恶性胶质瘤自杀基因治疗中旁效应的机理

目的探讨恶性胶质瘤自杀基因治疗中旁效应的机理。方法野生型C6鼠胶质瘤细胞与基因修饰的C6tk细胞不同比例混合,在GCV作用下体外共培养;C6与C6tk细胞1：1混合大鼠颅内接种,观察肿瘤治疗反应;收集发生凋亡的C6tk细胞的条件培养基．经不同孔径的滤膜过滤,滤液及0220μm滤膜上的物质重新加入野生型瘤细胞,观察细胞存活,送检电镜。结果C6细胞的抑制率随C6tk细胞混入比例的增高而增高并具有GCV剂量依赖性（P＜0.01）;实验组比对照组瘤龄二周时肿瘤体积明显减小（P＜0.01）,存活期延长;和溶性物质无细胞毒作用,0.22μm滤膜上物质可使野生型瘤细胞存活率下降（P＜0.01）。电镜观察到瘤细胞对毒性囊泡的吞噬,并经历凋亡。结论野生型瘤细胞对基因修饰细胞凋亡囊泡的吞洚是旁效应的原因,凋亡囊泡的内容最大可能是毒性核酸。     

全反式维甲酸提高自杀基因系统治疗前列腺癌效果及其与Cx43的关系

目的探讨全反式维甲酸（ATRA）增强前列腺癌自杀基因治疗的旁观者效应及其与连接蛋白（Cx43）的关系。方法前列腺癌细胞系PC-3建立荷瘤裸鼠26只，按应用ATRA与否均分为对照组和治疗组，两组再分为PBS／GCV组（3只）和Ad-TK／GCV组（10只）。癌灶内多点注射Ad-TK病毒液1×10^9 pfu／100μa,1，共治疗35d。应用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学检测肿瘤组织中Cx43分子和蛋白表达水平。结果ATRA可延缓前列腺癌生长速度，单独应用抗前列腺癌效果不明显（P〉0．05）。与对照组比较，ATRA联合Ad．TK／GCV系统抑制前列腺癌生长可提前1周，治疗后3周效果更显著，肿瘤体积分别为30．12mm^#和47．69mm^3，差异有统计学意义（P〈0．05）；但4周时肿瘤体积分别为110．71mm^3和40．01mm^3，差异无统计学意义（P〉0．05）。对照组Cx43 mRNA表达量为0．9995±0．2318，ATRA组则高达2．0315±0．8563，差异有统计学意义（P〈0．05）；Cx43蛋白在前列腺癌组织中弱表达，应用ATRA后表达增强，以胞膜为主。结论AT．RA可以增强Ad-TK／GCV系统抗前列腺癌效果，可能通过提高Cx43表达量来提高旁观者效应。     

53基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗的体内研究

目的　探讨p5 3基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗在动物体内的疗效。　方法　以C6鼠胶质瘤细胞和SD大鼠建立动物模型 ,原位注射腺病毒介导p5 3和单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK)基因 ,腹腔给以更昔洛韦 (GCV ,15mg·kg-1·d-1,共 14d)。观察荷瘤鼠生存期 ;强化MRI动态监测荷瘤鼠肿瘤大小 ;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。评价p5 3基因对HSV TK GCV系统治疗胶质瘤的优化作用。　结果　p5 3基因明显增强HSV TK GCV的疗效 ,使荷瘤鼠生存期明显延长 ,肿瘤细胞凋亡明显增加 ;强化MRI显示 4周肿瘤消失。　结论　p5 3基因联合HSV TK GCV可作为临床上优化自杀基因治疗方案的一种较佳选择     

连接蛋白connexin43与阴茎勃起调控

连接蛋白43(Cx43)是构成阴茎海绵体平滑肌细胞缝隙连接的主要成分,Cx43的表达和缝隙连接的变化影响细胞间通讯,并调节阴茎海绵体平滑肌同步舒缩,参与阴茎勃起调控,现就这方面研究情况作一综述。     

肝癌的自杀基因治疗

介绍导入自杀基因以杀灭肝癌细胞的抗肿瘤机制和旁观者效应。     

前列腺癌自杀基因治疗研究进展

随着分子生物学及其相关学科的发展，基因治疗已成为治疗恶性肿瘤的重要方法，其中自杀基因治疗便是研究的热门之一。如今，在前列腺癌的自杀基因治疗方面已取得较大进展。并显示其巨大潜力，本文就前列腺癌的自杀基因治疗作一综述。     

