骨髓增生异常综合征患者SFRP5基因启动子区甲基化状态研究

背景：SFRP5基因启动子区的甲基化与急性髓系白血病的发生密切相关。作为白血病的前期,骨髓增生异常综合征患者中SFRP5基因启动子区的甲基化状态尚不清楚。目的：探索骨髓增生异常综合征中WNT/β-catenin信号传导通路拮抗基因分泌型卷曲相关蛋白5（SFRP5）基因的甲基化状态。方法：应用甲基化特异性PCR（MSP）法对43例骨髓增生异常综合征患者的骨髓或外周血进行SFRP5基因启动子区甲基化状况检测,并以70例门诊普通患者的外周血作为对照。结果与结论：113例样本均成功进行了MSP检测,进入结果分析。43例骨髓增生异常综合征患者中检出5例（11.6%）SFRP5的甲基化,70例正常对照中检出1例（1.4%）SFRP5的甲基化,并且均为不完全甲基化状态。SFRP5在骨髓增生异常综合征患者中的甲基化率显著高于正常对照（χ2=5.511,P=0.019）。43例患者样本中,17例为骨髓样本,26例为外周血样本。而5例甲基化的样本中,2例为骨髓样本,3例为外周血样本。样本的来源（骨髓/外周血）对于甲基化状态的结果无显著差异（χ2=0.001,P=0.982）。提示,SFRP5基因的甲基化与骨髓增生异常综合征有相关性,SFRP5基因的甲基化可能是引起骨髓增生异常综合征的分子机制之一。     

骨髓增生异常综合征恶性造血克隆分子标志的研究进展

骨髓增生异常综合征是一组恶性克隆性造血干/祖细胞疾病,其主要特征是病态造血、难治性血细胞质/量异常以及高风险向急性白血病转化.本文就近年来有关骨髓增生异常综合征恶性造血克隆分子标志的研究进展进行综述.     

骨髓衰竭与造血微环境异常

骨髓衰竭是由于成熟红细胞、粒细胞和血小板在骨髓中有效生成减少而引起的外周血血细胞减少;再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征均属于获得性骨髓衰竭综合征.研究骨髓衰竭再生障碍性贫血患者骨髓微环境功能不仅能了解再生障碍性贫血的发病机制,而且也为其与其他疾病特别是低增生骨髓增生异常综合征的鉴别提供了新方法 .本文就有关骨髓衰竭造血微环境方面的研究进展作一综述.     

骨髓增生异常综合征患者SFRP5基因启动子区甲基化状态研究

背景:SFRP5基因启动子区的甲基化与急性髓系白血病的发生密切相关.作为白血病的前期,骨髓增生异常综合征患者中SFRP5基因启动子区的甲基化状态尚不清楚.目的:探索骨髓增生异常综合征中WNT/β-catenin信号传导通路拮抗基因分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)基因的甲基化状态.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)法对43例骨髓增生异常综合征患者的骨髓或外周血进行SFRP5基因启动子区甲基化状况检测,并以70例门诊普通患者的外周血作为对照.结果与结论:113例样本均成功进行了MSP检测,进入结果分析.43例骨髓增生异常综合征患者中检出5例(11.6%)SFRP5的甲基化,70例正常对照中检出1例(1.4%)SFRP5的甲基化,并且均为不完全甲基化状态.SFRP5在骨髓增生异常综合征患者中的甲基化率显著高于正常对照(χ2=5.511,P=0.019).43例患者样本中,17例为骨髓样本,26例为外周血样本.而5例甲基化的样本中,2例为骨髓样本,3例为外周血样本.样本的来源(骨髓/外周血)对于甲基化状态的结果无显著差异(χ2=0.001,P=0.982).提示,SFRP5基因的甲基化与骨髓增生异常综合征有相关性,SFRP5基因的甲基化可能是引起骨髓增生异常综合征的分子机制之一.     

骨髓增生异常综合征的发病机制探讨

骨髓增生异常综合征的发病机制探讨杨崇礼，朱平综述骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）的发病机制已进行了多年研究，但迄今尚未形成完整的理论，我们结合文献，讨论ＭＤＳ的发病机制。ＭＤＳ是克隆性细胞增生已有大量证据表明，ＭＤＳ和急性白血病一样，是由一个异常的造血干...     

