超高效液相色谱串联质谱法检测血液中的氨曲南及甲硝唑

 目的 建立同时检测血液中氨曲南及甲硝唑的超高效液相色谱串联质谱分析方法。方法 以头孢拉定和氯霉素为内标,血液样品经乙腈沉淀蛋白后通过高效液相色谱分离,电喷雾离子源进行离子化,采用多反应监测方式(multiple reaction monitoring mode,MRM)对各化合物进行监测。结果 所建立的方法可同时检测血液中的氨曲南和甲硝唑成分,氨曲南在10～5 000 ng/mL、甲硝唑在1～1 000 ng/mL的线性范围内具有良好的线性关系,线性相关系数r均大于0.995;血液中氨曲南和甲硝唑的检出限分别为5和0.5 ng/mL (S/N=3∶1);定量限分别为10和1 ng/mL (S/N=10∶1);方法的日间及日内精密度均小于10%,准确度为 89.6%～97.5%。将此方法应用于1例医疗纠纷案件的鉴定,在涉案死者的血液中同时检出氨曲南及甲硝唑成分,血液中氨曲南及甲硝唑的质量浓度分别为438 ng/mL和15 μg/mL。结论 本研究所建立的分析方法灵敏度高、简便快速、专属性强、可靠性高,为司法鉴定实践中涉及氨曲南和甲硝唑的案件提供了技术支持和基础数据。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定新生儿血浆中氟康唑的浓度

目的建立快速测定新生儿血浆中氟康唑浓度的方法。方法以非那西丁为内标,用乙腈沉淀蛋白处理血浆。色谱柱:Eclipse Plus C18RRHD(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相:0.1%甲酸-甲醇梯度洗脱;流速:0.3 ml/min;进样量:1μl。采用电化学喷雾离子源正离子模式电离,多反应监测模式检测,定量分析离子对分别为质核比(m/z)307.1→220.0(氟康唑),m/z 180.1→110.0(非那西丁)。结果该方法氟康唑在0.1001～60.0600μg/ml范围内有良好线性关系,定量下限为0.01μg/ml,准确度为82.5%～101.2%,提取回收率为85.0%～109.0%。结论该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,适用于新生儿血浆中氟康唑浓度的测定。     

液相色谱-串联质谱法测定家兔血浆中倍他米松

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定家兔血浆中倍他米松含量.方法:血浆样品经乙醚-正己烷(4:1,V/V)液-液萃取,以乙腈-5 mmol/L醋酸铵-甲酸(80:20:0.1,V/V/V)为流动相,Zorbax Eclipse XDB-C18柱分离;采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 393m/z 373和m/z 393m/z 355 (倍他米松)和m/z 406m/z 247 (内标,A0).结果:测定血浆中倍他米松方法的线性范围为15.0～1 000 pg/ml,定量下限为15.0 pg/ml,日内、日间精密度(RSD)均小于13.0%,准确度(RE)在-1.4%～-0.6%以内.应用本法对家兔经皮给予二丙酸倍他米松乳膏后的药动学进行研究,结果显示Tmax为(11.0±5.3) h,Cmax为(167±28) pg/ml,AUC0-t为(4.24±1.68) ng·h·ml-1.结论:该法选择性强、灵敏度高,适用于二丙酸倍他米松乳膏剂的药代动力学研究.     

超高效液相色谱-质谱串联法测定牦牛肉中11种喹诺酮类药物残留

目的建立牦牛肉中11种喹诺酮类农药残留的超高效液相色谱-串联质谱监测分析方法。方法样品经20ml,0.1 mol/L EDTA-Mcllvaine缓冲液(pH=4.0)匀浆后采用2.5 ml酸性乙腈(含0.2%甲酸)沉淀蛋白,上清液经HLB固相萃取柱净化,用Thermo C18小柱(100 mm×2.1 mm,2.2μm),以甲醇-乙腈溶液(40+60)-0.2%甲酸水溶液为流动相、多反应监测(MRM)正离子扫描方式进行质谱检测,内标法定量。结果添加浓度在1.5~10.0μg/kg时,11种喹诺酮药物在牦牛肉中的平均回收率为84.2%~97.7%,RSD为5.2%~12.1%,在2.5~100.0μg/L范围内线性良好,11种喹诺酮药物的相关系数r≥0.995。结论该方法简单、灵敏、特异性强,适用于牦牛肉中喹诺酮类药物多残留的检测。     

固相萃取联合高效液相色谱-串联质谱测定人血浆中肌苷浓度的方法学建立

目的·建立一种使用固相萃取联合高效液相色谱-串联质谱(solid-phase extraction-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,SPE-HPLC-MS/MS)测定人血浆中肌苷浓度的方法.方法·采用电喷雾离子化正离子模式和...     

