IMMUNOCHEMICAL AND CATALYTICAL CHARACTERIZATION OF THE HUMAN LIVER NADPH-CYTOCHROME P450 REDUCTASE

1. The NADPH-cytochrome P450 reductases (EC 1.6.2.4) from human and rabbit liver have been purified to electrophoretic homogeneity. The human reductase had an apparent monomeric molecular weight of 77,500 and the rabbit enzyme of 76,500. 2. Both flavoproteins exhibited typical flavoprotein spectra and contained equimolar quantities of FAD and FMN. The two reductases were catalytically active in reducing cytochrome c, ferricyanide and dichlorophenolindophenol, and in supporting rabbit liver cytochrome P450 Form 4 metabolism of 2-acetylaminofluorene. 3. An antibody raised in the goat against the human enzyme formed a precipitin line with the human reductase in a double-diffusion assay, but did not react with the rabbit reductase. Similarly, an antibody raised in the goat against the rabbit reductase formed a precipitin line with the rabbit enzyme, but did not cross-react with the human reductase. 4. Both antibodies inhibited cytochrome c reduction by the two reductases suggesting some immunochemical recognition. 5. Immunochemical cross-reactivity was confirmed when both reductases were subjected to the more sensitive immunoblot technique using either anti-human or anti-rabbit reductase IgG. 6. The human and rabbit reductases are essentially similar in amino acid composition, except that the former has larger amounts of serine and glycine.     

THE ACTIVE SITE OF AN INDUCIBLE ARYLACYLAMIDASE FROM PSEUDOMONAS ACIDOVORANS

Though very effectively ibhibited by both SH-group directed reagents and inhibitors typical for serine hydrolases, the inducible arylacylamidase from Pseudomonas acidovorans is a serine enzyme rather than a sulfhydryl enzyme. The amino acid sequence around the reactive serine residue is Gly-Ser-Ile. The sequence of a larger peptide from the active site is described.     

芳基异羟肟酸对核苷酸还原酶抑制机制的量子化学研究

应用cNDO/2量子化学方法计算了28个芳基异羟肟酸化合物的电子结构,讨论了异羟肟酸化合物抑制核苷酸还原酶的作用机制。在原络合机制(仅端基部分—CONHOH与酶中金属离子M进行单位点络合)基础上,提出了新的络合机制:当芳环上存在二相邻的—OH或—NH_2时,不仅端基部分能与金属离子M络合,且这二个相邻的—OH(NH_2)中的氧(氮)原子也可以与金属离子M络合,产生双位点络合,提高了化合物抑制核苷酸还原酶的活性。这一新的络合机制合理地解释了原络合机制所无法解释的实验事实。     

芳基异羟肟酸对核苷酸还原酶抑制机制的量子化学研究

应用cNDO/2量子化学方法计算了28个芳基异羟肟酸化合物的电子结构,讨论了异羟肟酸化合物抑制核苷酸还原酶的作用机制。在原络合机制(仅端基部分—CONHOH与酶中金属离子M进行单位点络合)基础上,提出了新的络合机制:当芳环上存在二相邻的—OH或—NH₂时,不仅端基部分能与金属离子M络合,且这二个相邻的—OH(NH₂)中的氧(氮)原子也可以与金属离子M络合,产生双位点络合,提高了化合物抑制核苷酸还原酶的活性。这一新的络合机制合理地解释了原络合机制所无法解释的实验事实。     

栉孔扇贝边的营养价值和应用研究

采用酶解方法制备栉扇贝蛋白粉。测定了扇贝蛋白粉与扇贝柱中的氨基酸含量，分别为８３．８４％和７６．１５％，两者中氨基酸的组成比例基本一致。     

海藻美容面膜对小鼠皮肤羟脯氨酸等多种氨基酸含量的影响

应用氨基酸自动分析仪,测定海藻美容面膜对小鼠皮肤组织中羟脯氨酸等多种氨基酸的含量。结果表明,海藻美容面膜的美容剂量组和大剂量组,均能提高小鼠皮肤中羟脯氨酸的含量,分别为2.10±0.40和2.32±0.36(g/100g),且在一定范围内呈剂量依赖关系(P<0.001)。此外,皮肤组织中甘氨酸、谷氨酸、脯氨酸、缬氨酸、酪氨酸、亮氨酸的含量也有不同程度的升高。     

