腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移的心肌保护作用

目的蛋白激酶Cε(Protein Kinase C ε,PKCε)转基因小鼠表现了保护心肌缺血/再灌注损伤的遗传特性(心肌保护表型).本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接的PKCε基因转移对心肌缺血-再灌注损伤的影响.方法通过克隆PKC ε cDNA到人类5型腺病毒基因组DNA的E1区建立表达PKCε基因的重组腺病毒.直接注射重组腺病毒3.3×1010菌落形成单位(pfu)/体重(kg)到小鼠(10～13周),对照鼠被直接注射相同剂量的空载腺病毒.Western免疫印迹被用于测定PKC ε蛋白质表达水平.通过冠状动脉阻断/再灌注、染色、照像和微机计算进行心肌梗死分析.结果PKC ε重组腺病毒直接心肌注射优于静脉注射;直接心肌注射后48 h,基因转移鼠心肌PKCε蛋白质表达水平比对照鼠增加近4倍.心脏重、左室重、危险区重和危险区重/左室重百分数在PKCε基因转移和对照小鼠之间无显著差异,而PKCε基因转移小鼠的梗死重[(35.4±3.1)mgvs(10.3±1.3)mg]、梗死/危险区域百分数(51.1%±0.3%vs17.0%±2.6%)、梗死/左室百分数(30.0%±3.0% vs 9.2%±0.5%)明显低于对照鼠(均P＜0.01).结论腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移小鼠表现了对心肌梗死的保护作用.     

腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移的心肌保护作用

目的　蛋白激酶Cε (ProteinKinaseCε,PKCε)转基因小鼠表现了保护心肌缺血 /再灌注损伤的遗传特性 (心肌保护表型 )。本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接的PKCε基因转移对心肌缺血 -再灌注损伤的影响。方法　通过克隆PKCεcDNA到人类 5型腺病毒基因组DNA的E1区建立表达PKCε基因的重组腺病毒。直接注射重组腺病毒 3 3× 10 10 菌落形成单位 (pfu) /体重 (kg)到小鼠 (10～ 13周 ) ,对照鼠被直接注射相同剂量的空载腺病毒。Western免疫印迹被用于测定PKCε蛋白质表达水平。通过冠状动脉阻断 /再灌注、染色、照像和微机计算进行心肌梗死分析。结果　PKCε重组腺病毒直接心肌注射优于静脉注射 ;直接心肌注射后 4 8h ,基因转移鼠心肌PKCε蛋白质表达水平比对照鼠增加近 4倍。心脏重、左室重、危险区重和危险区重 /左室重百分数在PKCε基因转移和对照小鼠之间无显著差异 ,而PKCε基因转移小鼠的梗死重 [(35 4± 3 1)mgvs(10 3±1 3)mg]、梗死 /危险区域百分数 (5 1 1%± 0 3%vs 17 0 %± 2 6 % )、梗死 /左室百分数 (30 0 %±3 0 %vs 9 2 %± 0 5 % )明显低于对照鼠 (均P <0 0 1)。结论　腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移小鼠表现了对心肌梗死的保护作用。     

蛋白激酶Cη转基因过渡表达未引起心肌肥厚和心衰——介绍转基因小鼠体内心功能评价方法

目的　蛋白激酶Cη(PKCη)转基因对心脏表型的影响。 方法表达低水平 (Tg PKCη L)和高水平 (Tg PKCη H)靶心脏野生型PKCη的转基因小鼠通过标准技术被建立。Tg PKCη L、Tg PKCη H阳性鼠通过PCR和Southern印迹鉴定 ,转基因阴性鼠作为研究对照。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术测血液动力学指标和评价小鼠左室收缩功能。Western免疫印迹分析α 骨骼肌肌动蛋白 (α \|SkeletalMuscleActin)和PKCη表达水平。苏木精染色进行心脏组织学分析。 结果与对照鼠相比Tg PKCη L、Tg PKCη H鼠基线左室最大收缩压、左室收缩压、最大收缩速率 (dp/dt)、 dp/dt、左室舒张末压、舒张压均无明显变化 (均P >0 0 5 ) ,异丙肾上腺素激发后左室dp/dt剂量依赖的升高无明显抑制 (均P >0 0 5 )。此外 ,Tg PKCη H、Tg PKCη L鼠心脏 /体重比、心肌α 肌动蛋白表达无显著变化 ,(P >0 0 5 ) ,心肌组织学分析表现了正常的心肌细胞形态。结论　低水平和高水平PKCη的转基因过渡表达未导致心肌肥厚、心衰表型的出现。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科方法能敏感、准确地评价小鼠左室收缩功能。     

