大鼠严重创伤后早期肝组织糖皮质激素受体和热休克蛋白变化与继发性肝损伤

目的：探讨大鼠严重创伤后肝组织糖皮质激素受体（GR）、热休克蛋白（HSP70）的变化及其在肝脏继发性损伤中的作用。方法：采用严重胸部撞击伤伴单侧股骨骨折模型，以500kPa(1kPa=7.5mmHg）驱动压致伤，动态观察创伤后24h大鼠肝组织GR、HSP70、肝脏病理、血清肝功能生化指标等变化，并对GR进行阻断后再致伤。结果：创伤后肝组织GR的最大结合容量即开始下降，12h降至最低，仅为正常对照的12．9％（P＜0．01），24h有所回升，但仍明显低于正常对照（P＜0．05），HSP70在伤后增加，8h达到高峰，24h仍持续在较高水平。但肝脏病理、血清ALT、LDH及白蛋白的改变差异无显著性。使用GR阻断剂后，肝淤血明显，肝窦内有较多炎性细胞浸润；血清ALT、LDH在伤后4h即有明显升高（P＜0．05），白蛋白明显下降（P＜0．05），伤后12h变化更加显著（P＜0．01）；肝组织HSP70较单纯创伤组明显增多。结论：GR不足可导致创伤后继发性肝功能不全的发生；HSP70参与了肝组织细胞抗损伤机制的启动；它们在严重创伤后肝组织细胞的抗损伤机制方面起着重要作用。     

热休克蛋白70与大鼠肝移植术后早期急性排斥反应的相关性研究

目的对热休克蛋白70（heat shock protein70，HSP70）与大鼠肝移植术后早期急性排斥反应进行相关性研究．探讨其中的免疫学机制。方法建立改良“二袖套法”大鼠原位肝移植模型，将大鼠分为A组（冷保存1h同基因组），B组（冷保存18h同基因组），C组（冷保存1h异基因组），D组（冷保存18h异基因组），术后收集大鼠肝脏组织和血清．用免疫组织化学及Western blotting方法检测HSP70在移植肝脏中的表达，观察其与病理学检查的相关性结果冷保存时间的延长可以诱导移植肝组织HSP70的高表达，移植肝HSP70表达水平的升高与大鼠原位肝移植术后早期急性排斥病理学评分之间存在着明显的正相关性（P〈0．05，r=0.928）．结论HSP70的升高可能与大鼠原位肝移植术后急性排斥的早期发生以及大鼠移植术后2周存活率密切相关．     

不同营养支持途径对烧伤大鼠肠粘膜上皮细胞周期的影响

目的：探讨肠道喂养及静脉营养对烧伤早期肠粘膜上皮细胞周期的影响。方法：66只烧伤大鼠随机分为肠道喂养组（EF组）及静脉营养组（PN组），分别采用灌喂和颈外静脉输入方法给予等氮、等热卡的营养液。每组设伤后6、12、24、48、72h5个观察时相点，每时相点6只大鼠，并设正常对照（6只）。采用流式细胞技术进行空、回肠粘膜上皮细胞周期分析，以Western blot法检测肠粘膜细胞周期蛋白D1、E及细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）2、4的表达。结果：（1）肠粘膜上皮GO／G1期细胞百分比的变化：在空肠粘膜，伤后72h时EF组明显低于PN组（P＜0．05）；在回肠粘膜，6、12、48、72h时EF组与PN组比较，差异有显性意义（P＜0．05）；（2）伤后48．72h时EF组S期细胞百分比均显高于PN组（P＜0．05－0．01）；（3）肠粘膜细胞周期蛋白D1表达的变化：与对照值比较，EF组在伤后24h及PN组在伤后48h明显增高（P＜0．05），72h时EF组显高于PN组（P＜0．05）；（4）EF组肠粘膜细胞周期蛋白E的表达在伤后72h显高于对照值和PN组（P＜0．05）；（5）PN、EF组肠粘膜CDK2的表达与对照值比较以及PN、EF两组间比较，差异均无显性意义（P＞0．05），EF组CDK4的表达在72h明显增高（P＜0．05）。结论：烧伤后早期肠道喂养能加速肠粘膜上皮细胞周期的进程以及受损肠粘膜的修复与更新。细胞周期蛋白及CDK在其中起重要作用。     

