1型糖尿病关键抗原谷氨酸脱羧酶65蛋白表达的研究现状

谷氨酸脱羧酶（GAD）属于内分泌酶,包括GAD65和GAD67两种同工酶,但只有GAD65才是重要的胰岛自身抗原.众多研究认为GADA是诊断和预测1型糖尿病（T1DM）和成人隐匿性自身免疫糖尿病（LADA）最敏感且应用最广泛的指标[1-2].GADA检测方法多样,包括放射配体法和酶联免疫吸附实验（ELISA）法等,但诊断敏感性和特异性与GAD65蛋白纯度和抗原性密切相关.而抗原特异性T细胞更能直接反映胰岛自身免疫状态,可改善抗体诊断T1 DM的效率.研究表明在新诊断T1DM患者中使用酪氨酸磷酸酶（IA-2）、GAD65、胰岛细胞特异性葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基相关蛋白（IGRP）和前胰岛素原作为CD8＋T细胞刺激抗原,其诊断敏感性波动在25％～40％,特异性在87％ ～ 100％[3].随后T细胞检测国际标准化工作组证实GAD270-285是人白细胞抗原（HLA）Ⅱ类分子四聚体检测技术的主要刺激片段[4-5].因此,选用合适的GAD65抗原或蛋白片段可改善GADA或自身反应性T细胞的诊断敏感性和特异性.     

谷氨酸脱羧酶基因疫苗与1型糖尿病

研究发现谷氨酸脱羧酶(GAD)与1型糖尿病(T1DM)关系密切，含相关载体、免疫佐剂的GAD基因疫苗能有效减轻胰岛炎、预防或延缓T1DM的发生。其机理与GAD基因疫苗在体内产生GAD，诱导T细胞向Th2细胞分化以及T细胞的Fas表达上调引起T细胞凋亡有关。     

谷氨酸脱羧酶基因疫苗与1型糖尿病

研究发现谷氨酸脱羧酶(GAD)与1型糖尿病(T1DM)关系密切,含相关载体、免疫佐剂的GAD基因疫苗能有效减轻胰岛炎、预防或延缓T1DM的发生.其机理与GAD基因疫苗在体内产生GAD,诱导T细胞向Th2细胞分化以及T细胞的Fas表达上调引起T细胞凋亡有关.     

谷氨酸脱羧酶基因疫苗与1型糖尿病

研究发现谷氨酸脱羧酶(GAD)与1型糖尿病(T1DM)关系密切,含相关载体、免疫佐剂的GAD基因疫苗能有效减轻胰岛炎、预防或延缓T1DM的发生。其机理与GAD基因疫苗在体内产生GAD,诱导T细胞向Th2细胞分化以及T细胞的Fas表达上调引起T细胞凋亡有关。     

谷氨酸脱羧酶与Ⅰ型糖尿病

谷氨酸脱羧酶与Ⅰ型糖尿病杨文，周智广谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ）是抑制性神经递质——γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）的合成酶，广泛存在于中枢和周围神经系统及肝、脾、睾丸等组织中，是神经系统疾病僵人综合征（ｓｔｉｆｆｍａｎｓｙｎｄｒｏｍｅ）的自身抗原。在胰岛β细胞中...     

人重组谷氨酸脱羧酶65基因的克隆表达及其在1型糖尿病诊断中的初步应用

目的 构建人重组谷氨酸脱羧酶65(GAD65)基因不同区段原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,并初步验证GAD65不同抗原区段在1型糖尿病GAD自身抗体检测中的价值.方法 应用巢式逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术调取目的 基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠杆菌E.coli HB101,诱导表达获得纯化重组蛋白,用重组蛋白作为包被抗原,初步建立检测GAD自身抗体的酶联免疫吸附测定法(ELISA)方法,评价各片段在1型糖尿病诊断中的价值.结果 获得了4种可被1型糖尿病患者血清识别的重组人GAD抗原区段,其中GAD65(180-585)抗原区段具有很好的特异性,检出率为55.3%,是首选的抗原区段.结论 所选重组人GAD65(180-585)抗原区段具有良好的抗原性,可作为1型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原.     

