胃癌组织MMP-3及MMP-13蛋白的表达

目的 探讨MMP-3、MMP-13蛋白在胃癌组织中的表达及意义.方法 选择60例手术切除的胃癌及癌旁组织,并以15例慢性浅表性胃炎组织作为对照,采用免疫组化方法检测MMP-3、MMP-13蛋白表达.结果 MMP-3在胃癌组织中表达率为60.0%,癌旁组织表达率为16.7%(x2=23.8308,P＜0.05);MMP-13在胃癌组织中表达率为68.3%,癌旁组织表达率为21.7%(x2=26.3973,P＜0.05).胃癌组织MMP-3、MMP-13蛋白表达率显著高于癌旁组织(P＜0.05);淋巴结转移组显著高于无转移组(P＜0.05);在中、晚期胃癌中的表迭均高于早期胃癌.MMP-3、MMP-13之间呈正相关(r=0.8337,P＜0.05).结论 胃癌组织MMP-3、MMP-13蛋白表达率增高,与胃癌的漫润和转移有关.可作为判断胃癌恶性程度和预测预后的参考指标.     

AGEs对兔软骨细胞TNF-α和MMP-13表达的影响及其机制研究

目的:探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对兔软骨细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响及可能机制。方法:不同浓度的AGEs与兔软骨细胞共孵育48h后采用RT-PCR方法检测TNF-α和MMP-13的mRNA表达量,试剂盒方法检测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平。AGEs与兔软骨细胞共孵育的同时,分别加入AGEs受体的抗体(Anti-RAGE)及核因子-κB(NF-κB)的特异性阻断剂PDTC处理,同法检测TNF-α和MMP-13的mRNA表达量。结果:与AGEs共孵育48h后兔软骨细胞TNF-α及MMP-13表达明显增多,CAT、SOD活性降低,MDA、ROS含量增多,均呈浓度依赖性;分别加入Anti-RAGE及PDTC处理后软骨细胞TNF-α及MMP-13表达明显低于AGEs单独处理组(P<0.01),与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AGEs能诱导软骨细胞TNF-α和MMP-13表达增多,其机制与激活RAGE,诱导ROS生成增多,激活NF-κB信号通路有关。     

MMP-13在家兔动脉粥样硬化斑块中表达的研究

目的:研究高脂血症家兔的动脉粥样硬化斑块中基质金属蛋白酶-13的表达,为进一步探讨动脉粥样硬化发病机制提供形态学依据.方法:将24只健康雄性新西兰白兔随机分为两组:(1)空白对照组(正常组)8只,每天给予普通饲料;(2)阳性对照组(模型组)16只,每天给予普通饲料 1g胆固醇 15%猪油.16周末所有实验用兔麻醉处死,各组行主动脉粥样硬化病理形态学观察,包括大体形态学观察、光镜观察.根据形态学特点再分成稳定斑块和不稳定斑块,通过免疫组化对斑块内的病变进行定量分析.结果:S-P免疫组化可见模型组中基质金属蛋白酶-13在粥样斑块中平滑肌细胞及泡沫细胞中的细胞核上呈阳性表达,而正常血管壁表达阴性.在稳定性斑块与不稳定性斑块对比中发现,MMP-13在不稳定斑块中表达明显较稳定斑块要高.结论:MMP-13在AS不稳定斑块中较稳定斑块阳性表达明显,显示MMP-13与AS斑块的不稳定性有密切联系.     

TNF-α和MMP-3在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的 讨论肿瘤坏死因子α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)在子宫内膜异位症(EMs)中的表达和发病的关系.方法 以EMs患者20例作研究组,分别取其术前清晨空腹静脉血3mL和在位与异位内膜,以子宫肌瘤患者20例的血清和内膜为对照组.内膜中的MMP-3采用免疫组化方法测定.血清中TNF-αd和MMP-3的含量采用ELISA法检测.结果 MMP-3、TNF-α在血清中的含量在实验组明显高于对照组(P＜0.01).MMP-3主要定位于子宫内膜组织的问质细胞.在异位内膜中,其阳性染色强度均较强,以(+)～(++)为主,呈棕黄色或棕褐色,明显强于正常子宫内膜(P…＜0.05),差异有统计学意义.MMP-3在正常子宫内膜组中增殖期的表达强于分泌期(P＜0.05).结论 MMP-3在EMs患者异位内膜和在位内膜中的高表达,促进了内膜的侵袭、浸润.TNF-α和MMP-3在EMs患者血清中的含量升高,在黏附的同时促进新生毛细血管的形成,加速了EMs的发生发展.     

