抑制生存传导路径可增加肿瘤细胞化疗敏感性

目的：研究抑制磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)／Akt生存传导路径是否可增加肿瘤细胞对一些化疗药物的敏感性。方法：采用Akt亚型特异抑制剂结合多柔比星(阿霉素ADM)或喜树碱治疗各种肿瘤细胞系；检测细胞凋亡蛋白激酶3活性，来定量评估细胞凋亡程度；免疫沉淀 Werstern印迹法测定药物对磷酸化各类Akt亚型的抑制作用。结果：①各类Akt亚型抑制剂可阻断Akt1或Akt2蛋白序列上的第308位点苏氨酸(pAkt^308)和第473位点丝氨酸(pAkt^473)磷酸化，并表现出相应的Akt亚型抑制特异性；②单独抑制某一类Akt亚型并不足以增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，只有同时抑制Akt1和Akt2才能增敏药物对肿瘤细胞的杀灭效应；③药物的增敏效应可能和肿瘤细胞内源性PTEN脱磷酸酶的表达有一定的关联。结论：临床应用化疗结合PI3K／Akt生存传导路径抑制剂应选择具有阻断2种Akt亚型功能的药物以达到最大的肿瘤杀灭效应。     

PI3K/Akt/mdm2信号通路活化对胃癌细胞阿霉素敏感性的影响

目的 研究PI3K/Akt/mdm2信号通路活化对胃癌细胞阿霉素(DOX)敏感性的影响.方法 分别用DOX和PI3K特异性抑制剂wortmannin处理胃癌细胞株SGC7901,采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡,免疫沉淀法检测PI3K活性,Western blot法检测PI3K-p85、phospho-Akt(S473)、phospho-mdm2(S166)、Akt和p53的表达.结果 DOX能诱导胃癌细胞SGC7901凋亡,且凋亡率与作用时间密切相关,联合应用wortmannin后,可促进胃癌细胞凋亡.DOX作用SGC7901细胞3、6、12和24 h后, PI3K活性逐渐增强,分别为(8.4±1.7)%、(12.7±2.1)%、(17.4±3.2)%和(16.8±2.4)%;同时,还促进Akt、mdm2磷酸化和p53表达.wortmannin可以抑制mdm2磷酸化,进一步增强p53的表达.结论 DOX可以诱导PI3K/Akt通路异常激活,并通过促进mdm2磷酸化降低胃癌细胞化疗敏感性.     

Akt及磷酸化Akt308和473在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Akt及磷酸化的Akt在人结直肠癌的发生和演进中的作用.方法:应用组织芯片结合免疫组化染色方法检测323例结直肠癌和107例对应的非癌粘膜组织中Akt、苏氨酸308位点磷酸化的Akt(pAkt308)和丝氨酸473位点磷酸化Akt(pAkt473)的表达和结直肠癌临床病理参数的关系,并分析三者以及VEGF和Ki67表达的相关性.结果:结直肠癌中Akt、 pAkt308 和 pAkt473 的阳性率分别为 63.2%、 64.7% 、 72.4%,在非癌粘膜组织中分别为 37.4%、13.1%、16.8%.结直肠癌中三者的表达显著高于癌旁正常粘膜的表达(P＜0.001).肿瘤中Akt 和 pAkt473表达与肿瘤高分化具有统计学相关性(P=0.027,P=0.039),但与患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴管或静脉转移、淋巴结转移及Duke's分期无关(P＞0.05).pAkt308表达与淋巴结转移相关(P=0.017),但与其他临床病理参数无关(P＞0.05).而且,Akt表达与Akt308,pAkt473,VEGF 和 Ki67表达均有统计学相关性(P＜0.01).结论:在结直肠癌发生过程中,Akt、pAkt308 和 pAkt473表达明显上调.pAkt308是预示肿瘤演进和预后的良好指标,pAkt308 和 pAkt473可能是有效的结直肠癌的分子治疗新靶点.     

