Vitek 2 Compact AST-N334、AST-N335、AST-P639中国定制药敏卡性能评估

目的 评估Vitek 2 Compact AST-N334、AST-N335和AST-P639中国定制药敏卡的性能.方法 随机收集权威机构质控菌株73株和2018年1—6月华山医院住院患者首次临床分离株112株.以权威机构提供的质控菌株为检测对象,采用3种中国定制药敏卡及微量肉汤稀释法(BMM)进行平行试验,以室间质量...     

应用VITEK32系统检测大肠埃希菌及药敏分析

为了解本地区大肠埃希菌感染致病及抗生素治疗情况,对本院3年来检出的266株大肠埃希菌应用VITEK32全自动微生物分析仪进行鉴定及药敏试验.结果表明产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌逐年上升,耐药现象严重,情况不容乐观.     

2007年CHINET大肠埃希菌和克雷伯菌属耐药性监测

目的 了解2007年我国不同地区12所医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌属的耐药性.方法 采用纸片扩散法( K-B 法)对临床分离株作药敏试验.结果 共收集CHINET 细菌耐药性监测网12所医院分离的大肠埃希菌6 527株,肺炎克雷伯菌3 051株,催产克雷伯菌206株.其中儿童分离株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别占24.0%(1 566/6 527)和 17.8% (542/3 051).大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs菌株检出率分别平均为55.0%(12.3%~72.1%)和44.9%(15.4%~ 70.6% ).各医院ESBLs检出率存在一定差异.药敏结果显示,大肠埃希菌和克雷伯菌属对亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮-舒巴坦都保持高度敏感,耐药率均低于10%.产ESBLs株对上述3种药物的耐药率也均低于20%.50%以上的产ESBLs株对庆大霉素和环丙沙星耐药.有5所医院分离出对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株,其中肺炎克雷伯菌21株,大肠埃希菌2株,产酸克雷伯菌1株.其中20株肺炎克雷伯菌为泛耐药株,占0.7%(20/3 051).结论 大肠埃希菌和克雷伯菌属对碳青霉烯类抗生素和头孢哌酮-舒巴坦仍保持高度敏感性,不同地区的分离株中产ESBLs菌株检出率和药敏试验结果存在差异,儿童分离株中产ESBLs检出率上升值得关注.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的 了解我院2005-2008年产超广谱β内酰胺酶(ESBLs) 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率及耐药情况.方法 收集我院2005年1月-2008年12月临床分离到的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别2 557株和1 883株,采用纸片扩散法(K-B法)对分离株进行抗菌药物敏感试验和ESBLs筛选和确证试验.对其中60株产ESBLs菌用PCR和测序检测该类酶的基因型.结果 4年中大肠埃希菌ESBLs检出率分别为48.0%、63.0%、65.8%和59.8%,肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为40.9%、53.9%、56.8%和47.3%.产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢克洛、头孢呋辛、头孢唑林、头孢丙烯和哌拉西林等耐药率超过90%,对美罗培南和亚胺培南的敏感率为97%～100%.29株大肠埃希菌TEM基因检出率为75.8 %(22/29),SHV基因检出率为0,CTX-M基因检出率为86.2%(25/29).31株肺炎克雷伯菌TEM基因检出率为41.9 %(13/31),SHV基因检出率为64.5%(20/31),CTX-M基因检出率为48.4%(15/31).35株(58.3%)菌同时检测到2种以上基因型.序列分析证实TEM 扩增产物均属于TEM-1基因,CTX-M 扩增产物均属于CTX-M-3基因,而SHV 扩增产物则分别属于SHV-1、SHV-5、SHV-11、SHV-12和SHV-28.结论 我院2005-2008年大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率较高.CTX-M-3、SHV-11和SHV-12是我院产ESBLs 菌株的主要基因型.     

铜陵地区大肠埃希菌和克雷伯菌属ESBLs检测及耐药性分析

目的了解安徽省铜陵地区大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检出率及其耐药状况。方法铜陵地区2003年1月-2004年12月临床分离大肠埃希菌270株和克雷伯菌属127株用NCCLS表型确证试验（纸片增强法）检测其ESBLs产生率；并用Kirby-Bauer法进行药敏试验。结果大肠埃希菌和克雷伯菌属ESBLs产生率分别为37．8％和30．7％；产ESBLs株对亚胺培南均呈敏感，对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦及哌拉西林-三唑巴坦耐药率较低，对其他抗菌药物的耐药率均较不产ESBLs株高。结论临床上应加强细菌耐药性监测及ESBLs检测，指导临床合理使用抗菌药物，防止产ESBLs菌株的产生和流行。     