p38丝裂原活化蛋白激酶途径在大鼠严重烧伤后早期心肌膜磷降解中的作用

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径在严重烧伤后早期心肌胞质型磷脂酶A2（cPLA2）表达及膜磷脂降解中的作用。方法将Wistar大鼠分为：正常组（8只）、单纯烧伤组（40只）、烧伤＋SB203580组（16只）和烧伤＋等渗盐水组（16只）。后3组大鼠制成40％TBSAⅢ度烧伤模型,后2组按实验设计分别注射p38MAPK抑制剂SB203580或等渗盐水。单纯烧伤组设5个时相点,其余烧伤组设2个时相点,每时相点8只。检测各组大鼠心肌cPLA2 mRNA表达和膜磷脂含量变化。缺氧复合烧伤血清处理体外培养的大鼠心肌细胞,观察SB203580对其cPLA2 mRNA表达的影响。结果单纯烧伤组大鼠伤后各时相点cPLA2 mRNA表达显著高于正常组的0．280±0．020,伤后3h达峰值;单纯烧伤组大鼠心肌膜磷脂含量伤后即降低,6h达最低值[（0．052±0．017）mg磷／mg蛋白]。烧伤后心肌cPLA2 mRNA表达与膜磷脂含量呈显著负相关（r=-0．53,P＜0．05）。与烧伤＋等渗盐水组比较,伤后6、12h烧伤＋SB203580组大鼠心肌磷酸化p38MAPK水平显著降低,cPLA2 mRNA表达仅为该组的72％、51％（P＜0．01）,心肌膜磷脂含量也显著高于该组。此外,SB203580也显著降低了缺氧复合烧伤血清处理的离体大鼠心肌细胞cPLA2 mRNA的表达水平。结论p38MAPK途径在大鼠严重烧伤后早期心肌膜磷脂降解中起重要作用,其机制可能与磷酸化p38MAPK上调心肌cPLA2 mRNA表达水平有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体在烧伤大鼠胸腺组织中的表达

目的 了解肿瘤坏死因子（TNF）相关的凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体在严重烧伤大鼠胸腺组织细胞异常凋亡中的作用。方法 将50只Wistar大鼠随机分为假伤组（模拟烧伤）lO只和烧伤组40只（设伤后4、12、24、48h 4个时相点）。应用膜联蛋白A5-异硫氰酸荧光素／碘化丙啶双染法，观察大鼠胸腺组织中细胞凋亡的情况；反转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测TRAIL的死亡受体5（DR5）、DR4、诱骗受体1（DcR-1）、DcR2在大鼠胸腺组织中的表达。结果 与假伤组大鼠细胞凋亡率[（6．7±0．8）％]比较，烧伤组于伤后4h[（17．1±0．4）％]起增高，12h时[（25．2±1．1）％]达高峰，48h时仍明显高于假伤组（P〈0．05）。烧伤组大鼠胸腺组织中DR5的表达显著高于假伤组，DcR2的表达则显著低于假伤组；其余受体的表达组间相似。结论 严重烧伤后早期大鼠胸腺组织的细胞凋亡明显增加，且胸腺组织中DR5和DcR2的表达异常，提示TRAIL凋亡途径可能参与了病理性细胞凋亡过程。     

亚砷酸钠诱导HSP 72在大鼠肝脏热缺血-再灌注损伤中的保护作用

目的：观察亚砷酸钠（SA）诱导大鼠肝脏产生热休克蛋白72（HSP 72）的过程及其抗肝胆热缺血－再灌注损伤的作用。材料与方法：将24只SD大鼠随机分成SA组（预先给予SA6mg/kg)和对照组9预先给予生理盐水）。24h后，两组均阻断肝脏中、左叶血供60min,再灌注3、6h；分别用Western blot检测肝脏中的HSP 72表达；外周血测定ALT、AST、LDH；组织学作HE染色、免疫组化测定HSP 72。结果：注射SA 6mg/kg后12h肝脏开始产生HSP 72，24h达到高峰，并持续至60h。肝脏热缺血60min再灌注3、6h后，SA组HSP 72显著表达，血清ALT、AST、LDH显著下降（P＜0．05），组织学检查显示肝脏损伤明显减轻。结论：SA可诱导大鼠肝脏产生HSP72；SA预先诱导肝脏产生对HSP 72可使肝脏抵御热缺血－再灌注损伤。     

