玉郎伞多糖对慢性应激小鼠不同脑区腺苷酸环化酶的影响

目的:探讨玉郎伞多糖(yulangsan polysaccharide,YLSPS)抗抑郁的受体后作用机制.方法:采用放射免疫方法测定慢性应激小鼠前额皮层、下丘脑、海马腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)的活性.结果:经慢件应激后,小鼠前额皮层、下丘脑和海马cAMP的量明湿降低,YLSPS(150-600 mg/kg)能显著提高慢性应激小鼠各脑区cAMP量,与模型组相比具显著性差异(P<0.01).结论:激活慢性应激小鼠前额皮层、下丘脑、海马AC可能是YLSPS抗抑郁活性的重要机制之一.     

玉郎伞多糖对大鼠不同脑区腺苷酸环化酶的影响

目的 从腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)水平来探讨玉郎伞多糖(yulangsan polysaccharide, YLSPS)抗抑郁的作用机制.方法 采用放射免疫方法测定大鼠前额皮层、下丘脑、海马AC的活性.结果 YLSPS(150～600 mg/kg)可激活正常大鼠前额皮层AC活性,YLSPS(600 mg/kg)可抑制正常大鼠下丘脑、海马AC的活性(P＜0.05).结论 激活大鼠前额皮层AC可能是YLSPS抗抑郁活性的重要机制之一.     

玉郎伞多糖对小鼠免疫功能的调节作用

目的 研究玉郎伞多糖(YISPS)对小鼠免疫功能的影响.方法 考察YLSPS对小鼠肉瘤S<,180>的抑瘤率、荷瘤小鼠免疫器官指数、外周血白细胞数量的影响;MTT法检测YLSPS对荷瘤鼠、正常BALB/c及裸鼠脾淋巴细胞增殖的影响;ELISA法检测YLSPS对TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2的影响.结果 YLSPS各剂量组(0.15,0.3,0.6 g·kg<'-1>)治疗小鼠S<,180>实体瘤的平均抑瘤率分别为39.7%,41.3%,52.6%;可提高荷S<,180>小鼠的脾脏和胸腺指数,可明显升高CTX降低的免疫器官指数和外周血白细胞数量,增强ConA诱导的脾淋巴细胞转化,而对LPS诱导的脾淋巴细胞转化无明显影响;能促进免疫细胞分泌TNF-α、IL-6、IFN-γ和IL-2.结论 YLSPS具有明显的免疫调节活性,其作用的靶细胞可能是T淋巴细胞与巨噬细胞,而对B淋巴细胞没有影响.     

玉郎伞多糖解酒作用及机制研究

目的 研究玉郎伞多糖( YULANGSAN polysaccharides,YLSP)的解酒作用及其机制.方法 采用小鼠白酒灌胃造模,在饮酒前后,分别给予一定剂量的YLSP、海王金樽片或生理盐水,观察醉酒率、醉酒潜伏期和醉酒时间,并测定小鼠肝脏中乙醇脱氢酶( ADH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、超氧化...     

玉郎伞多糖对肝星状细胞氧应激脂质过氧化作用的影响

目的 研究玉郎伞多糖(YLS)对肝星状细胞(HSC)氧应激脂质过氧化作用的影响及机制.方法 用H2O2诱导肝星状细胞脂质过氧化,测定细胞培养上清液中MDA,SOD水平,MTT法测定肝星状细胞的增殖,LDH法检测YLS对肝星状细胞的毒性作用,ELISA法测定I型胶原含量.结果 YLS (25～200μg/ml)可明显降低培养上清液中MDA含量和I型胶原水平,抑制肝星状细胞的增殖,提高SOD活力,并呈剂量依赖性.结论 YLS对肝星状细胞的增殖及I型胶原的合成具有抑制作用,该作用可能与其抗氧化作用有关.     