EDTA纸片法检测大肠埃希菌和克雷伯菌的高产AmpC酶

目的寻找一种简便、快速、有效的检测高产AmpC酶的方法。方法用纸片扩散法对1 935株大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌进行AmpC酶的初筛试验,然后用EDTA纸片法、头孢西丁三维试验和多重聚合酶链反应(PCR)同时对327株初筛阳性细菌进行AmpC酶的检测,并进行方法学比较。结果PCR、头孢西丁三维试验、EDTA纸片法阳性菌株分别为54、85、94株,阳性率分别为2.79%、4.39%、4.86%,EDTA法与三维试验的符合率为97.25%,2种检测方法差异无显著性(P>0.05);EDTA对质粒AmpC酶的检测率高于三维试验。结论EDTA纸片法用于这2种临床菌株中持续高产AmpC酶的检测,方法简便,结果可靠,无需特殊仪器支持,可在临床实验室推广使用。     

EDTA纸片法检测大肠埃希菌和克雷伯菌的高产AmpC酶

目的寻找一种简便、快速、有效的检测高产AmpC酶的方法。方法用纸片扩散法对1935株大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌进行AmpC酶的初筛试验,然后用EDTA纸片法、头孢西丁三维试验和多重聚合酶链反应（PCR）同时对327株初筛阳性细菌进行AmpC酶的检测,并进行方法学比较。结果PCR、头孢西丁三维试验、EDTA纸片法阳性菌株分别为54、85、94株,阳性率分别为2．79％、4．39％、4．86％,EDTA法与三维试验的符合率为97．25％,2种检测方法差异无显著性（P〉0．05）;EDTA对质粒AmpC酶的检测率高于三维试验。结论EDTA纸片法用于这2种临床菌株中持续高产AmpC酶的检测,方法简便,结果可靠,无需特殊仪器支持,可在临床实验室推广使用。     

VITEK 2 Compact检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星药敏结果的准确性评价

目的 评价VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统(简称VITEK 2 Compact)及与之配套的AST-GN13卡检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星药物敏感性结果的准确性。方法 分别采用VITEK 2 Compact,纸片扩散法(K-B法)和E-test法检测临床分离的147株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星的敏感性。结果 147株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星的药敏检测中,K-B法和E-test法的结果完全一致。其中,5株VITEK 2 Compact,K-B法和E-test法三种检测方法结果一致,4株均为敏感,1株均为耐药; 142株VITEK 2 Compact和E-test法结果不一致,VITEK 2 Compact结果敏感或中介,而E-test法和K-B法结果耐药。结论 VITEK 2 Compact在检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星的敏感性时会出现不准确的结果,临床工作中需要用K-B法或者其他方法验证后方能报告耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对阿米卡星的药敏结果。     

双纸片氯唑西林增效试验检测高产AmpC酶的大肠埃希菌和克雷伯菌

目前,较为认可的检测高产AmpC的方法是头孢西丁三维试验[1],但由于其操作繁琐而难于在临床实验室常规开展.     

VITEK2 Compact全自动微生物分析仪对黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测评价

目的 评价VITEK2 Compact全自动微生物分析仪对黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果的准确性。方法 对某院分离的29株黏液型铜绿假单胞菌和30株非黏液型铜绿假单胞菌同时以VITEK2 Compact分析仪法及琼脂稀释法进行药物敏感性试验,以琼脂稀释法为参考方法进行统计学分析。结果黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的标准符合率(CA)为84.69%,严重错误率(VME)为3.20%,重大错误率(ME)为2.13%,一般错误率(MIE)为9.96%; 非黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的标准符合率(CA)为94.33%,严重错误率(VME)为0.67%,重大错误率(ME)为1.67%,一般错误率(MIE)为3.33%。两种铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的VME,MIE,CA相比较,差异有统计学意义(χ²=5.02,10.44,14.55,P<0.05)。黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的CA比非黏液型铜绿假单胞菌低,且<90%,而VME,MIE均比非黏液型铜绿假单胞菌高。结论 VITEK2Compact全自动微生物分析仪对非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果准确可靠,对黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果准确性较低,黏液型铜绿假单胞菌建议用其它方法做药物敏感性试验。     