Ⅰ型糖尿病患者谷氨酸脱羧酶反应性T淋巴细胞与自身抗体的比较

应用NAG微量酶反应比色法反映细胞增殖，检测30例Ⅰ型糖尿病（Ⅰ型DM）患者外周血单个核细胞对谷氨酸脱羧酶（GAD）的反应性，并以Ⅱ型糖尿病（Ⅱ型DM）、其它自身免疫性疾病、正常人各30例作对照。同时应用间接ELISA法检测Ⅰ型DM患者血清中GAD自身抗体作比较。结果GAD反应性T淋巴细胞Ⅰ型DM的阳性率为36．7％（11／30），其它自身免疫性疾病10％（3／30），而Ⅱ型DM和正常对照组无一例阳性，Ⅰ型DM阳性率显著高于正常对照组（P＜0．005）。新发病Ⅰ型DM（病程≤1年）阳性率高达62．5％（10／16），与GAD抗体81．3％（13／16）的阳性率相比无显著性差异（P＞0．05）；长病程（1．5～20年）Ⅰ型DM的阳性率为7．1％（1／14），与正常对照组相比无显著性差异（P＞0．05），且明显低于GAD抗体64．3％的阳性率（P＜0．05）。这些结果表明新发病Ⅰ型DM存在GAD反应性T淋巴细胞，这对阐明Ⅰ型DM的发病机理，确定早期糖尿病的分型及指导治疗都有一定意义。     

谷氨酸脱羧酶抗体阳性的1型糖尿病患者易合并甲状腺自身免疫紊乱

目的 探讨1型糖尿病（T1DM）患者中甲状腺自身免疫发生情况.方法 对104例T1DM、100例2型糖尿病（T2DM）患者和100例健康对照（NC）者进行甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）、甲状腺球蛋白抗体（TG-Ab）检测,T1DM和T2DM患者还检测谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab）.结果 （1）T1DM患者任一甲状腺自身抗体（TAA）的检出率为25.0%（26/104）,高于T2DM患者的12.0%（12/100）和NC者8%（8/100）,（P＜0.05）.（2）GAD-Ab阳性的T1DM患者TAA的检出率为38.6%（17/44）,高于GAD-Ab阴性组的18.3%（11/60）（P＜0.01）.（3）女性T1DM患者的 TPO-Ab、TG-Ab的检出率分别为30.4%（14/46）、28.3% （13/46）,均高于男性的15.5%（9/58）和10.3%（6/58）（P ＜0.05）.结论 GAD-Ab阳性和女性T1MD患者易合并甲状腺自身免疫紊乱.     

I型糖尿病患者谷氨酸脱羧酶反应性T淋巴细胞与自身抗体的比较

应用ＮＡＧ微量酶反应比色法反映细胞增殖，检测３０例Ｉ型糖尿病（Ｉ型ＤＭ）患者外周血单个核细胞对谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ）的反应性，并以Ⅱ型糖尿病（Ⅱ型ＤＭ）、其它自身免疫性疾病、正常人各３０例作对照。同时应用间接ＥＬＩＳＡ法检测Ｉ型ＤＭ患者血清中ＧＡＤ自身抗体作比较。结果ＧＡＤ反应性Ｔ淋巴细胞Ｉ型ＤＭ的阳性率为３６．７％（１１／３０），其它自身免疫性疾病１０％（３／３０），而Ⅱ型ＤＭ和正常对照组无一例     

Ⅰ型糖尿病的关键抗原－谷氨酸脱羧酶

谷氨酸脱羧酶是胰岛的正常组成成分，在遗传学异常的基础上（如ＨＬＡ－ＤＲ，ＨＬＡ－ＤＱ等），遇到感染（如病毒，分支杆菌等）和／或免疫细胞异常，机体可产生针对谷氨酸脱羧酶的自身免疫反应，破坏胰岛素分泌细胞，导致糖尿病的发生。应用谷氢酸脱羧酶自身抗原诱导免疫耐受可望用于防治Ⅰ型糖尿病。     

