丹参酮ⅡA对房颤大鼠心房肌组织LTCCα1c mRNA 表达的干预研究

目的:探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对房颤(AF)大鼠心房肌细胞L型钙通道α1c亚单位(LTCCα1c或CaLα1c)mRNA表达的影响,揭示活血祛瘀中药预防和治疗房颤的作用机制.方法:采用乙酞胆碱-氯化钙(Ach-CaC12)药物经尾静脉注射法复制AF大鼠模型,随机分成3组:模型组、丹参酮治疗组、维拉帕米干预组,并设正常对照组.2周后,应用免疫组化方法和RT-PCR法检测心房肌细胞CaLα1 c mRNA及蛋白表达变化.结果:与正常对照组相比,模型组CaLα1c亚单位mRNA表达水平降低,L型钙通道(LTCC)蛋白表达水平减低,两组比较具有差异性(P＜0.05);与模型组比较,丹参酮治疗组、维拉帕米干预组均明显改善了房颤大鼠心房组织CaLα1c亚单位mRNA表达和蛋白表达水平减低状态(P＜0.05).结论:丹参酮ⅡA能够改善房颤大鼠心房肌细胞重构过程的损伤程度,可能是其干预治疗房颤的靶点之一.     

贞清方对2型糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制物-1表达的调节作用

目的探讨中药贞清方(含女贞子、地龙等中药)对2型糖尿病大鼠肾脏结构及肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法采用高糖高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射的方法建立2型糖尿病模型。将成模大鼠随机分成模型组,贞清方高、低剂量组,依那普利组,并设立正常对照组,治疗8周。用免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1以及纤维连结蛋白(FN)在肾脏的表达,光镜观察肾小球和肾小管形态。结果糖尿病模型组较对照组TIMP-1、FN表达增强,MMP-9表达减弱；治疗组TIMP-1、FN表达较模型组减弱,MMP-9表达增强。其中贞清方高剂量组作用最明显。形态学观察显示治疗组肾小球和肾小管病变比模型组减轻。结论贞清方可能通过影响糖尿病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1的表达而发挥其对糖尿病大鼠肾脏结构的保护作用。     

丹参酮ⅡA对阿霉素肾病大鼠肾小球nephrin和 TGF-β1的表达影响

目的:探讨肾小球足细胞跨膜蛋白(nephrin)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达变化及丹参酮ⅡA对其影响。方法:SD大鼠56只随机分为2组,模型组44只和对照组12只。模型组大鼠尾静脉一次注射盐酸阿霉素(ADR)0.007 g.kg-1,对照组大鼠尾静脉注射等容积生理盐水,注射ADR 1周后尿蛋白定量>100 mg.(24 h)-1即算建模成功,共有40只大鼠建模成功,随机又分为肾病模型组、泼尼松组、丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组,每组10只。泼尼松组给予泼尼松0.01 g.kg-1.d-1 ig;丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组分别给予丹参酮ⅡA 0.02,0.04 g.kg-1.d-1 ig,共4周。对照组和肾病模型组给予等容积生理盐水ig。实验结束后检测各组大鼠血、尿生化指标,光镜观察肾脏病理学改变,免疫组化技术和Western blotting技术检测nephrin和TGF-β1的表达。结果:肾病模型组、泼尼松组、丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组24 h尿蛋白定量、胆固醇、甘油三酯、血尿素氮、血肌酐和肾小球TGF-β1表达均高于对照组(P<0.05),但泼尼松组和丹参酮ⅡA高剂量组上述指标均低于肾病模型组(P<0.05);肾病模型组、泼尼松组、丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组血清总蛋白、白蛋白、肾小球nephrin表达低于对照组(P<0.05),但泼尼松组和丹参酮IIA高剂量组血清总蛋白、白蛋白、nephrin表达高于肾病模型组(P<0.05)。结论:Nephrin及TGF-β1在阿霉素肾病发病机制中起重要作用;丹参酮ⅡA能够增加肾组织nephrin的表达,抑制TGF-β1的表达,减少阿霉素肾病大鼠尿蛋白的排出,减轻及延缓肾小球硬化,发挥保护肾脏的作用。     