1月和6月龄mdx基因缺陷小鼠心肌病理改变与心功能变化的初步研究

目的：研究1月和6月龄mdx小鼠心肌病理和心功能改变。方法：1月和6月龄mdx小鼠各10只，以同龄同数量的C57BL6小鼠作为正常对照，颈动脉插管检测动脉和左心室内的血流动力学参数，评价各组小鼠的死亡率、生存时间和心功能。分析小鼠心脏大体形态和组织病理改变。结果：1月龄mdx小鼠大动脉和左心室内的血流动力学参数均与对照组无显著差异。与对照组相比，6月龄mdx小鼠心率显著增快（P〈0．05），生存时间显著缩短（P〈0．05），左心室内第5分钟心率和反映收缩功能的LVPSP、dp／dt及反映最大收缩舒张能力的△Pmax，以及反映舒张功能的．dp／dt的绝对值均显著降低或减小（分别P〈0．01，P〈0．01，〈0．05，〈0．01，〈0．01）。1月龄mdx小鼠心重／体重比显著低于对照组（P〈0．01），而6月龄mdx小鼠则显著增加（P〈0．01）。6月龄mdx小鼠心脏宽度和长径均显著超过对照组（均P〈0．01）。病理切片1月龄mdx小鼠心肌未见损害，6月龄mdx小鼠心肌存在散在的细胞坏死，炎性细胞浸润和胶原纤维含量增加。结论：6月龄mdx小鼠已存在心脏扩张和心肌病的病理改变，并开始出现心率增快、对外源性的心室内刺激耐受不良和心功能储备降低。     

蛋白激酶Cη转基因过渡表达未引起心肌肥厚和心衰--介绍转基因小鼠体内心功能评价方法

目的蛋白激酶Cη(PKCη)转基因对心脏表型的影响.方法表达低水平(Tg-PKCη-L)和高水平(Tg-PKCη-H) 靶心脏野生型PKCη的转基因小鼠通过标准技术被建立.Tg-PKCη-L、Tg-PKCη-H阳性鼠通过PCR和Southern 印迹鉴定,转基因阴性鼠作为研究对照.用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术测血液动力学指标和评价小鼠左室收缩功能.Western免疫印迹分析α-骨骼肌肌动蛋白(α-Skeletal Muscle Actin)和PKCη表达水平.苏木精染色进行心脏组织学分析.结果与对照鼠相比Tg-PKCη-L、Tg- PKCη-H鼠基线左室最大收缩压、左室收缩压、最大收缩速率(dp/dt)、-dp/dt、左室舒张末压、舒张压均无明显变化(均P>0.05),异丙肾上腺素激发后左室dp/dt剂量依赖的升高无明显抑制(均P>0.05).此外,Tg- PKCη- H、Tg-PKCη-L鼠心脏/体重比、心肌α-肌动蛋白表达无显著变化,(P>0.05),心肌组织学分析表现了正常的心肌细胞形态.结论低水平和高水平PKCη的转基因过渡表达未导致心肌肥厚、心衰表型的出现.用非开胸经颈总动脉插管的显微外科方法能敏感、准确地评价小鼠左室收缩功能.     

