不同种布鲁氏菌过氧化氢酶的测定

本文报道了通过对布鲁氏菌属不同种细菌的过氧化氢酶活性的测定,证实了所有种的布鲁氏菌均有过氧化氢酶活性,除犬种布鲁氏菌外,其他种的活性差别不大,而犬布鲁氏菌的过氧化氢酶活性高于其他种布鲁氏菌4倍。这一特性可作为犬种布鲁氏菌鉴定的辅助手段之一。     

布鲁氏菌非典型菌株及R型菌株生物学特性和产生原因的探讨

本文报告了布鲁氏菌非典型菌株部分生物学特性的研究，从而发现了犬种布氏菌过氧化氢酶活性高于其它种布氏菌２～８倍的特性，同时完了过氧化氢酶活性与布氏菌毒力无线性关系，并对羊种布氏菌Ｓ型、Ｒ型或Ｉ型及非典型株ＯＭＰ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱进行了比较，找出非典型菌株不能用常规鉴定方法定种的可能原因，同时对出现非典型株原因进行了探讨。     

PCR-HRM方法快速鉴定布鲁氏菌的初步应用

目的 本研究旨在建立准确、快速地鉴定布鲁氏菌菌种及生物分型的PCR-HRM(高分辨率熔解曲线)方法。方法 根据目的基因序列,参考文献合成6对基因扩增引物(1对布鲁氏菌属特异引物,5对种间特异引物),应用PCR-HRM方法鉴定布鲁氏菌属6个种19个生物型的标准菌株,并初步应用到临床分离的35株布鲁氏菌中。结果 采用布鲁氏菌属特异引物(Bspp),6个种19个生物型的标准菌株均扩增出同样形状的溶解曲线,与其它对照菌株的曲线不同;采用5对种特异引物,6个种的标准菌株均有特征性PCR-HRM曲线;临床分离的35株布鲁氏菌的PCR-HRM曲线与羊种布鲁氏菌标准菌株的一致。结论 该研究采用的PCR-HRM分析方法,获得了布鲁氏菌属及6个种标准菌株的不同曲线图,可准确鉴定临床分离的羊种布鲁氏菌,可用于临床微生物实验室疑似布鲁氏菌感染的初步鉴定。     

布鲁氏菌属DNA的多态性

布鲁氏菌是布鲁氏菌病的病原体，能感染多种动物（包括家畜、家禽、野生动物及多种海洋哺乳动物）引起动物布鲁氏菌病，也可以通过多种途径感染人，造成人布鲁氏菌病。传统方法是根据培养生物特性、氧化代谢和抗原特征、噬菌体裂解特点以及主要宿主等不同，将布鲁氏菌属分为６个种１９个生物型：牛种布鲁氏菌、羊种布鲁氏菌、猪种布鲁氏菌、沙林鼠种布鲁氏菌、绵羊附睾种布鲁氏菌和犬种布鲁氏菌，其中牛种布鲁氏菌包括８个生物型，即１、２、３、４、５、６、７、９；羊种布鲁氏菌有３个生物型，即１、２、３；猪种布鲁氏菌有１、２、３、４…     

试验感染动物抗布鲁氏菌BSAg抗体动态观察

用布鲁氏菌属６种布鲁氏菌第１生物型参考菌株，Ｓ１９和Ｍ５菌苗菌株，Ｙｅ Ｏ：９，Ｅ．ｃｏｌｉ Ｏ：１１６和Ｏ：１５７以及土拉伦斯菌分别感染豚鼠每组１０只，从感染后７天开始取血检查，观察１７个月。以布鲁氏菌声波抗原和ＢＳＡｇ作ＥＬＩＳＡ试验，证实所有布鲁氏菌株感染动物中，在观察期内均存在抗声波抗原和抗ＢＳＡｇ的抗体。除Ｂｒ．ｏｖｉｓ和Ｂｒ．ｎｅｏｔｍａｅ感染的动物外（５个月），在其他布鲁氏菌感染动物     

福建省首次从人体分离到的布鲁氏菌的初步研究

目的对从人体分离到的5株布鲁氏菌进行种型鉴定。方法常规确定布鲁氏菌属与种型鉴定。结果FJFZ0609菌株由于菌型特殊,难以定种;FJZZ0701、FJNP0808和FJSM0808三个菌株均为羊种布鲁氏菌2生物型;FJFZ0903菌株为羊种布鲁氏菌3生物型。结论福建省自1964年以后首次从人体内分离到羊种布鲁氏菌,证实福建省存在羊种布鲁氏菌并波及人间。     