大鼠高位脊髓损伤并创伤失血休克后急性期血流动力学变化

目的：研究大鼠高位脊髓损伤并创伤失血休克后急性期血流动力学及血清去甲肾上腺素（nore-pinephrine，NE）、肾上腺素（epinephrine，E）、神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）的变化规律。方法：将50只SD大鼠随机平均分为假手术组（A组）、失血组（B组）、脊髓损伤组（C组）、脊髓损伤并失血组（D组）和多发伤组（脊髓损伤、失血并单侧胫骨骨折，E组）。失血量为大鼠全身血量的20％，动脉瘤夹法制成C7～T1节段完全性脊髓损伤。监测伤后6h内不同时间点血流动力学变化。另取40只SD大鼠复制上述B、C、D、E组模型（每组均为10只），于损伤前及伤后不同时间点测定血清NE、E浓度（酶联免疫吸附法）和血浆NPY浓度（放射免疫测定法）。结果：E组大鼠平均动脉压在伤后1～6h，心率在伤后即刻、0．5、4、5、6h，左室收缩压在伤后3～6h，左心室内压最大变化速率在伤后0．5～6h显著低于其他各组（P〈0．05）。E组大鼠血清E浓度在伤后0．5、1、2、3、5h，NE浓度在伤后2、3、6h轻度高于伤前及C组（P〈0．05）；NPY浓度在伤后0．5～2h和5～6h呈小幅双峰增长（和伤前及C组比，P〈0．05）。E组伤后各时间点血NE、E、NPY浓度与D组比较差异无显著性（P〉0．05），均远低于B组（P〈0．05）。结论：大鼠高位脊髓损伤并创伤失血休克后急性期血流动力学出现严重紊乱，血NE、E、NPY浓度相对缺乏。     

含钙镁生物敷料对氢氟酸烧伤的疗效

目的观察大鼠及人氢氟酸烧伤后局部应用“含钙镁生物敷料”（吸附钙、镁离子液后与戊二醛交联的绵羊真皮）的疗效，为临床治疗氢氟酸烧伤寻找更好的方法。方法将Wistar大鼠分成对照组（24只）、不治疗组（32只）、湿敷A组（32只）、生物敷料A组（32只）。后3组大鼠制成3cm×3cm的氢氟酸Ⅲ度烧伤模型，设伤后4、8、24、72h为观察时相点（每时相点8只）。生物敷料A组伤后应用“含钙镁生物敷料”覆盖创面并定期更换，湿敷A组、不治疗组、对照组则分别代以“湿敷液”或等渗盐水纱布湿敷。计算各组大鼠死亡率、进行组织病理学观察、测定血钙浓度。将46例氢氟酸烧伤患者分为湿敷B组与生物敷料B组，两组创面参照动物实验进行对比用药并观察疗效。结果对照组、不治疗组、湿敷A组、生物敷料A组大鼠的死亡率分别为0、31．2％、15．6％、6．2％。不治疗组大鼠伤后创面进行性加深，生物敷料A组与湿敷A组相对而言局部损伤略轻。对照组大鼠各时相点血钙浓度均高于其余3组，生物敷料A组各时相点均高于不治疗组与湿敷A组。伤后8、24h，生物敷料A组血钙浓度分别为（2．215±0．008）、（2．216±0．008）mmoL／L，不治疗组为（1．813±0．017）、（1．912±0．013）mmoL／L，湿敷A组为（2．015±0．006）、（2．018±0．010）mmoL／L，生物敷料A组与后两组比较，差异有统计学意义（P＜0．01）。生物敷料B组患者创面用药的镇痛效果及后期愈合情况明显优于湿敷B组。结论“含钙镁生物敷料”可用于氢氟酸烧伤后的急救和局部创面的后续治疗。     

高温预处理对PC12细胞高温损伤的影响

目的探讨高温预处理（HPC）对大鼠嗜铬细胞瘤株（PC12）细胞高温损伤的影响及其机制。方法体外培养PC12细胞,随机分为4组（n=6）,正常对照组（C组）37℃培养箱中常规培养23 h；高温预处理组（HPC组）将细胞置于42℃培养箱中1h后,37℃常规培养22h；严重高温损伤组（LH组）细胞常规培养19h,将细胞置于46℃培养箱中2h后,恢复常规培养2h；高温预处理＋严重高温损伤组（HPC＋LH组）细胞置于42℃培养箱1h,恢复常规培养18h,再置于46℃培养箱2h后,恢复常规培养2h。各组处理后观察细胞形态学,测定细胞活力、上清液乳酸脱氢酶（LDH）活性,检测细胞内HSP70的表达。结果与C组比较,LH组、HPC＋LH组细胞活力降低,LDH活性升高,LH组细胞内HSP70表达下调,HPC组细胞内HSP70表达上调（P＜0．01）；与LH组比较,HPC＋LH组细胞活力升高,LDH活性降低,细胞内HSP70表达上调（P＜0．01）。结论高温预处理可通过诱导HSP70表达上调,减轻高温对PC12细胞的损伤。     

