黔岭淫羊藿总黄酮类成分对去势雌性大鼠骨质疏松症的实验研究

目的：观察黔岭淫羊藿总黄酮类成分（YYH-C）对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用。 方法：将去卵巢大鼠随机分为模型组、YYH-C低、中、高剂量组（生药0.7,1.4,2.8 g·kg^-1）和阳性药补佳乐组（0.15 mg·kg^-1）,另设假手术组。连续灌胃给药3个月,测定血清中甲状旁腺激素（PTH）、I型前胶原N末端前肽（PINP）、碱性磷酸酶（ALP）、钙（Ca）和磷（P）含量;取左侧股骨和腰椎,进行骨计量学指标测定,包括骨密度、骨钙磷含量和骨灰重/干重百分比;取右侧股骨进行骨组织形态学观察。 结果：和假手术组比较,模型组大鼠PTH,ALP明显升高,PINP,血钙水平明显降低。YYH-C 3个剂量组均能明显对抗PINP的降低,低、中剂量组尚能明显抑制PTH的升高,高剂量组能明显增加血钙含量,但对ALP的增高无明显抑制作用,各组之间血磷含量无明显差异;模型组动物股骨、椎骨骨密度、灰重/干重比值和Ca,P含量与假手术组比较均明显降低;YYH-C高剂量组能明显提高骨密度,3个剂量组均能明显增加灰重/干重比值和股骨、椎骨Ca,P含量;YYH-C能显著升高股骨近端的骨小梁平均厚度、骨小梁面积、骨小梁面积百分比以及骨干的皮质骨面积百分比等,增加骨小梁表面成骨细胞数,减少破骨细胞数。 结论：YYH-C能有效控制去卵巢所致骨质疏松模型大鼠的骨量丢失,防止骨显微结构的改变,抑制骨吸收亢进,进而对抗去卵巢后的高转换型骨质疏松症。     

黔岭淫羊藿化学成分的研究Ⅱ

目的 研究黔岭淫羊藿（Epimedium leptorrhizum Stearm）。根的化学成分，为阐明其有效成分提供依据。方法 利用硅胶、聚酰胺柱层析及硅胶制备薄层进行分离，根据化合物的光谱数据（IR，UV，MS，^1H-NMR,^13C-NMR)和化学方法鉴定其结构。结果 从其根的正丁醇萃取物中分离得到5个化合物，分别鉴定为：淫羊藿次苷（I），淫羊藿苷（Ⅱ），淫羊藿次苷C（Ⅲ），icariesionl-4‘-β-D-glucopyranoside(IV)，朝藿定C（V）。结论 化合物I-V系首次从该植物中分离得到。     

黔产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿总黄酮对2型糖尿病小鼠IR相关因子的影响

目的:研究黔产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿中总黄酮(TFE)对四氧嘧啶(ALX)诱发2型糖尿病模型小鼠胰岛素抵抗(IR)相关因子的影响。方法:雄性小鼠100只,随机取10只为正常组,喂养基础饲料;其余的采用高脂饲料喂养小鼠6周,单次ip 2%ALX(200 mg·kg-1),建立2型糖尿病小鼠模型。将糖尿病模型小鼠随机分为6组,每组10只,分别为模型组,二甲双胍(150 mg·kg-1)组,两种TFE分别按剂量100,50 mg·kg-1分组,ig给药14 d。于末次给药后取血,检测小鼠血清胰岛素(FINS)、C肽水平;检测小鼠空腹血糖(FBG),注射胰岛素(Ins)40 min后血糖(BG);计算胰岛素耐量(ITT),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰腺指数;观察小鼠胰腺形态学改变。结果:与正常组比较,模型组小鼠血糖升高非常显著(P0.01),空腹血清中C肽,FINS有明显增加(P0.05),胰腺组织损伤极为严重(P0.01),胰腺指数降低非常显著(P0.01)。与模型组相比,两种淫羊藿TFE均能够较明显地改善模型小鼠ITT(P0.05),降低模型小鼠血清C肽、FINS含量及HOMA-IR(P0.05),提高模型小鼠的胰腺指数(P0.05),明显地修复模型小鼠的胰腺组织损伤(P0.05)。两种TFE同剂量组相比,以粗毛淫羊藿TFE作用较为显著(P0.05,P0.01)。结论:两种黔产淫羊藿TFE对ALX诱生的2型糖尿病模型小鼠能增加胰岛素敏感性,较明显地改善模型小鼠胰岛素抵抗相关因子,保护受损的胰腺组织。以粗毛淫羊藿TFE作用较为明显,这可能与粗毛淫羊藿TFE中淫羊藿苷(ICA)含量高有较大关系。     