高效液相色谱-串联质谱法测定啤酒中4种霉菌毒素

目的探讨液相色谱-串联质谱法测定啤酒中4种霉菌毒素的可行性。方法样品采用加入乙腈提取,过Mycosep~(TM)226多功能净化柱净化后,采用HPLC/MS/MS电喷雾电离负离子(ESI~-),以多离子反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。结果 4种霉菌毒素的线性范围为5.0μg/L~206.0μg/L,线性相关系数在0.9952~0.9998之间,检出限在0.1~0.2μg/kg之间;低中高3个水平的平均加标回收率在80.6%~91.4%之间;相对标准偏差(RSD)均6.3%。结论结果提示该方法具有操作简单、干扰少、快速、准确可靠等特点,为检测此类毒素提供了一种新的潜在的方法。研究具有潜在的应用价值。     

固相萃取-超高效液相色谱-质谱/质谱法测定蔬菜、水果中多菌灵

目的:建立一种新的蔬菜、水果中多菌灵的超高效液相色谱-质谱/质谱测定方法.方法:多菌灵通过Oasis HLB固相萃取柱分离浓缩后,采用超高效液相色谱-质谱/质谱仪的正离子模式电离和多反应离子检测模式进行测定,同时对诸如流动相的种类、色谱柱类型、锥孔电压和碰撞能量等参数进行了研究.结果:多菌灵在0.005～1.000 mg/L范围内对响应值具有良好线性关系;样品的加标回收率为87.3%～105.6%,相对标准偏差小于15%(n=6);方法检出限为1.0μg/L.结论:该方法测定特异性好、灵敏度高,定性定量准确,可用于实际样品测定.     

固相萃取-高效液相色谱串联质谱测定人体尿液中芳香化合物代谢物的方法研究

  目的  建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱（high performance liquid chromatographic tandem mass spectrometric, HPLC-MS/MS）同时测定尿液中8种芳香化合物代谢物（苯巯基尿酸、甲基马尿酸、N-乙酰基-S-苯基-L-半胱氨酸、苯乙醛酸、苯乙醇酸、对氨基酚、对硝基酚和1-羟基芘）的方法。  方法  取1 mL尿液,加入20 μL β-葡萄糖醛酸酶和1 mL乙酸铵缓冲溶液,在37 ℃孵箱中酶解20 h。酶解后混匀,取适量酶解液注入PrimeHLB 固相萃取柱净化,4 mL乙腈洗脱,洗脱液氮吹至干,用0.20 mL甲醇复溶后进样HPLC-MS/MS系统分析。高效液相色谱分离采用反相C₁₈色谱柱（2.1 mm×150 mm,3.5 μm）,流动相A为含体积分数0.1%甲酸的水,流动相B为甲醇,采用梯度洗脱,流速为0.2 mL/min。质谱采用正、负离子交替扫描方式,多反应监测（multiple reaction monitoring, MRM）模式检测,内标标准曲线法定量。  结果  8种代谢物在 1~100 ng/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995,测定的精密度（relative standard deviation, RSD）在0.05%～9.95%之间,8种代谢物的检出限在0.041~0.12 ng/mL范围内。将所建立的方法用于尿样分析,加标回收率为80.1%～114.0%。  结论  所建立的方法灵敏、快速、准确,适用于普通人群和职业人群的芳香化合物生物监测评估。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中黄体酮的浓度

目的建立测定大鼠血浆中黄体酮的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法。方法血浆样品采用液-液萃取法,经正己烷-二氯甲烷-异丙醇(100∶50∶5,V/V/V)提取后,以甲醇-水(75∶25,V/V)为流动相,以Hypersil ODS柱(50 mm×2.1 mm,5μm)为分析柱,采用ESI源以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应为m/z 315.4→m/z(97.0+109.2)(黄体酮)和m/z 385.4→m/z 267.4(醋酸甲地孕酮,内标)。结果黄体酮血浆浓度测定方法的线性范围为0.5~200 ng/ml,日内、内间精密度(RSD)均<6.7%,准确度(RE)在±6.2%之间。结论该方法分析时间短、操作简便、灵敏度高、专属性强,适用于黄体酮的药动学研究。     