剪接异常在骨髓增生异常综合征发病机制中的作用

近年来应用高通量测序技术较全面地揭示了骨髓增生异常综合征(MDS)的基因突变谱系,但对这些基因突变在MDS发生、发展中的作用知之甚少。剪接因子突变是MDS这组异质性疾病中最常见的分子学异常。在最近研究中发现了SF3B1、SRSF2、U2AF1突变以及端粒酶功能异常导致的剪接因子失调而影响前体mRNA剪接的具体机制,揭示了可能的下游靶基因,初步阐释了剪接异常对造血功能的影响及其在MDS发病机制中的作用,并建立了相应的动物模型,对寻找MDS新的治疗靶点具有重要意义。本文就剪接异常在骨髓增生异常综合征发病机制中的作用进行了综述。     

基于GEO骨髓增生异常综合征芯片数据的生物信息学分析

目的:用生物信息学分析方法挖掘骨髓增生异常综合征的关键基因并探索其发病机制.方法:从公共基因芯片数据库(GEO)中下载2组骨髓增生异常综合征表达谱芯片数据,通过GEO2R工具在线分析,筛选出骨髓增生异常综合征中差异表达基因,利用GO数据库获取差异表达基因的功能注释,利用KEGG数据库进行通路富集分析,基于STRING数...     

难治性贫血伴环形铁粒细胞增多的铁过载

骨髓增生异常综合征的亚型难治性贫血伴环形铁粒细胞增多(Refractory anemia withring sideroblasts,RARS)的特征表现是线粒体铁过载明显。对红细胞生成作用中细胞铁代谢网络的分析有助于阐明RARS的分子机制和发病机制,进而有助于临床防止靶器官组织损伤和改善骨髓有效红细胞的生成。     

低增生性骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血的CD34+细胞检测及临床分析

低增生性骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血临床表现有许多相似之处,极易混淆,骨髓增生异常综合征(MDS)是一种起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病。再生障碍性贫血(AA)的病因及发病机制目前尚不十分清楚,骨髓造血干／祖细胞的质或量的改变可能是其发病的重要原因,二者均表现为3系减低,骨髓增生低下,给诊断造成一定困难。我们应用流式细胞仪检测了MDS、AA的CD34^ 细胞数量,     

血小板增多为首发表现的骨髓增生异常综合征1例

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组源于造血干细胞的恶性克隆性疾病。目前大多数学者采用法、美、英协作组(FAB)的诊断分型标准，将骨髓增生异常综合征分为5个亚型。近年来特殊类型骨髓增生异常综合征引起血液工作者关注，有关方面报道逐渐增多，有伴多系病态造血的难治性血细胞减少症(RCMD)，有伴骨髓纤维化的骨髓增生异常综     

axl基因在骨髓增生异常综合征患者外周血细胞的表达

为研究axl基因在骨髓增生异常综合征(MDS)及其它几种血液病患者外周血单个核细胞中的表达,用RT-PCR方法测定细胞中axl基因mRNA的表达情况。结果表明:①10/11例(91%)MDS患者和1/2例AML-M_3型患者有axl基因表达。2例再生障碍性贫血患者、2例球形红细胞增多症患者、2例正常人均无axl基因表达。②FAB分型与axl基因表达关系:5例RA有表达,其中强表达2例,弱表达3例;4例RAEB均有表达,其中强表达1例,弱表达3例;1例RAEB-T为强表达。以上结果说明,axl基因在MDS患者中有很高的表达率,提示其可能作为MDS患者的诊断指标之一。     

应用DNA微阵列对骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞基因表达谱的初步研究

为了探讨应用DNA微阵列研究骨髓增生异常综合征(MDS)的基因表达谱的可行性，将2例患者骨髓单个核细胞RNA各取等量混合后进行逆转录Cy5标记，与Cy3标记的正常对照cDNA混合．与H141微阵列杂交、扫描、软件分析。结果H141s芯片中共点样13484个基因克隆，其中1064个靶克隆是由针对同一基因内不同序列的cDNA片段重复点样至少2次。重复点样检测结果表明：在2张芯片内各自完全一致的分别为625个(58．7％)和630个(59．2％)，而存在完全相反结果的cDNA片段分别有21个(2.0％)和11个(1．0％)。1064个靶克隆中重复点样数据完整且分别在2张芯片内结果一致的共有411个，其中在2张芯片间结果也完全一致的共有400个(97．3％)。2张芯片中MDS与正常对照比较存在差异表达的靶基因分别为1549和1311个，而2张芯片间表达差异一致的靶基因为409个，其中101个基因参与造血调控，主要涉及转录因子、细胞周期调节蛋白、代谢相关基因、表面黏附分子等。结论：DNA微阵列可用于对MDS患者混合标本的表达谱分析，为深入研究MDS的发病分子机理提供线索，但需要进行重复实验以降低微阵列操作过程引起的表达偏差。     