Ⅰ型糖尿病的关键抗原—谷氨酸脱羧酶

谷氨酸脱羧要酶是胰岛的正常组成成分，在遗传学异常的基础上，遇到感染和／或免疫细胞异常，机体可产生针对对谷氨酸脱羧酶的自身免疫反应，破坏胰岛素分泌细胞，导致糖尿病的发生。应用谷氨酸脱羧酶自身抗原诱导免疫耐受可望用于防治Ⅰ型糖尿病。     

僵人综合征1例

患者女,32岁,因“双下肢发作性无力僵硬2个月余”收入院。患者2个月前无明显诱因出现右下肢无力、发硬,症状进行性加重,2—3d后出现左下肢无力,双下肢发紧、僵硬,1周后已无法行走。曾在当地医院给予抗炎补液治疗,效果欠佳,头胸椎MRI未见异常,治疗1周后出院,病情无好转。来我院门诊以“双下肢无力原因待查”收入院。     

爆发性1型糖尿病患者谷氨酸脱羧酶抗体阳性一例报道

爆发性1型糖尿病(FT1DM)是T1DM亚型,临床少见,发展迅速,病情凶险,死亡率高,多数FT1DM患者胰岛相关抗体阴性.现报告1例FT1DM GADAb阳性患者.     

诱骗受体3和谷氨酸脱羧酶65重组腺病毒对糖尿病小鼠的作用研究

构建诱骗受体3(DcR3)和谷氨酸脱羧酶65( GAD65)重组腺病毒载体,转染树突状细胞,干预1型糖尿病小鼠,观察小鼠体内CD+8T细胞的活化抑制情况和血糖水平.结果显示转染重组腺病毒的树突状细胞能有效抑制GAD65特异性T细胞的增殖和细胞因子的分泌,γ-干扰素[(50.5±7.2)对(95.4±6.9)、(91.2±6.5)pg/ml]和白细胞介素2[(46.3±5.1)对(86.1±5.2)、(80.3±7.3) pg/ml]低于阴性和空白对照组(均P＜0.05),同时延缓1型糖尿病的发生.提示DcR3和GAD65重组腺病毒可用于1型糖尿病的基因治疗.     

谷氨酸脱羧酶抗体和胰岛细胞抗体联合检测对1型糖尿病？…

对９８４例糖尿病患者的胰岛细胞抗体、谷氨酸脱羧酶抗体和血清Ｃ肽进行了检测与分析了解ＩＣＡ和ＧＡＤＡ阳性率以及阳性患者的胰岛功能情况，以明确ＩＣＡ和ＧＡＤＡ检测对１型糖尿病早期诊断的意义。方法采用免疫组化法检测ＩＣＡ，ＥＬＩＳＡ法定量检测ＧＡＤＡ，放射免疫法检测血清空腹和餐后Ｃ肽。结果ＩＣＡ和（或）ＧＡＤＡ阳性（阳性组）１６８例（１７．０％）高于ＩＣＡ阳性率（１０．５％）和ＧＡＤＡ阳性率（１２．０％     

僵人综合征 1 例报告

患者男,16岁,因发作性左大腿肌肉抽动伴疼痛半年余,于2013年4月20日入院。2013年2月3日晚上突然出现左大腿前侧疼痛、抽搐,因左大腿僵硬不能走路,伴有大汗、气促,但可在旁人搀扶下行走,持续约10rain左右好转。外院考虑为“癫痫”,给予卡马西平100mg,3次／d,症状缓解不明显。此后反复发作,逐渐发展为整个左大腿肌肉全部僵硬,疼痛较重,至4月发作频繁,每周2—3次,     

谷氨酸脱羧酶抗体预示胰岛素依赖型糖尿病

０６３　谷氨酸脱羧酶抗体预示胰岛素依赖型糖尿病［英］／ＴｕｏｍｉｌｅｈｔｏＪ…∥Ｌａｎｃｅｔ．－１９９４，３４３（８９１０）．－１３８３～１３８５胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）时，胰腺β细胞呈渐进性破坏。利用胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）、自身胰岛素抗体（Ｉ...     