阻断PI3K生长路径可改变前列腺癌细胞对细胞药物易感性

目的研究磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)阻断剂Ly294002是否可通过抑制Akt磷酸化,从而增加前列腺癌细胞(Lncap)对不同类型的细胞凋亡促进因子的敏感性。方法通过免疫沉淀+Western印迹法证实Ly294002可灭活Akt活性及其调节底物的功能。结合Ly294002和不同细胞促进因子来处理Lncap,采用细胞凋亡蛋白酶3实验来评价细胞凋亡的比例。同时,转染Akt3或myr-Akt,求证Ly294002作用的分子机制。结果1)Ly294002可抑制磷酸化Akt1和Akt2,并改变bad,胞质内p21waf1和p27kip1的表达。2)Ly294002联合AG1024、Fas抗体、Trail或喜树碱可明显增加Lncap细胞凋亡比例(P<0.05),它们之间起着协同作用。转染myr-Akt于细胞中,可明显的削弱Ly294002增敏效应。3)Akt3的转染并不改变Ly294002增加Lncap细胞对Trail的敏感性。结论阻断PI3K/Akt生长传导路径可改变Lncap对不同细胞凋亡促进因子(如Fas、Trail、AG1024或喜树碱)的敏感性。它主要是通过抑制PI3K的下游效应子Akt来起作用。本实验为临床探索新的分子靶向治疗阻抗性前列腺癌提供了理论依据。     

阻断PI3K生长路径可改变前列腺癌细胞对细胞药物易感性

目的：研究磷酸酰肌醇3激酶（PI3K）阻断剂Ly294002是否可通过抑制Akt磷酸化,从而增加前列腺癌细胞（Lncap）对不同类型的细胞凋亡促进因子的敏感性.方法：通过免疫沉淀＋Western印迹法证实Ly294002可灭活Akt活性及其调节底物的功能.结合Ly294002和不同细胞促进因子来处理Lncap,采用细胞凋亡蛋白酶3实验来评价细胞凋亡的比例.同时,转染Akt3或myr-Akt,求证Ly294002作用的分子机制.结果：1）Ly294002可抑制磷酸化Akt1和Akt2,并改变bad,胞质内p21^waf1和p27^kip1的表达.2）Ly294002联合AG1024、Fas抗体、Trail或喜树碱可明显增加Lncap细胞凋亡比例（P〈0.05）,它们之间起着协同作用.转染myr-Akt于细胞中,可明显的削弱Ly294002增敏效应.3）Akt3的转染并不改变Ly294002增加Lncap细胞对Trail的敏感性.结论：阻断 PI3K/Akt生长传导路径可改变Lncap对不同细胞凋亡促进因子（如Fas、Trail、AG1024或喜树碱）的敏感性.它主要是通过抑制PI3K的下游效应子Akt来起作用.本实验为临床探索新的分子靶向治疗阻抗性前列腺癌提供了理论依据.     

Akt及磷酸化Akt308和473在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨Akt及磷酸化的Akt在人结直肠癌的发生和演进中的作用。方法：应用组织芯片结合免疫组化染色方法检测323例结直肠癌和107例对应的非癌粘膜组织中Akt、苏氨酸308位点磷酸化的Akt（pAkt308）和丝氨酸473位点磷酸化Akt（pAkt473）的表达和结直肠癌临床病理参数的关系,并分析三者以及VEGF和Ki67表达的相关性。结果：结直肠癌中Akt、pAkt308和pAkt473的阳性率分别为63.2%、64.7%、72.4%,在非癌粘膜组织中分别为37.4%、13.1%、16.8%。结直肠癌中三者的表达显著高于癌旁正常粘膜的表达（P〈0．001）。肿瘤中Akt和pAkt473表达与肿瘤高分化具有统计学相关性（P=0．027,P=0．039）,但与患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴管或静脉转移、淋巴结转移及Dukeg分期无关（P〉0．05）。pAkt308表达与淋巴结转移相关（P=0．017）,但与其他临床病理参数无关（P〉0．05）。而且,Akt表达与Akt308,pAkt473,VEGF和Ki67表达均有统计学相关性（P〈0．01）。结论：在结直肠癌发生过程中,Akt、pakt308和pAkt473表达明显上调。pAkt308是预示肿瘤演进和预后的良好指标,pAkt308和pAkt473可能是有效的结直肠癌的分子治疗新靶点。     

