^125IUdR对大鼠胶质瘤细胞靶点放疗的研究

目的 在建立C6/wISTAR胶质瘤大鼠模型的基础上，研究^125IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的作用及其机制。方法 将Wistar大鼠分为实验组（20只）、对照组（20只）和空白组（10只）3组，前两组再分为5日处死和生存分析两个亚组。实验组在肿瘤增殖高峰期于肿瘤接种原位分次注入^125IUdR，0．2mCi／10μl／次；对照组同法注入等摩尔浓度的^125IUdR、5．6uM／10μl ；空白组同法注入同量生理盐水，10μl／次。行免疫组化染色及核仁组织区银染检查，了解^125IUdR和^127IUdR治疗后C6胶质瘤细胞的增殖动力学改变。结果1．大体病理改变；治疗5d后，实验组大鼠肿瘤直径和重量均明显小于对照组（P〈0．05）。2．HE染色：对照组坏死区增大，其他变化不明显，实验组C6肿瘤细胞的核分裂像计数减少，细胞坏死区增大较对照组更明显，肿瘤细胞的凋亡现象也更为多见。3．AgNOR染色；实验组AsNOR计数和面积均明显低于对照组（P〈0．01）。4．免疫组化染色：实验组PCNA阳性表达低于对照组（P〈0．05）。结论 应用必^125IUdR内放射治疗肿瘤，可以有效的抑制肿瘤细胞的增殖，已成为肿瘤治疗的一种新途径。     

^125IUdR对胶质瘤细胞靶点放疗后的大鼠生存分析

目的　在建立C6 Wistar胶质瘤大鼠模型的基础上 ,研究1 2 5IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗后的大鼠生存分析。方法　建立C6 Wistar胶质瘤大鼠模型后 ,将Wistar大鼠分为实验组 (2 0只 )、对照组 (2 0只 )和空白组 (10只 ) 3组 ,前两组再分为 5日处死和生存分析两个亚组。实验组在肿瘤增殖高峰期于肿瘤接种原位分次注入1 2 5IUdR ,0 2mCi 10 μl 次 ;对照组同法注入等摩尔浓度的1 2 7IUdR ,5 6 μM 10 μl 次 ;空白组同法洲入等量生理盐水 ,10 μl 次。了解1 2 5IUdR和1 2 7IUdR治疗后 3组动物的生存情况。结果　在 5 0天的观察期内 ,实验组有 2只生存下来 ,实验组中期生存时间比空白组和对照组延长了 1倍多 (P <0 0 5 )。     

拉马克啉对内皮素-1诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及蛋白激酶C表达的作用

目的：探讨拉马克啉（levcromakalim）对内皮素-1（ET-1）诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）表达的影响。方法：体外培养Wistar大鼠主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMCs），用ET-1诱导其增殖，用不同浓度拉马克啉共培养，MTT法评价VSMCs增殖情况，3H—TdR检测DNA合成，流式细胞术检测VSMCs凋亡，逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR），Western blot检测PKCamRNA及蛋白表达。结果：拉马克啉对ET-1所致VSMCs增殖有显著抑制作用，随浓度增加，其MTT活性细胞含量和3H—TdR掺入量都明显减少（P〈0．05）；拉马克啉呈剂量依赖性地增加G0／G1期VSMCs（P〈0．05），促使VSMCs凋亡增多（P〈0．05）；拉马克啉抑制VSMCs内PKCamRNA及蛋白表达。结论：拉马克啉抑制ET-1诱导的VSMCs增殖作用，可能的机制是通过下调VSMCs内PKCa表达水平而影响vSMCs增殖和凋亡。     

大鼠胶质瘤模型的C6胶质瘤细胞的增殖动力学研究

目的　在建立C6 Wistar胶质瘤大鼠模型的基础上 ,研究大鼠胶质瘤模型的C6胶质瘤细胞的增殖动力学。方法　应用流式细胞仪检测、PCNA免疫组化染色和核仁组织区银染三种方法 ,研究C6胶质瘤细胞的增殖动力学指标 ,并进行相关性分析。结果　 1、肿瘤细胞接种 2周后 ,肿瘤模型建立 ,HE染色见肿瘤细胞增殖活跃 ,各项增殖指标显示该肿瘤增殖活性较强。 2、AgNor面积、AgNOR计数与S期百分比和PCNA指数具有良好的相关性 ,AgNOR面积 (P <0 0 1)比AgNOR计数 (P <0 0 5 )相关性更强     