IL-17A对成骨细胞系MC3T3-E1细胞中明胶酶表达的影响及其作用机制

目的检测IL-17A对MC3T3-E1细胞中明胶酶表达的影响,并探讨其作用机制。方法采用小鼠重组细胞因子IL-17A作用于MC3T3-E1细胞,通过Real-time PCR和ELISA分别检测MMP-2及MMP-9在mRNA水平及蛋白水平上的表达情况;通过免疫荧光和Western Blot检测NF-κB的磷酸化水平的变化,并通过使用NF-κB阻断剂检测其在MMP-9表达中的影响。结果 IL-17A在mRNA水平及蛋白水平上均上调MMP-9的表达(P <0. 01),然而对MMP-2的表达无明显影响; IL-17A促进转录因子NF-κB的磷酸化水平(P <0. 01);阻断NFκB的活性可减弱IL-17A对MMP-9的上调作用(P <0. 05); IL-17A对MC3T3-E1细胞中TIMP-1及TIMP-2的表达没有影响。结论 IL-17A可以通过激活NF-κB促进MC3T3-E1细胞分泌MMP-9。     

强直性脊柱炎患者TNF-α与MMP-3的相关性

目的研究强直性脊柱炎患者中MMP-3与TNF-α间的作用机制。方法在体外分别分离出5例As患者的外周血单个核细胞（PBMC）和6例As患者的膝关节液中的单个核细胞（SFMC），利用不同浓度人重组MMP-3分别在体外诱导PBMC和SFMC，然后应用ELISA技术检测诱导前后TNF-α度变化；同时在分离了7例脊柱关节病（SpA）患者的PBMC后，又进一步分离出它们的贴壁细胞（adherent cells），研究MMP-3是否选择性地作用于单核-巨噬细胞系统还是淋巴细胞系统。结果不同浓度的MMP-3均能诱导AS患者PBMC释放TNF-α并且TNF-α的浓度具有剂量依赖性；MMP-3能够明显诱导贴壁细胞分泌TNF-α；MMP-3对SFMC具有一定程度的诱导作用，但同时还观察到与PBMC不同的是，即使没有MMP-3的诱导作用，SFMC自身也能分泌一定程度的TNF—α。结论AS患者中，MMP-3与TNF-α之间的相互作用可能是参与其发病的重要原因之一，同时MMP-3可能是通过选择性地作用于AS患者的单核-巨噬细胞系统，而非通过淋巴细胞系统来发挥作用。     

炎性相关因子诱导卵巢癌细胞增殖信号和蛋白酶表达的实验研究

目的 研究炎性微环境中脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor, TNF-α）诱导卵巢癌细胞增殖信号及蛋白酶的表达。方法 采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）和Western印迹法分别检测对照组、LPS和TNF-α刺激组以及添加LPS和TNF-α抑制剂组卵巢癌细胞中的细胞增殖信号及蛋白酶的mRNA和蛋白表达情况;并通过ELISA检测这些细胞上清液中蛋白酶的表达。结果 LPS和TNF-α刺激组中的炎性增殖信号JNK、p38、ERK和NF-κB/p65及蛋白酶（基质金属蛋白酶-9、中性粒细胞蛋白酶和组织蛋白酶）的mRNA明显高于对照组（P＜0.05）,且该应答可以被LPS和TNF-α拮抗剂所抑制。LPS和TNF-α处理组诱导细胞增殖信号相关蛋白的激活及蛋白酶的表达,同时此效应可以被相关受体拮抗剂所抑制。结论 肿瘤微环境中的炎性相关因子LPS和TNF-α通过诱导卵巢癌细胞炎性增殖信号及蛋白酶的表达,分别从促进细胞炎性增殖及细胞侵袭转移能力方面影响卵巢癌的发生发展。     

TNF-α、MMP-9在扁平苔藓皮损中的表达及意义

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在扁平苔藓发病中的作用.方法:采用免疫组织化学法和RT-PCR方法检测扁平苔藓皮损处及正常组织中TNF-α和MMP-9的表达情况.结果:两者在患者组中的表达高于正常对照组.结论:TNF-α和MMP-9可能参与了扁平苔藓的发病.     