高效液相色谱-质谱联用分析法测定血清全氟辛烷磺酸

目的全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)是全氟表面活性剂,被广泛用于纺织、皮革、涂料、农药等生产中,具有较高的生物蓄积性和多种毒性,是目前最难降解的持久性环境有机污染物之一,由其造成的污染已经逐渐成为全球性的环境问题。建立高效液相色谱-质谱联用分析方法对于检测环境和生物体内的PFOS具有实际意义。方法样品经固相萃取、液相色谱分离后进行电喷雾质谱分析,在多反应监控(multiple reaction monitoring,MRM)模式下使用内标法测定PFOS。结果PFOS在质量浓度为0μg/L～120μg/L时有良好的线性关系,线性相关系数r=0.991039。由标准曲线计算PFOS的回收率为76.88%。结论用高效液相色谱-质谱联用内标法定量分析血清中PFOS的浓度灵敏度高,分析速度快,适于血清PFOS含量的测定。     

新型液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中孔雀石绿及其隐色代谢物残留

目的采用液相色谱-串联质谱（LCMS／MS）建立水产品中孔雀石绿及其隐色代谢物残留的检测方法。方法均质后的水产品样品，用乙腈和乙酸铵缓冲液提取，合并提取液，用二氯甲烷反提取，经中性氧化铝柱和丙磺酸（PRS）柱固相萃取净化，没有使用氧化铅柱在线氧化，色谱分离后直接进入串联质谱检测器。采用电喷雾（ESI）正离子扫描模式，多反应监控（MRM）方式检测，外标法定量。结果孔雀石绿和隐色孔雀石绿的检出限为0．5ng／g，线性方程的相关系数r〉0．99，在添加浓度0．5～2．0ng／g范围内，孔雀石绿回收率为78．4％～92．1％。隐色孔雀石绿回收率为82．4％～98．1％，相对标准偏差（RSD）均小于5．7％。结论此方法高效快速，结果准确，重现性好，适合于对水产品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿的残留检测。     

反相高效液相色谱法同时测定血清中5种水溶性维生素

目的 建立血清中水溶性维生素B_1(VB_1)、B_6(VB_6)、烟酸、烟酰胺和叶酸的高效液相色谱同时测定方法.方法 取全血40 μL,用200 μL甲醇沉淀蛋白,冰箱冷冻(-18℃)30 min后离心(8000 r/min,8 min),上清液通过固相萃取柱进一步净化,收集洗脱液,50℃水浴中氮气吹至0.20 mL,取50 μL进样色谱柱分析.对样品的固相萃取条件和色谱条件进行优化后,用于测定人血清样品中5种水溶性维生素的含量.结果 优化后的固相萃取条件;固相萃取柱AGT cleanert~(TM) ODSC_(18)柱;洗脱液:甲醇(2.4 mL)-水(0.6 mL)混合液;洗脱流速:0.5 mL/min.本法的色谱分离条件为:分离柱Phenomenex C18 Luna色谱柱(250×4.6 mm,5 μm);柱温:室温(20℃);流动相:0.05 mol/L KH_2PO_4溶液(pH6.0)-甲醇梯度洗脱;流速:0.9 mL/min;紫外检测波长:266 nm.5种水溶性维生素标准曲线的线性范围为0～100 ng,相关系数均大于0.999,相对标准偏差(RSD)小于5%,方法 检出限(信噪比S/N=2)为0.076～0.170 μg/mL,加标回收率为80.2%～115.0%.人血清样品中除烟酰胺未检出外,其余4种均检出.结论 所建立的方法 快速、简便、灵敏、准确,可用于人血清中水溶性维生素VB_1、VB_6、烟酸和叶酸的同时测定,但烟酰胺的检测灵敏度有待提高.     

高效液相色谱法测定甲硝唑的血药浓度

用高效液相色谱法,采用乙腈：水（１８：８２）为流动相,呋喃妥因为内标,检测波长为３４０ｎｍ,建立了甲硝唑血药浓度测定方法,并做了线性关系、精密度和回收率试验。应用本法测定了家兔口服甲硝唑的血药浓度,并得到了平均药—时曲线。     

反相高效液相色谱法测定桅子中京尼平甙和京尼平的含量

应用高效液相色谱法同时测定了栀子中京尼平甙和京尼平的含量。采用YWG -C18柱 ,0 0 5mol/L磷酸氢二钠—甲醇 ( 72∶2 8) ,用磷酸调节pH6 80为流动相 ,于 2 4 0nm波长处检测 ,京尼平甙和京尼平的平均加样回收率分别为 99 10 % ,98 2 8% ,RSD分别为 1 0 5% ,1 2 1% (n=5)。本法简单、准确、重现性好     

