转录因子Sp1与肿瘤关系研究的新进展

Sp1参与了细胞的生长和分化等重要的生命过程,是目前研究极为广泛和系统的转录因子之一.在肿瘤的生长和转移过程中,Sp1可以通过调控癌基因、抑癌基因、细胞周期调控分子和生长相关信号转导通路、血管生成相关因子和细胞的凋亡过程,对各型肿瘤细胞产生重要影响.Sp1的表达水平和活性均受到严格的调控,具体机制包括对Sp1蛋白本身的修饰以及其它分子对Sp1的调控作用等.以Sp1作为靶点的新的肿瘤治疗方法,将会对临床肿瘤化疗策略产生深远的影响.     

转录因子Sp1和Sp3对JurkatT细胞端粒酶活性的调节作用

目的：探讨转录因子Sp1、Sp3对Jurkat T细胞端粒酶活性和粒酶逆转录酶（hTERT）的调节作用。方法：用脂质体将Sp1、Sp3表达载体转入JurkatT细胞，用Western blotting方法检测蛋白表达水平，用端粒酶PCR－ELISA法检测细胞端粒酶活性并用银染显示端粒酶活性梯度；用RT－PCR方法检测hTERT mRNA水平。结果：Sp1、Sp3载体转化36h的细胞Sp1、Sp3蛋白水平分别升高59．6％（P＜0．01）和36．8％（P＜0．05）；随着Sp1表达水平的增加，端粒酶活性和hTERT mRNA水平明显增加，增加率分别为38．5％（P＜0．05）和25．4％（P＜0．05）。而Sp3表达载体对端粒酶活性和hTERT mRNA水平无明显影响。结论：转录因子Sp1通过调节hTERT mRNA转录水平而调节Jurkat T细胞端粒酶活性，Sp3无此作用。     

转录因子Sp1基因克隆及表达载体的构建

目的 通过转录因子Sp1基因克隆以及真核表达载体的构建,为探讨转录因子Sp1在牙釉质发育的分子调控奠定基础.方法 根据引物设计原则设计Sp1基因的PCR引物,以从小鼠成釉细胞中提取的总RNA逆转录所得cDNA为模板,进行PCR扩增,用PCR法扩增得出含有EcoRⅠ和XbaⅠ的Sp1目的 基因连接到pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体上.结果 经过PCR引物扩增得到2343bp基因片段,将获得的重组质粒pcDNA3.1/myc-HisA-Sp1双酶切分析鉴定,测序结果与GenBank登录基因完全一致.结论 成功实现了Sp1基因克隆及表达载体的构建,为以后研究转录因子Sp1在牙釉质发育的分子调控方面奠定基础.     

转录因子Ets-1在胃癌组织中的表达及意义

目的研究转录因子Ets-1在人胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌浸润转移的关系.方法运用免疫组化S-P法检测86例胃癌及癌旁组织中Ets-1的表达.结果 Ets-1在胃癌组织中的阳性表达率为74.4%,显著高于癌旁组织(40.7%,<0.05);Ets-1阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与印戒细胞癌/黏液腺癌之间差异有显著性(P<0.01);Ets-1的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关,与性别、年龄、肿瘤大小、远处转移均无关.结论 Ets-1在胃癌组织中具有高表达率,其阳性表达与肿瘤的浸润、转移密切相关.     

甲状腺转录因子1在原发性肺腺癌中的表达

目的：研究甲状腺转录因子1在原发性肺腺癌中的表达状况以及与临床病理资料的联系。方法：通过免疫组织化学染色的方法对54例外科手术切除的原发性肺腺癌标本进行染色,并结合临床病理数据进行分析。结果：在54例原发性肺腺癌中TTF-1的阳性率为81%,其表达与肿瘤的大体类型相关,在阳性肿瘤中周围型与中心型肺腺癌的比率为36/41和8/13 (P < 0.05);肿瘤组织分化程度是另一个与TTF-1表达相关的因素,结果显示分化程度越高的肿瘤TTF-1阳性率也越高TTF-1 (P < 0.05);但是TTF-1的表达与患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结分期、肿瘤病理分期和患者预后无关。 结论：TTF-1在原发性肺腺癌中存在高表达,而且其表达与肿瘤分化程度和大体类型相关,TTF-1 是很有价值的诊断原发性肺腺癌的指标。     

GLI1基因在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨胰腺癌组织中Hedgehog信号通路成员GLI1 mRNA的表达情况及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测25例胰腺癌组织及其相应近癌旁组织、癌旁正常组织GLI1 mRNA的表达,并分析胰腺癌组织中GLI1 mRNA表达与肿瘤大小、分化程度及转移的关系。结果GLI1 mRNA在胰腺癌组织、近癌旁组织及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为68．0％（17／25）、24．0％（6／25）、0;胰腺癌组织GLI1 mRNA阳性表达率显著高于近癌旁组织及癌旁正常组织（均P〈0．01）;GLI1 mRNA阳性表达率与肿瘤分化程度相关（P=O．014）,与肿瘤大小、有无淋巴结及远处转移无关（P〉0．05）。结论GLI1 mRNA在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,且其表达率与肿瘤分化程度相关。检测GLI1表达有助于胰腺癌的诊断,可能作为判断胰腺癌恶性程度及预后的指标。     