MMP-2和TIMP-2在脂多糖诱导的新生大鼠急性肺损伤中表达的变化

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metallo proteinase-2,MMP-2)及其组织抑制剂(tissue inhibitors of metallo proteinase-2,TIMP-2)在脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤中的作用.方法 选择30只新生7日龄SD大鼠,随机分为生理盐水对照组(n=6)和急性肺损伤组(n=24),后者进一步分为1、2、4及6h亚组,每组6只.以LPS 腹腔注射建立急性肺损伤模型,观察注射LPS后不同时间点大鼠肺组织的病理改变,用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肺组织中MMP-2和TIMP-2的蛋白及mRNA表达.结果 病理学检查证实新生大鼠急性肺损伤模型复制成功.与生理盐水对照组比较,急性肺损伤组注射LPS后MMP-2蛋白及mRNA均表达增加,4～6h达高峰,差异有统计学意义(均P<0.05).TIMP-2蛋白及mRNA表达在6h内可见微弱增加趋势,但与生理盐水对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05).结论 LPS致新生大鼠的急性肺损伤存在MMP-2和TIMP-2的表达失衡,进而可能通过破坏基底膜参与急性肺损伤的病理过程.     

外源性H2S对糖尿病大鼠心肌纤维化及MMP-13、MMP-14和TIMP-1表达的影响

目的：探讨外源性H2S对糖尿病大鼠心肌纤维化及基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）、MMP-14和金属蛋白酶组织抑制因子-1（tissue inhibitor of metallo proteinase-1,TIMP-1）表达的影响。方法：52只SD雄性大鼠随机分成4组（每组13只）：正常对照组、糖尿病大鼠组（STZ组）、硫化氢干预糖尿病大鼠组（STZ+H2S组）、硫化氢干预正常大鼠组（H2S组）。腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）（40 mg/kg）建立糖尿病模型;正常对照组每天腹腔注射等剂量生理盐水;STZ组与H2S组每天腹腔注射硫氢化钠（H2S供体）溶液（100 μmol/kg）。HE和VG染色观察心肌纤维化,Western blot检测Ⅲ型胶原蛋白以及MMP-13、MMP-14和TIMP-1的表达。结果：排除死亡后每组成功建模量分别为12、9、9、10只;与正常对照组相比,STZ组心肌细胞排列紊乱,细胞间胶原纤维堆积明显增加,Ⅲ型胶原蛋白表达明显上调（P＜0.01）,而MMP-13、MMP-14和TIMP-1蛋白表达也增加（P＜0.01）;与STZ组相比,STZ+H2S组大鼠心肌细胞排列紊乱有所改善,细胞间胶原纤维堆积减少,Ⅲ型胶原蛋白表达下调（P＜0.01）,MMP-13、 MMP-14和TIMP-1蛋白的表达也明显减少（P＜0.01）。结论：H2S可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,其机制可能与下调MMP-13、MMP-14和TIMP-1蛋白的表达有关。     

侵袭性牙周炎患者牙龈组织中MMP-8及TIMP-1的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶-8(MMP-8)及其抑制因子-1(TIMP-1)在侵袭性牙周炎(AgP)牙龈组织中的表达情况。方法:采用免疫组织化学方法检测15例AgP患者和20例对照的牙龈组织中MMP-8和TIMP-1蛋白的表达情况。结果:MMP-8和TIMP-1在2组牙龈组织的上皮内及上皮下结缔组织中均有表达。AgP组MMP-8表达水平和MMP-8/TIMP-1均高于对照组(Z=2.990和4.911,P<0.05),2组TIMP-1的表达差异无统计学意义(Z=1.822,P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,AUC(MMP-8)=0.752(95%CI=0.618～0.885,P=0.003),AUC(MMP-8/TIMP-1)=0.913(95%CI=0.831～0.996,P<0.001),AUC(TIMP-1)=0.347(95%CI=0.194～0.499,P=0.068)。结论:牙龈组织中MMP-8表达水平和MMP-8/TIMP-1可以作为诊断AgP的潜在指标。     

脑膜瘤组织中MMP-9、TIMP-1的表达

目的:探讨脑膜瘤组织中基质金属蛋白酶- 9(MMP- 9)及其组织抑制因子 (TIMP)- 1的表达。方法:采用免疫组化S- P法检测 10例正常蛛网膜组织、28例良性脑膜瘤组织和 16例恶性脑膜瘤组织中MMP -9及TIMP- 1的表达水平。结果:正常蛛网膜组织、良性脑膜瘤组织和恶性脑膜瘤组织中MMP- 9的阳性表达率分别为 0%、25. 0%和 62. 5%,恶性脑膜瘤组织中MMP- 9阳性率高于良性脑膜瘤组织,差异有统计学意义(P<0. 01);正常蛛网膜组织中TIMP 1的表达率最高 (100. 0% ),良性脑膜瘤组织次之 (89. 3% ),恶性脑膜瘤组织最低 18. 8%,各组间比较差异有统计学意义(P<0. 01)。结论:MMP- 9的高表达和TIMP 1的低表达与脑膜瘤的发病过程有关。     

