Box-Behnken设计优化黄芩超高压提取工艺

目的:应用Box-Behnken试验设计优选黄芩的超高压提取工艺。方法:以黄芩苷提取率为指标,采用单因素试验考察提取压力、提取次数、液固比等因素对黄芩超高压提取工艺的影响;Box-Behnken试验设计考察乙醇体积分数、液固比、提取压力对提取工艺的影响,优化工艺参数。结果:最佳提取工艺条件为乙醇体积分数72%,提取压力100 MPa,液固比100∶1,提取时间10 s,黄芩苷提取率102.65 mg.g-1。结论:优选的工艺提取率高、提取温度低、耗时短、能耗少,适用于黄芩的工业化提取。     

均匀设计法优化黄芩提取工艺

目的 以黄芩苷为主要质量控制指标,优化出黄芩水提的最佳工艺。方法 利用计算机软件“均匀设计回归分析及优化系统”。结果 最佳工艺为提取3次,每次100mL,提取30min。结论 计算机软件“均匀设计回归分析及优化系统”是优化中药提取工艺的一个非常有效的工具。     

Box-Behnken效应面法优化复方土茯苓颗粒提取工艺

目的:优选复方土茯苓颗粒的提取工艺条件。方法:以落新妇苷、总黄酮提取量和出膏率的总评"归一值"(OD)为因变量,通过对提取次数、提取时间、溶媒比各水平进行多元线性回归及二项式拟合,采用Box-Behnken效应面法优选提取工艺。采用HPLC测定落新妇苷含量,流动相乙腈-0.1%磷酸水(20∶80),检测波长290 nm。结果:最佳提取工艺为加9.8倍量水提取3次,每次1.4 h;落新妇苷提取量1.991 mg·g-1,总黄酮提取量54.436 mg·g-1,干膏得率8.558%,OD实测值与预测值相对偏差1.54%。结论:Box-Behnken效应面法用于复方土茯苓颗粒提取工艺的优选是可行的。     

Box-Behnken设计-效应面法优化黄连多糖的提取工艺

目的：本研究旨在优选黄连中黄连多糖的提取工艺条件。方法：采用Box-Behnken设计-效应面法,以黄连出膏率、多糖得率和糖醛酸得率为评价指标,考察黄连多糖回流提取过程的提取温度、提取次数、提取时间和料液比对提取工艺的影响。结果：最终确定黄连多糖的最佳提取条件为：提取温度100℃,提取时间3.8 h,提取次数3次,料液比 1?15.7。结论：运用Box-Behnken设计-效应面法优化黄连多糖的提取方法是准确、合理、可行的。     

Box-Behnken设计优化荷叶总黄酮的温浸提取工艺

目的:优化荷叶总黄酮的温浸提取工艺.方法:在单因素试验基础上,以总黄酮提取率为指标,通过Box-Behnken响应面设计考察乙醇体积分数、温浸时间、液固比及温浸温度对荷叶总黄酮提取工艺的影响.结果:最佳提取工艺为加39倍量51％乙醇于71℃温浸2次,每次62 min,总黄酮提取率6.21％.结论:利用温浸方法提取荷叶总黄酮的工艺稳定可行.     

Plackett-Burnman设计联合Box-Behnken设计-效应面法优化心神宁片的提取工艺

目的优选心神宁片的最优提取工艺条件。方法以干膏率及栀子苷、斯皮诺素的转移率为评价指标,以PlackettBurnman设计联合Box-Behnken设计-效应面法对心神宁片的提取工艺进行考察,确定最优提取工艺参数。结果最优提取工艺为7.5倍量70%乙醇,回流提取3次,每次1.5 h。结论优选的醇提工艺经中试验证合理可行,可以用于工业大生产。     

星点设计-效应面法优选黄芩提取工艺的研究

目的优选黄芩的最佳提取工艺条件。方法以黄芩苷提取率为指标,乙醇浓度、回流时间及溶剂量为考察因素,采用星点设计-效应面优化法优选提取工艺条件,并进行预测分析。结果最优提取工艺条件为乙醇浓度45%、提取时间120min、溶剂用量4倍,二项式拟和复合相关系数较高r=0.9759,提取率预测值与理论值偏差率为-3.86%。结论星点设计-效应面法优选黄芩提取工艺方法简单、精密度高、预测性好。     

正交设计联用Box-Behnken效应面法优选复方石斛清肺散提取工艺

目的采用正交设计和Box-Behnken响应曲面法优选复方石斛清肺散最佳提取工艺。方法出膏率、橙皮苷含有量为评价指标,通过正交设计初步优选提取工艺,Box-Behnken效应面法进一步优化工艺,从可行性和经济性确定最终提取工艺条件。结果正交设计优选的最佳工艺为12倍量50%乙醇,回流提取3次,每次1.5 h;效应面法优化工艺为14倍量32%乙醇,回流提取3次,每次1.5 h。结论对比验证试验表明,Box-Behnken效应面法优化后提取溶剂用量稍增加,但乙醇体积分数显著降低,经济成本将大幅降低。     

