加味温胆汤对抑郁模型大鼠海马CaMK信号转导通路的影响

目的 探讨加味温胆汤对抑郁模型大鼠海马钙调素依赖蛋白激酶(CaMK)信号转导通路的影响.方法 128只SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组,每组32只.采用孤养结合慢性不可预见性应激造模抑郁大鼠,从造模第1天开始中药组给予加味温胆汤12g/(kg·d),西药组予氟西汀1.8mg/(kg·d),模型组、空白组给予生理盐水2ml/(kg·d),各组均灌胃给药,连续28天.实验第7、14、21、28天时采用Western印迹法检测各组大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDA-NR1)、钙调素(CaM)、CaMKⅡ蛋白表达变化.结果 第7、14天,各组大鼠海马NMDA-NR1、CaM、CaMKⅡ蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).21、28天时,与空白组比较,模型组大鼠海马NMDA-NR1、CaM、CaMKⅡ蛋白表达增多(P＜0.01);与模型组比较,中、西药组大鼠海马NMDA-NR1、CaM、CaMKⅡ蛋白表达减少(P＜0.05或P＜0.01);中、西药组同时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 加味温胆汤可通过抑制CaMK信号转导通路的活性发挥其抗抑郁效应.     

加味丹栀逍遥散对抑郁模型大鼠海马内盐皮质激素受体和糖皮质激素受体的影响

目的:观察加味丹栀逍遥散对抑郁模型大鼠海马内盐皮质激素受体(MR)和糖皮质激素受体(GR)含量的影响。方法:将50只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、氟西汀组、加味丹栀逍遥散低剂量组、加味丹栀逍遥散高剂量组,每组10只;采用孤养结合慢性轻度不可预见性应激的复合模型,除空白组外,其余各组均接受不同应激因子刺激21 d,建立慢性应激抑郁大鼠模型,随后分别按氟西汀组2.5 mg·kg-1、加味丹栀逍遥散低、高剂量组2.04,4.08 g·kg-1,各组均按10 mL·kg-1ig给药,空白对照组和模型组ig 10 mL·kg-1生理盐水1次/d,每天应激前灌胃,从造模第22天开始,至动物处死当天,共21 d,实验周期共42 d;采用蛋白印迹法(Western-blot)测定大鼠海马内糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)的蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠海马内GR的蛋白表达下调而MR的蛋白表达升高;经治疗后,各组大鼠海马内GR的蛋白表达较模型组显著上调(P<0.05),而各组大鼠海马内MR的蛋白表达较模型组显著下调(P<0.05)。结论:加味丹栀逍遥散可以通过调节海马内GR和MR的蛋白表达而起到抗抑郁的作用,经过药物干预后的模型大鼠海马内GR表达升高而MR的表达下调,其抗抑郁的作用机制可能与海马内GR和MR之间的比例关系失调有关。     

加味温胆汤对抑郁模型大鼠下丘脑神经元超微结构的影响

目的:探讨慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑神经元超微形态结构的变化及加味温胆汤对其影响。方法:将SD大鼠32只随机分为4组:空白组、模型组、氟西汀组(西药组)和加味温胆汤组(中药组)。除空白组日常进水、食外,其余各组采取孤养联合慢性不可预见性应激的方式制备抑郁模型,持续3周造模成功后,各组分别灌胃给予相应药物,每天给药1次,连续4周。药物干预结束后,采用体质量和旷场试验观察各组大鼠行为学改变,采用透射电镜观察各组大鼠下丘脑神经元超微形态结构。结果:与正常组比较,模型组大鼠的体质量增长数、旷场实验得分显著下降(P 0. 01),下丘脑神经元严重损伤,结构发生显著改变;加味温胆汤组大鼠体质量、旷场实验得分显著增加(P 0. 01),下丘脑神经元受损程度得到明显减轻。结论:慢性应激可诱导大鼠出现下丘脑神经元超微结构改变,加味温胆汤能够减轻慢性应激所致抑郁模型大鼠的下丘脑神经元超微结构损害。     