肺纤方对博莱霉素大鼠肺纤维化模型基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2的影响

目的:观察肺纤方抗大鼠肺纤维化肺基质重建的作用。方法:气管内注入博莱霉素制造大鼠肺纤维化模型,观察造模后14、28、45d模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1、2的变化。结果:肺纤方可以显著降低血清基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2。结论:肺纤方具有抗大鼠肺纤维化基质重建作用。     

丹参酮ⅡA对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元L－型钙通道表达的影响

1 材料与方法 1．1实验药品 丹参酮ⅡA：中国药品生物制品检定所（化学标准品）。尼莫地平针剂：德国Bayer公司。 1．2主要试剂 Tfizol：Gibco公司。RT试剂盒：Invitrogen公司。Taq酶：为上海生工产品。引物：上海生工合成。戊巴比妥钠：上海化学试剂采购供应站。     

“夹脊”电针对兔退变腰椎间盘组织中基质金属蛋白酶13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1表达的影响

目的:研究"夹脊"电针对兔退变的腰椎间盘中基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响,探讨夹脊电针治疗腰椎间盘退行性病变的作用机制。方法:36只清洁级成年新西兰大白兔随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组,每组9只。采用克氏针横穿椎体后椎体间加压法复制椎间盘退变模型。电针组针刺L 4、L 5"夹脊"穴28d。各组于第1、28、56天应用Western blot方法检测椎间盘组织中MMP-13蛋白的表达,免疫荧光技术检测椎间盘组织中TIMP-1蛋白的表达。结果:建立模型后,MMP-13蛋白表达增强(P0.01);电针进行干预后可降低MMP-13的表达(P0.01)。TIMP-1在荧光激发下,胞质清晰,可见红色荧光,其中各组第1天和正常组、假手术组的第28、56天均呈现强阳性,模型组第56天阳性细胞最少、红色荧光最弱(P0.01),而电针组在第56天阳性细胞升高(P0.01)。结论:电针"夹脊"穴可以通过降低椎间盘组织中MMP-13和增强TIMP-1的表达,纠正基质合成与分解代谢失衡,达到防治椎间盘退变的效果。     

猪血清肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-9/13和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1/2表达的动态变化及下瘀血汤对其影响

目的:研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9/13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1/2表达的动态变化及下瘀血汤对其影响,探讨下瘀血汤抗肝纤维化的机制。方法:猪血清腹腔复制大鼠肝纤维化模型,造模8周后ig下瘀血汤的流浸膏,用药4周后和在造模过程中的1、24、、8周动态处死大鼠,获取标本,检测指标。结果:MMP-2/9的高活性和TIMP-1的高表达贯穿于本模型的始终。MMP-9/13蛋白表达在肝纤维化发生发展过程中有先抑制后升高,再次抑制而后升高的反复过程,并受TIMP-1/2表达影响;下瘀血汤可以提高MMP-9活性,促进MMP-9/13而抑制TIMP-1,2表达。结论:该模型有MMP-9/13和TIMP-1/2表达的失衡;下瘀血汤可通过调控MMp-9/13和TIMP-1/2的表达,降解过度沉积的细胞外基质而发挥抗肝纤维化的作用。     

消渴康对糠尿病肾病大鼠肾脏基质金属蛋白酶9与蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

目的：观察消渴康对糖尿病肾病大鼠肾脏基质金属蛋白酶9（ matrix metalloproteinase-9,MMP-9）与金属蛋白酶组织抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1）表达的影响。方法 SD大鼠单侧肾切除后2周,一次性腹腔注射链脲佐菌素（ streptozotocin,STZ）,72小时后血糖浓度≥16.7 mmol/L,尿糖定性〉＋＋＋,确定糖尿病肾病造模成功,随机分为模型、氯沙坦和消渴康大、中、小剂量治疗组,分别灌胃12周后,免疫组化法检测各组糖尿病肾病大鼠肾脏 MMP-9与TIMP-1表达情况。结果消渴康小剂量治疗组极显著增加糖尿病肾病大鼠肾组织MMP-9表达（ P〈0．01）,消渴康中、小剂量治疗组极显著降低糖尿病肾病大鼠肾组织TIMP-1表达（P〈0．01）。结论消渴康对糖尿病肾病大鼠肾脏异常细胞外基质（ extracellu-lar matrix,ECM）堆积具有一定促降解作用。     