黄芩提取工艺的优化

目的:研究黄芩的提取工艺,提高黄芩苷的转移率。方法:以黄芩苷的含量和出膏率为综合指标,应用正交实验设计优化黄芩的提取工艺。结果:黄芩提取的较佳工艺加8倍量水,提取3次,每次1小时,将提取液浓缩至1∶2(生药克数/药液体积)时,加60%乙醇醇沉即得。结论:优选得到的工艺稳定提取效率高。     

Box-Behnken效应面法优化牛大力总黄酮提取工艺

目的:优化牛大力总黄酮提取工艺。方法:采用超声提取法,以总黄酮提取率为评价指标,以乙醇浓度、乙醇体积、提取时间为考察因素,利用Box-Behnken效应面法优化提取工艺。结果:最佳工艺为乙醇浓度81.07%、乙醇体积21.63倍、超声提取2次、每次52.51 min,温度60℃。在此条件下,牛大力总黄酮提取率达3.81 mg/g。结论:Box-Behnken效应面法优选的提取工艺稳定可行,实验值与预测值相吻合。     

市售黄芩饮片的炮制质量

目的:测定黄芩药材和不同厂家的黄芩饮片中黄芩素转化率,对黄芩饮片的炮制质量进行探讨。方法:采用HPLC测定黄芩药材和不同厂家的黄芩饮片中黄芩苷与黄芩素的含量,并测定其超声自身酶解后的黄芩素含量,计算各自的黄芩素转化率。结果:黄芩药材中黄芩素的转化率为81.1%,按药典方法炮制的黄芩饮片的黄芩素转化率为5.3%,不同厂家的黄芩饮片的黄芩素转化率依次为76.3%,73.0%,54.81%,52.7%,61.3%,71.5%。结论:市售黄芩饮片的炮制质量偏低。     

黄芩中主要黄酮类成分的含量分析

目的：建立黄芩中主要黄酮类成分的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)含量测定方法,并研究产地、生长年限、采收期、栽培和加工方法等对主要黄酮类成分含量的影响。方法：采用Thermo ODS-2 Hypersil 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸水-四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱,检测波长274 nm,流速1.00 mL·min^-1,柱温26 ℃,进样量20 μL。结果：6个主要黄酮,黄芩苷(1)、千层纸素A苷(2)、汉黄芩苷(3)、黄芩素(4)、汉黄芩素(5)和千层纸素 A(6),分别在选定范围内线性关系良好(R²≥0.999 3),平均加样回收率介于96.6%～103.0%,RSD均小于5.0%(n=9)。结果：不同产区黄芩质量差异很大。传统道地和传统非道地黄芩药材中黄酮含量没有显著性差异(P=0.480～1.000),但现在道地与非道地、传统道地与现在道地黄芩药材之间化合物1,2以及6个黄酮含量之和存在较显著差异(P=0.005～0.013);生长年限对药材质量影响不是特别显著(P>0.148～0.966),但一、二年生药材中的黄酮含量稍高;春季采收比秋季采收的黄芩黄酮含量高;野生与栽培药材中的黄酮含量除化合物3(P=0.019)和6(P=0.038)外,其他没有显著性差异(P=0.185～0.635);与药材比较商品饮片中黄酮苷的含量较低,而黄酮苷元的含量则较高。结论：本法简便、准确、重现性好,可作为黄芩药材质量检测的方法。     

黄芩中主要黄酮类成分的含量分析

目的:建立黄芩中主要黄酮类成分的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)含量测定方法,并研究产地、生长年限、采收期、栽培和加工方法等对主要黄酮类成分含量的影响.方法:采用Thermo ODS-2 Hypersil色谱柱(4.6 min×250mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水一四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱,检测波长274 nm,流速1.00 mL·min~(-1),柱温26℃,进样量20μL.结果:6个主要黄酮,黄芩苷(1)、千层纸素A苷(2)、汉黄芩苷(3)、黄芩素(4)、汉黄芩素(5)和千层纸素A(6),分别在选定范围内线性关系良好(R~2≥0.999 3),平均加样回收率介于96.6%～103.0%,RSD均小于5.0%(n=9).结果:不同产区黄芩质量差异很大.传统道地和传统非道地黄芩药材中黄酮含量没有显著性差异,但现在道地与非道地、传统道地与现在道地黄芩药材之间化合物1,2以及6个黄酮含量之和存在较显著差异;生长年限对药材质量影响不是特别显著,但一、二年生药材中的黄酮含量稍高;春季采收比秋季采收的黄芩黄酮含量高;野生与栽培药材中的黄酮含量除化合物3,6外,其他没有显著性差异;与药材比较商品饮片中黄酮苷的含量较低,而黄酮苷元的含量则较高.结论:本法简便、准确、重现性好,可作为黄芩药材质量检测的方法.     