哈巴苷对缺氧缺糖诱导下大鼠海马神经细胞游离Ca~(2+)浓度的影响

目的:研究哈巴苷对缺氧缺糖(OGD)诱导下海马神经细胞内游离Ca2+浓度的影响。方法:原代培养新生24 h内SD乳鼠海马神经细胞,采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色鉴定并检测其纯度;哈巴苷(0.5、1、5、10、25、50、100、150、200、250、500、1 000μmol/L)预处理48 h后,OGD 4 h,另设正常对照组及模型组,采用MTT法检测各组海马神经细胞活力,筛选哈巴苷有效浓度范围;将SD乳鼠海马神经细胞随机分为正常对照组、模型组、哈巴苷各剂量(50、75、100、125μmol/L)组,采用Fluo-3/AM负载的海马神经细胞,应用荧光倒置显微镜及荧光分光光度计观测哈巴苷各剂量对OGD海马神经细胞内游离Ca2+浓度的影响。结果:原代SD乳鼠海马神经细胞培养至第7天,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色鉴定为海马神经细胞,并检测其神经细胞纯度为85%~90%;MTT结果显示:与模型组比较,哈巴苷10、25、50、100μmol/L能显著增强海马神经细胞的活力(P0.05或P0.01),确定哈巴苷预处理48 h的有效浓度范围为10~100μmol/L;荧光倒置显微镜下观察,正常对照组海马神经细胞Ca2+荧光强度弱,模型组海马神经细胞Ca2+荧光强度强;与模型组比较,哈巴苷各剂量预处理48 h,均能降低OGD诱导的海马神经细胞Ca2+的荧光强度,其中75μmol/L组荧光强度降低最为明显。荧光分光光度法测定显示:与正常对照组比较,模型组海马神经细胞内游离Ca2+浓度显著升高(P0.01);与模型组比较,哈巴苷75μmol/L能显著降低OGD诱导下海马神经细胞内游离Ca2+的浓度(P0.05)。结论:哈巴苷预保护48 h能降低OGD诱导的海马神经细胞内游离Ca2+的浓度,以75μmol/L剂量效果最好,其保护作用与降低细胞内游离Ca2+浓度有关。     

“心胆同治”麦粒灸对抑郁共病失眠大鼠海马单胺类神经递质水平的影响

目的 探讨“心胆同治”麦粒灸治疗抑郁共病失眠可能的作用机制。方法 (1)选用SPF级SD大鼠24只,雌雄各半,随机分为空白组、模型组、麦粒灸组、西药组,每组6只。(2)模型组、麦粒灸组、西药组均采用慢性不可预测性温和应激结合孤养法联合改良多平台水环境睡眠剥夺法制备抑郁共病失眠大鼠模型,连续造模21天。造模结束后采用行为学评分及戊巴比妥钠翻正实验进行模型评价。(3)造模成功后第2天,麦粒灸组取大鼠双侧“心俞”及“胆俞”穴麦粒灸干预,每穴每天连续灸3壮,持续10天;西药组予盐酸文拉法辛合地西泮混合溶液（盐酸文拉法辛：13.5 mg·kg-1,地西泮：0.9 mg·kg-1）灌胃,1次/天,连续灌胃10天;空白组、模型组予0.9%氯化钠溶液（10 mL·kg-1）灌胃,1次/天,连续灌胃10天。(4)干预结束后,采用行为学实验及戊巴比妥钠翻正实验评价各组大鼠抑郁及失眠样行为,以酶联免疫吸附测定法（ELASA）测定各组大鼠海马5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）表达水平,并通过苏木素-伊红（HE）染色观察各组大鼠海马组织的病理改变。结果 与空白组比较,模型组行为学评分、...     

桂枝芍药知母汤对急性痛风性关节炎大鼠抗炎作用机制的探讨

目的观察桂枝芍药知母汤对大鼠急性痛风性关节炎的疗效以及对炎性介质前列腺素(PGE2)和白三烯(LTB4)含量的影响,探讨其抗炎作用机制。方法踝关节注射法造模,雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,桂枝芍药知母汤高(2g·kg-1·d-1)、中(1mg·kg-1·d-1)、低(0.5mg·kg-1·d-1)剂量组,秋水仙碱组(0.1mg·kg-1·d-1),痛风舒组(0.3mg·kg-1·d-1)。在受试大鼠右侧踩关节腔内注入尿酸钠(每只0.01g)溶液,形成痛风模型。空白组以同样方法注射空白溶剂。造模12h后给药,连续给药5天后腹主动脉取血,取大鼠踝关节做病理切片,比较各组大鼠关节体积,观察各组血清中PGE2和LTB4的含量。结果桂枝芍药知母汤组大鼠踝关节体积变小,血清中PGE2和LTB4的含量明显低于模型对照组。结论桂枝芍药知母汤可抑制炎症因子PGE2和LTB4,并对大鼠急性痛风性关节炎有显著疗效。     