白花败酱的化学成分研究

从败酱科植物白花败酱(Patrinia villosa Juss)的稀醇提取物中分离得到四个成分(A,B,C与D),经光谱分析和衍生物的制备,证明成分C与D系新的环烯醚萜类(iridoids)成分,分别命名为白花败酱醇(villosol,Ⅳ)和白花败酱醇甙(villosolside,Ⅴ),并证明了二者的立体结构。前者为后者的甙元。另外二个(A与B)分别为棕榈酸和齐墩果酸。     

五灵脂活性成分的研究

自五灵脂中分离得到13种化合物。根据化学方法及光谱(UV,IR,MS,¹H-NMR,¹³C-NMR)分析,其中晶V为一新的异海松酸的衍生物,命名为五灵脂酸。并鉴定其它9种化合物为邻苯二酚(Ⅰ)、苯甲酸(Ⅱ),3-蒈烯-9,10-二羧酸(Ⅲ)尿嘧啶(Ⅳ),间羟基苯甲酸(Ⅵ),原儿茶酸(Ⅶ),次黄嘌呤(Ⅺ),尿囊素(Ⅻ),L-酪氨酸(ⅩⅢ)。化合物Ⅰ～Ⅶ在体外有明显的抑制血小板聚集活性;Ⅰ,Ⅲ,Ⅴ,Ⅶ显示了不同程度的抗菌活性。     

氟乙酸类化合物抗日本血吸虫作用机理研究

本文报道了服氟乙酰胺小鼠体内血吸虫基本生化成分的变化及虫体柠檬酸积聚与虫肝移的关系。测定结果表明,血吸虫肝移与其体内柠檬酸积聚量有关。体外试验表明,血吸虫乳酸生成量与其葡萄糖利用量之比,在给药2次后从1下降至0.65左右,表明此时虫体糖酵解亦已发生故障,此外,对有氧代谢在血吸虫代谢中的重要性也进行了讨论。     

白木香酸晶体结构的研究

白木香酸(C₁₅H₂₄O₃)的晶体属单斜晶系,空间群C2,晶胞参数为:a=12.150(3),b=10.827(4),c=11.344(4),B=111.78(2)°,Z=4,理论密度Dc=1.208 gcm^-3。在“RIGAKU”衍射仪上收集强度数据;用直接法(MULTAN 80)解结构;全矩阵最小二乘修正结构,对2052个衍射点,最终R=0.060;差值Fourier综合确定了氢原子位置。     

维甲类化合物构效关系研究维甲酸核受体与选择性配体相互作用的分子模拟

目的：研究维甲酸核受体蛋白α,β和γ３种亚型的氨基酸序列差异性,确定可能与抑制剂选择性结合有关的氨基酸残基,揭示维甲酸类药物的毒副作用和与其结合多种受体亚型的关系,设计、开发受体选择性的维甲类分子。方法和结果：基于已解析的γ受体亚型的晶体结构,利用分子图形学和计算化学方法预测了未知的α,β亚型的三维结构;通过３种维甲酸核受体分别与其泛激动剂、选择性激动剂及无结合活性的维甲酸分子之间的分子对接研究,定性解析了抑制剂立体结构上的微小差异导致不同受体产生选择性的本质原因。结论：有选择性受体结合活性的维甲类化合物是进行低毒作用的新型维甲类药物研究和开发的基础。     

含硫杀菌药叶枯灵代谢产物的合成

This paper reports the synthesis of the metabolites．1,3-dfthiolan-2-ylidenehydrazine(I)，acetic acid 1,3-dithiolan-2-ylidenehydrazide(II)，pyruvic acid 1,3-dithiolan-2-ylidenehydrazone(III)and benzoic acid l，3-dithiolan-2-ylidenehydrazide-S-oxide(IV)of yekuling，a new sulfurorganic fungicide(benzoic acid 1，3-dithiolan-2-ylidenehydrazide)．The structures of all the compounds synthesized were characterized by elemental analysis，IR，UV，MS and ¹HNMR spectra．     

齐墩果酸防治实验性肝损伤作用的研究

齐墩果酸对CCl₄引起的大鼠急性肝损伤有明显的保护作用。表现在药物能使血清GPT明显下降;肝内甘油三酯蓄积量减少;肝细胞变性、坏死明显减轻,糖原蓄积增加;根据超微结构观察,肝细胞内线粒体肿胀与内质网囊泡变减轻。     

