青春期大鼠实验性精索静脉曲张对附睾细胞线粒体Ca~(2+)和细胞色素C的影响

目的 :探讨外科所致的精索静脉曲张对青春期大鼠附睾细胞线粒体Ca2 + 及细胞色素C的影响。　方法 :对 4 0只青春期雄性Wistar大鼠 ,通过部分结扎左肾静脉或显露左肾静脉建立精索静脉曲张模型 (VG ,2 0只 )和假手术模型 (SOG ,2 0只 ) ,术后 10周 ,取双侧附睾 ,检测附睾头、体部细胞线粒体Ca2 + 、细胞色素C含量。　结果 :与SOG组相比 ,VG组附睾细胞线粒体Ca2 + 含量显著降低 (P <0 .0 0 1) ,细胞色素C含量显著增高 (P <0 .0 5 )。　结论 :外科所致精索静脉曲张大鼠附睾细胞钙稳态失衡、线粒体有损伤 ,这些变化可能是影响其生育能力的机制之一。     

灵芝孢子粉对雄性糖尿病大鼠睾丸细胞色素C、线粒体钙影响的研究

目的:观察灵芝孢子对2型糖尿病大鼠睾丸组织中细胞色素C(Cyt-C)及线粒体钙的影响。方法:Wistar雄性大鼠50只,随机分成3组(对照组、模型组、灵芝孢子粉组)。模型组及灵芝孢子粉组大鼠经尾静脉一次性按25mg/kg体重注射2%链脲佐菌素(STZ),对照组尾静脉注射等量枸橼酸缓冲液。正常饮食喂养2周后,进行糖耐量试验,模型组和灵芝孢子粉组以糖耐量异常者保留,余去除,并改喂高脂高糖饮食,灵芝孢子粉组另加灵芝孢子粉[250mg/(kg·d)]持续10周,实验结束前1天做糖耐量试验,取双侧睾丸检测相关指标。结果:模型组睾丸线粒体Cyt-C、线粒体钙均显著低于对照组和灵芝孢子粉组(P<0.05),胞质Cyt-C显著高于对照组和灵芝孢子粉组(P<0.05)。结论:Cyt-C、钙离子参与2型糖尿病大鼠睾丸组织损伤,灵芝孢子粉对糖尿病大鼠睾丸组织具有保护作用。     

线粒体细胞色素C释放在H2O2诱导内皮细胞凋亡中的作用

目的：探讨线粒体及其细胞色素C释放,在过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡信号途径中的作用。方法：人脐静脉内皮细胞和100umol/L H2O2共同培养24h,或内皮细胞先与环孢霉素A（cyclosporin A,CsA)孵育30min后加入H2O2;在不同时相点取细胞作DAPI染色计数凋亡细胞数量,同时用Rhoadminel23聚集法观察线粒体通透性的变化。Western bolt检测早期线粒体和血浆中细胞色素C浓度的变化。结果：H2O2处理细胞后,细胞呈现出典型的凋亡形态：细胞皱缩,胞核致密,凋亡小体形成,从处理后4h起凋亡细胞数量迅速增加,至12h达峰值,CsA可以明显抑制H2O2诱导内皮细胞亡的作用。H2O2可诱导线粒体细胞色素C浓度的下降,使得胞浆中细胞色素C浓度升高,同样线粒体中Rhoadminel23浓度下降,线粒体通透性增加,而CsA则可以明显抑制二的变化。结论：H2O2促进细胞色素C释放进入胞浆,导致内皮细胞的凋亡,CsA抑制凋亡的机制是通过保护线粒体膜的正常功能来实现的。     