锌指转录因子Gli1在胰腺癌组织中的表达及其意义

目的:探讨Sonic hedgehog信号通路中锌指转录因子Gli1在胰腺癌组织中的表达及其意义。方法:收集56例手术切除的新鲜胰腺癌及癌旁胰腺组织,应用免疫组化S-P法及RT-PCR方法检测癌组织和癌旁胰腺组织Gli1蛋白及Gli1 mRNA的表达情况。结果:Gli1蛋白和Gli1 mRNA在癌旁胰腺组织中不表达或弱表达,在胰腺癌组织中的表达分别为85.7%和73.2%,两者在胰腺癌组织和癌旁胰腺组织中表达率差异有显著性。Gli1蛋白和Gli1 mRNA阳性表达率与胰腺癌的分化程度有关,与肿瘤大小及有无淋巴结转移无关。结论:Gli1的异常表达与胰腺癌的发生发展密切相关,针对的干预治疗有可能成为治疗胰腺癌的一种新的策略。     

甲状腺转录因子-1在滤泡源性甲状腺肿瘤中的表达及其与RET等3种基因表达的相关性研究

目的 探讨甲状腺转录因子（TTF－1）在甲状腺肿瘤及滤泡上皮细胞不同部位的表达及与RET、Galectin-3(Gal-3）和粘蛋白－1（MUC1）基因产物的相关性。方法 应用免疫组织化学（SP）法,对133例甲状腺手术切除标本进行了TTF－1、RET、Gal-3和MUC1的联合检测。结果 （1）TTF－1：在病变（瘤）细胞核、质及周围正常组织的细胞核均有表达,4种不同病理类型的周围正常滤泡,良、恶性病变的胞核阳性表达判别无显著意义（P＞0.05）。而胞质型TTF－1在良性病变的表达率为27.4％,恶性肿瘤的表达率为66.1％,良性病变与两种甲状腺癌组织的差异有显著意义（P＜0.05）,恶性肿瘤高于良性病变。（2）RET：腺瘤组织阳性表达率为38.9%,乳头状癌、滤泡性癌阳性表达率分别为88.4%和87.5%,腺瘤与乳头状癌、滤泡性癌的差异有显著意义（P＜0.05）。（3）Gal-3、MUC1：良性病变阳性率分别为38.4%和23.3%,恶性肿瘤的阳性率分别为88.1%和50.9%,良性病变（结节性甲状腺肿和腺瘤）阳性率低于甲状腺乳头状癌和滤泡性癌（P＜0.05）;甲状腺癌中Gal-3和MUC1表达基本平行,但Gal-3的敏感性高于MUC1;部分腺瘤中可见灶性Gal-3和MUC1同时阳性。而胞质型TTF－1表达与Gal-3、MUC1阳性表达有关。结论 TTF－1胞核反应是正常的及病理状态甲状腺滤泡细胞的共有表现;RET、Gal-3和MUC1的联合检测可作为甲状腺良、恶性滤泡源性肿瘤的鉴别诊断标志,胞质型TTF－1反应可能是甲状腺滤泡源性肿瘤恶性表型的一个特征。     

转录因子Sp1和Sp3对Jurkat T细胞端粒酶活性的调节作用

目的探讨转录因子Sp1、Sp3对JurkatT细胞端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)的调节作用.方法用脂质体将Sp1、Sp3表达载体转入Jurkat T细胞,用Westem blotting方法检测蛋白表达水平;用端粒酶PCR-ELSA法检测细胞端粒酶活性并用银染显示端粒酶活性梯度;用RT-PCR方法检测hTERTmRNA水平.结果Sp1、Sp3载体转化36 h的细胞Sp1、Sp3蛋白水平分别升高59.6%(P〈0.01)和36.8%(P〈0.05);随着Sp1表达水平的增加,端粒酶活性和hTERT mRNA水平明显增加,增加率分别为38.5%(P〈0.05)和25.4%(P〈0.05).而Sp3表达载体对端粒酶活性和hTERT mRNA水平无明显影响.结论转录因子Sp1通过调节hTERT mRNA转录水平而调节Jurkat T细胞端粒酶活性,Sp3无此作用.     