过氧化氢酶过度表达对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨腺病毒戢体介导的过氧化氢酶基因转染对体外培养的人血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法 用含过氧化氢酶基因的重组腺病毒转染人血管平滑肌细胞，采用Western blot方法检测血管平滑肌细胞过氧化氢酶的表达。应用流式细胞术、TUNEL法等方法检测血管平滑肌细胞的凋亡。结果 含过氧化氢酶基因的重组腺病毒转染后血管平滑肌细胞过氧化氢酶表达明显增多；流式细胞术显示含过氧化氢酶基因的重组腺病毒组与对照组比较凋亡率明显增加（P〈0．01）。经TUNEL分析显示，含过氧化氢酶基因的重组腺病毒组凋亡细胞明显多于对照组。两者之间有显著性差异（P〈0．001）。结论 腺病毒载体介导的过氧化氢酶基因转染导致过氧化氢酶过度表达。促进人血管平滑肌细胞的凋亡，这可能是防治经皮腔内冠状动脉血管成形术后再狭窄的一种新方法。     

热休克蛋白27对小鼠实验性心力衰竭的保护作用

目的 观察热休克蛋白27（Hsp27）心肌特异性高表达对doxorubicin（Dox）诱导的慢性心力衰竭（心衰）小鼠的影响。方法 （1）建立心肌特异性高表达Hsp27的转基因鼠模型;（2）经Dox诱导小鼠的慢性心衰,并观察Hsp27对小鼠生存率、左心室血流动力学的影响。结果 （1）成功建立心肌特异性过表达Hsp27的转基因鼠模型;（2）Hsp27心肌特异性过表达显著改善了Dox诱导的小鼠死亡率（P〈0．01）和左心室血流动力学参数变化（P〈0．05或P〈0．01）;（3）Hsp27表达显著抑制了Dox诱导的心肌氧化应激。结论 Hsp27心肌特异性过表达对Dox诱导的小鼠心衰具有显著的抑制作用。     

磷脂酰肌醇3激酶调节亚基P85α在自发性糖尿病大鼠心肌中表达下降

目的探讨糖尿病晚期心肌病变的细胞分子机制。方法分别选用Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty（OLETF）和Long-Evans Tokushima Otsuka（LETO）大鼠作为实验组和对照组。基因芯片、实时定量PCR、Westernblot法比较两组大鼠心肌磷脂酰肌醇3激酶（P13K）调节亚基P85a的表达。结果与LETO大鼠相比,OLETF大鼠血浆Ins下降（6．0±2．9 vs52．6±7．5mU／L,P〈0．01）,TG和TC增加（1．73±0．34 vs0．48±0．08mmol／L,P〈0．01;4．41±0．21 vs2．25±0．75mmol／L,P〈0．01）,左心室内压舒张期下降速率（-dp／dt）降低30％（P〈0．05）。基因芯片检测显示,OLETF大鼠心肌组织中P85a基因表达量仅为LETO大鼠的1／8。实时定量PCR和Western blot证实OLETF大鼠P85α基因在转录和翻译水平分别较LETO大鼠下降了81．5％（P〈0．05）和43．2％（P〈0．01）。结论自发性糖尿病大鼠OLETF心肌组织P85amRNA和蛋白表达水平显著下降与心肌收缩、舒张速率下降相关。     

Toll样受体在Goldblatt鼠左室心肌中的表达-炎症与左心室肥厚相关的一个证据

目的 观察肾血管性高血压大鼠（2K1C，Goldblatt高血压大鼠）左室心肌中Toll样受体4（Toll-like receptor4，TLR4）、核因子κB（NFκB）的表达情况并探讨其影响因素。方法 采用免疫组化法检测10只雄性Goldblatt高血压大鼠和6只正常雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠左室心肌中TLR4、核因子κB的表达情况，维多利亚蓝一丽春红法行心肌胶原染色评价心肌纤维化程度，根据超声心动图评价左室结构和功能。结果 高血压大鼠左室心肌组织中TLR4和NFκB的表达水平升高（P〈0．01），两者呈高度正相关（r=0．824，P〈0．01）；TLR4表达水平与左室心肌纤维化呈正相关；TLR4表达水平与左室心肌肥厚程度、收缩功能指数显著相关。结论 TLR4信号通路的活化可能参与Goldblatt大鼠心肌肥厚的发生和发展。     