佐太对慢性束缚应激抑郁模型小鼠的行为学影响

目的:探索藏药佐太对慢性束缚应激抑郁模型小鼠的抗抑郁作用及其机制。方法:雄性小鼠分为空白组、模型组、佐太组(6.07mg/kg、60.7mg/kg、607mg/kg)、β-HgS组(3.38mg/kg),丙咪嗪(阳性药)组(15mg/kg),空白组和模型组每天灌胃2%淀粉悬浮液0.1ml/只,其它各组小鼠每天按照上述剂量灌胃0.1ml/只,同时进行慢性束缚应激造模。实验持续21天后,选用糖水偏爱实验和悬尾实验评价受试小鼠的抑郁样行为;通过观察小鼠海马区域组织形态,评价佐太对动物海马损伤的修复;利用ELISA法分析佐太对模型小鼠血清中的促炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。结果:与模型组比较,各佐太组(6.07mg/kg、60.7mg/kg、607mg/kg)、和β-HgS组(3.38mg/kg)小鼠悬尾实验中不动时间显著减少;海马组织病理切片发现,佐太(6.07mg/kg、60.7mg/kg、607mg/kg)和β-HgS(3.38mg/kg)可显著修复海马齿状回和CA1区的损伤;另外,发现各佐太组(6.07mg/kg、60.7mg/kg、607mg/kg)和β-HgS组(3.38mg/kg)小鼠血清中IL-1β,IL-6和TNF-α含量减少。结论:佐太可显著改善CRS模型小鼠的抑郁样行为,可能是通过降低小鼠脑内促炎性细胞因子IL-1β,IL-6和TNF-α的分泌而实现。     

玉郎伞多糖化学成分的研究

目的:从玉郎伞中分离出玉郎伞多糖,并对其化学组成进行研究.方法:玉郎伞经醇提后的药渣用热水提取,乙醇沉淀,Sevag试剂脱蛋白,采用DEAE纤维素(DEAE-52)柱层析分离纯化,气相色谱和薄层色谱分析其组成.结果:分离得到的玉郎伞多糖经Sephadex-75凝胶柱层析,硫酸-苯酚法以及高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)证实为单一多糖,紫外扫描显示无核酸和蛋白特征吸收峰,薄层色谱和气相色谱表明由葡萄糖和阿拉伯糖组成.结论:玉郎伞多糖首次从玉郎伞中提取获得,为玉郎伞主要成分之一.     

玉郎伞多糖抗鸭乙型肝炎病毒作用

目的：研究玉郎伞多糖（YLSP）抗鸭乙型肝炎病毒（duck hepatitis B virus,DHBV）的作用。方法：取1日龄广西麻 鸭60只,在麻鸭颈静脉注射0.2 mL强阳性DHBV DNA鸭血清,13 d后分别从其颈静脉采血0.5 mL,分离血清,用普通PCR法筛选出DHBV感染强阳性鸭。然后,将50只DHBV DNA阳性麻鸭随机分为5组：YLSP高、中、低剂量组（5,2.5,1.25 g·kg^-1）;阿昔洛韦阳性对照组（0.1 mg·kg^-1）和模型组。所有给药组均与模型组比较,以明确玉郞伞多糖对DHBV DNA的作用,所以未设置正常组。于给药前（T₀）,给药7 d（T₇）,14 d（T₁₄）及停药后3 d（P₃）采血,用实时荧光定量PCR法检测鸭血清中DHBV DNA的含量。HE染色观察肝损伤程度。结果：与模型组相比,YLSP各剂量组及阳性对照组在用药后血清中DHBV DNA的含量显著降低,停药后,阳性对照组及YLSP中、低剂量组DHBV DNA含量均有反跳现象。HE染色结果显示YLSP能减轻鸭肝组织的病理损伤程度。结论：YLSP对DHBV 具有抑制作用同时对肝损伤具有保护作用。     