Survivin在胰腺癌组织中的表达及其与细胞增殖的关系研究

目的 :探讨凋亡抑制蛋白survivin的表达与胰腺癌细胞增殖及其生物学特性的关系。方法 :用免疫组织化学方法Envision法对 5 1例胰腺导管癌survivin蛋白和ki6 7的表达进行检测。结果 :5 1例胰腺导管癌中survivin .蛋白的表达率为 80 .4 % ,ki6 7平均标记指数为 2 6 .5 2± 12 .2 2 ;二者在 11例癌旁非肿瘤胰腺组织中均未发现阳性表达。survivin的表达与组织学分级有关 (P <0 .0 1) ,而与临床分期和淋巴结转移关系不大 (P >0 .0 5 ) ;ki6 7标记指数与组织学分级和临床分期和淋巴结转移有关 (P <0 .0 1) ;survivin的阳性表达与肿瘤细胞的增殖指数密切相关 (P <0 .0 1)。结论 :survivin基因在胰腺癌中高度表达可能与肿瘤的发生发展及细胞的增殖密切相关。     

转录因子S p3在肝细胞癌中的表达意义

目的：研究转录因子Sp3（Sp3）在肝细胞癌（HCC）发生、发展及预后中的作用。方法采用Western blot法和RT‐PCR法检测该院49例HCC组织及其癌旁肝组织中Sp3和β‐Catenin的表达情况,分析二者在 HCC和癌旁肝组织中的表达差异、二者的表达与 HCC临床病理特征的关系,以及Sp3与预后的关系。结果 Western blot和RT‐PCR法的结果均显示：（1）Sp3在HCC中的表达高于癌旁肝组织,差异有统计学意义（P＜0．05）;（2）β‐Catenin在HCC中的表达高于癌旁肝组织,差异有统计学意义（P＜0．05）;（3）Sp3和β‐Catenin在HCC中的表达与肿瘤直径和分级相关;（4）Sp3和β‐Catenin在 HCC中的表达呈正相关（Western blot ：r＝0．681、P＝0．000;RT‐PCR：r＝0．641,P＝0．000）,均与肿瘤大小和分化程度有关;（5）Sp3高表达的病例预后较低表达的病例差（P＜0．05）。结论 Sp3在 HCC发生中起促进作用且与肿瘤恶性程度相关;Wnt通路可能是其参与 HCC发生、发展的途径。     

髓样细胞白血病基因-1在胰腺癌组织和胰腺癌细胞株中的表达和意义

目的 研究人胰腺癌组织中髓样细胞白血病基因-1(Mcl-1)的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系及在不同胰腺癌细胞株中表达的情况.方法 应用免疫组织化学SP法检测50例胰腺癌组织和14例正常胰腺组织中Mcl-1的表达,分析其与临床病理特征的关系.应用Western blot法检测Mcl-1在不同胰腺癌细胞株中的表达情况.结果 胰腺癌标本50例中有34例出现Mcl-1阳性表达,阳性率为68.0％;而正常胰腺组织中均未检测到Mcl-1表达.Mcl-1蛋白的表达与肿瘤分化程度、临床分期有关(P＜0.05),与患者性别、肿瘤部位及有无淋巴结转移无显著相关性(P＞0.05).PANC1和BxPC3两种细胞中均有Mcl-1表达,表达强度为PANC1＞ BxPC3,但差异无统计学意义.结论 抗凋亡蛋白Mcl-1在胰腺癌组织中的呈高表达,提示其对胰腺肿瘤的发生、发展可能起重要作用,Mcl-1的表达情况可作为胰腺癌预后不良的重要生物学指标.     

TBK1在胰腺癌中的表达及其与上皮间质转化的关系

目的研究TBK1（TANK binding kinase 1 ）在胰腺癌组织中的表达,并探讨其与胰腺癌恶性生物学行为及上皮间质转化（EMT）的关系。方法应用免疫组织化学技术SP法,检测50例胰腺癌组织中TBK1、间质源性标志物vimentin蛋白的表达,分析其与患者的临床病理资料的关系,以及二者的相关性。选择20例正常胰腺组织为对照组。结果在50例胰腺癌组织中TBK1染色阳性率为70％,与对照组（20％）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。TBK1的表达与与胰腺癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移、远处转移存在相关性,差异具有统计学意义（P〈0．05）;vimentin表达阳性率为42％,对照组阳性率为0,两者间差异具有统计学意义（P〈0．05）;vimentin的阳性表达与胰腺癌组织的淋巴转移、远处转移明显相关（P〈0．05）;在胰腺癌组织中TBK1的表达与vimentin表达间具有正相关性（r=0．427,P〈0．05）。结论TBK1是反映胰腺癌恶性程度的肿瘤标记物,与胰腺癌侵袭、转移密切相关,可能源于TBK1参与了胰腺癌的EMT现象。     