生理浓度睾酮对前列腺素F_(2α)诱导SD大鼠血管平滑肌细胞中Ca~(2+)升高的影响

目的:观察生理浓度睾酮短时作用对前列腺素F2α(PGF2α)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)中Ca2+升高的影响。方法:贴块法培养雄性SD大鼠胸主动脉VSMCs,钙敏荧光指示剂Fura-2负载细胞,Nikon TE-2000E活细胞工作站对VSMCs内钙信号进行测定。结果:VSMCs给以单纯PGF2α(10μmol/L)刺激,[Ca2+]i在数秒钟内由基线水平100nmol/L左右迅速升至约500nmol/L的峰值,随后呈缓慢下降,约150s降至基线水平。在PGF2α作用的峰值给以生理浓度(40nmol/L)睾酮或乙醇溶媒干预,前者能够明显缩短[Ca2+]i由峰值回落至基线水平的时间[与乙醇溶媒相比,(104.9±27.0)svs(153.5±40.4)s,P<0.01]。在PGF2α作用前预先给以睾酮或乙醇溶媒处理2min,前者对PGF2α刺激的[Ca2+]i峰值水平无明显影响[与乙醇溶媒相比,(390.0±126.0)nmol/Lvs(403.4±160.7)nmol/L,P>0.05],但使[Ca2+]i由峰值降至基线水平的时间显著缩短[与乙醇溶媒相比,(120.6±32.0)svs(151.4±27.4)s,P<0.01]。结论:睾酮对PGF2α诱导的VSMCs中[Ca2+]i升高具有快速抑制作用,提示睾酮通过与VSMCs细胞膜作用抑制受体门控钙通道介导的Ca2+内流。     

氟桂利嗪对小鼠生精细胞T型Ca~(2+)通道的作用

目的:研究二苯烷基氨类衍生物氟桂利嗪(F lu)对小鼠生精细胞T型钙电流(ICaT)的影响。方法:采用急性机械分离的小鼠生精细胞,应用膜片钳全细胞记录技术,观察F lu对ICaT的影响。结果:钳制电位为-90 mV、刺激电压为-30 mV时,F lu(0.1、1、10、100μmol/L)可抑制小鼠生精细胞Ca2+电流,抑制率分别为(23.34±2.76)%、(46.04±3.52)%、(62.52±3.70)%、(73.52±3.12)%(P<0.05);F lu对T型Ca2+通道的半数最大抑制浓度为0.29μmol/L。结论:F lu对生精细胞T型Ca2+通道有阻断作用,呈浓度依赖性;Cav3.2是生精细胞T型Ca2+电流的主要贡献者。     

糖尿病大鼠睾丸组织黄嘌呤氧化酶、髓过氧化物酶和线粒体琥珀酸脱氢酶的变化和灵芝孢子粉的干预

目的:探讨糖尿病大鼠睾丸组织黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)和线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)的变化及灵芝孢子粉对睾丸组织的保护作用。方法:将清洁级Wistar大鼠50只,随机分成3组(对照组10只、模型组20只、灵芝孢子粉组20只)。模型组及灵芝孢子粉组以25mg/kg的剂量一次性腹腔注射2%链脲佐菌素,对照组腹腔注射等量柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液。正常饮食喂养2周后,进行糖耐量试验,模型组和灵芝孢子粉组糖耐量异常者保留,余去除,并改喂高脂高糖饮食,灵芝孢子粉组另加灵芝孢子粉[250mg/(kg.d)]持续10周,动物均单独喂养,实验结束前1d做糖耐量试验,取睾丸。检测睾丸组织XOD、MPO和线粒体SDH。结果:模型组睾丸组织的SDH较对照组和灵芝孢子粉组明显降低(P<0.05),而XOD和MPO明显高于对照组和灵芝孢子粉组(P<0.05)。模型组生精小管层次不清,精子生成量减少或消失,管腔不规则,腔周围纤维组织(间质)增生,基膜增厚,血管壁纤维组织样增生硬化。灵芝孢子粉组生精小管层次比较清析,管腔规则,有大量精子生成,间质无增生,血管基膜增生硬化不明显。结论:灵芝孢子粉能减少自由基对睾丸组织的损伤,提高SDH活性,从而对糖尿病大鼠睾丸组织起保护作用。     