加味温胆汤对抑郁模型大鼠海马NMDA—NR1mRNA／蛋白表达的影响

目的探讨加味温胆汤对抑郁模型大鼠海马NMDA—NR1mRNA／蛋白表达的影响作用。方法以孤养结合慢性不可预见性应激抑郁模型大鼠为研究对象,在实验7d、14d、21d、28d时,检测各组大鼠旷场实验中水平运动、垂直运动得分,并采用QRT—PCR、Western—Blot技术检测各组大鼠海马NMDA—NR1mRNA／蛋白表达变化。结果21d、28d时,与空白组比较,模型组水平运动、垂直运动得分降低（P〈0．01）;与模型组比较,中、西药组水平运动、垂直运动得分增加（P〈0．05或P〈0．01）。21d、28d时,与空白组比较,模型组大鼠海马NMDA—NR1mRNA／蛋白表达增多（P〈0．01）;与模型组比较,中、西药组大鼠海马NM—DA—NR1tuRNA／蛋白表达减少（P〈0．05或P〈0．01）。结论加味温胆汤的抗抑郁效应可通过阻抑海马NMDA—NR1mRNA／蛋白表达而实现。     

电针对戊四唑点燃型癫痫大鼠脑电及海马神经元内Ca~(2+)含量的影响

目的:探讨电针抗癫痫的可能机制。方法:SD大鼠20只随机分为正常组、模型组、尼莫地平组、电针组。除正常组外,其它3组均制作戊四唑慢性点燃癫痫模型。电针组电针"百会"大椎",尼莫地平组腹腔注射尼莫地平。记录各组大鼠治疗后痫样波发作潜伏期及痫波密度,使用激光共聚焦显微镜观察大鼠海马神经元内Ca2+的荧光强度。结果:电针组脑电痫样波发作潜伏期较模型组明显延长(P<0.05),痫波密度与模型组比较明显变小(P<0.05)。模型组大鼠海马神经元Ca2+荧光强度较正常组明显升高(P<0.01),电针组Ca2+荧光强度较模型组明显降低(P<0.05),尼莫地平组Ca2+荧光强度较模型组明显降低(P<0.01)。结论:电针可调节戊四唑点燃型癫痫大鼠脑电及海马内Ca2+含量,电针的抗癫痫作用可能与之有关。     

安寐丹对睡眠剥夺大鼠海马CA1区细胞结构及神经元损伤的保护作用

目的:探讨安寐丹对睡眠剥夺大鼠海马神经元及相关蛋白表达的影响.方法:通过随机数字表法将SD大鼠分为空白组、模型组、安寐丹组和褪黑素组.空白与模型组给予等容生理盐水,安寐丹组给药9.09 g·kg-1·d-1.褪黑素组给药0.27 g·kg-1·d-1.自制睡眠剥夺箱造模4周.Ethovision XT视频分析系统监测大...     

艾灸督脉组穴对血管性痴呆大鼠海马CA1区肌醇需要酶1/X-盒连接蛋白1通路的影响

目的：观察艾灸督脉组穴对血管性痴呆（VD）大鼠海马CA1区肌醇需要酶1(IRE1)/X-盒连接蛋白1(XBP1)通路的影响，探讨艾灸治疗VD的作用机制。方法：将雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、艾灸组和西药组，每组12只。采用双侧颈总动脉永久结扎法复制VD模型。艾灸组取“百会”“大椎”“风府”温和灸，20 min/次，1次/d，干预6 d休息1 d，治疗4周。西药组给予尼莫地平2 mg·kg-1·d-1分3次灌胃，连续4周。采用Morris水迷宫实验检测造模前后及干预后大鼠的学习记忆能力，TUNEL染色法检测海马CA1区神经细胞凋亡率，Western blot法和实时荧光定量PCR法检测海马CA1区IRE1、XBP1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白及mRNA的表达水平。结果：与假手术组比较，模型组大鼠平均逃避潜伏期明显延长（P<0.01），穿越原平台次数明显减少（P<0.01），海马CA1区神经细胞凋亡率明显升高（P<0.01）,IRE1、XBP1、Bax蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,Bc...     

