肿瘤干细胞与胶质瘤细胞起源

经过过去20年的努力,癌基因和抑癌基因在神经胶质瘤形成及发展中的核心地位已达共识.然而,在生命科学研究突飞猛进、肿瘤诊断与治疗手段日新月异的今天,我们尚未确立这些核心分子在胶质瘤中作用的靶标,因此,胶质瘤的细胞起源-这一决定着人类最终克服胶质瘤的根本问题再度引起人类的关注.     

胶质瘤细胞及其干细胞的放疗敏感性差异

目的探讨脑胶质瘤细胞与脑肿瘤干细胞(BTSCs)的放射敏感性差异。方法胶质瘤细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基进行培养。用血清剥夺法(无血清的DMEM/F12培养基添加bFGF、EGF和B27,即干细胞培养液)培养胶质瘤干细胞。CD133免疫细胞化学染色鉴定BTSCs。用直线加速器分别以0、2、4、6、8、10Gy X线照射胶质瘤细胞及BTSCs,然后继续培养36h。流式细胞仪检测上述细胞中CD133+细胞比率。采用MTT法检测细胞的存活情况。结果胶质瘤细胞中存在BTSCs,后者能在干细胞培养液中存活并悬浮生长,增殖形成克隆球,具有自我更新和增殖能力,表达特异性标志物CD133。胶质瘤细胞及BTSCs在X线照射后,其增殖能力都下降,但BTSCs的下降幅度远没有胶质瘤细胞大(P0.05)。CD133+比率显示,X射线对普通胶质瘤细胞中极其微量的CD133+细胞几乎没有影响,而BTSCs中的CD133+细胞的比例在0-10GyX射线放射过程中,与放射剂量成正比(P0.05)。结论 BTSCs的放射敏感性明显低于胶质瘤细胞,其机制可能与放疗过程中CD133+细胞的增加有关。     

下调环指蛋白2的表达促进U87脑胶质瘤细胞凋亡并增强其放射敏感性

目的在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响。方法用含有针对RNF2基因小发夹RNA(shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF2的表达下调,用MTT法检测细胞增殖,用annexin V-FITC/PI标记结合流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况;经X射线照射后,用流式细胞术检测对照细胞和RNF2表达下调细胞的凋亡情况。结果 2条针对RNF2的shRNA均可有效抑制U87细胞中RNF2的表达。RNF2表达下调后,U87细胞的增殖受到显著抑制,S期细胞明显减少(shRNA-NC:27.31±1.35;shRNF2-1:16.72±2.90;shRNF2-3:10.35±1.33),G1期细胞显著增加(shRNA-NC:56.13±1.80;shRNF2-1:76.32±3.11;shRNF2-3:80.45±2.83),同时出现细胞凋亡。经X线照射后,RNF2下调的细胞凋亡率明显增加(shRNA-NC:20.88±0.64;shRNF2-1:39.69±0.57;shRNF2-3:47.82±0.45)。结论下调RNF2表达可明显抑制细胞生长,并增强U87细胞对放射的敏感性。     

放疗中肿瘤生长数学模型及放射敏感性分析

目的 建立放射治疗下肿瘤生长及浸润的数学模型,数值模拟放射治疗对肿瘤生长的影响,并进行敏感性分析。方法 建立放射治疗前后肿瘤生长和浸润随时间演变的数学模型,模型包括肿瘤浸润过程中4个关键变量：肿瘤细胞、细胞外基质、基质降解酶和氧,利用线性二次（LQ）模型模拟放疗后的肿瘤细胞存活概率,探讨肿瘤放射治疗下不同放疗方案和系数对治疗效果的影响,并将传统放疗和术中靶向放射治疗进行对比分析。结果 在总剂量不变的前提下,放疗结果与放疗系数成正比,与放疗频率无关联;术中靶向放疗与标准治疗相比,治疗成效更好。结论 模拟结果和临床实验结果基本相符,术中靶向放疗作为一种更加有效的治疗手段,能够为临床肿瘤治疗提供一种新思路。     