米诺环素对大鼠脊髓损伤后线粒体细胞色素C的释放及神经细胞凋亡的影响

目的：探讨大鼠脊髓损伤后应用米诺环素（minocycline）对线粒体细胞色素C的释放及神经细胞凋亡的影响。方法：成年大鼠脊髓损伤后分为应用米诺环素腹腔注射的治疗组（A组）和应用生理盐水的对照组（B组），于损伤后不同时间点取材，采用流式细胞仪磷脂结合蛋白V，碘化丙啶（AnnexinV／PI）双标检测凋亡细胞，HE染色观察损伤脊髓组织病理变化，免疫组化染色检测胞浆中细胞色素C表达阳性的神经细胞以及BBB运动评分观察术后动物行为学。结果：HE染色镜检发现损伤脊髓组织病理学改变A组明显轻于B组；免疫组化染色A、B两组均发现凋亡的神经细胞以及胞浆中细胞色素C的阳性表达，神经细胞凋亡率及细胞色素C表达的阳性细胞率B组均〉A组（P〈0．01）；术后动物行为学观察显示，与B组比较A组大鼠后肢的运动功能显著增强，后肢反射的恢复较快。BBB运动评分B组明显小于A组（P〈0．05）。结论：米诺环素能有效抑制大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡以及线粒体中细胞色素C的释放，促进神经功能的恢复。     

丙泊酚对Ca2+诱导大鼠离体心肌线粒体损伤的影响

目的 探讨丙泊酚对Ca2+诱导大鼠离体心肌线粒体损伤的影响.方法 Wistar大鼠35只,断头处死迅速取出心脏制备线粒体悬液后,随机均分为五组:空白对照组(C组);CaCl2组(Ca2组),加入CaCl2100 nmol/mg prot;P25组,加入丙泊酚25 μp.mol/L)P50组,加入丙泊酚50 μmol/L;P100组,加入丙泊酚100 μmol/L.P25、P50、P100组也加入CaCl2 100 nmol/mg prot.20 min后采用Western blot法测定线粒体释放细胞色素C(Cyt C)和凋亡诱导因子(AIF)的水平.结果 与C组比较,其他四组Cyt C和AIF释放增加(P<0.01);与Ca2+组比较,P25组、P50组、P100组Cyt C、AIF释放减少(P<0.01);P50组、P100组又较P25组Cyt-C释放减少(P<0.01).结论 丙泊酚25、50、100μmol/L均可减轻Ca2+诱导大鼠离体心肌线粒体损伤,从而产生心肌保护作用.     

七氟烷预处理对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤线粒体细胞色素C释放的影响

目的 探讨七氟烷预处理对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)时心肌细胞凋亡及线粒体细胞色素C释放的影响.方法 40只SD大鼠应用随机数字表法随机分为4组(每组10只):对照组(C组),0.75％、1.5％、3.0％七氟烷预处理组(S1、S2、S3组).应用Langendorff离体心脏灌注模型,经主动脉用Krebs-Henseleit( K-H)液逆行灌注.各组均缺血30 min,再灌注60 min.S1、S2、S3组在缺血前分别以含相应浓度七氟烷的K-H液灌注10 min,再冲洗5 min,重复2次.记录平衡灌注末、缺血前即刻、再灌注30、60 min时的心功能指标.再灌注60 min时用DNA原位末端缺口标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labelling,TUNEL)测定凋亡细胞,提取心肌线粒体,免疫印迹法测定线粒体和胞浆的细胞色素C水平.结果 与C组比较,S1、S2、S3组再灌注30、60 min时左室舒张末压(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)降低、左室发展压(left ventricular developed pressure,LVDP)升高(P＜0.05);与C组比较,S1、S2、S3组凋亡率明显下降(P＜0.05或0.01),再灌注末心肌细胞凋亡率C、S1、S2、S3组分别为(33.10±2.57)％、(28.03±3.11)％、(25.20±3.04)％、(24.06±2.58)％;与C组比较,S1、S2、S3组心肌线粒体细胞色素C释放减少,胞浆细胞色素C的量明显降低(P＜0.05或0.01).结论 七氟烷预处理能够通过抑制心肌线粒体细胞色素C释放到胞浆,降低心肌细胞凋亡率,减轻心肌I/RI.     

线粒体内质网耦联在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及机制

糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）为糖尿病常见的微血管并发症,蛋白尿是其特征性标志,而足细胞损伤是DKD蛋白尿发生发展的中心环节。线粒体内质网耦联（mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes,MAMs）指真核细胞内线粒...     