加味温胆汤抗大鼠营养性肥胖的机制探讨

目的: 从血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量和肝、脂肪组织病理学改变角度探讨加味温胆汤抗大鼠营养性肥胖的机制。方法: 采用"髙脂乳剂+普通饲料"双重喂养法复制大鼠营养性肥胖模型。雄性断乳SD大鼠30只,按体重均匀分为空白对照组、模型对照组和加味温胆汤组,每组10只。各组动物每天均喂饲普通饲料,除空白对照组外,其余组动物每天上午灌胃给予自制高脂乳剂20 mL·kg^-1造模,连续4周。从第5周开始,于每天下午灌胃给予实验组加味温胆汤(7.74 g·kg^-1),空白对照组与模型对照组给同体积水,连续4周。末次给药后,禁食不禁水12 h,取血清检测T-SOD,NO,MDA水平;分离肝、脂肪组织,10%甲醛溶液固定,常规制片,HE染色,光镜下观察肝、脂肪细胞的病变。结果: 加味温胆汤组大鼠血清NO含量明显低于模型组(P<0.01);大鼠肝细胞界限清楚,排列整齐,脂变肝细胞散在;脂肪细胞数量增多,体积减小。结论: 加味温胆汤抗大鼠营养性肥胖的机制可能与降低血清NO水平、对抗肝细胞脂肪变性、缩小脂肪细胞体积等有关。     

旋覆代赭汤对RE模型大鼠食管黏膜Na+-K+-ATP酶及 Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响

目的: 观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性的影响,探讨RE食管黏膜细胞能量代谢障碍与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。方法: 将96只雄性Wistar大鼠随机分成6组,即假手术组、模型组、旋覆代赭汤组高、中、低剂量组(24,12,6 g·kg^-1)及西药对照组(奥美拉唑10 mg·kg^-1+2 mg·kg^-1莫沙必利),每组16只。采用"食管-十二指肠端侧吻合术"制备胃及十二指肠液混合RE模型。从术后第3天开始,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,药物治疗组分别给予旋覆代赭汤高、中、低剂量、西药(奥美拉唑10 mg·kg^-1+莫沙必利2 mg·kg^-1)灌胃,连续7天,记录大鼠体重变化及死亡情况,于第8天处死大鼠留取标本,观察食管下段黏膜大体及病理组织学变化;化学法检测食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性。结果: 与假手术组比,模型组大鼠体重明显减轻(P<0.05),食管黏膜肉眼及镜下病理改变明显,评分增高(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与模型组及西药组比,旋覆代赭汤高、中剂量组大鼠死亡率明显降低(P<0.05):与模型组比,旋覆代赭汤高、中剂量组、西药组肉眼及病理评分显著降低(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性明显提高(P<0.05)。结论: 旋覆代赭汤能明显提高RE大鼠食管黏膜细胞膜Na⁺-K⁺-ATP 酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性, 从而保持食管黏膜细胞完整性,减轻黏膜损伤。     

加味温胆汤配合认知-行为疗法治疗慢性失眠

目的:观察加味温胆汤配合认知-行为疗法治疗慢性失眠痰热内扰证的临床疗效.方法:将60例慢性失眠痰热内扰证患者,通过随机方法分成治疗组和对照组各30例.对照组予以认知-行为疗法治疗,治疗组予以中药加味温胆汤配合认知-行为疗法进行治疗,观察两组临床疗效及匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)积分、中医症状积分.结果:治疗后治疗组PSQI各量表积分和总分均显著下降,与治疗前比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01);治疗后对照组PSQI睡眠质量、入睡时间、睡眠障碍、睡眠药物等量表积分和总分下降,与治疗前比较,差异有显著性意义(P＜0.05).两组PSQI各量表积分和总分治疗后比较,差异均有显著性意义(P＜0.05).中医症状积分变化比较,对于失眠症的改善差异有统计学差异(P＜0.05),而治疗组对于中医症状的改善如失眠、胸闷脘痞和易惊醒方面有显著的优势(P＜0.05).结论:加味温胆汤配合认知-行为疗法治疗慢性失眠疗效优.     

温胆汤对地卓西平马来酸盐诱发精神分裂症模型大鼠脑组织中Cx43 mRNA表达的影响

目的:探讨温胆汤对精神分裂症模型大鼠脑组织中神经胶质细胞连接蛋白(Cx43)mRNA的影响。方法:将健康的SD大鼠50只随机分为5组:正常组(A)、模型组(B)、温胆汤高、中、低剂量组(C,D,E组,剂量为生药40,20,10 g.kg-1)。A,B组生理盐水ig,C,D,E组温胆汤ig,1次/d,21 d后,按照0.6 mg.kg-1一次性ip地卓西平马来酸盐(MK-8O1)建立拟精神分裂症模型,然后行为学观察3 d,处死大鼠。应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,检测大鼠Cx43 mRNA的表达量。结果:模型组Cx43 mRNA的表达量低于正常组,有显著性意义(P<0.05);温胆汤3个剂量组Cx43 mRNA的表达量明显高于模型组,有显著性意义(P<0.05)。结论:温胆汤能够增强精神分裂症模型大鼠脑组织中Cx43 mRNA的表达。     