红花黄色素注射液对膜性肾病大鼠的肾保护作用及对基质金属蛋白酶抑制物-1、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:观察红花黄色素注射液对膜性肾病(MN)大鼠模型血液生化指标及对肾组织基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,探讨红花黄色素注射液对MN大鼠的肾保护作用和可能机制。方法:将60只SD大鼠随机选取10只为正常对照组,其余50只进行造模,造模成功后将大鼠随机分为模型对照组、贝那普利组、红花黄色素注射液(6.5mg/kg、13mg/kg、26mg/kg)组,每组各10只,各组按相应剂量给药,在给药的第4周末检测大鼠24小时尿蛋白定量(UTP)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;采用电镜、免疫荧光观察肾脏病理形态学变化,原位杂交技术检测各组大鼠肾组织TIMP-1、MMP-9的表达情况。结果:治疗结束后,与模型对照组比较,各治疗组UTP、TC、TG均明显降低,各治疗组TP、ALB均明显升高。红花黄色素注射液(6.5mg/kg、13mg/kg、26mg/kg)组与贝那普利组UTP、TC、TG、TP、ALB比较差距无统计学意义。与正常对照组比较,各治疗组及模型对照组BUN、Scr均未见明显变化,差异无统计学意义。治疗结束后,与模型对照组比较,各治疗组TIMP-1 mRNA表达显著下调,MMP-9mRNA表达显著上调(P0.05);各治疗组间TIMP-1、MMP-9mRNA比较差距无统计学意义。结论:红花黄色素注射液对MN大鼠的肾保护作用可能与其能够下调TIMP-1、上调MMP-9的表达有关。     

丹莪妇康煎膏对子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA表达的影响

 目的 探讨子宫内膜异位症大鼠在位和异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）表达的差异以及丹莪妇康煎膏对其影响。方法 采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏高剂量组、低剂量组以及假手术组,共5组。给药30 d后,以反转录聚合酶链反应法检测大鼠在位以及异位内膜组织中基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA表达。结果 丹莪妇康煎膏能显著降低子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达（P＜0.01）,显著升高基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA的表达（P＜0.01）。结论 丹莪妇康煎膏可调节基质金属蛋白酶-9/基质金属蛋白酶抑制剂-1的平衡,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一。     

祛瘀生肌中药对大鼠正常创面肉芽组织中Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶表达的影响

目的探讨祛瘀生肌中药对大鼠正常创面肉芽组织影响的差异。方法以120只大鼠皮肤全层缺损创面为模型,采用免疫组化和图像分析相结合的方法,观察生肌化瘀方及其拆方生肌方和化瘀方对创面修复不同时期肉芽组织中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）和Ⅰ型胶原变化的影响。结果正常组工型胶原表达水平明显延迟,MMP-1水平在创伤后3～11天里呈阶梯式增高;生肌方早期可以促进创面Ⅰ型胶原及MMP-1分泌,从创伤后3～11天一直维持在较高水平;化瘀方组MMP-1表达在前7天保持较高水平,与生肌方组比较差异有显著性（P〈0．05）,创伤后11天降低,显著低于正常组和生肌方组（P〈0．05）;生肌化瘀方小剂量组促进I型胶原分泌有两个高峰时期,即创伤后7天和15天,与正常组比较差异有显著性（P〈0．05）;生肌化瘀方大剂量组在11天时MMP-1表达显著降低,明显低于正常组（P〈0．05）。结论祛瘀生肌中药对实验性创面新生肉芽组织中I型胶原及MMP-1表达的影响,可能是在创面愈合的过程中,通过抑制MMP-1的分泌,从而使创面I型胶原的分泌增加,起到促进创面愈合的作用。     