自杀基因联合全反式维甲酸治疗对前列腺癌PC-3细胞旁观者效应的影响

目的 观察单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)系统联合全反式维甲酸(ATRA)对人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞旁观者效应的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测HSV-TK(Ad-TK)/GCV系统对PC-3细胞的杀伤力.流式细胞仪检查连接蛋白(Cx)43阳性细胞数.结果 单纯Ad-TK/GCV系统对PC-3细胞旁观者效应在TK+:TK-细胞混合比例为5:5时明显出现(P<0.05),而联合ATRA后,在TK+:TK-细胞混合比例为3:7时就明显出现(P<0.05).Ad-TK/GCV联合ATRA处理PC-3细胞后,在细胞抑制率均达到约50%时,其TK+PC-3细胞混合比例可降低20%.ATRA(10-6 moL/L)处理PC-3细胞1、3、5 d后,Cx43阳性细胞率由10.5%分别升高为25.8%、50.8%和62.4%(P<0.01).结论 ATRA可能通过增强基于Cx43的旁观者效应,从而提高Ad-TK/GCV系统对前列腺癌的杀伤效应.     

自杀基因治疗胃肠道肿瘤的研究进展

随着分子生物学及相关学科的进展,肿瘤的基因疗法倍受关注,其中自杀基因疗法显示了较好的应用前景,该疗法又称药物敏感基因疗法、分子化疗或病毒介导的酶解前药疗法（ＶＤＥＰＴ）。其原理是将一些病毒或细菌基因组中前药转换酶基因（也叫自杀基因）导入肿瘤细胞,该基...     

连接蛋白43与睾丸肿瘤相关性的研究进展

由连接蛋白(Cx)构成,缝隙连接(GJ)是相邻细胞间的一种特殊膜结构,它调控着细胞的增殖和分化。研究表明,在多数肿瘤细胞中缝隙连接功能出现减弱或丧失,这种异常常伴随着连接蛋白表达的改变。连接蛋白43是睾丸组织中主要的连接蛋白,现就连接蛋白Cx43在睾丸肿瘤方面的研究进展作一综述。     

人脑胶质瘤中连接蛋白基因表达及其临床意义

目的探讨人脑胶质瘤连接蛋白(Cx)43、32基因表达及其临床意义。方法对8例正常脑组织和50例人脑胶质瘤采用Northern印迹和免疫组织化学法检测。结果人脑胶质瘤Cx43mRNA及其蛋白表达阳性率分别为54％、52％，Cx32仅在1例低恶度少枝胶质细胞瘤及1例混合性星形一少枝胶质细胞瘤中表达。Cx43mRNA及其蛋白表达水平随肿瘤恶性程度升高而下降。结论Cx基因在人脑胶质瘤中表达可下降或缺失，与肿瘤的病理类型及恶性程度呈负相关，可作为某些肿瘤的病理诊断参考指标之一。     

乳腺癌的自杀基因治疗研究进展

自杀基因疗法是一种具有临床应用前景的治疗肿瘤的方法.近年来自杀基因治疗乳腺癌的研究主要集中于自杀基因系统的发现和改进,靶向基因转移载体的构建,自杀基因与其他治疗方法的联合运用,本文在这几方面作了简要综述.     

肿瘤的双自杀基因治疗

肿瘤的基因治疗是目前研究热点，其中单自杀基因治疗肿瘤的疗效不大令人满意，但双自杀基因治疗肿瘤已取得了令人满意的效果。本文就肿瘤的双自杀基因治疗的研究进展作一综述。     

大肠癌的自杀基因治疗

大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,常用的手术、化疗、放疗等传统的治疗方式均未能使其疗效得到明显的提高。随着分子生物学及基因工程的发展,基因治疗已成为研究重点,其中自杀基因治疗是一种较为有效的具有临床应用潜力的治疗策略。它是把某些能将非毒性药物代谢成细胞毒性药物的非哺乳动物酶类合成的基因自杀基因,经分子生物学途径导入肿瘤细胞,使之在肿瘤细胞内特异地表达,该基因产物能将无毒的药物前体代谢为毒性产物,从而影响肿瘤细胞的ＤＮＡ合成,引起细胞的死亡。目前用于治疗大肠癌的自杀基因主要有ＨＳＶｔｋ基因和ＣＤ基因。本文就…     