黔岭淫羊藿总黄酮对抗维甲酸致大鼠骨质疏松作用的研究

目的： 观察黔岭淫羊藿总黄酮（YYH-C）对抗维甲酸致骨质疏松大鼠的作用。 方法： 将大鼠按体重随机分为对照组、模型组、仙灵骨葆胶囊（0.3 g·kg^-1）、YYH-C低、中、高剂量（生药0.7,1.4,2.8 g·kg^-1）组共6组,除对照组外,其余各组动物每日灌胃给予维甲酸70 mg·kg^-1,连续14 d。造模同时,各组给予相应药物进行干预,共28 d。取左侧股骨和腰椎骨,进行骨计量学指标测定,包括骨密度、骨钙、磷含量和骨灰重/干重百分比,取右侧股骨进行骨组织形态学观察。 结果： 给药28 d后,与对照组相比,模型组大鼠椎骨的骨密度和股骨的骨灰重/干重比明显下降（P<0.01,P<0.05）,股骨、椎骨的骨组织钙和磷的含量均显著降低（P<0.01）,形态学检查可见股骨骨皮质变薄,骨髓腔扩大,骨小梁变薄,排列稀疏、不规则,成骨细胞数明显减少等骨质疏松表现。与模型组比较,YYH-C 高剂量组能显著增加骨质疏松大鼠腰椎骨的骨密度以及灰重/干重比（P<0.01,P<0.05）,YYH-C各剂量组均能不同程度增大股骨灰重/干重比（P<0.01,P<0.05）,增加股骨、腰椎骨的钙、磷的含量（P<0.01,P<0.05）;显著提高骨皮质面积百分比、扩大骨小梁面积（P<0.01,P<0.05）;YYH-C中、高剂量组可使骨质疏松大鼠骨小梁的厚度和面积百分比显著增加,成骨细胞数增多（P<0.01）,而中剂量组还能明显减少破骨细胞数（P<0.05）。 结论： YYH-C能有效防止维甲酸造成的大鼠骨量丢失,改善骨组织显微结构,调节骨生成与骨破坏的紊乱状态,从而有效对抗骨质疏松的发生。     

黔岭淫羊藿化学成分的研究Ⅰ

 目的:对黔岭淫羊藿(Epimedium leptorrhizumStearm.)的化学成分进行分离,并鉴定其化学结构?方法:采用柱层析方法进行分离,用UV,IR,MS,¹H-NMR和¹³C-NMR等光谱技术鉴定化合物的结构?结果:从醋酸乙酯部分分离到4个化合物,经鉴定为:thalictoside(Ⅰ),2″-鼠李糖基淫-羊藿次苷Ⅱ[2″-O-rhamnosyl-icarisidⅡ(Ⅱ)],箭藿苷A[sagitatosideA(Ⅲ)],大花淫羊藿苷B[ikarisosideB(Ⅳ)]?结论:化合物Ⅰ为苯酚苷类化合物,化合物Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ为8-异戊烯基黄酮苷类化合物,4个化合物均为首次从该植物中分离得到?     

黔岭淫羊藿的化学成分研究Ⅰ

目的：研究黔岭淫羊藿（Epimedium leptorrhizum Stearn.)根的化学成分，为阐明其有效成分提供依据。方法：利用硅胶柱层析进行分离，根据化合物的光谱数据（IR，UV，MS，1H－NMR，13C－NMR）和化学方法鉴定其结构。结果：从其根的石油醚和醋酸乙酯萃取物中分离得到5个化合物，分别鉴定为，三十二烷烃（Ⅰ），β谷甾醇（Ⅱ），6，22－二羟基何柏烷（Ⅲ），宝藿苷II（大花淫羊藿苷A）（Ⅳ），2－O－鼠李糖基淫羊藿次苷（Ⅱ）（Ⅴ），结论：化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ系首次从该植物中分离得到。     