布鲁氏菌PCR鉴定方法的研究与应用

目的采用PCR、PCR SSCP方法对布鲁氏菌进行快速鉴定,并对其种、型鉴别。方法分析已发表布鲁氏菌属、种、型基因序列,寻找出不 同布鲁氏菌的种、型特异性碱基分布规律,设计特异性引物,用于布鲁氏菌属、种、型的鉴定;根据聚合酶链反应 单链构象多态性（PCR SSCP）分析原理,建立PCR SSCP方法,用于区分牛种A19疫苗株与其他型布鲁氏菌。结果所建立的PCR方法能高效、准确鉴定出布鲁氏菌,并能 对其种、型进行区分;PCR SSCP方法可将A19疫苗株从其他型布鲁氏菌中区分出来。结论利用PCR、PCR SSCP方法能快速、准确地进行布鲁氏 菌属、种、型以及疫苗株A19的鉴别,且简便、可靠,便于临床应用。     

布鲁氏菌病患者血清中IgE含量的测定

布鲁氏菌病患者血清中ＩｇＥ含量的测定木合塔尔，邰新萍，安次巴依专业指导：王伟导，卿燕（新疆地方病防治研究所，乌鲁木齐市８３０００２）在五种免疫球蛋白中，ＩｇＥ发现最晚，迄今只有十多年的历史，但大大推动了速发型变态反应的研究和实际应用，布鲁氏菌病属过敏...     

高效液相色谱用于布鲁氏菌标准株的鉴别试验

用高效液相色谱法对羊种、牛种、猪种、犬种、鼠种和绵羊副睾种布鲁氏菌6个标准菌种菌株进行鉴别试验,以目视法观察菌株核酸样品的峰形数量、高度以及出峰保留时间,分析各菌株图谱的A区,结果表明:6个布鲁氏菌种都出现了各自独特的洗脱图峰,峰形清晰可辨,并且B区和C区峰形可能是布鲁氏菌属的“特征峰区”。     

布鲁氏菌分离株MLVA分子分型鉴定

目的对牛奶、羊奶以及羊流产胎儿中分离布鲁氏菌进行分型鉴定。方法采集新疆4个地区牛奶20份,羊奶20份,羊流产胎儿10份,分离培养后,运用VirB8-PCR和布鲁氏菌分子分型PCR(AMOS-PCR)方法对分离株进行布鲁氏菌属、种的鉴定,同时采用MLVA方法对分离株进一步鉴定,并将测定结果与http://mlva.u-psud.fr/数据库提供的布鲁氏菌数据进行比较,结合软件BioNumerics 6.6进行聚类分析。结果 6株分离株均为羊种3型布鲁氏菌,与辽宁省分离羊种3型布鲁氏菌在聚类分析中关系较近。结论 MLVA作为布鲁氏菌基因分型鉴定的一种快速、可靠的方法,为今后布鲁氏菌传染源的追溯及防控措施的制定提供依据。     

过氧化氢酶活性KatG基因与结核分支杆菌异烟肼耐药性的 …

探讨过氧化氢酶活性，ＫａｔＧ基因及其突变与结核分支杆菌异烟肼耐药性的相关关系。方法 对５８株结核分支杆菌临床分离株进行地氧化氢酶活性测定，并采用聚合酶链反应－单链构象多态性方法进一步分析结核分支杆菌中ＫａｔＧ基因及其突变的情况。结果所有２６株敏感菌均有ＫａｔＧ基因及过氧化氢酶的表达；３２株耐药菌中，８株缺乏过氧化氢酶活性，３株ＫａｔＧ基因完全缺失，且主要发生于高度耐药菌中。     

在羊的血培养中发现一株与布鲁氏菌交叉反应的迟缓爱德华氏菌

在羊的血培养中发现一株与布鲁氏菌交叉反应的迟缓爱德华氏菌山东淄博市淄川区防疫站曹温年，常承忠中国预防医科院流行病学微生物学研究所李元凯，邱海燕１９９０年７月，在做羊群布鲁氏菌病检疫时，从一只山羊的血培养物中分离到一株与布氏菌诊断血清凝集的非布鲁氏菌属...     