华蟾素诱导人膀胱癌细胞株T24凋亡研究

目的研究华蟾素注射液（cinobufacin，Cino）对膀胱癌细胞株T24的体外增殖抑制及诱导凋亡作用，探讨其对膀胱癌的l临床应用价值。方法不同浓度Cino单独作用和配伍丝裂霉素C（MMC）作用于膀膀癌T24细胞株后，通过流式细胞术（FCM）以及DNA凝胶电泳检测细胞的凋亡情况，应用光学显微镜观察细胞形态学的变化。结果除Cino（25mg／m1）组外，其它处理组均可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化。DNA琼脂糖电泳可见到凋亡的特征性“梯子”条带。流式细胞仪结果示，除高浓度的Cino（25mg／m1）组外．其余各组均见到在G0／G1期前出现亚二倍体峰（APO峰），且阻滞细胞生长在G0／G1期。各药物浓度组与对照组的S期比率（SPF）和增殖指数（PI）分别进行比较（P〈O．05）有统计学差异。结论Cino对膀胱肿瘤1、24细胞有诱导凋亡和直接杀死的双重作用。具体表现为高浓度（25mg／m1）作用于细胞时，对细胞表现为直接杀死作用。而在较低浓度范围内（O．001～2．5mg/ml），表现为对细胞诱导凋亡的作用，且具有一定的时效和量效关系：配伍丝裂霉素应用时．对T24细胞的诱导凋亡作用明显增强．两药有协同作用。具有治疗膀胱癌的临床价值     

丙氨瑞林对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨丙氨瑞林对卵巢癌细胞株CoC1／cDDP增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法：将丙氨瑞林与CoC1／cDDP一起培养，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率，流式细胞仪进行细胞周期时相及凋亡分析，瑞氏-姬姆萨染色后观察凋亡细胞形态，放射免疫法测定培养液中CA125的变化，半定量RT—PCR法检测作用前后CoC1／cDDP细胞Survivin—△Ex3及Caspase-3 mRNA的表达。结果：（1）随着丙氨瑞林浓度的升高，作用时间的延长，细胞生长抑制率逐渐上升（P〈0．01）。（2）丙氨瑞林作用后的CoC1／cDDP细胞，G0/G1期细胞比例增加，S期及G2/M期细胞比例减少，细胞增殖指数（PI）降低（P〈0．01）；培养液中CA125的水平下降，与PI正相关（r=0．893，P〈0．05）；并且这些变化与丙氨瑞林的浓度相关。（3）作用后亚G1期及Annexin V^＋／PI^-细胞的百分率较对照组明显升高（P〈0．01），并出现明显的凋亡细胞形态的改变；Survivin—△Ex3 mRNA表达与对照组比较无明显变化（P〉0．05），而Caspase-3 mRNA的表达上调，并随着丙氨瑞林浓度的升高而表达增加（P〈0．01），且与亚G1期及Annexin V^＋／PI^-胞的比例呈正相关（r分别为0．994及0．978，P〈0．01）。结论：丙氨瑞林能直接抑制卵巢癌细胞株CoC1／cDDP细胞的增殖，并诱导其凋亡，作用机制与丙氨瑞林上调Caspase-3 mRNA的表达有关。     

125I近距离照射对C6胶质瘤细胞的影响

目的 了解不同剂量^125I硅胶球囊内近距离照射对C6胶质瘤细胞的生物学效应。方法 将^125I—NaI溶液放人硅胶球囊内，对体外培养的C6胶质瘤细胞给予不同剂量的近距离照射，检测细胞死亡率、增殖抑制及细胞周期再分布情况。结果 与对照组相比，受照射组细胞死亡率、增殖抑制率明显增加，S期比例降低、G1期阻滞，细胞周期发生紊乱。结论 ^125I近距离照射可以通过导致细胞死亡、细胞增殖抑制以及细胞周期改变在胶质瘤的治疗中发挥作用。     