从贮存骨髓涂片提取RNA检测骨髓增生异常综合征病人的WT1基因表达

从贮存骨髓涂片提取RNA,用巢式RT-PCR检测61例骨髓增生异常综合征（MDS）病人的WT1基因表达,结果显示各类型MDS病人均高表达WT1基因,难治性贫血伴原始细胞增多（RAEB）和转变中的RAEB（RAEB-t)的表达率高于难治性贫血（RA）和环形铁粒幼细胞性难治性的贫血（RAS）,WT1基因的表达与MDS病人的疾病进展呈正相关关系。WT1基因表达的RT-PCR检测可作为判断疾病进展的一个有用指标。     

骨髓增生异常综合征细胞周期调控基因表达谱的研究

目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)细胞周期调控基因的异常表达。方法通过半定量RTPCR分析29名正常对照、27例MDS和19例原发性急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞周期素(cyclins)家族(cyclinD2,cyclinD3,cyclinA1和cyclinE)、细胞周期素依赖性激酶(CDKs)家族(CDK2,CDK4和CDK6)、CDKs抑制剂家族(p21,p27和p57)以及RbE2Fs通路中Rb和E2F1基因的表达率和表达量。结果MDS组cyclinD3和cyclinA1基因表达量(分别为0.65±0.17,0.48±0.04)均明显高于正常对照(0.49±0.04,0.32±0.06),且低于原发性AML组(0.84±0.15,0.65±0.09)(P值均<0.05)。MDS组cyclinD2和cyclinE基因表达率(表达量)分别为40.7%(0.78±0.21)和51.9%(0.52±0.10),均明显高于正常对照[13.8%(0.49±0.09);17.2%(0.33±0.13)]和原发性AML组[10.5%(0.38±0.08);21.1%(0.33±0.03)]。MDS组CDK2基因表达量(0.66±0.19)明显高于正常对照(0.42±0.04)(P<0.001),而且CDK6基因表达率(25.9%)明显高于正常对照(3.4%)(P<0.05)。MDS组、原发性AML组及正常对照组CDK4基因表达率和表达量差异无统计学意义。MDS组p21基因(77.8%;1.18±0.21)和p27基因(48.1%;1.14±0.40)有较高的表达率和表达量,明显高于正常对照和原发性AML组。MDS组p57基因表达量(0.69±0.06)明显高     

骨髓增生异常综合征患者间充质干细胞SDF-1基因的表达

本研究探讨骨髓基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓间充质干细胞(MSC)中的表达水平。采集MDS的骨髓标本,分离、培养和扩增MSC,观察细胞形态并进行表型鉴定;以实时定量RT-PCR法检测间充质干细胞SDF-1基因和内参照磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的表达水平,并与健康供者的表达水平相比较。结果发现,MDS患者骨髓间充质干细胞SDF-1基因的表达水平经GAPDH校正后为1.53±0.92,与对照组(5.51±0.99)相比差异非常显著(P<0.01)。结论:SDF-1基因在MDS患者骨髓间充质干细胞中的表达显著升高,SDF-1基因的异常表达可能影响MDS患者骨髓微环境的造血调控作用,是否可对MDS的发病机制及治疗提供新的思路值得进一步探讨。     

抑癌基因pten在骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病的表达

为了研究pten基因在骨髓增生异常综合征（MDS）、急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其意义，采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫印迹杂交（Western blot）方法检测Jurkat细胞株、35例MDS、45例AML及20例正常人骨髓有核细胞中pten mRNA及其蛋白的表达。结果表明：pten mRNA在阴性对照Jurkat细胞株不表达。MDS组的阳性表达率（77．1％）低于正常对照组（90．0％），但差异无统计学意义（P〉0．05）；AML组阳性表达率（60．0％）低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；MDS—RAEB组阳性表达率（70．0％）低于MDS—RCMD组（86．7％），初发／复发AML组阳性表达率（53．3％）低于完全缓解AML组（73．3％），但差异均无统计学意义（p〉0．05）。对各组pten mRNA相对表达量分析发现，MDS及AML组均明显低于正常对照组（P〈0．005）；MDS-RAEB组低于MDS-RCMD组（P〈0．05）；初诊／复发的AML组明显低于完全缓解的AML组（P〈0．001）；MDS组与AML组相比，差异无统计学意义（p〉0．05）。PTEN蛋白表达阳性率在MDS组（65．7％）及AML组（54．8％）均低于正常对照组（90％）（P〈0．05）；MDS—RCMD组（80．O％）与MDS—RAEB组（55．0％）相比，阳性表达率均无统计学意义（P〉O．05），但初诊／复发的AML组（44．4％）与完全缓解的AML组（73．3％）相比，差异有统计学意义（p〈0．05）。结论：pten mRNA在MDS、AML中表达完全缺失并不多见，但表达强度较正常人明显减弱。PTEN蛋白在MDS、AML中阳性表达率低于正常人，且与mRNA表达水平不一致。pten基因的表达异常参与了MDS及AML的发病。     