A549细胞条件培养液激活PI3K-Akt1信号通路促人脐静脉内皮细胞存活

目的:研究肺癌A549细胞条件培养液(conditioned medium, CM)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生存活性和凋亡的影响,以及PI3K-Akt信号通路在其中的作用.方法:用制备获得的人肺癌A549细胞CM 培养HUVECs;XTT 法检测HUVECs活性; Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变;FCM法检测细胞的凋亡率; Western印迹法检测Akt总蛋白和磷酸化Akt蛋白表达.分别用特异性PI3K抑制剂 wortmannin(WT)和针对Akt1基因的siRNA (siAkt1)转染HUVECs, RT-PCR法检测Akt亚型mRNA的表达,并观察上述各指标的变化.结果:在CM刺激后24 h, HUVECs活性明显增强(P=0.037),凋亡率下降(P =0.001).CM呈时间依赖性激活HUVECs Akt磷酸化,CM处理后15 min即显示磷酸化Akt水平增高,30 min达高峰,此后呈下降趋势.WT或siAkt1转染均能阻断前述效应.结论:肺癌A549细胞CM经PI3K-Akt途径促进HUVECs存活并抑制其凋亡,其中Akt1起关键作用.     

PI3K/Akt信号转导通路与Basal-like型乳腺癌的分子治疗

磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)信号转导通路与肿瘤的发生、发展密切相关.研究表明,PI3K/Akt信号通路的活化具有促进乳腺癌细胞增殖及减少细胞凋亡、分化的作用.基底细胞样(Basal-like)乳腺癌是乳腺癌的一种亚型,因其分子表型独特无明确的治疗靶点且恶性程度高、预后差.随着对PI3K/Akt信号转导通路及基底细胞样型乳腺癌发生、发展的研究不断深入,开发应用PI3K/Akt信号通路抑制剂可能为Basal-like型乳腺癌提供有效的分子治疗药物.     

PI3K抑制剂与非小细胞性肺癌

磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路是人体中的重要信号通路,通过逐级磷酸化下游蛋白发挥作用.非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中存在该信号通路的异常活化.活化的信号通路可以改变NSCLC细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学特性从而影响其对治疗药物的反应及预后.针对该通路抑制剂的研究很多,部分抑制剂已进入临床研究阶段.PI3K抑制剂包括广谱PI3K抑制剂、亚型特异性的PI3K抑制剂和PI3 K/mTOR双重抑制剂.PI3K抑制剂单药有效率较低,但与化疗药物或其他靶向药物联用取得了不错的临床效果,目前往往将P IK3 CA突变以及抑癌基因PTEN的缺失作为预测疗效的指标,但准确性欠佳,进一步筛选疗效预测指标是目前面临的重要问题.     

卵巢透明细胞癌临床治疗效果研究

背景与目的:卵巢透明细胞癌相比于其他卵巢上皮性癌,其预后较差,本文对本院卵巢透明细胞癌患者生存率作分析比较,探讨CAP[表柔比星(E-ADM)、顺铂(DDP)加环磷酰胺(CTX)]方案加用丝裂霉素(MMC)后的治疗效果。方法:对本院于1999年1月1日至2002年12月31日接受治疗的卵巢透明细胞癌共33例(A组),同时随机取37例卵巢其他上皮性癌的患者作对照(B组)。Ⅰ期患者行全子宫 双附件 大网膜切除 阑尾切除 淋巴结分期术),2例患者需要生育的卵巢癌患者行患侧附件切除 对侧卵巢活检 大网膜切除 阑尾切除术术。Ⅱ期以上的患者行肿瘤减灭术(tumor reductive surgery,TRS)尽可能使残余灶<1cm,2组患者均在术后化疗均采用CAP方案(静脉应用),但A组患者CAP方案中加用了丝裂霉素。A组患者与仅用CAP方案的透明细胞癌患者(C组)Ⅰ/Ⅱ期15例及Ⅲ/Ⅳ期9例相比较。结果:术前A组与B组Ⅰ/Ⅱ血清CA125差异有显著性,卵巢透明细胞癌血清CA125水平值较低,Ⅲ/Ⅳ期血清CA125差异无显著性。在3次及6次化疗后与化疗前Ⅰ/Ⅱ期A组及B组血清CA125差异有显著性,而Ⅲ/Ⅳ期血清CA125下降水平差异无显著性。A组卵巢透明细胞癌患者中有11例有子宫内膜异位症(33.33%),有7例患者出现深静脉血栓(21.21%),有深静脉血栓的患者与生存率无直接关系(P=0.26)。Ⅰ/Ⅱ期患者的平均生存时间分别为:A组38.3±2.4个月,B组38.3±2.7个月,Ⅰ/Ⅱ期患者A组与B组用Log Rank检验相比较4年生存率差异无显著性(P=0.471),Ⅲ/Ⅳ期患者的平均生存时间分别为:A组20±3个月,B组34±4个月,Ⅲ/Ⅳ期患者A组与B组相比较用Log Rank检验4年生存率差异有显著性(P<0.05)。C组患者Ⅰ/Ⅱ期15例,平均生存时间为:30±3个月,与A组用MMC的透明细胞癌患者Ⅰ/Ⅱ期23例比较生存率差异有显著性(P<0.05)。C组患者Ⅲ/Ⅳ期9例,均死亡。平均生存时间为18±3个月。与A组用MMC的透明细胞癌患者Ⅲ/Ⅳ期10例比较生存率差异无显著性(P=0.430)。结论:卵巢透明细胞癌术前及化疗后血清CA125水平值较低,用CAP加丝裂霉素的规则化疗治疗透明细胞癌对Ⅰ/Ⅱ期患者有一定的治疗效果,对Ⅲ/Ⅳ期患者治疗效果不佳。卵巢透明细胞癌疾病的复发率及死亡率仍然较高。     