苦参碱对大鼠胶质瘤模型的作用的实验研究

目的：研究C6胶质瘤细胞在大鼠脑内成瘤后，苦参碱对其作用。方法：采用脑立体定向术建立胶质瘤大鼠模型，通过TUNEL及免疫组织化学方法捡测苦参碱对胶质瘤大鼠模型肿瘤细胞的作用。结果：TUNEL及免疫组织化学Fas表达结果均显示在空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义（P〉0．05）；低剂量组高于空白对照组和阴性对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；高剂量组高于低剂量组、阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：苦参碱具有诱导体内胶质瘤细胞凋亡的作用，可能是通过增加Fas的表达来实现的。     

甲异靛对K562原代细胞凋亡作用研究

目的探讨甲异靛诱导慢性髓系细胞白血病K562细胞株凋亡的作用。方法K562细胞经20μm／L甲异靛处理12h、24h、48h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果K562未经甲异靛作用时凋亡率[（1．0±0．36）％]与人体正常细胞系NIH3T3凋亡率[（2．6±0．39）％]相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;K562细胞空白组凋亡率为（1．0±0．36）％,12h组为（12．5±0．69）％,24h组为（19．4±1．07）％,48h组为（42．5±3．22）％,与NIH3T3细胞组同时间比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;k562组12h、24h、48h与空白组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。甲异靛能使K562细胞阻滞于G2／M期,G2／M期细胞比例增加,G0／G1期和S期细胞减少。结论甲异靛对体外K562细胞有诱导凋亡作用,其作用与时间成正相关关系。甲异靛可使K562细胞阻滞于G2／M期。     

大黄酸对脑出血大鼠神经损伤和细胞凋亡的影响

目的探讨大黄酸对脑出血（ICH）大鼠神经损伤和细胞凋亡的影响。方法在成年Sprague-Dawley大鼠尾状核注入collagenaseⅣ（0．05U／0．5uL）诱导ICH,假手术大鼠在相同位置注入相同剂量的氯化钠注射液。大鼠术后分别在3h．6h、12h腹腔注射大黄酸注射液（70mg／kg）或相同剂量的氯化钠注射液。Western blot法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）活性,TUNEL标记凋亡细胞,阿朴吗啡诱导的旋转行为评价神经功能缺损。结果大鼠脑出血后3h和6h给予大黄酸注射液明显抑制casepase-3的激活（P〈0．001）,减少TUNEL阳性细胞数（P〈0．05）,减少阿朴吗啡诱导的旋转次数（P〈0．05）;脑出血后12h给药无效。结论脑出血后早期给予大黄酸,可能通过阻断凋亡通路起到神经保护作用。     

HPLC测定甲磺酸罗哌卡因旋光异构体含量

目的:测定经拆分合成的左旋S-(-)-甲磺酸罗哌卡因中右旋R-(+)-甲磺酸罗哌卡因含量。方法:采用高效液相色谱法测定。色谱条件:Chiral—AGP柱(150 mm×4.0 mm,5 μm),流动相为异丙醇-磷酸盐缓冲液[取1 mol·L-1的磷酸二氢钠7.5 mL,0.5 mol·L-1的磷酸氢二钠溶液28.5 mL,加水稀释到1000 mL,调节pH值至7.2](7:93),柱温:25℃,流速为1.0 mL·min～1。紫外检测器,检测波长220 nm,进样量20μL。结果:甲磺酸罗哌卡因消旋体中左旋体、右旋体的保留时间分别为12.1及17.4 min,左、右旋体的分离度良好。精密度试验的RSD为3.3％。结论:采用本方法可简单、准确地测定甲磺酸罗哌卡因中右旋甲磺酸罗哌卡因的含量。     

头孢曲松钠中残留的三嗪环的定性定量研究

目的:对头孢曲松钠中的三嗪环进行定性定量测定,可以控制其残留总量,减少过敏反应的发生,促进工艺改进。方法:本文采用质谱(MS)、红外吸收光谱(IR)与核磁共振谱(NMR),对获得的三嗪环参照品进行结构确认,然后用高效液相色谱法(HPLC)对其在头孢曲松钠中的残留进行定量测定。结果:表明所获得的三嗪环参照品纯度很高,能够对头孢曲松钠作定性定量分析。结论:头孢曲松钠中三嗪环的残留在安全限度之中。     

化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid对胃癌BGC-823细胞生长抑制作用的实验研究

目的：研究化合物K_1(ent-kaur-16-en-19-oic acid)对BGC-823胃癌细胞的生长抑制作用。方法：采用MTT法观察不同浓度化合物K_1对BGC-823胃癌细胞的生长抑制作用。结果：化合物K_1对BGC-823胃癌细胞增殖有明显的抑制作用。     