人参皂苷对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶9及Ⅳ型胶原表达的影响

目的研究人参皂苷对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶9（MMP-9）及Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）表达的影响,从而探讨人参皂苷防治糖尿病肾脏病变的可能机制。方法糖尿病大鼠用人参皂苷治疗,肾标本用MMP-9、Col-Ⅳ单克隆抗体行免疫组化染色后经图像分析仪分析。结果糖尿病大鼠肾小球MMP-9表达较正常对照组明显下降,而肾间质MMP-9与正常对照组比较,有增高趋势。而应用人参皂苷治疗后可逆转上述改变。Col-Ⅳ的表达在肾小球和肾间质均较正常对照组上升,经人参皂苷治疗后下降。结论人参皂苷对糖尿病大鼠肾脏病变有部分保护作用,其机制可能与提高肾组织MMP-9,降低Col-Ⅳ的表达有关。     

“三部针刺法”对类风湿关节炎模型大鼠血清中白细胞介素-17、基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1含量影响

目的:观察类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)模型大鼠在"三部针刺法"的干预下,血清中白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)、基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)9及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(Tissue Inhibitor of Matrix Metalloproteinase-1,TIMP-1)含量的变化,探讨针灸通过调控细胞因子等发挥改善RA病症的作用。方法:将SPF级雄性大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组及针刺组,每组10只。除空白组外于右后足跖皮内注射0.15 mL弗氏完全佐剂(Freund’s Complete Adjuvant,FCA)诱发RA大鼠模型,空白组注射0.15 mL的0.9%NaCl溶液。针刺、艾灸组干预方法选用"三部针刺法",针刺组治疗每次20 min,7 d为一个疗程,间隔1天后再行第2个疗程,艾灸组艾灸时间、疗程同针刺组。治疗结束后观察大鼠体质量、右后足跖度肿胀度的变化,酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测大鼠血清中IL-17、MMP9、TIMP-1含量。结果:与空白组比较,三组大鼠血清中IL-17、MMP9、TIMP-1含量皆上升(P<0.05)。与模型组比较,两干预组干预1周、2周后,血清中IL-17、MMP9、TIMP-1含量均下降(P<0.05)。与艾灸组比较,针刺组干预1周、2周后,血清中IL-17含量与艾灸组相当,血清中MMP9、TIMP-1含量均下降更明显(P<0.05)。结论:"三部针刺法"通过影响血清中IL-17、MMP9及TIMP-1的含量,来改善RA大鼠的关节炎性反应。     

丹参酮ⅡA对大鼠缺血再灌注肾组织AMPK/ULK1通路的影响

目的观察丹参酮ⅡA对大鼠肾缺血再灌注后腺苷单磷酸激活蛋白激酶(AMPK)/自噬激活激酶1(ULK1)通路的影响,探讨其肾脏保护的作用机制。方法将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为丹参酮ⅡA组、缺血再灌注组、假手术组,每组10只。丹参酮ⅡA组于缺血前30 min尾静脉注射丹参酮ⅡA注射液0. 5 mg/kg,假手术组和缺血再灌注组注射等量的生理盐水。丹参酮ⅡA组和缺血再灌注组通过双侧肾蒂夹闭45 min的方法建立肾缺血再灌注模型,假手术组打开腹腔后不夹闭双侧肾蒂。再灌注24 h后心脏采血,检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平;取肾组织,采用HE染色观察各组肾组织病理改变,Western blot法测定肾组织中AMPK、ULK1表达水平。结果缺血再灌注组大鼠血清Cr、BUN、TNF-α、IL-6、IL-10水平及肾组织中AMPK、ULK1表达水平均明显高于假手术组(P均相似文献   