温胆汤对精神分裂症模型鼠海马PKC,p38MAPK及P-Cx43的影响

目的:研究温胆汤对精神分裂症模型鼠大脑蛋白激酶C(PKC),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及磷酸化连接蛋白Cx43(P-Cx43)蛋白表达的影响。方法:将72只清洁级SD大鼠随机平均分为6组:正常组(A,生理盐水20 m L·kg-1),模型组(B,生理盐水20 m L·kg-1),氯氮平组(C,20 mg·kg-1),温胆汤高剂量组(D,40 g·kg-1),温胆汤中剂量组(E,20g·kg-1),温胆汤低剂量组(F,10 g·kg-1)。A,B组ig生理盐水;C组ig氯氮平;D,E,F组分别ig温胆汤,1次/d,21 d后,B,C,D,E,F组一次性ip地卓西平马来酸盐(MK-801)0.6 mg·kg-1,建立精神分裂症模型,行为学观察3 d后,处死大鼠,取海马组织,采用蛋白免疫印迹(Western bloting)法检测海马组织中PKC,p38 MAPK及P-Cx43蛋白的含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠出现刻板行为;海马组织PKC,p38 MAPK及P-Cx43含量明显升高(P0.05)。与模型组比较,温胆汤各组及氯氮平组均不同程度改善了模型鼠的一般状况;明显降低海马组织PKC,p38 MAPK及P-Cx43的含量(P0.05)。Cx43的磷酸化程度也有统计学意义(P0.05),且模型组磷酸化水平最高。结论:温胆汤可明显降低PKC,p38 MAPK及P-Cx43蛋白的浓度,进而调节缝隙连接通讯(GJIC)的功能。     

旋覆代赭汤及其拆方对RE大鼠血浆Na~+-K~+-ATP酶及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影响

[目的]探讨反流性食管炎(RE)食管黏膜血浆细胞能量代谢与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。[方法]将120只Wistar大鼠按照随机数字法随机分为10组,每组12只,即正常组、模型组、旋覆代赭汤全方组(全方组)、苦降组、甘升组、升降相因组、去苦降组、去甘升组、去升降相因组和西药组;除正常组外,其余9组行"4.2 mm幽门夹+胃底2/3结扎术"造模。治疗14 d后,即造模后第22天处死,检测各组大鼠血浆Na~+-K~+-ATP酶及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的活性。[结果]实验后各模型组大鼠ATP酶活性低于正常组;全方组、西药组酶活性较好,与正常组差异无统计学意义(P0.05),与模型组相比有统计学差异(P0.05);苦降组及去甘升组与模型组相比,差异无统计学意义(P0.05),与全方组及西药组比较差异有统计学意义(P0.05);正常组与其他各组比较,均有统计学差异(P0.05);西药组与全方组比较,差异无统计学意义。[结论]旋覆代赭汤全方组能提高模型大鼠血浆Na~+-K~+-ATP酶及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的活性,改善模型大鼠食管黏膜组织形态学病变,且作用优于各拆方组。     

加味四君固本汤与Iressa联合用药对裸鼠移植瘤的影响

目的:研究加味四君固本汤对皮下成瘤裸鼠的影响。方法:使用人非小细胞肺癌A549细胞在裸鼠皮下接种成瘤,随机分成对照组,易瑞沙(Iressa)治疗组(100 mg·kg-1·d-1),中药治疗组(加味四君固本汤0.10 g·kg-1·d-1),加味四君固本汤和Iressa联合治疗组,观察肿瘤生长情况及裸鼠生存质量,并采用免疫印记实验(Western blot)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组肿瘤中上皮生长因子受体(EGFR)蛋白质与mRNA的表达情况。结果:西药组、中药组和联合用药组的肿瘤抑制率分别为55.75%、35.22%和82.3%,与对照组比较差异显著(P<0.01),联合用药组与单独用药组差异具有统计学意义(P<0.01)。观察治疗期间裸鼠的运动量、饮食、体重等指标,显示联合用药组裸鼠的生存质量优于西药组。Western Blot与RT-PCR结果显示联合用药组的肿瘤组织中增殖相关的指标明显低于其他3组。结论:加味四君固本汤与Iressa联合用药能更好地抑制肿瘤生长,对肿瘤的治疗效果明显优于Iressa组。加味四君固本汤能提高裸鼠治疗过程中的生存质量。