氯胺酮对严重烧伤大鼠心肌HSP 70表达的影响

目的 评价氯胺酮对严重烧伤大鼠心肌HSP 70表达的影响,探讨其心肌保护的机制.方法 雄性Wistar大鼠72只,随机分为正常对照组(C组,n=8)、烧伤组(BI组,n=32)和氯胺酮组(K组,n=32).K组或BI组于烧伤模型制备成功后15 min分别肌肉注射氯胺酮20 mg/kg或等容量生理盐水,于给药后3、6、12和24 h分别随机处死8只大鼠,取心肌组织,采用Western blot方法检测心肌HSP 70的表达,电镜下观察给药后3 h时心肌细胞的病理学结果.结果 与C组相比,K组和BI组给药后3、6、12及24 h时HSP 70表达上调(P<0.05);与B组相比,K组给药后3、6 h时HSP 70表达上调(P<0.05).K组较BI组给药后3 h时心肌病理损伤减轻.结论 氯胺酮通过上调心肌HSP 70表达,减轻严重烧伤早期大鼠心肌损伤.     

Protective effect of heat preconditioning of rat liver graft resulting in improved transplant survival

BACKGROUND: The protective effect of heat preconditioning of the liver against ischemia-reperfusion injury has been reported mostly in models of transient ischemia in relation to heat shock protein 70 (HSP70). We estimated the effect of heat preconditioning of liver grafts on the transplant survival rate and on apoptosis of sinusoidal endothelial cells (SEC) as well as hepatocytes in a rat model of liver transplantation. METHODS: Donor rats of the heat shock (HS) group were subjected to heat preconditioning 48 hr before graft harvest, and HSP70 levels were estimated by. Western blot analysis and immunohistochemistry. The liver isografts from the HS group and control (C) group were preserved in Euro-Collins solution for 6 or 8 hr and transplanted orthotopically. Serum hyaluronic acid and alanine aminotransferase were measured, and apoptosis of the SEC and hepatocytes was analyzed by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end-labeling staining and electron microscopy. RESULTS: HSP70 expression was detected not only in hepatocytes but also in SEC. In the 8-hr preservation model, the 1-week survival rate was 60% in the HS group and 0% in the C group. Serum hyaluronic acid and alanine aminotransferase levels in the HS group were significantly lower than those in the C group at 3 hr after reperfusion, and the number of terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end-labeling-positive SEC in the C group (35.2%) was markedly increased compared with the HS group (10.1%). Electron microscopic examination confirmed the features of apoptosis of SEC. CONCLUSIONS: Heat preconditioning of the graft improved the survival rate of the liver transplants. Induction of HSP70 in SEC as well as in hepatocytes might attenuate preservation-reperfusion injury by inhibiting apoptosis of SEC.     