丹参酮ⅡA磺酸钠对AngⅡ诱导心房成纤维细胞胶原合成及TGF-β1活化的影响

目的：观察丹参酮Ⅱ_A磺酸钠（sodium tanshinone Ⅱ_A sulfonate,STS）对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）诱导心房成纤维细胞胶原合成及TGF-β₁活化的影响。方法：培养新生大鼠心房成纤维细胞,检测胶原含量,并[³H]-脯氨酸掺入法测定胶原合成速率作为心肌纤维化指标。ELISA法检测培养细胞上清中活性TGF-β₁及总TGF-β₁含量。Western blot测定血小板反应素-1（thrombospondin-1,TSP-1）表达。结果：AngⅡ能够明显上调心房成纤维细胞胶原含量、胶原合成速率;TSP-1表达及活性TGF-β₁分泌量上调,而总TGF-β₁表达无明显改变。在STS处理后,除总TGF-β₁外,其他指标均明显下调。结论：STS能减轻AngⅡ诱导心房成纤维细胞胶原分泌及合成速率,机制与抑制TSP-1/TGF-β₁通路有关。     

抗凝护心Ⅱ号对心肌缺血再灌注损伤后大鼠心肌组织基质金属蛋白酶-9的影响

目的：通过观察抗凝护心Ⅱ号（ACⅡ）对大鼠心肌缺血再灌注损伤模型中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）分泌的影响,探讨该药应用于急性冠脉综合征（ACS）临床治疗的意义。方法：50只Wistar大鼠雌雄各半,随机分为假手术组、模型对照组、通心络组、ACⅡ低剂量组及ACⅡ高剂量组5组,每组各10只。灌胃14天后,建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,应用HE及S-P免疫组化法分别观察各组大鼠心肌细胞的病理组织学改变及MMP-9表达的变化。结果：假手术组基本无炎性细胞浸润,心肌细胞排列成束,界限清晰,细胞核形态、大小正常,胞浆染色均匀。模型对照组大量炎性细胞浸润（以PMNs为主）,细胞高度水肿,界限不清,核浓缩或溶解,胞浆淡染,内有红染颗粒,空泡样变,甚至崩解坏死。药物组改变程度依照低剂量组、通心络组、高剂量组的顺序减轻,出现不同程度的散在的PMNs浸润,心肌缺血及心肌细胞超微结构的改变;ACⅡ高剂量组、通心络组MMP-9较模型组比较明显降低。结论：ACⅡ对实验性大鼠心肌缺血再灌注损伤模型具有减轻再灌注后不可逆性损伤及心肌缺血、坏死,保护心肌超微结构的作用。其机制可能与减少MMP-9的分泌有关。     

葛根素联合丹参酮ⅡA对糖尿病血管病变大鼠t-PA，PAI-1及氧化应激的影响

目的:观察葛根素联合丹参酮Ⅱ_A对糖尿病血管病变大鼠的保护作用及其相关机制。方法:高脂饲料喂养SD大鼠给予尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病血管病变模型,将造模成功大鼠随机分为模型组,葛根素联合丹参酮Ⅱ_A高(0. 5 g·kg~(-1)+1. 0 g·kg~(-1)),中(0. 25 g·kg~(-1)+0. 5 g·kg~(-1)),低剂量组(0. 05 g·kg~(-1)+0. 1 g·kg~(-1)),丹参酮ⅡA(0. 5 g·kg~(-1))组,葛根素(0. 25 g·kg~(-1))组,二甲双胍药(二甲双胍,0. 09 g·kg~(-1))组,每组10只,连续灌胃给药70 d。观察实验各组药物干预后大鼠体质量及一般情况;采用全自动生化分析仪检测大鼠血糖、血脂含量;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清胰岛素(INS),晚期糖基化终末产物(AGEs),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,血浆组织纤溶酶原激活物(t-PA),纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1),血栓素B2(TXB2)含量,主动脉匀浆AGEs,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)含量;采用化学比色法检测大鼠血清丙二醛(MDA)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察冠状动脉组织病理学改变;免疫组化观察主动脉PAI-1蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组血糖及血脂明显升高(P 0. 05,P 0. 01),血清INS,AGEs,MDA含量明显增加(P 0. 05,P 0. 01),血浆PAI-1,TXB2含量显著增加(P 0. 01),主动脉匀浆AGEs,ox-LDL含量显著增加(P 0. 01),血清SOD,GSH-Px水平显著降低(P 0. 01),血浆t-PA含量明显降低(P 0. 05),主动脉组织PAI-1蛋白表达明显增加(P 0. 05);与模型组比较,葛根素联合丹参酮ⅡA可降低血糖及血脂水平(P 0. 05,P 0. 01),降低血清INS,AGEs,MDA含量(P 0. 05,P 0. 01),降低血浆PAI-1,TXB2含量(P 0. 05,P 0. 01),降低主动脉匀浆AGEs,ox-LDL含量(P 0. 05,P 0. 01),升高血清SOD,GSH-Px含量(P 0. 05,P 0. 01),升高血浆t-PA含量(P 0. 05,P 0. 01),减轻冠状动脉组织病变,降低主动脉组织PAI-1蛋白表达(P 0. 05),其效果好于单药。结论:葛根素联合丹参酮Ⅱ_A能减轻糖尿病大鼠血管病变,其机制可能与减轻氧化应激,调节凝血-纤溶系统有关。     