肝癌的自杀基因治疗：文献综述

介绍导入自杀基因以杀灭肝癌细胞的抗肿瘤机制和旁观者效应。     

自杀基因联合化疗药物治疗结肠癌的体外研究

目的 研究胞嘧啶脱氨酶基因（CD）联合化疗药物对结肠癌的治疗作用。方法 以重组腺病毒AdCMVCD为载体转移CD基因，在体外研究病毒感染对顺铂（CDDP）、丝裂霉素（MMC）敏感性的影响，化疗药物对AdCMVCD/５-FC直接杀伤作用及“旁观者效应”的影响。结果 病毒感染并不影响Lovo细胞对CDDP、MMC的敏感性；低剂量CDDP、MMC即可明显增强AdDMVCD/5-FC系统的直接杀瘤作用，５-FC的IC50明显降低（P＜0．05），并且增强AdCMVCD/5-FC系统的“旁观者效应”。结论 化疗药物可以增强自杀基因系统对结肠癌的治疗作用，自杀基因和化疗药物有望联合应用于结肠癌的治疗。     

胰腺癌自杀基因治疗的研究进展

目前消化系肿瘤的治疗主要是手术治疗结合化疗或放疗 ,但辅助治疗如对胰腺癌的化疗效果不理想。自杀基因治疗可以增强胰腺癌化疗疗效、减轻化疗的毒副作用。本文对胰腺癌自杀基因治疗的研究进展作一综述。1　自杀基因的基本概念自杀基因 (ｓｕｉｃｉｄｅｇｅｎｅ)又称化疗敏感基因 (ｃｈｅｍｏｓｅｎｓｉ ｔｉｖｅｇｅｎｅ)、化疗药物前体活化基因 (ｐｒｏｄｒｕｇａｃｔｉｖａｔｉｏｎｇｅｎｅ) ,是存在于细菌或真菌中的一类基因 ,哺乳动物体内往往缺乏。自杀基因通过编码特异的酶 ,将一些低毒或无毒的前体化疗药物转化为具有毒性的代谢产…     

病理性瘢痕成纤维细胞中连接蛋白43的免疫电镜观察

目的：观察连接蛋白43（Connexin43,Cx43）在病理性瘢痕成纤维细胞中的表达,探讨Cx43及其构成的缝隙连接在病理性瘢痕中的调控作用。方法：取正常皮肤2例、正常修复组织2例、增生性瘢痕5例、瘢痕疙瘩5例,用特异性抗体（Cx43）作为标记物,用胶体金标记的IgG作示踪物进行免疫电镜观察Cx43的分布与表达,并对其进行定位,同时观察不同标本成纤维细胞的超微结构变化。结果：Cx43在正常修复组织及正常皮肤成纤维细胞的胞浆及近胞膜上表达,且明显集中于粗面内质网;Cx43在增生性瘢痕成纤维细胞的表达明显减少,粗面内质网中见到少许Cx43金颗粒的聚集;瘢痕疙瘩成纤维细胞仅在胞浆中见到少许Cx43散在金颗粒。结论：成纤维细胞Cx43的表达下调可能是造成病理性瘢痕组织中成纤维细胞间缝隙连接细胞间通讯异常,从而导致病理性瘢痕发生的因素之一。     

自杀基因治疗中间隙连接的作用

自杀基因治疗肿瘤中，旁观者效应有非常重要的作用，本文即总结了近年来研究细胞间通过间隙连接的信息交流（ＧＩＣ）在旁观者效应中的作用的文献。     

胃肠道肿瘤的自杀基因治疗研究进展

肿瘤自杀基因疗法是一种具有潜在应用价值的肿瘤治疗方法,本文从自杀基因体系。载体构建、靶向性转导和转录、旁观者效应、联合基因疗法等几个方面着重介绍了胃肠道肿瘤自杀基因疗法的研究进展。     

缝隙连接蛋白43对双自杀基因系统旁观者效应的影响

目的观察双自杀基因胞嘧啶脱氨酶基因(CD)和单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)对胆管癌细胞的抑制作用以及转染缝隙连接蛋白43(Cx43)基因对旁观者效应的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定双自杀基因系统作用下和/或Cx43基因转染后胆管癌QBC939细胞的细胞抑制率及旁观者效应。RT-PCR检测双自杀基因和Cx43基因的表达。Westernblot检测Cx43蛋白的表达。结果CD和tk基因在QBC939/CD tk细胞和QBC939/CD tk Cx43细胞中获得稳定表达。mRNA和蛋白水平均显示转染Cx43基因的QBC939/CD tk Cx43细胞的Cx43的表达量明显增加。双自杀基因系统对QBC939/CD tk Cx43细胞组的抑制作用较QBC939/CD tk细胞组高。结论双自杀基因系统对胆管癌细胞有明显的抑制作用,Cx43基因的导入可明显增强旁观者效应,提高对肿瘤细胞的抑制作用。