对头孢吡肟敏感的疑似产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌属的分子生物学特征

目的 了解初筛试验疑似产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)但确证试验未能确认,而对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs和质粒介导的AmpC酶.方法 纸片扩散法检测18株细菌对常用抗菌药物的敏感性;PCR及多重PCR法检测细菌中的ESBLs和质粒AmpC酶基因;质粒转移接合试验检测耐药质粒的可传递性;细菌基因间重复一致序列(ERIC)-PCR法检测供体大肠埃希菌和受体E.coli J53及其接合子的同源性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对11株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果 18株细菌均为2005年1月至12月期间上海华山医院临床分离的菌株,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌6株,产酸克雷伯菌1株,按常规方法对细菌进行重新鉴定和药敏试验.18株细菌经美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的ESBLs初筛试验结果均为ESBLs产生可疑菌株,但确证试验未能确认;所有菌株的头孢吡肟抑菌圈直径均在18 mm以上,显示敏感.PCR检测结果显示,11株大肠埃希菌中有9株产CIT型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为CMY-2型AmpC酶,未发现TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、SFO等广谱或ESBLs;6株肺炎克雷伯菌中有5株产DHA型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为DHA-1型AmpC酶;5株产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌株中,4株同时伴有广谱或ESBLs:其中2株产SHV-11型广谱酶,另2株分别产CTX-M-14型ESBLs和SHV-62型ESBLs;1株产酸克雷伯菌亦单产DHA-1型AmpC酶;质粒转移接合试验结果表明,携带耐药基因的质粒可从供体菌转移至敏感细胞中;PFGE结果显示,6株肺炎克雷伯菌的谱型各不相同,而11株大肠埃希菌可分为5种谱型,其中B型包含7株细菌,这7株细菌均产生质粒介导的CMY-2型AmpC酶,并分离自外科病房,提示可能存在克隆菌株的流行传播.结论在确证试验未能确认的疑似产ESBLs中,对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌主要产生质粒介导的AmpC酶,但尚有少数菌株同时伴有产ESBLs.对同时产生ESBLs和AmpC酶的菌株,临床微生物实验室必须报告这些菌株对头孢吡肟耐药.     

2010年CLSI三代头孢菌素折点改变对我国大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌药物敏感性结果解释的评估

目的评估2010年CLSI M100-S20(S20)及2009年CLSI M100-S19(S19)文件中CAZ、CTX、CRO新旧折点变化对我国如何解释产ESBL大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌体外药物敏感性试验结果的影响.方法收集2005-2007年中国15家医院SEANIR监测项目中3种细菌琼脂稀释法药敏结果,用PCR-基因序列分析法和(或)药敏表型分析法去除产AmpC酶的菌株.用CLSI琼脂稀释法确定ESBL表型.3种抗菌药物对2 733株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌的敏感性用WHONET5.4软件分别按S19和S20折点进行回顾性分析.对北京协和医院同时有琼脂稀释法和纸片扩散法药敏结果的207株3种肠杆菌科细菌用WHONET5.4软件进行散点图和回归性分析,观察S19和S20折点下3种抗菌药物两种方法的相关性.结果产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对CTX的耐药率分别由S19折点(64μg/m1)下的65.2%、55.5%和14.6%上升为S20折点(4 μg/ml)下的99.7%、96.2%和93.8%,敏感率则由S19折点(8 μg/ml)下的6.0%、11.5%和33.3%下降至S20折点(1μg/ml)下的0%、0.2%和0%.CRO的结果与CTX相近.虽然在我国产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对CAZ的敏感率比CTX和CRO高,它们的耐药率也由S19折点(32μg/ml)下的30.3%和43.2%升为S20折点(16μg/ml)下的41.9%和55.9%,敏感率则由S19折点(8μg/ml)下的58.1%和44.1%降至S20折点(4 μg/m1)下的44.7%和28.0%.不产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌在CTX、CRO和CAZ新旧折点下的敏感率为99.2%～100.0%,耐药率为0%～0.4%.琼脂稀释法CTX和CRO S20折点与ESBL表型分布具有良好的对应关系;琼脂稀释法和纸片扩散法回归性分析得CAZ、CTX和CRO的r值分别为0.67、0.79和0.77,P均＜0.01,S20与S19相比,纸片扩散法药敏正确分类均在可接受范围内.结论应用S20 CTX和CRO的新折点,药敏结果与ESBL检测结果一致性大大提高,临床医生可根据药敏结果结合临床情况合理选择抗菌药物,细菌室可不报告ESBL表型情况.S20 CAZ新折点与我国临床治疗结局相关性还有待进一步评估.