Period2基因对大鼠神经胶质瘤放射敏感性的影响

目的:探讨Period2基因对肿瘤细胞放射敏感性的影响。方法:体外培养C6细胞(C6神经胶质瘤细胞,C6gliomacells),使用脂质体包裹法将Period2表达质粒(pcDNA3.1per2)转导入C6细胞内;以免疫组化及流式细胞术检测Period2表达;通过流式细胞术和克隆形成试验检测稳定转染Period2阳性表达的C6细胞在γ射线照射后的凋亡及增殖情况。结果:γ射线照射后Period2阳性表达的C6细胞射线照射后其较对照组细胞凋亡率减少、增殖率较高。结论:Period2基因过表达使C6神经胶质瘤细胞的放射敏感性降低。     

miR-486对胶质瘤干细胞的抑制作用

背景：既往研究发现,miR-486在胶质瘤干细胞(CD133⁺)中的表达水平显著低于其在胶质瘤非干细胞(CD133^-)中的表达水平,但是miR-486对CD133⁺细胞的影响尚不明确。 目的：探索miR-486对CD133⁺细胞的作用。 方法：利用流式细胞分选将U87胶质瘤细胞中分为CD133⁺和CD133^-细胞。通过脂质体转染构建miR-486过表达的胶质瘤干细胞。 结果与结论：流式细胞分选和纯化获得高比率的CD133⁺胶质瘤干细胞。实时反转录PCR检测发现miR-486在CD133⁺胶质瘤干细胞的表达水平比CD133^-胶质瘤细胞明显下降。脂质体转染成功构建miR-486过表达的胶质瘤干细胞,体外实验发现miR-486高表达抑制胶质瘤干细胞的增殖,将其阻滞于G₁/S期,并促进凋亡。提示miR-486对胶质瘤干细胞具有抑制作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

人骨肉瘤细胞株MG-63中肿瘤干细胞的生物学特性

背景：骨肉瘤干细胞在骨肉瘤的发生、复发及对化疗药物的耐药性中发挥关键作用,而目前关于骨肉瘤干细胞体外分离培养及生物学特性研究的报道甚少。 目的：从人骨肉瘤细胞株MG-63中分离出具有干细胞特征的高致瘤性细胞亚群,检测肿瘤干细胞特异性标志物CD105的表达。 方法：无血清悬浮培养法从人骨肉瘤细胞株MG-63中分离出骨肉瘤细胞球,应用流式细胞术检测细胞球中CD73、CD90、CD105的表达,免疫荧光法检测骨肉瘤细胞株及骨肉瘤细胞球中CD105的阳性率,免疫磁珠法分选出CD105⁺和CD105^-的细胞,传代后分别接种于NOD/SCID小鼠评估其致瘤性。 结果与结论：CD105在球体细胞中高表达,此类肿瘤细胞具有高侵袭性和高致瘤性,在NOD-SCID小鼠中仅需移植1 000个细胞即可形成肿瘤,这些细胞具有自主生长特性,能够在无血清条件下长期培养,CD105⁺骨肉瘤细胞显示了干细胞的生物学特性,CD105可能成为骨肉瘤干细胞的表面标志之一。     

骨髓间充质干细胞向胶质瘤迁移中血小板衍生生长因子BB的作用

目的探讨血小板衍生生长因子BB(PDGFBB)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向迁移的影响及其在BMSCs向C6胶质瘤迁移过程中的作用。方法直接贴壁法分离培养传代BMSCs,RT-PCR检测PDGF受体α和β mRNA在BMSCs的表达,用Transwell小室建立体外迁移模型检测PDGFBB对BMSCs迁移的影响及其在BMSCs向C6胶质瘤的迁移过程中的作用,评价p38丝裂原蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580对PDGFBB诱导BMSCs迁移能力改变的影响。结果通过直接贴壁法获得了纯化的BMSCs,RT-PCR证实PDGF受体α和βmRNA在BMSCs呈阳性表达,C6胶质瘤可以诱导BMSCs向胶质瘤细胞定向迁移。用阻断抗体阻断PDGFBB后,向C6胶质瘤发生迁移的BMSCs数量减少;含10ng/mlPDGFBB的无血清培养基可诱导BMSCs迁移;加入SB203580后PDGFBB诱导发生迁移的BMSCs数量减少。结论 PDGFBB是诱导BMSCs向C6胶质瘤发生迁移的细胞因子之一。PDGFBB可诱导BMSCs发生迁移,p38M APK参与了这一过程的信号转导。     