液相色谱-四极杆-线性离子阱质谱仪联用法对护肤类化妆品中7种性激素的快速筛查

目的：建立液相色谱-四极杆-线性离子阱质谱（LC-Q-Trap）法测定护肤类化妆品中7种性激素含量的方法.方法：样品用含1.0％乙酸的乙腈溶液超声溶解,用C18柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）分离,乙腈和0.1％乙酸为流动相梯度洗脱,用正、负离子模式同时扫描检测样品中7种性激素含量.结果：7种性激素在0.060 06 ～1.008 9 mg/L范围内呈良好的线性相关性,相关系数均大于0.9991,定量限为2.0～5.0 μg/L,平均回收率为88.7％～110.7％,相对标准偏差为2.7％ ～6.2％.结论：LC-Q-Trap联合检测方法适用于化妆品中性激素的快速筛查和测定.     

高效液相色谱法同时测定血浆中的肾上腺素和去甲肾上腺素

为同时测定人血浆中肾上腺素和去甲肾上腺素浓度,建立了高效液相色谱－电化学检测方法,采用ＹＷＧ－Ｃ１８分析柱,３,４－二羟基苄胺作内标,以０．０５ｍ ｏｌ／Ｌ醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．０）－甲醇－０．０５ｍ ｏｌ／ＬＥＤＴＡ－Ｎａ２（７８∶２０∶２）为流动相,每１Ｌ流动相含ＳＤＳ２００ｍ ｇ,流速为１．０ ｍ ｌ／ｍ ｉｎ。去甲肾上腺素和肾上腺素及内标的保留时间分别为７．３、８．３ 和１０．４ 分钟,线性范围均为３１．２５～４０００ｎｇ／Ｌ（ＮＥ：ｒ＝ ０．９９９９,Ｅ：ｒ＝ ０．９９９６）。去甲肾上腺素和肾上腺素日内ＲＳＤ分别低于１．８７％ 和２．０７％ ,日间ＲＳＤ分别小于８．９２％ 和９．６５％ ,平均萃取回收率分别为９３．５％ 和９１．３％ 。提示本方法快速简便,灵敏准确,适用于嗜铬细胞瘤的鉴别诊断和临床研究。     

蜂蜜中氨基酸类成分高效液相指纹图谱研究

【目的】建立蜂蜜中氨基酸成分的高效液相（HPLC）指纹图谱分析方法。【方法】采用732阳离子交换树脂富集蜂蜜中的氨基酸,而后采用异硫氰酸苯酯柱前衍生法,以脯氨酸为参照峰。色谱柱为Waters Symmetry C18色谱柱（4．6 mm ×250 mm,5μm）;流动相： A为乙腈∶水（体积比为4∶1）, B为30 mmol／L醋酸钠溶液∶乙腈（体积比为355∶15）,用冰乙酸调节pH＝6．5,梯度洗脱;检测波长：254 nm;流速：1．0 mL／min;进样量5μL。【结果】15批蜂蜜样品氨基酸指纹图谱共标出16个共有峰,15批样品的相似度在0．910～0．996之间。【结论】该指纹图谱检测方法简便可行、重现性好、特征性强,可为蜂蜜质量控制提供一定参考。     

高效液相色谱法测定奈韦拉平片有关物质及其含量

目的采用高效液相色谱仪建立奈韦拉平片中有关物质及其含量的测定方法,为其质量控制提供参考。方法采用ODS-C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.025mol/L磷酸二氢铵溶液(20∶80);流速:1.0ml/min;检测波长:220nm。结果线性范围为5～100μg/ml(r=1.000 0)检测限为0.9ng,样品在24h内稳定性、精密度良好,RSD=0.2%,平均回收率为100.36%。结论所建立的高效液相色谱法简便、快速、准确、专属性高,适用于奈韦拉平片中有关物质及其含量的测定。     

高效液相色谱法测定人体内血浆中的妥舒沙星

目的 建立一种简便、快速的高效液相色谱法测定人体内血浆中的妥舒沙星浓度的方法.方法 采用VP-ODS C18 (150 mm×4.6 mm, 5 μm),柱温40℃,流动相为甲醇-乙腈-0.025%磷酸(pH=4.0)=6∶17∶77,流速为1.0 mL/min,检测波长346 nm.结果 妥舒沙星定量下限为13.77 ng/mL,线性范围为13.77～7050 ng/mL(r＝0.999 9),日内和日间RSD均低于10%.结论 该方法灵敏度高、快速、简便、无杂质干扰,适合于妥舒沙星的药动学以及生物等效性研究.