灵芝多糖联合二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠氧化应激的影响

目的研究灵芝多糖联合二甲双胍对2型糖尿病大鼠氧化应激的影响。方法 采用斯泼累格·多雷（SD）大鼠高脂饮食4周后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素30 mg.kg-1造模。成模后将大鼠随机分为模型对照组、灵芝多糖组（给予灵芝多糖600 mg.kg-1）、二甲双胍组（给予二甲双胍600 mg.kg-1）及联合用药组（给予灵芝多糖300 mg.kg-1＋二甲双胍300 mg.kg-1）,另设正常对照组。给药治疗12周末测量大鼠空腹血糖;测定血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平。结果用药组空腹血糖水平均低于模型对照组（P<0.01）,其中联合用药组血糖显著低于单独用药组（P<0.01）。与模型对照组比较,用药组血清TC、TG水平明显下降（P<0.05或P<0.01）,与单独用药组比较,联合用药组血清TC、TG水平明显降低（P<0.05或P<0.01）;与模型对照组比较,用药组血清SOD水平明显升高（P<0.01）;与单独用药组比较,联合用药组血清SOD水平明显升高（P<0.05）。与模型对照组比较,用药组血清MDA水平明显降低（P<0.01）,联合用药组血清MDA较单独用药组明显降低（P<0.05）。与模型对照组比较,用药组血清CAT、GSH-Px水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,联合用药组血清CAT、GSH-Px水平较单独用药组明显升高（P<0.05）。结论 灵芝多糖、二甲双胍联合用药能够有效对抗2型糖尿病大鼠体内氧化应激作用,效果优于单独用药,其机制可能与增强体内SOD、CAT、GSH-Px水平及调节血脂障碍有关。     

大鼠十二指肠空肠旷置术的实验研究

目的探讨大鼠十二指肠空肠旷置术的安全性及效果,明确其对2型糖尿病(type2 diabetes mellitus,T2DM)的治疗意义。方法取40只8周SD大鼠,随机分为糖尿病组(T组,n=20)和普通组(N组,n=20),均予高脂饮食。T2DM大鼠模型建立后,各组再分为两组:糖尿病手术组(To组)和糖尿病对照组(Tc组),正常手术组(No组)和正常对照组(Nc组),分别行DJB手术和假手术对照,每组10只。术后观察和记录各组存活率,术后8周手术探查大鼠腹腔观察其吻合情况。分别于术前、术后1、2、4、8周检测并比较各组大鼠空腹血糖和胰岛素水平。结果四组所有40只大鼠均施行手术,术后8周时To组存活率为80%,No组存活率为80%。术后8周处死大鼠并手术探查,见吻合口均连接紧密,无渗漏、出血,吻合口未见梗阻堵塞。To组血糖从术前的(22.71±5.26)mmol/L下降到术后8周的(4.05±2.39)mmol/L(P0.05),且接近No组手术前后的血糖值。胰岛素从术前的(11.61±0.51)mU/L下降到(6.35±3.38)mU/L(P0.05),且与术前No组的胰岛素值相近。与Tc组比较,To组术后各时点血糖均有降低,但在术后2、4和8周时血糖下降有统计学意义(P0.05);To组术后各时点胰岛素较Tc组均有降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论 DJB手术肠肠吻合简便易操作,吻合口可形成严密瘢痕愈合,安全易行。术后可有效降低T2DM大鼠血糖,改善血中胰岛素水平。     

Effects of experimental varicocele on mitochondria calcium and cytochrome C of epididymis in adolescent rats

Aim: To investigate the effect of experimental varicocele on mitochondrial calcium and cytochrome C of the epididymal cells in adolescent rats. Methods: Forty male adult Wistar rats were divided into two groups randomly: the varicocele group (VG) and the sham operated group (SOG). Varicocele was produced by partial ligation of the left renal vein. Bilateral epididymides were removed after ten weeks. The mitochondrial calcium and cytochrome C levels of the epididymal cells were determined. Results: The mi-tochondrial calcium was decreased (P<0.01) while the cytochrome C increased (P<0.05) markedly in the experimental group compared with the controls. Conclusion: Varicocele-induced calcium dyshomeostasis and mitochondrial damage of the epididymal cells may play an important role in causing subfertility.     