DNA拓扑异构酶-Ⅱα沉默对脑胶质瘤干细胞增殖和凋亡的影响

目的由U87MG细胞分离并鉴定脑胶质瘤干细胞,研究Topo-Ⅱα基因对脑胶质瘤干细胞增殖和凋亡的影响。方法培养脑胶质瘤U87MG细胞,分离和鉴定其中的胶质瘤干细胞。将Topo-Ⅱα基因特异性的siRNA转染胶质瘤干细胞。转染后,Western Blot检测转染后Topo-Ⅱα蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖活力,双标流式法检测细胞凋亡率。结果成功分离出U87MG细胞球细胞,并鉴定其具有肿瘤干细胞特性。转染Topo-Ⅱα基因特异性的siRNA后,胶质瘤干细胞中的Topo-Ⅱα蛋白表达明显降低,同时,细胞增殖能力显著降低,凋亡率明显增加。结论由U87MG细胞系中分离出细胞球细胞具备肿瘤干细胞特性,Topo-Ⅱα基因沉默降低胶质瘤干细胞的增殖能力,促进细胞凋亡。     

星形胶质细胞瘤干细胞的体外分离、培养与鉴定

背景：肿瘤干细胞理论认为肿瘤中存在一小部分具有无限增殖潜能和自我更新能力,能够分化为成熟细胞表型的干细胞样细胞,对肿瘤发生、增殖、侵袭起关键作用。 目的：建立体外分离、培养与鉴定星形胶质细胞瘤干细胞的方法。 方法：采用直接培养法分离培养星形胶质细胞瘤干细胞。参照神经干细胞培养条件,进行体外培养。观察其增殖、分化并进行巢蛋白、CD133免疫细胞化学鉴定和诱导分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白及O4免疫细胞化学鉴定。 结果与结论：培养7-10 d,可形成大量悬浮生长巢蛋白及CD133免疫阳性的神经球,经诱导分化后细胞呈神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白或O4免疫阳性。提示星形胶质细胞瘤中存在具有神经干细胞特性的肿瘤干细胞。CD133和巢蛋白是星形胶质细胞瘤干细胞重要的表面标记,可以用于星形胶质细胞瘤干细胞的分离。     

脑胶质瘤中PDGF-B、PDGFR-β、PTEN和p16基因的表达

目的　探讨PDGF B、PDGFR -β与抑癌基因PTEN、p16在脑胶质瘤发生和进展中的作用。方法　应用核酸原位杂交方法检测125例胶质瘤切片中PDGFK B、PDGFR- β、PTEN和p16mRNA表达情况。结果　胶质瘤PDGF- B、PDGFR -β阳性表达率分别为47. 20%和49 .60%,并随着肿瘤级别升高而表达增加(P<0 05 )。PTEN、p16mRNA阳性表达率34. 96%和45. 53%。高级别胶质瘤中PTEN、p16mRNA表达率分别为27. 72%和38. 61%,低于低级别胶质瘤(68 .18%和77 .27%,P<0 .01)。结论　PDGF- B、PDGFR-βmRNA高表达和PTEN、p16mRNA失表达与胶质瘤进展有关。     

干扰PAG1介导肿瘤相关巨噬细胞自噬状态提高放射抗拒喉鳞癌的放射敏感性研究北大核心CSCD

目的:探究鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白(PAG1)在喉鳞癌(LSCC)组织中的表达,以及干扰肿瘤相关巨噬细胞PAG1表达对放射抗拒喉鳞癌细胞敏感性的影响。方法:收集武汉市第一医院收治的40例LSCC肿瘤组织及邻近癌旁组织,免疫组织化学染色和RT-qPCR检测PAG1表达;将人单核白血病细胞株THP-1诱导为M2型肿瘤相关巨噬细胞,通过脂质体介导法将PAG1-siRNA转染至M2型肿瘤相关巨噬细胞,RT-qPCR和蛋白质印迹法检测转染效果,ELISA法检测巨噬细胞分泌相关细胞因子IL-6、IL-12、IL-4及IL-10含量;建立肿瘤相关巨噬细胞与放射抗拒人喉鳞癌细胞Hep-2max的共培养体系,培养4 d后收集Hep-2max细胞,经8 Gy X射线照射24 h后,MTT法检测细胞活性,流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡,免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测细胞自噬水平。结果:喉鳞癌肿瘤组织中PAG1蛋白和mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01);THP-1细胞诱导后呈不规则多边形,且胞体有尾足伸出,CD86表达减少,CD206表达明显增加(P<0.01),提示成功诱导肿瘤相关巨噬细胞;在PAG1-siRNA转染肿瘤相关巨噬细胞后,细胞中PAG1 mRNA和蛋白相对表达量较对照组均显著下降(P<0.01),培养液上清中IL-6和IL-12水平升高,IL-4和IL-10水平降低(P<0.01);诱导后的肿瘤相关巨噬细胞转染PAG1-siRNA与Hep-2max共培养,再经过8 Gy X射线照射,细胞活性降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.01),TUNEL阳性率升高(P<0.01),同时,LC3蛋白绿色荧光强度明显减弱,细胞中Beclin-1蛋白表达水平下降(P<0.01),P62蛋白表达水平升高(P<0.01),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ下调(P<0.01)。结论:干扰肿瘤相关巨噬细胞中PAG1表达可改变放射抗拒人喉鳞癌细胞自噬状态,增强放射抗拒人喉鳞癌细胞的放射敏感性,诱导放疗后细胞凋亡发生。     