玉郎伞多糖提取工艺的正交法优化

目的对玉郎伞提取工艺进行改进,利用正交法进一步优化提取玉郎伞多糖提取工艺。方法采用正交法优化玉郎伞的提取工艺;以苯酚-硫酸显色法于490 nm波长处测定葡萄糖含量吸光度,计算换算因子和玉郎伞多糖含量。结果葡萄糖的浓度在15～65μg/ml范围内其吸光度呈良好的线性关系(r=0.999 1);平均加样回收率为98.25%,RSD=1.72%(n=6);平均换算因子f=1.82,RSD=2.16%(n=6),玉郎伞多糖的平均提取率为3.78%,RSD=0.173 8%(n=9)。多糖的最佳提取条件为浸泡3 h、加10倍量水、提取3次每次3 h。结论优化提取方法后,玉郎伞多糖的提取率提高98%。苯酚-硫酸法可作为玉郎伞多糖定量分析。     

玉郎伞多糖的分离纯化和组成性质研究

目的 从玉郎伞(YLS)中分离出玉郎伞多糖,并对其化学组成进行研究.方法 YLS经醇提后的药渣用热水提取,乙醇沉淀,Sevag试剂脱蛋白,采用DEAE纤维素(DEAE-52)柱层析分离纯化,气相色谱和薄层色谱分析其组成.结果 分离得到的YLS多糖经Sephadex-75凝胶柱层析,硫酸-苯酚法以及高效凝胶渗透色谱法(HPGPC) 证实为单一多糖,紫外扫描显示无核酸和蛋白特征吸收峰,薄层色谱和气相色谱表明由葡萄糖和阿拉伯糖组成.结论 YLS多糖首次从YLS中提取获得,为YLS主要成分之一.     

黄豆苷元对抑郁模型小鼠行为及海马DG区病理形态学影响

目的: 探讨黄豆苷元的抗抑郁作用及其机制。方法: 昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组(3.0 mg·kg^-1, ig)、黄豆苷元低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1, ig),每组10只。给药组每日应激前1 h ig给药,共21 d。采用慢性不可预知性温和应激(CUMS)法建立抑郁小鼠模型,通过体重和旷场实验检测小鼠抑郁样行为;采用尼氏染色法检测海马DG区神经元病理形态学变化;TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果: 与正常组比较,模型组小鼠出现明显的行为学异常,表现为体重减少(P<0.01);旷场实验水平运动及垂直运动得分减少(P<0.01,P<0.05);尼氏染色显示海马DG区神经元形态不规则,细胞分层不清;TUNEL法显示神经元凋亡数量增加(P<0.01)。与模型组比较,氟西汀组及黄豆苷元低、中、高剂量组小鼠行为学异常均有明显改善,小鼠体重增加(P<0.01),旷场实验水平运动及垂直运动得分增加(P<0.01);海马DG区神经元损伤性变化减轻;神经元凋亡率减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论: 黄豆苷元可能通过减少神经元凋亡改善CUMS抑郁模型小鼠行为学异常,产生抗抑郁作用。     