胰腺实性-假乳头状肿瘤研究进展

胰腺实性-假乳头状肿瘤(solidpseudopapillarytumor,SPT)是一种胰腺少见的肿瘤,主要发生在年轻女性,13~15岁的年龄段发病率最高,临床症状不明显,部分患者症状为腹痛、呕吐、腹胀和消化不良等,超声和CT上一般可见到有囊性和实性部分组成的异质性的包块,缺乏其他特征性的结构。大体为囊壁厚薄不一内含血性液体的囊肿,其中可有破棉絮状的坏死组织,组织学特点是细胞形态单一,有纤细的假乳头结构,实性区域有蜕变坏死。SPT的超微结构研究显示,细胞内有直径50~2640nm的膜包围的颗粒;免疫组化Vimentin、α1-AT、α1-ACT阳性而腺癌的标记为阴性;DNA分析发现有染色体丢失和移位。较成熟的诊断方式是影像学和病理学,实验室检查对诊断帮助不大。最佳治疗措施是手术切除,但应注意随访,因为该肿瘤有恶性潜能和复发倾向。     

Possibility of predicting the results of the surgical treatment of cancer of the thoracic portion of the esophagus

Within a 18-year period in the clinic 273 patients were subjected to radical surgery for cancer of the thoracic esophagus. 206 patients were discharged from the clinic. The survival rate for 5 years and longer was noted in 58 patients. The data and results of the treatment depending on a sum of clinical signs were treated mathematically. It is noted that the patients' survival is influenced by such factors as sex, the stage of the disease, the morphological structure of tumor, the character of course, tumor size and spread, the type of surgical intervention. An advanced course, changes in blood presence of metastases do not seem to be the reason for cancellation of the operation.     

Angiosarcoma of the breast: the experience of the European Institute of Oncology and a review of the literature

Angiosarcoma of the breast (AB) is a rare entity: its overall incidence is estimated at between 0.002% and 0.005% per year. Some potential risk factors have been described, mainly previous irradiation of the breast. We report the experience of the European Institute of Oncology with this unusual disease from January 1996 to January 2006: sixteen patients with angiosarcoma, 9 (56%) of whom had primary AB and 7 (44%), secondary AB, are discussed.     

Cardiac tolerance of the combination paclitaxel-anthracyclines in the context of the management of cancer of the breast

Within the past decades there has been major interest in associating the paclitaxel into the management of breast cancer patients with a strong improvement of clinical results. Moreover, doxorubicin is historically one of the major chemotherapeutic agents in breast cancer treatment. So, investigations of the combination of the paclitaxel with doxorubicin have logically taken place in the strategy of breast cancer management. Also, this association became a standard of care neoadjuvantly in locally advanced breast cancer. The aim of this review of literature consists to make a special focus on cardiac toxicity occurring after doxorubicin and paclitaxel association and to give adequate directions for the next future in this promising combination.