腺病毒介导的hVEGF165基因治疗对骨髓移植后骨髓造血干细胞恢复的影响及其意义

目的：探讨重组腺病毒Ad—EGFP／hVEGF165介导的血管内皮细胞生长因子在骨髓移植后小鼠体内的表达效率及对骨髓造血干细胞恢复的影响。方法：利用细菌内同源重组法快速构建复制缺陷型腺病毒Ad—EGFP／hVEGF165，经尾静脉注射给同基因骨髓移植BALB／c小鼠；在移植后不同时间，通过荧光显微镜、RT—PCR、免疫组化染色和ELISA方法检测外源基因在小鼠体内的表达；取移植后30d小鼠骨髓单个核细胞并计数，随后进行脾集落形成单位试验(CFU—S)以评价VEGF基因转移组小鼠骨髓造血干细胞数量恢复情况。结果：重组腺病毒AdEGFP／hVEGF165介导的VEGF基因转移广泛分布在骨髓移植小鼠心、肺、肝、脾、肾、小肠和骨髓组织；小鼠血浆中VEGF浓度高峰出现在移植后2d；接受重组腺病毒AdEGFP／hVEGF165基因干预治疗组小鼠骨髓单个核细胞计数及其形成的脾集落数量明显高于其他对照组。结论：腺病毒成功介导了hVEGF165基因在骨髓移植小鼠体内的稳定表达，明显促进骨髓移植小鼠骨髓造血干细胞数量的恢复．是骨髓单个核细胞数量增加的根本原因。     

心肌去乙酰化酶SIR33对缺血／再灌注小鼠心律失常的影响

目的探讨心肌线粒体去乙酰化酶SIRT3对急性缺血再灌注（I／R）所致心律失常的影响。方法：以24只SIRT3基因敲除型小鼠为实验对象,用24只野生型小鼠为对照,两种小鼠均随机各分为对照组、假手术组、I／R模型组及I／R＋烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）治疗组,每组6只小鼠（rt=6）。采用冠脉左前降支结扎缺血30 min再灌注2 h建立在体大鼠急性心肌I／R模型,于术中监测心电指标。取心肌组织检测SIRT3、锰超氧化物歧化酶（MnSOD）和过氧化氢酶（Catalase）蛋白的表达和心肌内氧自由基（ROS）的水平。结果：与野生型对照小鼠相比,SIRT3基因敲除型小鼠心肌中SIRT3、MnSOD和Catalase蛋白表达的水平显著降低。心律失常评分的结果显示,SIRT3基因敲除型小鼠的假手术组即可观察到心律失常。SIR13基因敲除可导致小鼠心肌I／R所致心律失常显著加重（与野生型模型组相比,P〈0-05）。心肌I／R后,SIRT3基因敲除型小鼠心肌中ROS的增加程度明显高于野生型模型组小鼠（P〈0-05）。预先采用NAD＋治疗,可显著提高野生型I／R小鼠心肌SIRT3的活性（与野生型小鼠模型组相比,P〈0-05）,显著增加心肌MnSOD的活性,进而有效地抑制I／R小鼠心肌中ROS的水平,有效缓解I／R所致心律失常（与野生型小鼠模型组相比,均P〈0-05）。但是,SIR73基因敲除后,NAD＋治疗引起的上述心肌保护作用基本消失。结论：心肌中SIRT3表达的降低可能是加重心肌I／R过程中氧化应激损伤并促发心律失常的重要机制。SIRT3正常活性的维持有助于对抗心肌I／R损伤（MIRI）的发生。     