补阳还五汤对慢性不可预知性温和应激抑郁模型小鼠行为及脑海马CA3区病理形态学影响

目的:探讨补阳还五汤神经保护作用及抗抑郁机制。方法:清洁级昆明小鼠随机分为正常组,模型组,氟西汀组(3.0 mg·kg-1,ig),补阳还五汤低、中、高剂量组(9.0,18.0,27.0 g·kg-1,ig),每组10只。各给药组于每日应激前1 h ig给药,其余各组给予等体积生理盐水,共计21 d。采用慢性不可预知性温和应激法(CUMS)建立小鼠抑郁症模型,采用旷场实验(OFT),悬尾实验(TST)及体重测试(BWM)观察动物抑郁样行为;采用尼氏体染色检测海马CA3区神经元形态学变化;采用透射电镜观察海马区超微结构变化;采用TUNEL法检测海马CA3区神经元凋亡情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠出现抑郁样行为,表现为体重减少,OFT水平及垂直运动得分减少及TST不动时间延长(P0.05,P0.01);尼氏染色及透射电镜显示海马CA3区神经元损伤及早期凋亡变化;TUNEL法显示海马CA3区神经元凋亡数量增加(P0.01)。与模型组比较,氟西汀组及补阳还五汤各剂量组小鼠抑郁样行为均有改善,表现为体重增加,OFT水平及垂直运动得分增加,TST不动时间减少(P0.05,P0.01);尼氏染色及透射电镜显示海马CA3区神经元细胞损伤减轻;TUNEL法显示海马CA3区神经元凋亡数量减少,差异有统计学意义(P0.01)。结论:补阳还五汤可能通过减轻海马CA3区神经元损伤及抑制神经元凋亡而改善小鼠抑郁样行为,具有神经保护及抗抑郁症作用。     

复方石菖蒲颗粒对戊四唑致痫小鼠行为学及海马结构的影响

目的：观察复方石菖蒲颗粒（CSCP）对戊四唑（PTZ）致痫小鼠行为及海马结构的影响。方法：昆明种小鼠60 只,雌雄各半随机分为6 组：空白组,模型组,苯妥英钠组,CSCP 高（4 000 mg·kg-1）、中（2 000 mg·kg-1）、低（1 000 mg·kg-1）剂量组,空白组和模型组给予等体积生理盐水除外,其他组别给予对应药物,连续灌胃7 天,末次给药1 h 后,按80 mg·kg-1 剂量腹腔注射PTZ（空白组除外）,造成急性癫痫模型,观察CSCP 对PTZ 致痫小鼠的发作潜伏期、行为分级、发作次数等的影响;采用脑组织切片HE 染色观察海马结构的改变。结果：CSCP 可以改善癫痫小鼠的发作程度,延长轻度发作潜伏期,减少郁、吁级癫痫发作次数;观察HE 染色切片可见PTZ 致痫小鼠海马结构发生改变,细胞数量减少,苯妥英钠和CSCP 可有效保护小鼠海马神经元。结论：CSCP 对PTZ 致痫小鼠有一定抑制作用及减少海马神经元细胞的损伤,其抗癫痫机制有待进一步探讨。     

电针对抑郁大鼠海马E-选择素和抵抗素蛋白表达的影响

目的：观察电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马E-选择素和抵抗素蛋白表达的影响,探讨电针对抑郁症脑内微环境的作用机制。方法采用慢性应激结合孤养方法造模。将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、氟西汀组,每组10只。于每日造模前1 h,电针干预“百会”、“印堂”,频率2 Hz,电流强度0.6 mA,每次20 min;氟西汀灌胃干预,用药剂量10 mg/kg,给药容积5 mL/kg。采用生物素标记抗体芯片技术检测大鼠海马E-选择素和抵抗素蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠海马E-选择素和抵抗素蛋白水平上调（fold change＝1.23,1.22）;与模型组比较,电针组、氟西汀组 E-选择素水平下调（fold change＝0.65,0.62）、抵抗素表达水平下调（fold change＝0.76,0.65）。结论电针干预可下调慢性应激抑郁模型大鼠海马E-选择素和抵抗素蛋白表达。     