淫羊藿总黄酮对成骨细胞增殖的影响

为探索中药淫羊藿防治骨质疏松症的作用机理，采用血清细胞培养的方法，观察淫羊藿总黄酮对动物成骨细胞增殖的影响。结果显示淫羊藿总黄酮能明显促进成骨细胞数量增殖(P＜0．05)，增加碱性磷酸酶活性(P＜0．01)，降低培养基中钙含量(P＜0．05)。由此推测淫羊藿具有较强的防治骨质疏松症的作用。     

2种黔产淫羊藿总黄酮对免疫功能影响的比较研究

目的:比较2种黔产淫羊藿总黄酮(TFE)对CTX小鼠免疫功能的影响.方法:采用CTX造免疫低下小鼠模型,同时给药10d,以体重、脾重、脾指数,血清溶血素浓度,血清TNF-α及IL-2含量为指标,观察2种TFE增强免疫作用,并比较其差异.结果:单次ip CTX 80m9·kg(-1),使正常小鼠的脾指数、血清溶血素水平、IL-2和TNF-α含量明显下降;ig 2种TFE1.3,0.65g·kg(-1)10d,可使体重、脾重、睥指数上升(P<0.01),下降的溶血素值回升(P<0.01),以及下降的IL-2和TNF-α含量显著升高(P<0.01).结论:2种黔产淫羊藿TFE对CTX小鼠的非特异免疫和特异免疫功能都具有明显增强作用;但2种黔产淫羊藿茎叶TFE增强免疫作用差异不明显.提示TFE中除了淫羊藿苷(ICA)外,尚有其他增强免疫的有效成分.     

两种黔产淫羊藿总黄酮对小鼠学习记忆的对比研究

目的：研究贵州地方品种粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿中淫羊藿总黄酮（TFE）对化学药物诱导的痴呆小鼠模型学习记忆能力的影响,比较两种黔产淫羊藿TFE对小鼠学习记忆改善效果差异。方法：实验选用东莨菪碱、戊巴比妥、环磷酰胺3种化学药品分别复制出学习记忆损伤模型,按剂量l300,650mg·kg^-1灌胃TFE 14 d,采用Morris水迷宫实验,以定位航行实验和空间探索能力为指标进行其行为学检测。结果：两种TFE均能改善东莨菪碱等3种化学药物致痴呆小鼠学习记忆能力,且呈量效依赖关系。粗毛淫羊藿比黔岭淫羊藿改善记忆能力效果更好一些。结论：两种黔产淫羊藿TFE可明显改善东莨菪碱、戊巴比妥、环磷酰胺3种化学药物所致的空间记忆障碍,其效果与脑复康效果接近。两种TFE作用差异明显,粗毛淫羊藿优于黔岭淫羊藿。提示ICA是TFE中增强记忆的主要物质基础;同时也提示除了ICA外,TFE中尚有其他改善学习记忆的有效成分。     

5种淫羊藿黄酮类成分对体外培养成骨细胞的影响

目的：观察5种淫羊藿黄酮——淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B、淫羊藿定C对体外培养成骨细胞增殖、细胞基质钙及矿化结节钙的影响。方法：取新生1～3dSD大鼠头盖骨用酶消化法分离成骨细胞，第3代细胞经MTT法、甲基百里香酚蓝(MTB)比色法观察5种黄酮对体外培养成骨细胞增殖、细胞基质钙及矿化结节钙的影响。结果：淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿定C0．1—10μmol／L浓度均能显著地促进成骨细胞增殖，淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿定B0．1—10tanol／L浓度均能显著增加细胞基质钙,淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B0．1～10pmol／L浓度、淫羊藿苷lpmol／L浓度及淫羊藿定C0．1～1pmol／L浓度均能显著增加矿化结节钙。结论：淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B、淫羊藿定C具有增加细胞基质钙及促进体外培养成骨细胞增殖和矿化的作用。     

三叶人字草总黄酮的抗氧化作用评价

目的:评价三叶人字草总黄酮的抗氧化作用.方法:用75％乙醇提取结合聚酰胺纯化制备三叶人字草总黄酮,并采用紫外分光光度法对其总黄酮含量进行测定;以丁基羟基茴香醚(BHA),水溶性维生素E(Trolox)和柠檬酸作阳性对照,测定三叶人字草总黄酮清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+·)、超氧阴离子和羟自由基的能力,以及对Fe3+和Cu2+的还原能力和对Fe2+和Cu2+络合能力,综合评价其抗氧化作用.结果:三叶人字草中总黄酮的含量为(3.26±0.36)％(n=3),具有清除自由基,且具有较好的还原能力和金属络合能力.其对DPPH·,ABTS+.、超氧阴离子和羟自由基、Fe3+还原、Cu2+还原、Fe2+络合以及Cu2+络合的IC50分别为7.84,2.384,26.48,1.878,24.67,7.67,77.67,70.15 mg·L-1,且均呈一定的量效依赖关系.结论:三叶人字草总黄酮具有较强的抗氧化作用.     