系统性心理行为干预对2型糖尿病患者的影响

目的探讨系统性心理行为干预对2型糖尿病患者的影响.方法将87例2型糖尿病住院患者随机分为研究组(49例)与对照组(38例).对照组仅进行常规药物治疗和糖尿病常规护理;研究组在此基础上进行系统性心理行为干预,其内容包括心理健康教育、个别心理咨询与家庭治疗、行为矫正和运动疗法等.两组患者分别于干预前、干预后3个月采用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)评定患者焦虑、抑郁症状,并进行空腹血糖(FBG)及糖化血红蛋白(HbA1c)、体重指数(BMI)、总体幸福感量表(GWB)的测评;分别计算两组的住院时间及总住院费用,比较两组患者出院3个月内与糖尿病有关的再住院率.结果研究组干预前后SAS、SDS、FBG、HbA1c、BMI、GWB比较,差异有显著性意义(均P<0.01);对照组除BMI外,组内干预前后比较,差异有显著性意义(均P<0.01);干预后两组SAS、SDS、FBG、HbA1c、GWB比较,差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01),而BMI之间比较,差异无显著性意义(P>0.05).研究组的住院时间、总住院费用较对照组显著减少(均P<0.01);干预3个月后研究组与糖尿病有关的再住院率显著低于对照组(P<0.05).结论系统性心理行为干预能显著改善2型糖尿病患者的抑郁、焦虑症状,保持血糖稳定,改善患者生活质量,缩短住院时间,减少住院成本和再住院率.     

Short-term Effects of Sleeve Gastrectomy on Type 2 Diabetes Mellitus in Severely Obese Subjects

Background Data on the effectiveness of sleeve gastrectomy (SG) in improving or resolving type 2 diabetes mellitus (T2DM) are scarce. Methods A 4-month prospective study was conducted on the changes in glucose homeostasis in 35 severely obese T2DM subjects undergoing laparoscopic SG (LSG) and 50 subjects undergoing laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass (LRYGBP), matched for DM duration, type of DM treatment, and glycemic control. Results At 4-months after surgery, LSG and LRYGBP operated subjects lost a similar amount of weight (respectively, 20.6 ± 0.7% and 21.0 ± 0.6%). T2DM had resolved respectively in 51.4% and 62.0% of the LSG and LRYGBP operated subjects (P = 0.332). A shorter preoperative DM duration (P < 0.05), a preoperative DM treatment not including pharmacological agents, and a better pre-surgical fasting plasma glucose (P < 0.01) or HbA1c (P < 0.01), were significantly associated with a better type 2 DM outcome in both surgical groups. Conclusions Our data show that LSG and LRYGBP result in a similar rate of type 2 DM resolution at 4-months after surgery. Moreover, our data suggest that mechanisms beyond weight loss may be implicated in DM resolution following LSG and LRYGBP.     

系统性心理行为干预对2型糖尿病患者的影响

目的探讨系统性心理行为干预对2型糖尿病患者的影响。方法将87例2型糖尿病住院患者随机分为研究组（49例）与对照组（38例）。对照组仅进行常规药物治疗和糖尿病常规护理；研究组在此基础上进行系统性心理行为干预，其内容包括心理健康教育、个别心理咨询与家庭治疗、行为矫正和运动疗法等。两组患者分别于干预前、干预后3个月采用焦虑自评量表（SAS）、抑郁自评量表（SDS）评定患者焦虑、抑郁症状，并进行空腹血糖（FBG）厦糖化血红蛋白（HbAlc）、体重指数（BMI）、总体幸福感量表（GWB）的测评；分别计算两组的住院时间及总住院费用，比较两组患者出院3个月内与糖尿痛有关的再住院率。结果研究组干预前后SAS、SDS、FBG、HbAlc、BMI、GWB比较，差异有显著性意义（均P〈0．01）；对照组除BMI外。组内干预前后比较，差异有显著性意义（均P〈0.01）；干预后两组SAS、SDS、FBG、HbAlc、GWB比较，差异有显著性意义（P〈0．05，P〈0．01），而BMI之间比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。研究组的住院时间、总住院费用较对照组显著减少（均P〈0．01）；干预3个月后研究组与糖尿病有关的再住院率显著低于对照组（P〈o．05）。结论系统性心理行为干预能显著改善2型糖尿病患者的抑郁、焦虑症状，保持血糖穗定，改善患者生活质量，缩短住院时间，减少住院成本和再住院率。