电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马5-HT1A受体的影响

目的：在建立慢性不可预见性应激抑郁大鼠模型的基础上,采用3H放射性配体受体结合分析法,测定大鼠海马5-HT1A受体特异性结合量,探讨电针抗抑郁机制。方法：将45只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和电针组,每组15只。用慢性不可预见性轻度刺激结合孤养的方法造模。造模同时给予电针治疗。穴位：选取百会穴、太冲穴,频率2Hz,电流强度为0．6mA左右,留针20min,每日1次,连续针剌21d。结果：正常对照组和模型组大鼠海马匀浆粗膜的[^3H]8-OH—DPAT特异性结合分别为（30．16±3．34）fmol／mg protein和（19．42±2．12）fmol／mgprotein。抑郁大鼠海马匀浆粗膜的[^3H]8-OH—DPAT特异性结合明显低于正常对照组（P〈0．05）。电针组大鼠经电针治疗21d后,海马匀浆粗膜的[^3H]8-OH—DPAT特异性结合为（28．53±1．66）fmoL／mgprotein,明显高于模型组（P〈0．05）,与正常对照组没有显著性差异。结论：抑郁大鼠海马5-HT1A受体的结合位点明显下降,电针治疗可以显著提高抑郁大鼠海马5-HT1A受体的结合位点。     

电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马内甘丙肽表达的影响

目的：观察电针对慢性应激抑郁模型（chronic unpredictable mild stress,CUMS）大鼠海马内甘丙肽（galanin,Gal）蛋白及mRNA表达的影响,探讨Gal在大鼠实验性抑郁症发病过程中的作用机制及电针干预对其的影响。方法：将36只清洁健康雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组及电针组,每组12只。孤养结合CUMS21d复制抑郁症模型,通过开野试验观察大鼠行为学变化,采用酶联免疫吸附法和实时定量荧光PCR检测Gal蛋白及mRNA的表达。结果：模型组大鼠开野实验水平运动及垂直运动明显减少（P〈0.01）,电针可逆转此变化（P〈0.01）;模型组大鼠海马内GAL蛋白和mRNA表达均明显下降（P〈0.01）,电针可改善此病理变化（P〈0.05）。结论：慢性轻度不可预见性应激可使大鼠海马内GAL的表达量下降,电针可能通过增加海马内GAL表达发挥抗抑郁作用。     

玉郎伞多糖对快速老化小鼠额叶和 海马神经元Caspase-3表达及活性的影响

目的:考察玉郎伞多糖(YLSP)对快速老化(SAMP8)小鼠额叶、海马神经细胞半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)表达及活性的影响.方法:选择6月龄SAMP8小鼠,随机分为模型组,石杉碱甲组(0.02 mg·kg-1),YLSP低、高剂量组(45,180mg·kg-1),选择6月龄正常老化小鼠(SAMR1)作为对照组,以上各组每日上午ig给药1次,连续40 d,于末次给药的次日应用免疫组织化学方法检测额叶和海马Caspase-3的表达变化及神经细胞凋亡情况,测定Caspase-3活性.结果:SAMP8小鼠额叶和海马Caspase-3阳性细胞数分别为(46.00±5.30),(51.36±3.28)个,Caspase-3活性分别为2 380±193,2 473±241,均较对照组显著升高(4.90±0.60),(6.14 ±0.53);(437±76),(521±79) (P ＜0.01);与模型组相比,石杉碱甲组、YLSP低、高剂量组额叶和海马Caspase-3阳性细胞数(23.48±3.46,27.86 ±4.04;24.54±3.55,30.60±2.62;17.98±2.97,23.90±2.58)及Caspase-3活性(1323±126,1 456±130;1 397±133,1 483±147;987±79,1 091±95)明显低于模型组(P＜0.01);与石杉碱甲组、YLSP低剂量组比较,YLSP高剂量组的额叶和海马Caspase-3阳性细胞数及Caspase-3活性显著降低(P＜0.05).结论:表明YLSP降低Caspase-3表达及活性,减少SAMP8小鼠脑部神经细胞凋亡.     

