ELISA法检测乙型肝炎病毒前S1蛋白的室内质量控制

目的 制备以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒前S1蛋白的室内质控物,并对其应用价值进行初步评价.方法 留取前S1蛋白阳性的人混合血清样本,并用正常人血清将上述收集的血清稀释至所需浓度,与日常标本一起检测,用酶标仪在450nm波长下测光密度值(OD值),计算s/co值的-x±s,CV值,并用Excel软件绘制质控图.结果 自制室内质控物的s/CO值-x=1.93,s=0.26,CV=13.6%.结论 临床实验室可以用前S1蛋白阳性的混合血清样本制备其定性检测的质控物,其制备简单,且可以用Excel软件绘制L-J质控图,有一定的临床实用价值.     

自制人类免疫缺陷病毒抗体质控参考品的探讨

目的 探讨自制HIV抗体弱阳性质控血清作为室内质控参考品,对抗-HIV检测的结果进行质量控制、评价和分析并考核其稳定性,提高人类免疫缺陷综合征(AIDS)筛查的实验室检测质量.方法 采用阳性对照品自制临界的弱阳性血清,作为室内质控参考品.结果 依据HIV抗体弱阳性的标准,经20次试验检测确定按照1 ∶6稀释度(含HIV-1抗体)和1 ∶8稀释度(含HIV-2抗体)制备室内质控参考品,其质控参考品吸光度值/临界值(s/co)分别为2.58和2.62,变异系数分别为4.65%和4.32%.结论 自制HIV抗体室内质控参考品对HIV筛查实验室进行质量控制是经济、有效并值得推广的.     

抗-HIV质控血清解冻后结果的稳定性观察

ELISA测定抗-HIV必须用定值血清进行室内质控,定值血清的测定结果是否在控制范围内是判断本批检测数据可靠性的直接依据。市售抗-HIV定值血清常分装成0.5ml,-20℃冰冻密封保存。ILISA测定抗-HIV作室内质控的定值血清在临用前解冻,解冻后剩余的定值血清可否继续使用、其保存温度的选择以及不同温度条件下结果稳定性与稳定持续时间等未见有关报导。本实验将解冻后的抗-HIV定值质控血清分别放在不同温度保存,并在不同时间点分别测定其OD值,根据其变化确定其保存温度与使用期限。结果报告如下。1材料与方法1.1仪器与试剂全自动酶免分…     

凝血功能检测的室内质量控制初步研究

目的:对凝血功能检测的室内质量控制方法的建立进行探索。方法:以CLIA'88能力比对评价限设定为允许总误差(TEa),以每月一次的法国STA Compact公司的大范围室间质评结果计算Bias,以连续1年的凝血仪室内质控测定CV值为方法的不精密度(s),并以此为依据选择适合本实验室的质控规则。利用厂家推荐的分析批长度和质控品稳定时间为依据,进行本实验室的实际分析批长度和稳定时间的测定,通过实际的失控情况分析误差检出概率(Ped)和假失控概率(Pfr)选择满足临床要求的质控方法。结果:现行室内质控方法性能较好。质控规则的选择为:APTT使用13s/22s/R4s质控规则(n=2);Fib使用13s/22s/R4s/41s质控规则(n=2);PT使用13s/22s/R4s质控规则(n=2)。在室温达到30-35℃后,本实验室的实际分析批长度明显减低,尤其是APTT只有12小时,质控品温定时间也明显降低。结论:通过近一年的质控数据及本实验室实际分析批长度和质控品稳定时间的测定相结合建立的室内质量控制规则和方法可以满足达到临床工作要求的误差检出率和假失控率。     

两种不同血清稀释方法对抗HBc-IgM检测结果影响的探讨

目的探讨直接稀释和梯度稀释对血清进行1∶1 000稀释对抗HBc-Ig M检测的影响。方法按照美国临床实验室标准委员会EP9-A2文件的要求,以梯度稀释为参考系统,以直接稀释为对比系统,每天检测8份血清,双份重复测定,共测定5 d。对结果进行相关性分析以及对3个给定值进行预期偏倚评估。结果两种方法得到的稀释血清检测结果相关性良好,在临界值,室内质控平均值以及阳性对照的S/CO的平均值作为定值,计算预期偏差均为2.3%,在可接受范围之内,但在临界值时的预期值会1,影响结果判定。结论两种稀释方法得到的血清测定抗HBc-Ig M结果具有较好的一致性,均可用于抗HBc-Ig M的检测;同时提示实验室应结合实际设置合适的灰区。     