甘肃产藏药五脉绿绒蒿总黄酮对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的:研究甘肃产藏药五脉绿绒蒿总黄酮对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法:取小鼠55只,按性别体重随机分为5组;各组分别灌胃五脉绿绒蒿总黄酮(0.300,0.150,0.075 g.kg-1)以及对照液20 mL.kg-1;末次给药1 h后,模型对照组及各给药组腹腔注射四氯化碳(CCl4)15 mg.kg-1、扑热息痛(AP)150 mg.kg-1或硫代乙酰胺(TAA)500 mg.kg-1,16 h后采集标本,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)与天冬氨酸转氨酶(AST)、肝组织中丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果:0.150～0.300 g.kg-1的甘肃产藏药五脉绿绒蒿总黄酮能降低CCl4,TAA或AP诱发肝损伤小鼠的血清ALT和AST(P<0.01),提高CCl4或TAA诱发肝损伤小鼠肝组织SOD与GSH-Px的活性(P<0.05,P<0.01),降低CCl4或AP诱发肝损伤小鼠肝组织MDA的含量(P<0.01);同时在0.075～0.300 g.kg-1,甘肃产藏药五脉绿绒蒿总黄酮的肝损伤保护作用显示出一定的量-效关系。结论:甘肃产藏药五脉绿绒蒿总黄酮对CCl4,AP,TAA造成的小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。     

甘木通总黄酮抗心肌缺血的作用

目的:研究甘木通总黄酮抗心肌缺血作用。方法:取Wistar大鼠36只,随机分为6组,每组6只,假手术组、模型组、甘木通总黄酮低、中、高剂量组(8,16,32 mg·kg-1)和复方丹参片组(250 mg·kg-1),除假手术组外,其余大鼠采用结扎大鼠冠状动脉前降支制备心肌缺血模型,造模成功后ig给药,观察甘木通总黄酮对大鼠心电图ST段位移、血清心肌酶活力及心肌梗死范围的影响;昆明种小鼠30只,随机分为5组,分别为生理盐水组、甘木通总黄酮低、中、高剂量组(12,24,48 mg·kg-1)和复方丹参片组(360 mg·kg-1),采用小鼠密闭缺氧实验,观察甘木通总黄酮对小鼠耐缺氧存活时间的影响。结果:与假手术组比较,模型对照组心电图ST段即刻出现显著性抬高(P<0.01),血清谷草转氨酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH),肌酸肌酶同工酶(CK-MB)活力均显著升高(P<0.01),心肌梗死范围显著升高(P<0.01);与模型组比较,甘木通总黄酮各剂量组均可不同程度地降低急性心肌缺血大鼠不同时间点心电图ST段抬高值(P<0.05),降低血清AST,LDH,CK含量(P<0.05,P<0.01),降低心肌梗死率(P<0.01),并呈现一定的剂量效应;还可显著延长小鼠常压耐缺氧时间(P<0.05)。与复方丹参片组比较均无差异。结论:甘木通总黄酮对心肌缺血具有显著的保护作用。     