WT1基因在骨髓增生异常综合征中的表达及其与疾病进展的关系

目的 :观察 WT1基因在骨髓增生异常综合征 (MDS)不同亚型中的表达程度 ,探讨 WT1基因在MDS进展为急性白血病 (AL)进程中的表达规律。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)对 49例不同类型的 MDS患者外周血 WT1基因 (4种剪接变体 )表达情况进行测定。同时检测 66例 AL 患者〔其中包括由MDS转变而来的急性白血病 (post MDS AL)患者 8例〕及 16例健康对照者 WT1基因的表达。结果 :49例MDS患者 WT1阳性表达率为 2 2 .4% (11/4 9) ;难治性贫血 (RA) 13例 ,WT1阳性率为 0 (0 /13 ) ;原始细胞增多性难治性贫血 (RAEB) 2 4例 ,WT1阳性率为 2 5 .0 % (6/2 4) ;转化型原始细胞增多性难治性贫血 (RAEB t)12例 ,WT1阳性率为 41.7% (5 /12 )。 RA与 RAEB和 RAEB t比较差异有显著及非常显著性 (P<0 .0 5和P<0 .0 1)。 AL患者 66例 ,WT1阳性率为 48.5 % (3 2 /66) ,与 MDS组比较差异有非常显著性 (P<0 .0 1)。 postMDS AL 8例 ,WT1阳性率为 5 0 .0 % (4 /8)。 16例正常健康对照者 WT1阳性率为 0 (0 /16)。结论 :WT1基因在 MDS中呈较高表达 ;WT1基因在 MDS的 RAEB、RAEB t中表达率较高 ,在 RA中表达率较低。RT PCR方法灵敏度高 ,特异性强 ,可作为监测 MDS疾病进程及向 AL演变的可靠检测方法     

维生素D受体mRNA在骨髓增生异常综合征患者外周血细胞中的表达

为研究维生素D受体(VDR)mRNA在骨髓增生异常综合征(MDS)患者外用血细胞中的表达,取11例FAB不同亚型的MDS患者的外周血3ml,以RT-PCR方法进行检测。结果显示,11例MDS患者外周血细胞中均有VDR mRNA表达,提示MDS患者外周血细胞也是1,25(OH)_2D_3(VD_3)作用的靶细胞,VD_3的作用可能是通过VDR而介导的,为VD_3治疗MDS提供了理论依据。     

伴有t(3;5)(q25;q34)的骨髓增生异常综合征急性髓系白血病变患者的分子特征

目的研究t(3;5)(q25;q34)的分子特征。方法R显带染色体核型分析和染色体涂染分析确定t(3;5)(q25;q34)存在。RT-PCR法检测患者NPM-MLF1融合基因、MLF1基因表达。PCR联合序列分析检测NPM基因突变。实时定量RT-PCR(Real-time PCR)检测Evi-1,MDS1／Evi-1表达。免疫组化染色确定MLF1和NPM-MLF1蛋白细胞定位分布。Western blot法检测bcl-2蛋白表达。结果染色体核型分析和涂染分析均证实存在染色体t(3;5)(q25;q34),NPM-MLF1融合基因阳性,经诱导治疗获得完全缓解后转为阴性。患者白血病细胞仅表达MLF1基因非编码蛋白剪接体,不表达Evi-1基因,弱表达MDS1／Evi-1。无NPM基因突变,未检出bcl-2蛋白表达。MLF1蛋白定位于细胞质,而NPM-MLF1则主要定位于胞核。结论t(3;5)(q25;q34)是髓系肿瘤的一种少见的染色体易位,该染色体易位导致形成NPM-MLF1融合基因是其发病的分子学基础。     

骨髓增生异常综合征患者c/ebpα基因表达水平及其临床意义

本研究探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)基因的表达及其在MDS发病、病情进展中的意义.应用Taq-man探针的实时荧光定量PCR(Real-time ...