复方丹参片通过调控TGF-β1/Smad 通路及基质金属蛋白酶水平对肾纤维化大鼠的作用机制研究

目的基于TGF-β1/Smad 通路和基质金属蛋白酶水平探讨复方丹参片对肾纤维化大鼠的保护作用及相 关机制。方法采用灌胃腺嘌呤（250 mg·kg-1）的方式制备肾纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型 组、氯沙坦组（0.09 g·kg-1）及复方丹参低（0.3 g·kg-1）、高（0.6 g·kg-1）剂量组。各组大鼠给予相应剂量灌胃给 药,每日1 次,连续干预4 周。检测大鼠血清Cr、BUN 水平;采用HE 及Masson 染色法观察肾脏组织病理形 态及纤维化程度;采用免疫组织化学法检测肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 蛋白表达水平;采用 Western Blot 法检测肾脏组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1 蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大 鼠血清Cr、BUN 水平明显升高（P＜0.05）;肾脏出现明显纤维化病变;肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、 TIMP-1 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,Smad7、MMP-2、MMP-9 蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。与模 型组比较,低、高剂量复方丹参片均能明显降低大鼠血清Cr、BUN 水平（P＜0.05）;明显改善肾脏纤维化病 变;降低肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、TIMP-1 蛋白表达水平（P＜0.05）,升高Smad7、MMP-2、 MMP-9 蛋白表达水平（P＜0.05）。结论复方丹参片可能通过抑制TGF-β1/Smad 通路及提高基质金属蛋白酶 水平来实现对肾纤维化大鼠的保护作用。     

抗纤复方药物血清对HSC-LI90细胞Ⅰ型、Ⅳ型前胶原和基质金属蛋白酶及其组织抑制因子-1基因表达的影响

目的：探讨抗纤复方药物血清对肝星形细胞(HSC)L190细胞(HSC—L190)I型、Ⅳ型前胶原和基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMP—1)基因表达的影响。方法：以0．5、2．0、4．0g／kg等不同剂量抗纤复方灌胃大鼠,制备药物血清,作用于HSC—L190细胞48h,应用Northern印迹杂交的方法,检测I型、Ⅳ型前胶原、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及膜型基质金属蛋白酶(MT1-MMP)及其组织抑制因子(TIMP-1)基因的表达,并用酶图法检测基质金属蛋白酶-2的活性：结果：(1)抗纤复方不同浓度药物血清能抑制HSC—L190细胞I型、Ⅳ型前胶原及其组织抑制因子TIMP-1的基因表达(P<0．05或P<0．01);(2)能增加膜型基质金属蛋白酶基因表达(P<0．01);(3)对基质金属蛋白酶-2基因表达及活性无影响(P>0．05)。结论：(1)抗纤复方具有抗肝纤维化作用;(2)抗纤复方抑制HSC-LI90细胞TIMP-1基因表达水平,促进胶原降解,可能是抗肝纤维化的作用机制之一。