基于斑马鱼模型的朝鲜淫羊藿抗骨质疏松活性部位筛选

目的 利用泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松模型筛选朝鲜淫羊藿抗骨质疏松活性部位,探讨斑马鱼骨质疏松模型的适用性与合理性。方法 将受精后4 d的斑马鱼幼鱼暴露在25 μmol/L泼尼松龙模型药物组,含25 μmol/L泼尼松龙的15 μg/mL依替膦酸二钠阳性药物组,0.5% DMSO溶媒对照组、含25 μmol/L泼尼松龙的朝鲜淫羊藿总提物（生药0.1、1.0、10.0、100.0 μg/mL）及其大孔树脂水及30%、50%、70%、90%乙醇洗脱部位（生药1.0、10.0、100.0、1 000.0 μg/mL）溶液组,28.5℃下在24孔板中培养,每天换液至第9天处死。采用茜素红对各组斑马鱼幼鱼骨骼染色,并以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。结果 与对照组相比,模型组斑马鱼头部骨骼染色面积和染色光密度值显著减少;与模型组比较,除朝鲜淫羊藿大孔树脂水洗脱部位外,朝鲜淫羊藿总提物及30%、50%、70%、90%乙醇洗脱部位的斑马鱼头部骨骼染色面积和染色光密度值显著增加。色谱分析表明30%、50%、70%、90%乙醇分离部位主要含黄酮类成分和少量非黄酮类化合物。结论 斑马鱼骨质疏松模型成功用于高效筛选朝鲜淫羊藿的抗骨质疏松活性部位,具简单、高效及可操作性强的优势。     

菟丝子总黄酮对排卵障碍大鼠下丘脑-垂体-卵巢 轴性激素水平的影响

目的:探讨丝子总黄酮对排卵障碍大鼠下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴性激素水平的影响.方法:将大鼠分为对照组(C)、模型组(M)、菟丝子黄酮低、高剂量组(CCLD,CCHD)以及阳性对照枸橼酸氯米芬组(PC),采用羟基脲以300 mg· kg-1ig连续进行10 d制作排卵障碍大鼠模型,用不同剂量菟丝子总黄酮(10,20 mg· kg-)及阳性对照,4.5 mg· kg-ig连续5d干预.放射免疫法观察并比较大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、雌激素(E2)、促黄体生成素(LH)以及孕激素(P)水平的变化.结果:与C组相比,M组血清FSH,LH,E2及P水平显著降低(均P＜0.05),其中FSH由(8.18±1.37) U·L-1降低至(4.22±0.94) U·L-1;LH由(17.25±5.36) U·L-1降低至(7.81±1.39) U·L-1;E2由(48.59±8.11) μg·L-1降低至(23.18±7.62) μg·L-1;p由(16.02±4.83) μg·L-1降低至(5.94±1.02) μg·L-1(均P ＜0.05).与M组相比,CCLD,CCHD以及PC组血清FSH,LH,E2及P水平显著升高(均P＜0.05).其中PC组与CCHD组FSH,LH,E2及P水平较CCLD组升高更为明显(均P＜0.05).结论:菟丝子黄酮可显著改善排卵障碍大鼠HPO轴性激素水平,且以高剂量更为有效.     

杨桃叶总黄酮的降血糖作用

目的:探讨杨桃叶总黄酮对糖尿病大鼠模型的血糖影响.方法:小鼠腹腔注射四氧嘧啶80 mg· kg-1,大鼠腹腔注射链脲佐菌素40 mg· kg-1复制高血糖模型,随机分为模型对照(蒸馏水)组、格列本脲对照(0.3g·kg-1)组、杨桃叶总黄酮高、中、低剂量(0.8,0.4,0.2 g·kg-1)组,另设空白组(蒸馏水)每组10只.连续灌胃7d,末次药后1.5h采血,测定动物的空腹血糖和葡萄糖耐量.结果:杨桃叶总黄酮高、中剂量显著降低高血糖模型大鼠和小鼠的空腹血糖,提高模型大鼠和小鼠的葡萄糖耐量.结论:杨桃叶总黄酮具有改善链脲佐菌素或四氧嘧啶诱发的高血糖和糖耐量作用.     

淫羊藿减压提取与常规提取工艺比较

目的:比较淫羊藿的减压提取与常规提取效率.方法:以淫羊藿苷及总黄酮提取率的综合评分为指标,采用L9(34)正交设计法分别优化减压提取与常规提取的工艺,对比提取效率.结果:淫羊藿减压提取的效率明显优于常压提取.最佳常规提取工艺为加10倍量60％乙醇溶液提取3次,每次1h;最佳减压提取工艺为加10倍量60％乙醇溶液于50℃减压提取3次,每次20 min,真空度0.07 MPa.减压提取1h与常压提取3h效果相当,且减压提取干膏得率约降低30％.结论:淫羊藿减压提取工艺优于常规提取工艺,且减压提取工艺稳定,可在生产中推广应用.