ELISA法检测献血者抗HIV的室内质控

目的：对献血者抗HIV进行室内质控。方法：在应用ELISA法检测献血者抗HIV的过程中，通过测定最佳条件变（OCV），常规条件变异（RCV）和绘制质控图来监测检验结果的准确性。结果：OCV为：x^-=4.56，s=0.500，CV=10.97%；RCV为：x^-=4.301，s=0.646，CV=15.02%。结论：RCV的s接近OCV的s，可用作质控图，对献血者抗HIV测定过程中的各种影响因素进行监控。     

双抗原夹心法与间接法检测抗-HIV(1+2)的比较

目的:选择灵敏度和特异性较高的筛选试剂,提高抗-HIV(1+2)的检出率,减少由于抗-HIV(1+2)假阳性导致的血液浪费.方法:采用双抗原夹心法和间接法试剂对卫生部4NCU/ml抗-HIV质控血清和1680名无偿献血者血清进行抗-HIV(1+2)平行检测.结果:双抗原夹心法检测以上血清灵敏度和特异性明显高于间接法,P<0.01.结论:用双抗原夹心法试剂检测抗-HIV(1+2),提高了HIV的检出率,减少了由于抗-HIV(1+2)假阳性导致的血液浪费.     

甲状腺激素质控血清与自制质控血清的比较

目的 建立甲状腺激素药盒中的质控血清与实验室自备混合血清质控图.方法 厂家提供质控血清和自备病人混合血清在相同条件下测定通过测定10批以后,画出质控图并分析评价实验的批内误差.结果 厂家质控FT3高值:26.8～46.2pmol/L,低值:2.17～4.68pmol/L,FT4高值:11.4～23.31poml/L,低值:2.39～4.85pmol/L;平均病人血清FT3高值:6.26～9.26pmol/L;低值:3.8～5.9pmol/L,FT4高值:18.4～28pmol/L,低值:6.95～10.69pmol/L.厂家FT3低值是3.157S是0.23,CV是7.2%;平均病人血清FT3低值是5.13,S是0.59,CV是11.5%;其中CV是批间变异系数,厂家质控的批号是ST5606.厂家FT3低值(pmlo/L)10批分别是:,3.1,3.1,2.97,3.2,3,3.3,3.2,3.5,3.5.自制病人值(pmol/L)是:5.2,5.2,5.3,4.5,2.8,35.5,5.5,5.2,4.9,4,5.结论 两种质控图的建立为控制实验室甲状腺激素检验的质量提供了有效的监测指标.     

酶法直接测定血清总胆固醇的方法探讨

我们采用酶偶联比色法测定血清总胆固醇,试剂空白≤0.080,线性范围0mmol/L～10.40mmol/L准确度与质控血清靶值相对偏差≤10%,精密度n=20、批内变异系数CV≤3%,批间极差CV≤5%,试剂为浙江东瓯生物工程有限公司。常规测定中已广泛应用酶法,酶法具有特异性好,精密度和灵敏度都能很好的满足临床实验室的要求,既可手工操作,也可自动分析。目前已成为测定总胆固醇的主要方法[1]。1原理血清中总胆固醇(totalcholesterol,TC)包括游离胆固醇(freecholesterol,FC)和胆固醇酯(cholesterolester,CE)两部分。血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离…     

荧光定量PCR检测HBV-DNA室内质控物的制备及初步应用

目的:利用混合血清自制荧光定量PCR HBV-DNA室内质控血清,并对其在日常工作中的应用进行评价.方法:分别留取进行健康体检的多人两对半全阴的血清作为基质,"大三阳"作为高值血清,"小三阳"作为低值血清,用全阴血清将高值和低值血清稀释至(5.0±2)×106拷贝/ml和(5.0±2)×103拷贝/ml两个水平.与临床样本采用荧光定量PCR方法同时检测,其结果计算X、S、CV值,并在Levery-Jennings室内质控图绘图,并结合应用Westgard多规则质控判断方法[1].结果:高值:X=6.758277(对数值),S=0.203284(对数值),CV=3.0%.低值:X=3.66921(对数值),S=0.32195(对数值),CV=8.77%.结论:利用混合血清制备的HBV-DNA室内质控物,其制备方便,结果稳定,有一定的实用价值.     