骨髓干细胞移植对AMI后左室重构及心功能影响的实验研究

将雄性Wistar大鼠50只随机分为移植组及对照1、2、3组。用结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠急性心肌梗死（AMI）模型。对照1组单纯开胸但不结扎冠状动脉；对照2组仅建立AMI模型；对照3组将培养基经心外膜下植入梗死心肌周围；移植组将制备好的同种异体骨髓单个核细胞（BM-MNCs）悬液经心外膜下植入梗死心肌周围。移植术后4周末，超声心动图及心导管检查评价左室形态及功能，并观察梗死区及其周边区心肌内移植BM-MNCs组织形态学特点。结果与对照1组相比，对照2、3组及移植组左室收缩末期内径（LVEDs）、左室舒张末期内径（LVEDd）和左室舒张末压（LVEDP）均显著升高（P〈均0．05），左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、左室收缩压（LVSP）、左室压最大上升速率（＋dp／dtmax）和左室压最大下降速率（-dp／dtmax）均显著降低（P均〈0．05）；移植组LVEDs、LVEDd和LVEDP显著低于对照2、3组（P均〈0．05），LVEF、LVFS、＋dp／dmax。和-dp／dtmax显著高于对照2、3组（P均〈0．05）；免疫组织化学检查发现移植组AMI区内有存活的BrdU标记阳性的BM-MNCs。证实同种异体大鼠BM-MNCs移植可减轻急性AMI后的左心室扩大，抑制左室重构，改善AMI后的心脏功能。     

载脂蛋白E基因多态性与颈动脉粥样硬化性狭窄的相关性研究

目的研究载脂蛋白E（ApoE）多态性在颈动脉粥样硬化性狭窄发病中的作用。方法应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR．RELP）技术，对25例颈动脉粥样硬化性狭窄患者（狭窄组）和25例同期健康体检者（对照组）的ApoE基因多态性进行分析。结果与对照组比较，狭窄组ε3频率降低（P〈0．05），ε4频率升高（P〈0．01），ε3／ε4和ε4／ε4基因型频率增高（P〈0．05、0．01）；对以上两组再按ApoE基因型分别分为ApoE2（ε2／2＋ε2／3）、ApoE3（ε3／3）、ApoFA（ε3／4＋ε4／4）；其中ApoE4狭窄程度增加。结论ApoE基因多态性与颈动脉粥样硬化性狭窄形成有相关性，ε4基因是颈动脉粥样硬化性狭窄形成的危险因子。     

弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒的构建与表达

目的构建弓形虫致密颗粒蛋白GRA4的真核表达质粒，并研究其在体外与体内细胞中的表达情况。方法采用PCR方法及克隆技术，构建pVAC-GRA4重组质粒；利用脂质体介导转染法，将该重组质粒导入HEK-293细胞，用RT—PCR法及Westem-blot法检测其表达情况；利用基因枪导入法将该重组质粒导入BALB／c小鼠体内细胞，测定免疫鼠T淋巴细胞亚群及IFN-γ、IL-4含量，并观察攻毒试验后小鼠存活情况，以评价其免疫保护力。结果从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出GRA4基因片段，成功构建重组表达质粒pVAC-GRA4；转染GRA4的HEK-293细胞，RT—PCR检测可见一条约987bp的目的条带，表达产物经Western—blot鉴定，其分子量约为41kD，能被特异性免疫血清所识别；经pVAC-GRA4免疫后的小鼠，其CD4^＋T细胞百分率无明显变化（P〉0．05），CD8^＋T细胞百分率明显增加（与pVAC对照组比较P〈0．05，与空白对照组比较P〈0．01）。CD4^＋／CD8^＋比值也较空白对照组明显降低（P〈0．01）；pVAC-GRA4免疫鼠IFN-γ的A值比对照组略高，但差异无显著性（P〉0．05）。IL-4A值各组间无明显变化（P〉0．05）；pVAC-GRA4免疫鼠存活率显著高于两对照组，死亡小鼠的平均存活时间延长（与空白对照组比较P〈0．05）。结论构建的真核表达质粒pVAC-GRA4能在HEK-293细胞中和小鼠体内细胞中轰基．为弓形出癌苗的进一步研究打下基础．     