牛磺酸对烫伤大鼠心肌线粒体成分和酶活性的保护作用

目的 了解牛磺酸对大鼠烫伤后心肌线粒体成分和酶活性变化的影响.方法 将120只大鼠背部脱毛后造成30%TBSA的Ⅲ度烫伤.分为烫伤组(60只),伤后腹腔注射等渗盐水(4mL·kg-1·1%TBSA-1);牛磺酸治疗组(60只),伤后腹腔注射20 g/L牛磺酸液(200 mg/kg).伤后1、3、6、12、24、48 h处死大鼠.取心肌组织检测心肌线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素c氧化酶(CCO)、超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-腺苷三磷酸酶(ATPase)活性和细胞色素c、细胞色素aa3、丙二醛(MDA)、细胞质及线粒体内ca2+含量.另取10只大鼠作为对照组,模拟烫伤不予补液,1 h后处死大鼠取心肌组织检测以上指标.结果 烫伤组大鼠伤后1 h CCO活性即开始下降,伤后6、12 h下降最明显,而SDH活性在伤后6 h下降最明显,且各时相点均低于对照组;牛磺酸治疗组CCO和SDH下降不明显,伤后3、6、12 h CCO活性与烫伤组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).伤后3、6、12、及24 h烫伤组心肌线粒体细胞色素c和细胞色素aa3均显著降低.而牛磺酸组虽然有所下降,但以上4个时相点的值均高于烫伤组(P＜0.05).烫伤组SOD活性在伤后3、6、12 h均显著性下降,ca2+ATPase活性在伤后3、6、12及24 h均有不同程度下降;而牛磺酸治疗组虽然有所下降,但以上4个时相点SOD、Ca2+-ATPase值均高于烫伤组(P＜0.05).伤后3～48 h烫伤组、牛磺酸治疗组MDA值均高于对照组(P＜0.05),但牛磺酸治疗组低于烫伤组(P＜0.05).伤后1 h烫伤组大鼠心肌线粒体中Ca2+即开始升高为13.7±1.5,伤后3、6、12、24 h分别为24.8±2.6、29.7±3.1、16.3±1.9及13.5±1.7.均高于对照组(10.7±1.6,P＜0.05);心肌细胞质中ca2+在伤后3、6、12、24 h也明显高于对照组(P＜0.05).伤后3、6、12及24 h牛磺酸治疗组大鼠心肌线粒体中ca2+浓度分别为16.8±2.8、18.7±1.9、10.5±1.8及13.3±1.7,均低于烫伤组.结论 牛磺酸对烫伤大鼠心肌线粒体成分和酶活性破坏具有保护作用,其机制与提高线粒体清除氧自由基的能力和减轻Ca2+超载有关.     

富氢盐水对延迟复苏烫伤大鼠血压及肺组织抗氧化能力的影响

目的 观察富氢盐水对延迟复苏烫伤大鼠血压和肺组织抗氧化能力的影响.方法 制备富氢盐水(即氢气溶解度达到饱和的生理盐水,氢浓度为0.6 mmol/L).采用随机数字表法将20只SD大鼠分为富氢盐水组和生理盐水组,每组10只.2组大鼠背部致30%TBSAⅢ度烫伤,伤后7、9、17 h,分别经腹腔给予相当于总补液量体积1/2、1/4、1/4的富氢盐水或者生理盐水,补液总量按照4 mL·kg-1·%TBSA-1(Parkland公式)计算.观察实验过程中大鼠总体情况;伤后6、24 h测收缩压;伤后24 h取大鼠肺组织,检测S0D抑制率和丙二醛含量.对实验结果进行t检验.结果 2组大鼠实验过程中无一只死亡.富氢盐水组和生理盐水组伤后6 h的收缩压分别为(87±4)、(86±5)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),2组水平接近(t=0.213,P=0.834);伤后24 h,富氢盐水组收缩压[(124±7)mm Hg]高于生理盐水组[(115±6)mm Hg,t=2.958,P=0.008].富氢盐水组肺组织SOD抑制率为(0.465±0.014)%,高于生理盐水组[(0.358±0.021)%,t=11.767,P=0.000].富氢盐水组的肺组织丙二醛含量[(922±196)pmol/mg]低于生理盐水组[(1118±212)pmol/mg,t=-2.142,P=0.046].结论 用富氢盐水对烫伤大鼠行延迟复苏,更有助于其血压恢复,并通过增强抗氧化酶的作用,减轻再灌注引起的肺组织细胞损伤.     

阿霉素预处理替代缺血预处理提供鼠肝缺血耐受力的实验研究

目的 探讨缺血预处理（IPC）延迟保护作用的发生机制以及应用阿霉素预处理（DPC）是否可以模拟IPC的延迟保护作用。方法 建立大鼠部分肝脏热缺血再灌注模型。IPC组采用肝脏缺血10min，再灌注10in，DPC组经静脉注射阿霉素（1mg/kg体重），对照组等量生理盐水注射。肝组织HSP70和HO－1蛋白和血清TNF－α、IL－10浓度分别采用Western blot法和ELISA法测定。结果 IPC后HO－1和HSP70含量分别于12h和24h达到高峰；IPC和DPC后24h诱导HSP70、HO－1的量无显著差异（P＞0.05）。对照组缺血再灌注后3h血清中TNF－α、AST、ALT、LDH及W／D（湿重／干重）的水平明显升高，而IL－10的含量降低，和假手术组相比差异显著（P＜0.01）；IPC或DPC后降低了TNF－α的释放和AST、ALT、LDH及W／D的水平，提高了IL－10的含量，和对照组相比差异显著（P＜0.01）。结论 IPC的延迟保护作用与HSP70和HO－1的诱导生成有关，DPC可以模拟IPC的延尺性保护作用，诱导HSP70和HO－1的产生。     