正交试验法优选黄芩炮制工艺

目的:优选黄芩炮制的最佳工艺。方法:采用正交试验设计法,以黄芩苷得率为指标,确定蒸制时间,蒸制温度,投药时机3个炮制参数。结果:确定黄芩炮制最佳工艺条件为沸水投药200℃蒸制50 min。结论:黄芩炮制的最佳工艺条件科学合理,稳定可行。     

黄芩查耳酮异构酶基因的克隆和生物信息学分析

目的从黄芩愈伤组织中克隆查耳酮异构酶(CHI)基因,并对其进行生物信息学分析。方法从黄芩愈伤组织中提取RNA,反转录为cDNA,设计特异性引物,克隆得到黄芩查耳酮异构酶(sbCHI)基因。通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,使用MEGA5.1构建sbCHI与相关物种查耳酮异构酶基因的系统进化树。结果获得sbCHI基因(GeneBank登录号KP064512)全长648 bp,含有1个完整的开放阅读框,编码215个氨基酸。为不稳定亲水性蛋白,sbCHI编码蛋白相对分子质量为22 980,等电点(pI)为5.09,不含信号肽,无跨膜区,具有1个查耳酮超级家族的保守结构域。二级结构中α-螺旋(alpha helix)占37.21%、β-延伸(β-extended)占23.25%、无规则卷曲(random coil)占39.54%。同源性分析显示,sbCHI基冈与黄芩(ADQ13184.1)核苷酸序列相似性为99.69%、氨基酸序列相似性为99.07%,仅在第31、160位不同。结论成功从黄芩愈伤组织中克隆得到sbCHI,为进一步鉴定sbCHI基因的功能及黄芩苷的合成生物学研究提供基础。     

黄芩茎叶化学成分研究

目的: 研究黄芩茎叶的化学成分。 方法: 采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20柱色谱法等进行分离纯化,并通过理化常数测定和波谱数据分析鉴定其化学结构。 结果: 从黄芩茎叶中分离鉴定了11个化合物,分别为分别鉴定为:白杨素(1),5,7,4'-三羟基-6-甲氧基黄酮(2),汉黄芩素(3),5,4'-二羟基-6,7,3',5'-四甲氧基黄酮(4),芹菜素(5),异高山黄芩素(6),黄芩素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7),黄芩苷(8),芹菜素 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9),白杨素7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(10),千层纸素A-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)。 结论: 化合物2,4,6首次从该植物分离得到,化合物9,11首次从黄芩茎叶分离得到。     

黄芩药材UPLC-MS特征指纹图谱研究

目的:建立黄芩药材UPLC-MS特征指纹图谱分析方法,为黄芩药材的整体质量控制提供更为有效的评价方法。方法:采用70%甲醇和甲醇两步提取的方法制备黄芩药材供试品溶液,应用UPLC-ESI-TOF/MS联用技术进行检测,采集10个产地黄芩药材的色谱图,根据保留时间和分子离子m/z确定共有峰,创建提取离子色谱图用以计算峰面积,利用相关系数法和夹角余弦法计算相对峰面积的相似度。结果:确定了黄芩药材的23个共有峰,建立了这23个共有峰为特征指纹信息的黄芩药材UPLC-MS指纹图谱,10个产地样品的指纹图谱整体相似度>0.9,各产地黄芩药材之间相似度良好。结论:该方法准确可靠,重复性好,可用于黄芩药材的整体质量评价。     

基于抗菌活性及病理指标评价子芩与枯芩对肺炎的药效学差异

目的比较子芩与枯芩(均为黄芩的根)体外抗菌活性及体内对肺炎大鼠的药效学差异。方法采用体外实验,以二倍微量稀释法测定子芩与枯芩对肺炎链球菌的最小抑菌浓度(MIC);体内实验以肺炎大鼠为模型,选择体温、肺脏指数、血常规检测以及大鼠肺部病理切片为评价指标评价子芩与枯芩对肺炎大鼠作用的药效学差异;采用偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)法,对子芩和枯芩的抗菌活性及病理指标进行分析。结果子芩对肺炎链球菌的MIC为0.5 g/mL,枯芩的MIC为0.25 g/mL;子芩和枯芩均能显著降低肺炎大鼠的体温、肺脏指数、全血中白细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数;PLS-DA分析显示子芩与枯芩的体外抗菌活性及体内抗肺炎活性具有显著差异。结论子芩与枯芩对肺炎均具有一定的治疗作用,两者的作用强度有明显差异,枯芩作用优于子芩。     

Box-Behnken效应面法优化地乌总皂苷提取工艺

目的:优选地乌总皂苷的提取工艺条件.方法:以总皂苷提取率为指标,通过单因素试验和Box-Behnken效应面法考察加水量、提取时间、提取次数、浸泡时间等因素对提取工艺的影响.结果:最佳提取工艺为加8.8倍量水浸泡90 min,煎煮提取2次,每次2.5h.地乌总皂苷提取率11.23％.结论:优选的提取工艺稳定可行,数学模型的预测值与试验观察值相符.