电极法酶法干化学法测定钾、钠结果的比较

目的:用不同的仪器和方法测定急诊生化项目钾、钠并对其结果进行比较和质控。 方法:通过实验比对的方法,以及对新鲜标本和质控血清进行检测结果比较。 结果:不同的仪器和方法测定钾、钠,其精密度均好(CV:0.7-1.7),线性范围、回收率均符合要求,重复性良好,批内批间CV(变异)系数均在允许范围内,r>0.95,t检验无显著差异,p>0.05,同一质控血清采用不同方法测定基质效应较小。 结论:试验结果显示方法学,酶法、干化学法和电极法有较好的相关性,同一实验室不同方法间定期比对校正是分析结果的精密度好和准确性高的保证。校正后电极法酶法和干化学法做室内质控时可使用同一质控血清和同一靶值。     

电极法与酶法测定血清尿素氮 葡萄糖结果比较

目的　对不同原理 2种方法测定尿素氮 (BUN)、葡萄糖 (GLU)的结果进行对比、校准和质控 ,总结差异 ,指导临床治疗 ,判断预后。方法　用同 1种新鲜混合血清分别用 2种方法对BUN和GLU进行测定 ,分别计算精密度 ,计算线性方程和相关系数。取未知浓度血清分别测其浓度和加入标准品后浓度 ,计算准确度。观察同一质控血清 2种方法间基值效应。结果　 2种方法测定GLU和BUN的精密度较好 (CV :0 .81%～ 3.16 % )。不同仪器不同方法的GLU和BUN测定 ,无显著差异 (r >0 .972 ,P >0 .0 5 )。观察同一质控血清用 2种方法的基质效应较小。结论　同一实验室不同方法可以通过定期的对比、校准后 ,用同一质控血清、同一靶值 ,分析结果的精密度和准确性。 2种方法不存在显著性差异 ,其精密度、准确度、线性范围 ,均符合临床要求。     

血清门冬氨酸基移换酶测定的两种方法比较

目的 :为了提高AST的测定水平。方法 :采用速率法和比色法对三个水平的定值血清同时进行AST的重复性和高值血清的 10个稀释样本的准确性检测 ,并对以上两种方法所测结果进行统计学分析。结果 :两种方法的重复性尚可 ,三个质控血清速率法和比色法的 2 0次测定结果分别为 2 6 3 2± 1 76,CV =6 69% ,48 5 4± 2 17,CV =4 47% ,10 5 13± 3 61,CV =3 43 % ;2 7 65± 1 5 2 ,CV =5 5 0 % ,5 4 10± 2 0 3 ,CV =3 75 % ,96 78± 3 2 4,CV =3 3 5 %。速率法和比色法对 10个定值样本 2 0次测定值与预期值的符合率分别为 (96 2 8± 8 65 ) % ,CV =8 87% ;(97 15± 5 43 ) % ,CV=5 5 9%。两种方法准确性无明显差异 (t =0 3 81,P >0 0 5 )。结论 :以上两种测定血清AST差别不大 ,可以同时采用 ,以利工作。     

乙肝5项ELISA试剂盒CUTOFF值适用性的验证

目的 验证本实验室乙肝5项定性检测试剂盒的CUTOFF值是否适用于本实验室所属区域内的个体人群.方法 测定120份标本HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb-IgG,计算其检测结果OD值的均值(-x)和标准差s.夹心法试剂盒计算((-x)+3s)结果与试剂盒提供的CUTOFF值进行比较,竞争法计算((-x)-3s)结果与试剂盒提供的CUTOFF值进行比较.结果 各夹心法检测项目HBsAg、HBsAb、HBeAg其((-x)+3s)均小于相应CUTOFF值,各竞争法检测项目HBeAb、HBcAb-IgG其((-x)-3s)均大于其CUTOFF值.结论 本实验室所使用的乙肝5项ELISA试剂盒所选择的CUTOFF值适用于本实验室所属区域内的99％正常人群.     