种植体周围龈沟液中TNF-α和MMP-8水平的研究

[摘要]　目的　探讨种植体周围龈沟液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和基质金属蛋白酶-8（MMP-8）的水平与种植体周围炎的关系。　方法　　选择2012年5月至2014年5月在大连医科大学口腔医学院行OSSTEM种植体种植修复的患者36例作为研究对象（种植体48颗）,根据种植体周围情况将其分为健康种植体组（38颗）和炎症种植体组（10颗）,将对侧同名健康天然牙作为对照组（48颗）。收集各组种植体和天然牙周围龈沟液,运用ELISA法检测其中TNF-α和MMP-8的浓度,同时检测牙周探诊深度（PD）和牙龈出血指数（SBI）。分析PD、SBI值与龈沟液中TNF-α、MMP-8水平的相关性。　结果　炎症种植体组PD、SBI以及龈沟液中TNF-α和MMP-8水平均高于健康种植体组和健康天然牙组,差异具有显著性意义（P<0.05）。SBI、PD与TNF-α、MMP-8水平均呈正相关关系（P<0.01）。　结论　种植体周围龈沟液中TNF-α和MMP-8水平和种植体周围炎密切相关,可在一定程度上反映种植体周围组织的健康状态。     

急性肺损伤大鼠蛋白酶激活受体-1表达及其机制

目的 探讨肺损伤后蛋白酶激活受体1(protease-activated receptor-1,PAR-1)的表达情况及其与炎症因子之间的关系.方法 腹腔注射内毒素的方法复制大鼠肺损伤的模型,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测PAR-Ⅰ mRNA表达,HE染色观察肺组织病理变化,酶联免疫吸附(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测炎性因子的改变.结果 内毒素肺损伤时,PAR-1 mRNA随着脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预时间的延长表达逐渐增加.肺内肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、金属基质蛋白酶-12(matrix metalloproteinase-12,MMP-12)升高与PAR-1的水平密切相关.结论 PAR-1的表达与TNF-α,MMP-12相关,PAR-1的抑制剂减少了肺组织MMP-12和TNF-α的释放,可能具有抗炎作用.     

白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶13在骨性关节炎中的表达及相关性

目的 探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在骨性关节炎中的表达及相关性.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法及酶联免疫吸附(ELSIA)法检测72例骨性关节炎患者及32例正常对照者关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-13的表达,对骨性关节炎患者病情严重程度进行美国纽约特种外科医院(HSS)评分,采用Pearson 相关分析法分析骨性关节炎患者IL-1β、TNF-α与MMP-13的相关性以及它们与HSS评分之间的相关性.结果 骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13基因及蛋白表达水平均高于正常对照者(P<0.01),骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13蛋白水平均与骨性关节炎严重程度呈正相关,IL-1β和TNF-α均与MMP-13蛋白水平呈正相关.结论 IL-1β、TNF-α及MMP-13与骨性关节炎发生、发展有密切关系,并且与病情严重程度相关,关节液中MMP-13的高表达可能是通过IL-1β及TNF-α等炎性细胞因子激活、上调.测定骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-13 水平对骨性关节炎的诊断、病情判断和治疗具有重要意义.     