逍遥舒心胶囊对慢性应激抑郁模型小鼠的抗抑郁作用及其机制

目的: 探讨逍遥舒心胶囊对慢性应激抑郁模型小鼠的抗抑郁作用及可能机制。 方法: 60只ICR小鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、逍遥丸（1.5 g·kg^-1）组、逍遥舒心胶囊低、中、高剂量（0.5,1.5,4.5 g·kg^-1）组。于造模第1 天灌胃给药,每日1次,连续5周,空白对照组和模型组给予等容积的生理盐水。除空白对照组外,其余组均采用慢性不可预见性应激加孤养法建立慢性应激抑郁症小鼠模型,并观察逍遥舒心胶囊对小鼠强迫游泳和自主活动等指标的影响。采用分光光度法测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）活力以及丙二醛（MDA）含量,采用酶联免疫吸附法测定脑组织中5-羟色胺（5-HT）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、脑源性神经营养因子（BDNF）含量。 结果: 逍遥丸1.5 g·kg^-1剂量及逍遥舒心胶囊1.5,4.5 g·kg^-1剂量可缩短抑郁症小鼠游泳不动时间,使血清中SOD活力升高,MDA含量降低,并可升高脑组织中5-HT,BDNF含量,降低ACTH含量。逍遥丸1.5 g·kg^-1剂量及逍遥舒心胶囊0.5,1.5,4.5 g·kg^-1剂量组均可不同程度地提高抑郁症小鼠的自主活动次数,改善抑郁症症状。 结论: 逍遥舒心胶囊可拮抗慢性应激所引起的抑郁样行为,其作用机制可能与提高脑组织中单胺类神经递质功能,改善下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能紊乱,提高神经可塑性和促进神经发生,改善机体自由基损伤等多种途径有关。     

舒郁散对慢性应激抑郁大鼠行为及脑神经递质的影响

目的观察舒郁散对慢性应激抑郁大鼠行为及大脑皮质内去甲。肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）含量的影响。方法50只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、阿米替林组、舒郁散小剂量组、舒郁散大剂量组：对大鼠进行21d的应激刺激建立慢性应激抑郁大鼠模型,采用Open—Field方法观察各组处理前后2min内大鼠行走路线及格子交叉点数的变化,了解大鼠行为的改变,用荧光法测定各组大鼠大脑皮质内NE、DA、5-HT含量的变化。结果与正常对照组比较,模型组大鼠水平与垂直运动次数明显少于正常对照组（P〈0．05）,舒郁散大剂量组、阿米替林组大鼠旷场活动次数明显多于模型组（P〈0．05）;同时大剂量舒郁散能显著提高慢性应激抑郁模型大鼠脑内NE、5-HT的含量,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论舒郁散可以改善慢性应激抑郁大鼠行为,能显著提高慢性应激抑郁大鼠脑内神经递质的含量,上述作用与其剂量呈正相关。     

肉蔻-5味丸对慢性抑郁模型大鼠行为及海马单胺递质的影响

目的:观察蒙药肉蔻-5味丸对慢性抑郁模型大鼠行为及海马单胺递质的影响,探讨其抗抑郁作用机制。方法:60只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、盐酸氟西汀组(3.6 mg·kg-1)及肉蔻-5味丸低、中、高剂量组(0.2,0.4,0.8g·kg-1),每组10只。采用慢性不可预见性应激与孤养结合的造模方法复制抑郁模型,造模同时ig给药,每天1次,连续给药21 d。以体重变化,矿场试验(open-field test),糖水消耗试验来进行行为学评价,酶联免疫法(ELISA)检测大鼠海马5-羟色胺(5-HT),去甲肾上腺素(NE),多巴胺(DA)单胺递质的含量。结果:给予21 d应激后,模型组大鼠体重增长缓慢,糖水消耗量、Open-field试验水平活动得分和垂直活动得分及海马5-HT,DA,NE的含量较正常组显著降低(P0.05,P0.01),与模型组相比氟西汀和肉蔻-5味丸可不同程度改善其抑郁状态,氟西汀组、肉蔻-5味丸高、中剂量组大鼠海马5-HT,DA,NE的含量显著增加(P0.05,P0.01)。结论:肉蔻-5味丸的抗抑郁作用可能与提高脑内5-HT,NE,DA单胺递质的含量相关。