休克期切痂对烫伤大鼠外周血淋巴细胞凋亡及单核细胞抗原呈递功能的影响

目的观察不同时相点切痂对烫伤大鼠外周血淋巴细胞凋亡及单核细胞抗原呈递功能的影响。方法将136只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(8只)、单纯烫伤组(64只)、休克期切痂组(40只)、非休克期切痂组(24只)。对照组不作烫伤处理;其他组均造成30％TBSAⅢ度烫伤,其中后两组分别于伤后36、120 h行切痂植皮术。单纯烫伤组分别于伤后6、12、24、72、120、168、216、288 h处死;两个切痂组分别于伤后72～288 h、168～288 h(时间间隔同上)处死,留取血液标本检测淋巴细胞凋亡率、单核细胞主要组织相容性抗原(MHC)Ⅱ类分子阳性表达率、干扰素(IFN)γ及白细胞介素(IL)4浓度的变化,并行相关性分析。结果伤后6 h开始,单纯烫伤组淋巴细胞凋亡率迅速升高,24 h达峰值(18．19±1．42)％,之后迅速回落,于伤后72 h降至低谷(8．25±0．56)％,随着时间延长又逐渐升高,288 h时(17．81±1．99)％接近峰值,均明显高于对照组(P<0．05);伤后168～288 h两个切痂组淋巴细胞凋亡率明显低于单纯烫伤组(P<0．01)。单纯烫伤组伤后6 h单核细胞MHC-Ⅱ类分子阳性表达率急剧下降,伤后24 h已低于对照组[(37．2±2．4)％]的20％,之后逐渐升高,伤后288 h为(18．8±2．8)％,明显低于两个切痂组(P<0．01)。伤后6 h开始,单纯烫伤组血浆IFN-γ浓度迅速上升,24 h时达峰值(440．8±25．1)ng／L,之后逐渐回落,288 h降至低谷(51．3±37．0)ng／L;而IL-4水平则呈线性上升,于伤后288 h达峰值(78．1±2．8)ng／L;伤后72～288 h单纯烫伤组单核细胞MHC-Ⅱ类分子阳性表达率与休克期切痂组IFN-γ／IL-4比值呈明显的负相关(r= -0．96,P<0．05)。结论大鼠烫伤后切痂能明显抑制淋巴细胞凋亡,减缓IFN-γ／IL-4倒置的趋势,改善单核细胞抗原呈递功能。其中在单核细胞免疫功能恢复方面,休克期切痂较非休克期切痂效果显著。     

胰岛素在烫伤大鼠脑组织中的表达

目的观察烫伤大鼠脑组织中胰岛素的表达情况。方法将15只Wistar大鼠背部造成30％TBSAⅢ度烫伤(烫伤组),于伤后4、12、24 h以Zamboni液行左心室灌注,然后取大鼠脑组织,用免疫荧光法检测脑组织中胰岛素的表达。另取10只大鼠作为对照组,除不烫伤外,其余处理同烫伤组。结果对照组大鼠脑组织中胰岛素的表达不明显。烫伤组大鼠伤后4 h脑组织的嗅球、大脑皮质等部位可见胰岛素免疫反应阳性细胞,其细胞胞体较大,呈椭圆形或梭形;胞核大、圆而透亮,突起明显;阳性产物主要分布于细胞的细胞质,少数细胞的突起内也可见明显的胰岛素阳性产物。伤后12、24 h烫伤组大鼠脑组织中未见胰岛素免疫反应阳性细胞。结论大鼠脑组织具有自身合成胰岛素的潜能,但在正常基础状态下合成量极少,而在烫伤的应激状态下合成量增加。     

臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的热休克蛋白表达的影响

目的 探讨臭氧氧化预处理通过诱导热休克蛋白70(HSP70)的合成,保护大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用与机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,I/R前15 d经直肠吹人氧气和臭氧的混合气体5.0～5.5 ml(臭氧浓度50 mg/L,1 mg/kg体重,每日1次).全自动生化分析仪检测尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),比色法测定血清的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD).Western blot检测HSP70蛋白的含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HSPT0的表达.结果 肾缺血再灌注24 h后,血清中BUN、Cr、MDA明显增高,肾组织内HSP70表达明显增强(P＜0.05),经臭氧氧化预处理后,血清中的BUN、Cr、MDA均降低,SOD升高;HSP70表达升高更加明显(P＜0.05).结论 臭氧氧化预处理可以诱导大鼠肾缺血再灌注组织中HSP70表达,减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤.     