多聚赖氨酸包被球囊导管转移基因表达的时相特征

目的评估多聚赖氨酸包被球囊导管－重组腺病毒／ＬａｃＺ（Ａｄ５／ＬａｃＺ）局部基因转移系统的基因转移效率与表达时间。方法利用该系统，在体将Ａｄ５／ＬａｃＺ导入兔腹主动脉下段。然后于转基因后不同的时间点对转基因表达进行了定性（Ｘ－Ｇａｌ染色）及定量（β－Ｇａｌ活性）测定。结果基因转移后７天的表达最高。３天与１４天的次之，２１天时表达显著下降。２８天时几乎测不到转基因的表达。结论该基因转移系统能有效地实现直接、在体的基因转移。腺病毒介导的基因表达时间是短暂的。其表达峰值约在７天左右。     

转染人热休克蛋白70对同种异体移植心脏移植物血管病的影响

目的探讨经冠状动脉内灌注重组腺病毒载体介导HSP70（Ad．HSP70）转基因治疗对同种异体心脏移植物血管病的影响。方法以套管技术建立颈部异位异种心脏移植模型。基因转移组在体外经冠状动脉缓慢灌注含3．8×10^10VP／mlAd—HSP70的4℃HTK液,持续45min;空白载体组灌注含3．8×10^10VP／ml不携带基因腺病毒空白载体（Ad）的HTK液（B组）;对照组仅灌注无病毒的HTK液（A组）持续同样时间。术后1个月收集移植物组织做检测。组织内目的基因表达产物通过免疫分析、RT—PCR进行半定量分析,免疫组化染色进行定性和定位分析。结果RT—PCR证实,移植物内外源性HSP70基因转录,免疫组化检测证实Ad—HSPT0转染的移植物（C组）HsP70成功转到血管周围的心肌细胞和冠状动脉微血管,HSP70表达水平明显高于其他两组（P〈0．01）。HSP70过量表达减少NF—KB的活化及VCAM-1的表达,HSP70过量表达的移植物内炎症细胞浸润数明显减少,巨噬细胞和NK细胞浸润减少,移植物血管内皮损伤轻。结论经冠状动脉灌注重组腺病毒载体介导保护性自稳蛋白一人热休克蛋白70基因转移到心脏移植物是相当有效可行的,并可减轻移植物冠脉内皮损伤,预防移植物血管病。经冠状动脉灌注重组腺病毒载体介导基因转移在移植物内局部表达有潜力的治疗制剂,此方法具有广阔的临床应用前景。     

转染Angiopoietin-1基因对急性心梗后左室功能的影响

目的探讨重组腺病毒载体介导的血管形成素1(Ang1)基因转染对兔急性心梗后左室功能影响。方法构建含有Ang1的腺病毒粘粒载体,通过转染293细胞进行同源重组制备重组腺病毒颗粒。64只雄性新西兰大白兔行高位冠状动脉结扎,4只用于急性心梗后循环中VEGF含量的检测,其余60只随机均分为实验组、单纯培养基组(DMEM)与LacZ重组腺病毒组,分别于冠状动脉结扎后心肌内直接注射Ang1重组腺病毒,DMEM与LacZ重组腺病毒。并于转染后第3、14、28d应用超声心动图观察心功能情况,第3、7、14、28d应用RT PCR方法测定重组腺病毒基因在转染心肌中的表达,第14、28d用免疫组化方法观察缺血心肌内血管生长情况。结果获得的Ang1重组腺病毒滴度为5.6×1011pfu/L。重组腺病毒直接注射转染兔缺血心肌后能有效表达目的基因,RT PCR测定提示Ang1基因转染后第3d心肌中即有表达,7、14d仍呈阳性表达,28d未测出。心肌梗死后Ang1组心功能从术后第3d至第28d得到明显改善,其幅度显著好于对照组。心肌梗死后左室心肌收缩期截面积与舒张期截面积均明显增加,尤以术后第3d为著,随时间延长均有所缩小,至28d后Ang1组缩小幅度明显高于其他两组。转染14、28d后Ang1组新生毛细血管密度及αSMA阳性的小动脉性血管密度均明显高于对照组(P<0.01)。结论腺病毒介导的Ang1基因在兔缺血心肌中能有效地促进新生血管形成,并能改善缺血心肌的功能。     