液质联用鉴定重组人血管内皮抑制素

目的：用液质联用技术鉴定重组人血管内皮抑制素（rhEndostatin）。方法：利用ESI—Q—TOF—MS法测定rhEndostatin的精确相对分子质量，通过HPLC—ESI—Q—TOF—MS／MS法测定其胰蛋白酶酶切后肽段的部分氨基酸序列并结合数据库检索进行结构鉴定。结果：重组人血管内皮抑制素的实测相对分子质量为21114．5，与理论相对分子质量21113．8相比非常接近。HPLC—ESI—Q—TOF—MS／MS测定m／z802．0的肽段的部分氨基酸序列为Ala—Pro—Ser—Ala-Thr—Gly—Gin—Ala—Ser—Ser—Leu—Leu。将其m／z和氨基酸序列在MASCOT数据库检索，结果表明重组人血管内皮抑制素的结构正确。结论：液质联用是鉴定蛋白质的灵敏、快速、准确的新方法。     

5-氧-烯丙基-2,3,4-三-氧-苄基-D-核糖醇的合成工艺改进

目的合成5-氧-烯丙基-2,3,4-三-氧-苄基-D-核糖醇。方法以D-核糖为原料,经甲苷化、苄基化、水解、肟保护、烯丙基化、脱肟、还原7步反应得到5-氧-烯丙基-2,3,4-三-氧-苄基-D-核糖醇。结果与讨论总收率55%,目标产物结构经核磁共振氢谱确认。该合成路线步骤少,绿色环保,适合工业化生产。     

(R)-(-)-1-(2-萘基)-2-N-甲基氨基乙醇的合成

目的研究拟β-肾上腺素(R)-(-)-1-(2-萘基)-2-N-甲基氨基乙醇(1)的合成方法.方法以β-萘乙烯(2)为原料,通过烯烃的Sharpless不对称双羟化、环化、选择性开环、催化氢化、甲酰化、还原等6步反应制备目标产物.结果与结论设计的合成路线以β-萘乙烯计,6步反应总收率为39.3%,ee值高达97%～99%,合成路线易行.目标产物的结构经质谱、红外光谱、1H-NMR和13C-NMR确证.     

含氧叔丁基三唑醇类化合物的合成及其体外抗真菌活性

目的设计合成含氧取代的叔丁基三唑醇类化合物并研究其体外抗真菌活性。方法以一氯频那酮为起始原料经多步反应合成目标化合物,化合物结构经1H-NMR谱、IR谱确证;选择8种真菌为实验菌株,按国际标准抗真菌敏感性实验方法测定体外抑菌活性。结果与结论合成了12个新化合物。所有目标化合物对8种真菌均具有一定的抑制作用。可以将现有的三唑醇类抗真菌药物结构中的2,4-二氟苯基替换成其他疏水性基团来设计抗真菌化合物。     

Effects of (+/-)- (+)- and (-)-metoprolol, (+/-)- (+)- and (-)-pindolol, (+/-)-mepindolol and (+/-)-bopindolol on the rat left atria and portal vein.

1. The effects of (+/-)- (+)- and (-)-metoprolol, (+/-)- (+)- and (-)-pindolol, (+/-)-mepindolol and (+/-)-bopindolol on the beta 1-adrenoceptor mediated responses of the rat left atria and the beta 2-adrenoceptor mediated responses of the rat portal vein to isoprenaline have been determined. 2. Racemic and (-)-metoprolol were selective beta 1-adrenoceptor antagonists. (+)-Metoprolol was devoid of beta-adrenoceptor antagonistic activity. 3. Racemic and (-)-pindolol were potent and (+)-pindolol was a modest beta-adrenoceptor antagonist. 4. (+/-)-Mepindolol and (+/-)-bopindolol were apparently competitive antagonists of the isoprenaline beta 1-adrenoceptor mediated responses of the rat left atria but non-competitive antagonists of the isoprenaline beta 2-adrenoceptor mediated responses of the rat portal vein. 5. It is suggested that (+/-)-mepindolol and (+/-)-bopindolol are slowly dissociating beta-adrenoceptor antagonists and the non-competitive antagonism can only be detected on tissues with modest receptor reserves for maximum responses to isoprenaline.