谷氨酸脱羧酶抗体和胰岛细胞抗体联合检测对1型糖尿病早期诊断的意义

目的　对９８４ 例糖尿病患者的胰岛细胞抗体（ＩＣＡ） 、谷氨酸脱羧酶抗体（ＧＡＤＡ） 和血清Ｃ肽进行了检测与分析,了解ＩＣＡ 和ＧＡＤＡ 阳性率以及阳性患者的胰岛功能情况,以明确ＩＣＡ 和ＧＡＤＡ检测对１ 型糖尿病早期诊断的意义。方法　采用免疫组化法检测ＩＣＡ,ＥＬＩＳＡ 法定量检测ＧＡＤＡ, 放射免疫法检测血清空腹和餐后Ｃ 肽。结果　ＩＣＡ 和（或）ＧＡＤＡ 阳性（ 阳性组）１６８ 例（１７ ．０％ ） 高于ＩＣＡ 阳性率（１０．５ ％） 和ＧＡＤＡ 阳性率（１２．０ ％ ,Ｐ＜ ０ ．０５） 。成年患者ＧＡＤＡ 阳性率（１０ ．５％ ） 高于ＩＣＡ（７．７ ％ , Ｐ＜ ０ ．０５） , 青少年患者ＩＣＡ 阳性率（４６．５ ％） 高于ＧＡＤＡ（３１．０％ ,Ｐ＜０．０１）。抗体阳性患者的空腹和餐后Ｃ肽〔（３２５ ±３６８）ｐｍｏｌ／Ｌ和（７４５±７６７）ｐｍｏｌ／Ｌ〕明显低于抗体阴性患者〔（７０１ ±４３４）ｐｍｏｌ／Ｌ和（１ ６１４ ±９６７）ｐｍｏｌ／Ｌ,Ｐ＜０ ．００１〕。结论　自身抗体阳性患者的胰岛功能明显低于阴性患者,提示自身抗体阳性患者胰岛功能有明显损伤。在成年糖尿病患者中ＧＡＤＡ检测较ＩＣＡ 更为重要,而在青少年糖尿病患者中则ＩＣＡ阳性     

谷氨酸脱羧酶表达型质粒的构建

采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）克隆了谷氨酸脱羧酶基因的ｃＤＮＡ，双脱氧末端终止法对其全部核苷酸序列予以确定后，将此编码５８５个氨基酸、全长１７５８ｂｐ的ｃＤＮＡ重组入ｐＧＥＸ表达型载体中，通过原位杂交筛选阳性重组质粒，并通过序列分析证实重组质粒接口处读码框架无误，为谷氨酸脱羧酶重组基因的表达及表达产物在临床诊断中的应用奠定了基础。     

抗谷氨酸脱羧酶65抗体脑炎及相关自身免疫性多内分泌腺病综合征

抗谷氨酸脱羧酶65(GAD65)抗体脑炎是自身免疫性脑炎的一种亚型，常表现为僵人综合征、小脑性共济失调、颞叶癫痫等神经综合征，早期识别诊断并给予免疫治疗对于患者的预后有极大改善。目前对于抗GAD65抗体脑炎的诊断主要依赖于血清中检测出高滴度的GAD65抗体或脑脊液中GAD65抗体阳性，然而GAD65抗体与广泛的自身免疫性疾病相关，在非神经系统中可引起自身免疫疾病包括1型糖尿病和甲状腺炎等。因此，诊治抗GAD65抗体脑炎的过程中需要筛查潜在的内分泌腺体的变化，在多内分泌免疫环境下出现神经症状也需要考虑合并抗GAD65抗体脑炎的可能。