热休克蛋白27心肌特异性高表达诱导小鼠产生心肌肥厚

目的探讨不同表达量的热休克蛋白27（Hsp27）在小鼠心脏中的作用。方法构建在心肌中特异性表达Hsp27的不同表达量的转基因鼠（TG）,对照组为野生型鼠（WT）。采用蛋白印记测定Hsp27蛋白表达水平;分别测量心脏质量与体质量的比值和心脏质量与胫骨长度的比值（HW／BW和HW／TL）;采用实时定量荧光PCR（real time PCR）技术测定心肌肥厚标记物心房利钠肽（ANP）、脑利钠肽（BNP）的表达;采用超声心动图观察心功能及心脏结构。通过长期饲养,观察存活率。结果不同TG系鼠,Hsp27心肌特异性表达水平不同。高表达TG10鼠与WT鼠相比,其HW／BW和HW／TL比值显著增加（P〈0．01）,并且ANP和BNP的mRNA水平也明显增加（P〈0．01）。TG10鼠的心功能与WT鼠比较显著下降（P〈0．01）,射血分数（EF）降低了24．64％,短轴缩短率（VS）降低了29．37％。TG10鼠的生存率明显降低（P〈0．01）。结论高表达的Hsp27在TG鼠心肌肥厚发展中起着重要作用,提示Hsp27可以作为心肌病患者治疗的潜在靶点。     

重组人脑钠肽对急性心肌梗死冠脉未通患者左室重塑和心功能的影响

目的研究重组人脑钠肽（rhBNP）对急性心肌梗死（AMI）冠脉未通患者左室重塑和心功能的影响。方法将103例AMI冠脉未通患者随机分为常规治疗组23例、地高辛组40例、rhBNP治疗组40例,并于AMI后1周、12周、24周分别进行超声心动图分析,测定左室心肌重量,左室收缩功能、舒张功能,了解rhBNP对AMI后左室重塑的阻抑作用。结果①AMI后24周时rhBNP组与常规治疗组和地高辛组比较,室间隔厚度、左室后壁厚度、左室舒张末内径和左室心肌重量指数均明显降低。地高辛组与常规治疗组各项指标比较差异无统计学意义。②AMI后1周时,地高辛组和rhBNP组左室收缩末期容积较常规治疗组降低（P〈0．01）,左室射血分数较常规治疗组升高（P〈0．05）,两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗后12周、24周时,rhBNP组左室舒张末期容积和收缩末期容积较同时间点常规治疗组和地高辛组均显著降低（P〈0．05）,而左室射血分数、E／A则显著升高（P〈0．05）。结论rhBNP能明显减轻心肌梗死后心肌肥厚和左室重塑,阻抑左室重塑过程,改善左室功能。     

重组人硫氧还蛋白对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨重组人硫氧还蛋白（rhTRX）对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的影响。方法选用Balb／c小鼠23只，随机分为3组：对照组、硫氧还蛋白（TRX）保护组、病毒感染组。TRX保护组、病毒感染组给予腹腔注射100TCID5D柯萨奇B3病毒（CVB3）0．1ml，TRX保护组同时给予尾静脉注射rhTRX（2ml／kg），病毒感染组同时给予生理盐水作对照。7d后处死小鼠，光镜下观察心肌病理形态学变化，TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡，免疫组化法检测Fas、FasL蛋白的表达。结果光镜下可见病毒感染组小鼠出现局灶性心肌坏死和炎细胞浸润．对照组和TRX保护组心肌细胞未见异常：TUNEL染色发现病毒感染组小鼠心肌细胞凋亡百分比明显高于对照组和TRX保护组，差异有统计学意义（P〈0．01）；免疫组化检测发现病毒感染组Fas和FasL的表达明显高于对照组和TRX保护组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论TRX通过降低Fas、FasL蛋白的表达，抑制细胞凋亡，从而减轻心肌细胞的损伤。