ELISA检测抗—HCV室内质控探讨

室内质控作为临床安全用血的一个重要指标，越来越被人们所重视。我们开展了室内质控，取得了良好的效果，现将开展的抗—HCV检测室内质校报告如下。1材料及方法1．1抗—HCV检测临界值质控血清含量为2ng／ml，由卫生部临检中心提供。1．2仪器：296O型酶标测定仪及美国原装进口GBSUSA洗板机。1．3试剂：由厦门新创科技有限公司提供。1．4方法：用ELISA法检测抗—HCV，先格本室的OCV（最佳条件下已知值质控血清变异）的X和SD求出再将RCUK（常规条件下已知值质控血清变异）的X和SD值可用于质控图。质控血清随献血员标本一起测定…     

电极法与酌法测定血清尿素氮 葡萄糖结果比较

目的：对不同原理2种方法测定尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)的结果进行对比、校准和质控，总结差异，指导临床治疗，判断预后。方法：用同1种新鲜混合血清分别用2种方法对BUN和GIU进行测定，分别计算精密度，计算线性方程和相关系数。取未知浓度血清分别测其浓度和加入标准品后浓度，计算准确度。观察同一质控血清2种方法间基值效应。结果：2种方法测定GLU和BUN的精密度较好(CV：0．81％-3．16％)。不同仪器不同方法的GLU和BUN测定，无显著差异(r＞0．972，P＞0．05)。观察同一质控血清用2种方法的基质效应较小。结果：同一实验室不同方法可以通过定期的对比、校准后，用同一质控血清、同一靶值，分析结果的精密度和准确性。2种方法不存在显著性差异，其精密度、准确度、线性范围，均符合临床要求。     

两种HBsAg试剂检测定值血清的结果比较

室内质控(IQC)是评价实验室工作的可靠程度,保证实验室工作质量的主要措施.目前国内采供血机构都使用试剂盒对献血员进行筛选,因此在选用试剂盒时要尽可能选择灵敏度高,特异性强,重复性好的产品,这样定值血清在试剂盒的选择和检验过程中的监控就显得更加主要.为此我站从1999年5月开始选用定值血清对化验检测A1T、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV及梅毒的试剂盒进行连续室内质控以监控每批试剂的稳定性及灵敏度.     

艾滋病病毒抗体检测外部质控参考品制备和应用

目的 制备艾滋病抗体检测的外部质控参考品,以保证艾滋病筛查实验室的检测质量.方法 用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清稀释阳性对照的方法 ,经过国产试剂检测,制备出弱阳性标本的质控参考品,并绘制质控图.结果 根据HIV抗体弱阳性的标准,确定按照1:8稀释度制备外部质控血清,其质控物吸光度值/临界值(S/CO)为2.54,变异系数为15.2%.结论 自行制备的HIV抗体弱阳性标本质控参考品用于HIV筛查实验室的质量控制和评价是经济可行的.     

HBV-DNA检测试剂的性能评估与室内质控数据评价

参照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)文件,对临床检验使用的实时荧光定量PCR扩增检测试剂盒定量结果的精密度、正确度、定量限、线性范围及抗污染性进行评价.同时用乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)试剂盒检测2016年3月~8月两个批号的质控血清HBV-DNA,并计算质控结果、标准曲线斜率、截距和相关系数的均值()、标准差(SD)和变异系数(CV).其中批内、批间精密度CV分别为1.08%~4.41%、2.17%~2.74%,达到核酸检测试剂盒的国家标准及《医学实验室质量和能力认可准则》中基因扩增检验项目分析性能标准(CV≤5%).参加2016年卫生部室间质评结果总体平均偏倚为2.03%,准确度符合卫生部质评要求.相关系数r=0.999 9,>0.98,线性关系符合要求.定量限结果符合±0.5个对数数量级的要求(评价中至少22次为阳性).本室2016年3月~8月测定的室内质控物结果对数的累积均值(±2s)为4.34(4.20~4.44),符合参考范围要求.经验证,实时荧光定量PCR HBV-DNA检测试剂盒的各项性能指标以及室内质控结果满足《医学实验室质量和能力认可准则》要求,可以为临床提供快速、准确的报告.     

不同温度和存放时间对血糖值变化的影响

血糖测定是临床实验室常用的检验项目 ,要求准确、可靠。酶法测定精密度可达CV %∶1 %～2 % [1 ] 。然而在一些简陋的基层实验室 ,标本不可能及时检测 ,标本是采用血浆还是血清、如何保存、保存时间多长是值得探讨的问题。 2 0 0 0 - 2 0 0 1年比较了血浆糖、血清糖在不同温度、不同存放时间血糖值的变化 ,报告如下。1　对象和方法1 1　对象　研究对象为本院就诊的病人及糖尿病患者 ,平均 ( 5 5 8± 1 2 9)岁。1 2　方法　血糖浓度测定采用葡萄糖氧化酶法 ,试剂盒为保定长城临床试剂公司生产。每批测定均设标准管及质控管 ,质控测定结…