贵州省首次从山羊分离到布鲁氏菌及其种型鉴定

目的从贵州布鲁氏菌抗体阳性的山羊血液分离布鲁氏菌病原体并对其进行种型鉴定。方法采用血培养法对经试管凝集试验检测为布鲁氏菌抗体阳性的山羊血血液进行细菌分离培养,并应用传统方法和和分子生物学方法对可疑菌落进行种型鉴定。结果11份（GZB 01—11）抗体阳性的山羊血标本中有4份（GZB03、GZB04、GZB09、GZB11）经血培养瓶培养出布鲁氏菌可疑菌落,可疑菌落经传统方法鉴定为羊种生物3型布鲁氏菌,4株菌进一步采用布鲁氏菌属特异性PCR（BCSP31-PCR）鉴定为布鲁氏菌属细菌,GZB03,GZB04,GZB11经种／型特异性PCR（AMOS-PCR）将其定为羊种布鲁氏菌,而GZB09采用该方法不能定种。结论从11份贵州省布鲁氏菌抗体阳性山羊血样中分离到4株羊种布鲁氏菌,首次证实贵州省存在羊种布鲁氏菌。     

贵州省2013-2021年羊种布鲁氏菌分离株的多位点可变数目串联重复序列分析北大核心CSCD

目的了解贵州省2013-2021年羊种布鲁氏菌的分子流行病学特征,为贵州省布鲁氏菌病疫情防控提供科学依据。方法以贵州省疾病预防控制中心2013-2021年分离、鉴定和保存的78株羊种布鲁氏菌分离株为研究对象,运用BCSP31-PCR及AMOS-PCR技术对分离株分别进行布鲁氏菌属及种的鉴定,运用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA-16)技术进行分型分析。对MLVA分型结果进行整理及聚类分析,了解贵州省羊种布鲁氏菌的MLVA型别分布及分子流行病学特征。结果78株羊种菌分离株经BCSP31-PCR技术均鉴定为布鲁氏菌属细菌,AMOS-PCR技术将其均鉴定为羊种布鲁氏菌,MLVA-8分型技术将其分为5种MLVA型,MLVA-16分型技术将其分为46种MLVA型,其中遵义市的MLVA-16基因型型别分布最多。基于MLVA-16分型数据聚类分析显示,78株分离株亲缘关系较近,被聚类为4个群;最小生成树图显示,78株分离株被分为8个遗传复合体和14个单体。结论贵州省羊种布鲁氏菌MLVA型别呈多样性,提示贵州省布病疫情的病原体可能存在多条传播链。     

贵州省2株牛种布鲁氏菌分子流行病学特征分析

目的 分析贵州省牛种布鲁氏菌分子流行病学特征,为牛种布鲁氏菌病疫情的防控提供科学依据。方法 采用BCSP31-PCR及AMOS-PCR技术对经传统方法鉴定为牛种布鲁氏菌的2株分离株进行属/种复核,采用基于布鲁氏菌rpoB基因的单核苷酸多态性分析了解其rpoB基因型,采用MLVA-16技术进行MLVA分型,了解其与国内牛种布鲁氏菌的聚类关系,采用MLST技术分析其序列型及其与国内菌株间的遗传进化关系。结果 2株分离株经BCSP31-PCR和AMOS-PCR技术被鉴定为布鲁氏菌属细菌,未能明确其具体种型;其rpoB基因型相同;MLVA分型与新疆牛种布鲁氏菌共享同一MLVA-16型(4-5-3-12-2-2-3-1-6-43-8-5-5-5-3-3); MLST分析鉴定2株菌均为ST2型,最小间距图显示2株菌与布鲁氏菌属内的牛种布鲁氏菌遗传距离最近,属同一个遗传复合体。结论 贵州省2株牛种布鲁氏菌分离株间的遗传距离近,与新疆牛种3型布鲁氏菌为同一MLVA型,提示分离株引起的感染可能为外省输入。     