番麻蛋白酶活性中心基团的初步研究

在不引起酶变性的条件下,用半胱氨酸(Cys)专一性化学修饰试剂碘乙酸、对氯汞苯甲酸(?)(CMB),5,5′-二硫双硝基苯甲酸(DTNB)对酶分子进行化学修饰后,酶活性显著下降。发现酶的失活程度与修饰剂浓度间存在着化学计量关系,同时底物(酪蛋白)对酶活性有明显的保护作用。说明被修饰的部位(Cya残基)是酶的活性中心基团。Cys对酶有明显的激活作用;同时,(?)CMB、DTNB、碘乙酸对酶活性有明显的抑制作用(?)CMB抑制或O_2氧化而失活的酶溶液,又可被Cys重新激活,而恢复其活力,进一步证明其活性中心存在着Cys残基。以上事实均与典型的植物巯基蛋白酶——木瓜蛋白酶一致,说明番麻蛋白酶是一种巯基蛋白醇,其活性中心存在着Cys。     

甘油栓制备中存在的问题及其改进方法

甘油栓制备中存在“出汗”和硬度问题，在中国药典１９９５年版，ＢＰ１９９３年版收载甘油栓处方的基础上进行进一步实验研究，对处方提出改进意见；并对包装条件进行考察试验，基本上解决了上述问题。为制药厂或医院药房生产或制备甘油栓，提供了改进质量的方法。     

复方氨基酸胶囊的稳定性研究

用优选法处理自由变温加速试验数据,研究了复方氨基酸胶囊的稳定性。试验中考查了胶囊中最不稳定的色氨酸的含量变化。结果表明,复方氨基酸胶囊的室温贮存期约为2.4年。     

顺-3,4-二氯-α-氯代桂皮酰另丁胺的抗实验性癫痫作用及其机制的研究

顺—3,4—二氯—α—氯代桂皮酰另丁胺(代号:8601)为一种新的桂皮酰胺类化合物。它对MES有很强的对抗作用,其EK_(50)为20.3mg/kg,明显强于抗痫灵(ED_(50)为88.5mg/kg)。前者的治疗指数>44.3,后者为6.3。所以,8601有可能成为一种作用强、安全范围大的新的抗癫痫药。它也能有效的对抗icv谷氨酸钠和ZnSO_4所引起的惊厥,但对士的宁惊厥则无明显影响。8601抗最大抗电休克发作试验作用的机制可能与其升高脑中5HT和降低中枢兴奋性神经递质Glu和AsP的含量有关。     

若干莽草酸衍生物的合成和生物活性研究

虽然对莽草酸(shikimic acid)的研究由来已久,但只是在陆续发现了具有生物活性的乙二醛酶Ⅰ抑制剂(glyoxalase Ⅰinhibitor 1)和二(口恶)霉素(dioxolamycin 2)等含莽草酸类母核的天然产物后,才有合成莽草酸衍生物进行生物活性研究的报道,即由莽草酸甲酯合成乙二醛酶Ⅰ抑制剂的类似物3。     

有机锡化合物抗肿瘤生物活性研究

有机锡（ＩＶ）化合物能明显地抑制大鼠脑组织中ＰＫＣ活性和肿瘤细胞增殖，且两者之间存在着相关性。抗肿瘤活性的构效关系是：（１）有机基团Ｒ决定整个化合物的生物活性，Ｐｈ＞Ｅｔ＞ｎ－Ｂｕ；（２）卤素的电负性影响化合物活性的大小。抗肿瘤活性可能通过［ＳｎＲ２］２＋实现。并能部分地阻断ＨＬ－６０细胞周期中的Ｇ１期向ｓ期的移行。［ＳｎＰｈ２Ｆ２］，［ＳｎＰｈ２（ＣｙｓＯＳ）］ＨＯ２和［ＳｎＰｈ２Ｃｌ２·ｐｈｅｎ（ＣＨ３）２］对ＰＫＣ的ＩＣ５０值分别为２５，１５和２０μｍｏｌ·Ｌ－１，对ＨＬ－６０细胞的ＩＣ５０值分别为０．５，４．０和０．３μｍｏｌ·Ｌ－１。但它们无诱导分化ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞的作用。     

白三烯B4放射受体结合测定方法的建立及其特性的分析

白三烯Ｂ＿４放射受体结合测定方法的建立及其特性的分析赵宁，朱秀媛，程桂芳（中国医学科学院，中国协和医科大学药物研究所，北京１０００５０）白三烯Ｂ４（ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＢ４，ＬＴＢ４）是花生四烯酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄ）５－脂氧酶代谢产物...