巨噬细胞移动抑制因子蛋白在胰腺癌组织表达的临床意义

目的观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在胰腺癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学技术对36例胰腺癌组织中的MIF蛋白表达进行研究。结果胰腺癌组织中的MIF表达率为69.4%(25/36),高于正常胰腺组织表达率0(0/10)。统计学分析显示,MIF蛋白表达与胰腺癌病理分级呈显著相关(P<0.01),与胰腺癌临床分期及有无局部淋巴结转移间无显著相关(P>0.05)。结论MIF蛋白表达有可能与胰腺癌的发生有关。     

KiSS-1基因及其蛋白在人胰腺癌组织中表达及其与侵袭和转移的关系

目的研究胰腺癌组织中KiSS-1表达及其与侵袭和转移的关系.方法应用RT-PCR和western blot法检测KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin在37例胰腺癌及27例转移灶和9例正常胰腺组织中的表达情况.结果在胰腺癌组织中KiSS-1基因及其蛋白表达水平显著低于正常胰腺组织(P＜0.01,P＜0.01).KiSS-1mRNA及其蛋白的表达与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关,与临床分期、有无转移和神经侵犯密切相关.在Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织中KiSS-1基因及蛋白的表达分别为(0.135±0.121)和(9.23±2.74)μg/100μg总蛋白,明显低于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0.05,P＜0.05).KiSS-1基因及其蛋白在无转移、有转移的胰腺癌原发灶和转移灶组织中表达水平呈降低趋势,转移灶中的表达水平最低.有神经侵犯的胰腺癌原发灶KiSS-1基因及蛋白表达显著低于无神经侵犯的胰腺癌原发灶(P＜0.01,P＜0.01),其表达与有无神经侵犯相关系数分别为Kendall τ-b=0.597(P=0.003)和Kendall τ-b=0.438(P=0.007).结论KiSS-1基因转录和表达降低与胰腺癌侵袭和转移密切相关,可能参与胰腺癌转移的调控.     

转录因子ETS-1在舌癌组织中表达的意义

目的:探讨ETS-1基因在舌癌发生发展过程中的作用。方法:采用免疫组织化学方法检测57例舌癌患者手术标本和10例正常对照组标本的ETS-1基因的蛋白表达情况。结果:舌癌组中的ETS-1基因蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.05)。恶性度高的舌癌组明显高于低度恶性舌癌组(P<0.05)。结论:ETS-1基因在舌癌的发生发展过程中可能起一定的作用,且与恶性程度有一定相关性。     

胃癌组织中乳腺癌扩增基因1和核转录因子-κB的表达

目的探讨乳腺癌扩增基因1(AIB1)和核转录因子-κB(NF-κB)的表达与胃癌发生发展的关系,为开展以AIB1和NF-κB为靶标的胃癌防治提供理论依据。方法采用免疫组织化学法检测88例胃癌组织和85例癌旁组织中AIB1和NF-κB表达情况,并与临床病理特征结合进行综合分析。结果 AIB1在胃癌组织中表达率(75.0%)高于癌旁组织(7.1%),差异有统计学意义(P<0.05);NF-κB在胃癌组织中表达率(72.7%)高于癌旁组织(11.8%),差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中AIB1表达和淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),NF-κB表达与淋巴结转移及肿瘤分化程度有关(P<0.05);胃癌组织中AIB1与NF-κB表达呈正相关(r=0.236,P<0.05)。结论 AIB1与NF-κB参与胃癌的形成,且与胃癌的侵袭、转移及预后有一定的关系。     

甲状腺转录因子-1在肝细胞性肝癌中的表达

目的探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)在肝细胞性肝癌(HCC)的诊断及其生物学行为判定中的价值。方法良性病变切除的肝脏标本30例,其中肝硬化及炎症性病变25例,腺瘤5例。肝脏肿瘤标本176例,其中HCC142例(高分化12例、中分化57例、低分化73例,肝内胆管细胞癌(ICC)17例,肝脏转移癌(MC)17例。应用免疫组化法分别检测TTF-1在上述不同组织中的表达;运用Fishers精确检验、Kruskal-Wallis检验及Spearman等级相关分析,比较不同组织中TTF-1表达的差异。结果在所有良性病变和癌旁组织的肝细胞胞质中,TTF-1均呈强阳性表达。肝脏肿瘤标本中,HCC组织中TTF-1表达阳性率为78.9%(112/142),而ICC和MC组织中TTF-1表达均为阴性(均P<0.0001)。TTF-1在高分化、中分化和低分化HCC中的阳性表达率分别为100%、98.2%和60.2%;Spearman等级相关分析表明,TTF-1表达与肿瘤分化程度密切相关(P=0.0001)。结论TTF-1在HCC中的表达具有较强的特异性,可作为其诊断及与其他类型肿瘤或转移性癌鉴别诊断的重要标记物。TTF-1表达的缺失可能在HCC细胞去分化过程中起重要作用。