新疆职业人群布鲁氏菌病疫情现状与防治对策

布鲁氏菌病 (以下简称布病 )是由布鲁氏菌属的细菌引起的一种变态反应性和自然疫源性人畜共患传染病 ,患病牲畜的皮、毛、乳、肉、内脏以及流产分泌物是该病的主要传染源 [1 ] 。新疆是以羊种布鲁氏菌属、牛种布鲁氏菌属为主的布病疫区。据文献记载 ,新疆从 2 0世纪 5 0年代开始至 80年代初 ,为国内主要布病重疫区之一。据不完全统计 ,新疆 89个县 (市 )、兵团 13个师 (局 )均有不同程度的布病流行。经自治区卫生、畜牧各级科研防治工作者不懈的努力 ,截止 80年代末 ,新疆布病的年发病人数从 2 0世纪 5 0年代的 185 0 0 0例下降为 890 0例 ,…     

犬种布鲁氏菌病

犬种布鲁氏菌（Ｂ．Ｃａｎｉｓ）病是布鲁氏菌病家族中的种新发现的个病种。１９６６年Ｃａｒｍｉｃｈａｅｌ［１］等在美国第一次从小猎犬中分离到犬种布鲁氏菌后,德国、巴西、墨西哥和阿根廷等近十个国家相继报告发现Ｂ．Ｃａｎｉｓ感染［２］,１９７０年ＷＨＯ布病专家委员会正式把它列为布鲁氏菌属分类中的一个新种。我国台湾省１９８０年首次报道了该病的存在［３］。１９８４年尚德秋等在上海从美国进日的Ｂｅａｎｇｌｅ狗和中国草狗分离到Ｂ．Ｃａｎｉｓ［４］,１９８６年广西对家狗进行的Ｂ．Ｃａｎｉｓ感染的血清学及病原学调查…     

布鲁氏菌的分离、鉴定与分型技术研究进展

布鲁氏菌传统分离与鉴定方法周期长, 对操作条件要求高, 作为常规鉴定方法的补充和替代, 分子生物学方法因其快速灵敏易操作的特点而被广泛应用。本文将近年国内外的布鲁氏菌分离鉴定, 布鲁氏菌属的PCR鉴定, 布鲁氏菌种的分子生物学检测, 以及检测蛋白质和利用全自动生化分析仪器鉴定的方法做一综述, 以供参考。     

布鲁氏菌BsAg抗原的免疫电镜观察

利用免疫电镜包埋前包埋后染色法，分别观察６种布鲁氏菌及耶尔森氏０：９型菌中ＢｓＡｇ的分布情况，发现ＢｓＡｇ主要分布在布鲁氏菌外膜，菌体细胞质内很少，以１６Ｍ羊种布鲁氏菌株中ＢｓＡｇ抗原最多，其余５种布鲁氏菌株中ＢｓＡｇ较少。用包埋前染色法未发现耶尔森氏０：９型菌外膜表面有ＢｓＡｇ存在，而用包埋后染色法观察到布鲁氏菌体细胞质内及耶尔森氏０：９型菌外膜内侧和菌体细胞质内有微量的ＢｓＡｇ。提示布鲁氏菌细     

牛羊猪种布鲁氏菌快速鉴别PCR方法的建立及评价

目的 建立一种可在一个反应体系中同时鉴别布鲁氏菌及牛羊猪种布鲁氏菌的快速PCR鉴别方法。方法 将布鲁氏菌及牛羊猪种布鲁氏菌的扩增引物进行优化组合,建立全新的BAMS-PCR方法;随后对该方法的特异性和灵敏度进行评价,并对现场分离的219株布鲁氏菌进行鉴别,评价其在布鲁氏菌鉴别中的应用价值。最后,用该方法对临床标本中布鲁氏菌的DNA进行扩增,评价其在临床诊断中的实用性。结果 BAMS-PCR方法可在同一反应中同时鉴别布鲁氏菌及牛种(1,2,4型),羊种(1,2和3型)和猪种(1型)布鲁氏菌,并有较好的特异性和敏感性。布鲁氏菌属,牛种,猪种和羊种布鲁氏菌引物的检测灵敏度分别为10 pg/μL,100 pg/μL, 10 pg/μL和100 pg/μL。BAMS-PCR对219株临床分离菌株的鉴定结果和常规生物分型方法的鉴定符合率为100%。经BAMS-PCR检测,97份临床血清样本仅6份为阳性,全血和组织(羊脾)样本全部为阴性。结论 BAMS-PCR是一种简便、快速、高效、准确的布鲁氏菌鉴别方法,可作为临床分离菌株的首选鉴别方法。