3 strain (CVB3/20) but only at d 7 in deficient mice infected with the amyocarditic CVB3 strain (CVB3/0) compared with copper-adequate controls. Copper-deficient mice infected with either strain of CVB3 had increased cardiac pathology compared with copper-adequate controls. Genomic sequences of viruses isolated from copper-adequate and -deficient mice were identical. Heart cytokine expression was elevated in copper-deficient CVB3-infected mice compared with infected controls. Circulating CVB3-specific IgG2a but not IgM levels were decreased in copper-deficient mice. Thus, copper deficiency is associated with an increased inflammatory response but decreased acquired immune response to CVB3 infection that results in increased cardiac pathology, presumably due to increased viral load.     

肠道病毒71型感染乳鼠脑组织白介素1β与白介素6水平的研究

目的 检测肠道病毒71型(EV71)感染乳鼠脑组织白介素1β(IL-1β)与白介素6(IL-6)水平变化,探讨EV71致中枢损害可能的发病机制。方法 1日龄120只ICR乳鼠随机分为感染组及对照组。腹腔注射法建立EV71感染乳鼠模型。荧光定量RT-PCR法检测脑组织中EV71载量。光镜观察脑组织病理变化。酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织匀浆液中IL-6与IL-1β含量。结果 感染组3 d、5 d与7 d乳鼠脑组织匀浆IL-1β浓度较对照组明显升高(P<0.01),感染组3 d、5 d、7 d与10 d乳鼠脑组织匀浆IL-6浓度较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),感染组1 d与14 d乳鼠脑组织匀浆IL-1β及IL-6浓度与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EV71感染乳鼠早期脑组织中IL-1β及IL-6含量明显升高,其介导的免疫反应可能是EV71致中枢损害可能的机制之一。