人子宫颈癌组织中MMP-26、MMP-9和TIMP-4的表达及其意义

目的：检测人子宫颈癌组织中基质金属蛋白酶-26 (MMP-26)、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制因子-4（TIMP-4）的表达,探讨其与临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测10例正常子宫颈组织、6例宫颈原位癌和79例宫颈浸润癌组织中MMP-26、MMP-9及TIMP-4的表达。结果：MMP-26在宫颈原位癌和浸润性癌中阳性表达率分别为83.33%和82.28%,较正常子宫颈组织中表达明显增强（P<0.05）;MMP-26表达与子宫颈癌的肌层浸润深度和淋巴结转移有密切关联（P<0.05）,随着子宫颈癌浸润深度的增加,MMP-26阳性表达增强;淋巴结转移组MMP-26蛋白阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。MMP-9在宫颈浸润癌组织中阳性率为68.35%,MMP-9表达与子宫颈癌病理分级有密切关联,其在Ⅲ级子宫颈癌组织中的表达明显高于Ⅰ和Ⅱ级（P<0.05）。TIMP-4在正常子宫颈、原位癌及浸润性癌组织中的表达呈下降趋势,但差异无显著性（P>0.05）;TIMP-4的表达与子宫颈癌的临床分期有密切关联,其在早期癌中的表达高于晚期癌（P<0.05）。MMP-26与TIMP-4在子宫颈癌组织中的表达呈负相关关系（r_s=－0.259,P<0.05）;MMP-26与MMP-9蛋白在子宫颈癌组织中的表达无相关性（r_s=0.140,P>0.05）。结论：MMP-26和MMP-9在宫颈癌组织中高表达,促进其侵袭和转移;TIMP-4在子宫颈癌组织中的表达下降,提示三者联合应用有望成为一项判断子宫颈癌预后的指标。     

MMP-3、MMP-9及TIMP-1在急性心肌梗塞中的表达及其意义

目的: 观察急性心肌梗塞（AMI）患者血清中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）以及基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）水平的变化,探讨冠状动脉粥样硬化斑块破裂的机制。方法:选择67例AMI患者,发病3　h～5　d,选择同期住院非冠心病患者40例作为对照组,应用ELISA法测定血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1含量以及血清肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、肌酸激酶-MB（CK-MB）水平。结果：与对照组比较,AMI组血清中MMP-3、MMP-9和TIMP-1含量明显增高（P<0.05或P<0.01）;AMI组MMP-3/TIMP-1比值和MMP-9/TIMP-1比值均高于对照组（P<0.05）。MMP-3、MMP-9、TIMP-1的含量与cTnI、CK-MB水平无相关性。结论：MMP-3、MMP-9过度表达以及MMP-3/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比例失衡,参与冠状动脉粥样斑块的破裂和心肌梗塞的发生。     

MMP-3与细胞外MMP诱导因子在乳腺良、恶性病变中的表达及意义

目的：检测基质金属蛋白酶3（matrix metalloproteinase3,MMP3）和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN）在乳腺良、恶性病变组织中的表达和意义。方法：应用免疫组化二步法,检测58例乳腺癌,28例乳腺癌前病变、40例增生性病变、40例良性肿瘤及20例正常乳腺组织中MMP3和EMMPRIN蛋白的表达,并采用原位杂交法检测各种病变及正常乳腺组织各20例中MMP3 mRNA、EMMPRIN mRNA的表达,分析各指标的积分光密度（integral optic density ,IOD）值。结果：镜下观察可见MMP3、EMMPRIN及MMP3 mRNA、EMMPRIN mRNA在癌和癌前病变中的表达均较增生性病变、良性肿瘤及正常乳腺组织强。MMP3、EMMPRIN及MMP3 mRNA、EMMPRIN mRNA在癌和癌前病变组中的IOD值较增生性病变、良性肿瘤及正常乳腺组织组高（P＜0.01),且在后3组中的表达差异无统计学意义。MMP3、EMMPRIN和MMP3 mRNA、EMMPRIN mRNA在癌和癌前病变组中的表达水平差异均无统计学意义。EMMPRIN蛋白在乳腺癌伴腋下淋巴结转移组的表达高于无淋巴结转移组（P＜0.05)。在各病变组中,MMP3 mRNA与EMMPRIN mRNA的表达呈正相关,但MMP3和EMMPRIN蛋白的相关性在不同病变中有所不同。结论：MMP3、EMMPRIN过表达在乳腺癌前病变向癌转变的过程中可能起重要作用。EMMPRIN高表达的乳腺癌患者更易发生腋下淋巴结转移。     

子宫内膜异位症异位内膜组织中TNF-α、MMP-2蛋白的表达

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在子宫内膜异位症(内异症)发病机制中的作用.方法:采用免疫组化法检测39例内异症患者的异位内膜组织(试验组)与40例正常子宫内膜组织(对照组)中TNF-α、MMP-2蛋白的表达.结果:TNF-α、MMP-2蛋白染色主要定位于腺体细胞的胞质,间质细胞弱着色.2者在试验组的阳性表达灰度值高于对照组(P＜0.05).结论:内异症患者异位内膜组织中TNF-α、MMP-2的过表达可能与内异症的发生发展有关.