Reduction of ethanol-induced injury in portal hypertensive gastric mucosa of rats by induction of heat shock protein 72 by geranylgeranylacetone

Portal hypertensive (PHT) gastropathy has an increased susceptibility to damage due to noxious factors. Heat shock protein (HSP) 72 has a protective effect against gastric mucosal injury and geranylgeranylacetone (GGA) is an inducer of HSP 72. However, it remains unclear how HSP 72 influences the PHT gastric mucosa. The aim of the present study was to investigate HSP 72 induction by GGA and the protective effect to gastric mucosa in PHT rats. PHT rats were produced by staged portal vein occlusion, and GGA 200 mg/kg was orally administered. Expression of HSP 72 protein in the gastric mucosa was evaluated by enzyme-linked immunosorbent assay, and gastric mucosal damage against 70% ethanol (10 mL/kg) following GGA or vehicle treatment was also estimated. Expression of mucosal HSP 72 after vehicle administration was significantly higher in the PHT rats compared with the sham-operated rats. After GGA treatment, portal pressure did not change but HSP 72 was significantly increased in the gastric mucosa of both groups. Ethanol-induced gastric mucosal damage was significantly decreased due to GGA treatment in the PHT rats, but not in the sham-operated rats. These findings suggest that HSP 72 expression is enhanced in PHT gastric mucosa and plays an important role in gastric mucosal protection. The induction of HSP 72 by GGA may therefore effectively prevent mucosal injury in the PHT stomach.     

臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的热休克蛋白表达的影响

目的 探讨臭氧氧化预处理通过诱导热休克蛋白70(HSP70)的合成,保护大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用与机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,I/R前15 d经直肠吹入氧气和臭氧的混合气体5.0～5.5 ml(臭氧浓度50 mg/L,1 mg/kg体蕈,每日 1次).全自动生化分析仪检测尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),比色法测定血清的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD).Western blot检测HSP70蛋白的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HSP70的表达.结果 肾缺血再灌注24 h后,血清中BUN、Cr、MDA明显增高,肾组织内HSPT0表达明显增强(P<0.05),经臭氧氧化预处理后,血清中的BUN、Cr、MDA均降低,SOD升高;HSP70表达升高更加明显(P<0.05).结论 臭氧氧化预处理可以诱导大鼠肾缺血再灌注组织中HSP70表达,减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤.     

Welcoming a New Hip into the Family

ABSTRACT

Introduction: The aim of this study is to evaluate whether hemorrhage and resuscitation affect liver, intestinal, and renal expressions of heat shock protein 70 (HSP70), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and apoptosis indexes (TUNEL, caspase-3 activation) and whether the expression of these proteins can be modulated by pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC) after a nonlethal hemorrhagic shock (HS) in rats. Methods: Forty rats were randomized into four groups: sham-operated, only HS, HS/resuscitation with blood plus normal saline (NS), and HS/resuscitation with blood/NS plus PDTC, 15 mg/kg body weight, intravenously. Rats were subjected to HS by blood removal to a mean arterial pressure of 35–40 mmHg through the femoral artery. After 1 hr of shock, the animals were resuscitated according to the experimental protocol. HSP70, iNOS, cleaved caspase-3 expression, and TUNEL were analyzed in liver, small intestine, and kidney 3 hr after resuscitation. Results: HS upregulated HSP70, iNOS, cleaved caspase-3 expression, and induced apoptosis (TUNEL) (p < .05 to < .001). Resuscitation was not associated with further increase of their expressions. The administration of PDTC during resuscitation decreased liver, intestinal, and renal activation of iNOS and apoptosis indexes (p < .05 to < .001), and was associated with further increase in HSP70 expression (p < .05). Conclusions: Our results show that HS resuscitation with PDTC modulates several signaling pathways (HSP70, iNOS, TUNEL, and caspase-3) in a rat model. The results suggest that PDTC administration—by reducing apoptosis and iNOS expression—may have a potential role in minimizing organ damage after severe hemorrhage.