胶质瘤中hTFERT、VEGF表达及其与肿瘤血管形成的关系

目的 探讨胶质瘤中端粒酶逆转录酶(hTERT)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达与肿瘤血管形成问的相互关系.方法 分别用原位杂交和免疫组化染色检测106例胶质瘤hTERT和VEGF的表达;用CD34标记瘤组织血管内皮细胞,测定微血管密度(MVD).结果 hTERT、VEGF总阳性表达率分别为53.8%(57/106)、68.0%(72/106);hTERT或VEGF阳性分别定位于肿瘤细胞核内和细胞质内.hTERT阳性或VEGF阳性的瘤组织MVD分别为71.2±18.0和74.4±20.0;而相应的阴性组分别为60.3±21.8和58.4±23.1,两组差异均有显著性(P＜0.01).hTERT、VEGF的表达和MVD均与胶质瘤组织病理分级呈正相关(P＜0.01).结论 hTERT、VEGF的表达及MVD均与胶质瘤的恶性程度有关,前两者阳性表达,其MVD高于两者阴性表达,说明hTERT、VEGF在肿瘤血管形成中可能起促进作用.     

胶质瘤细胞的自分泌或旁分泌因子对肿瘤增殖的调控作用

目的 探讨胶质瘤微环境中的多种肿瘤自分泌/旁分泌因子对肿瘤细胞增殖的调控作用。方法 应用PubMed、CNKI及谷歌学术数据库以“胶质瘤”“自分泌/旁分泌”“肿瘤增殖”为关键词,查阅2004年1月—2016年5月国内外文献,就胶质瘤自分泌/旁分泌中的多种因子与胶质瘤细胞增殖之间的关系进行归纳总结。结果 胶质瘤微环境中,生长因子、细胞因子、趋化因子、非肽类因子、甾体激素等多种因子参与了肿瘤自分泌/旁分泌的信号环路,调控胶质瘤细胞增殖、侵袭、扩散等多种生物学活动。结论 对胶质瘤微环境中的自分泌/旁分泌的机制研究,为胶质瘤的发病机制研究以及临床诊断和治疗提供了新的途径。     

FABP-5基因沉默对人胶质瘤细胞增殖、侵袭、凋亡及肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+表达的影响

文章快速阅读：文题释义： 表皮型脂肪酸结合蛋白5：是在表皮细胞中发现的脂肪酸结合蛋白,其分子质量为15 ku,在肿瘤发生及发展中发挥关键的作用。肿瘤相关的上皮细胞黏附分子可以使FABP-5基因表达上调,高表达FABP-5基因的肿瘤细胞通过脂肪酸代谢产物影响细胞的信号转导功能。 肿瘤干细胞：肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞的细胞。传统观念认为,肿瘤是由体细胞突变而成,每个肿瘤细胞都可以无限制地生长,但这无法解释肿瘤细胞似乎具有无限的生命力以及并非所有肿瘤细胞都能无限制生长的现象。肿瘤细胞生长、转移和复发的特点与干细胞的基本特性十分相似,因此,有学者提出肿瘤干细胞的理论,这一理论为重新认识肿瘤的起源和本质提供了新的方向和视觉角度。 摘要 背景：已有研究表明,FABPs在多种恶性肿瘤,包括乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、膀胱上皮癌都有不同程度的表达,与恶性肿瘤的发生、转移、侵袭和抗药性关系密切。 目的：探讨沉默FABP-5基因表达对人胶质瘤细胞U251增殖、侵袭、凋亡的影响。 方法：以人胶质瘤细胞U251细胞为研究对象,根据FABP-5 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,瞬时转染U251细胞。将人胶质瘤细胞U251分为3组：FABP-5-shRNA组加入Lv-shRNA-FABP-5,阴性对照组加入LV-shRNA-NC,空白对照组仅行常规培养。RT-PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平检测FABP-5的表达,CCK-8法测定细胞体外增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及肿瘤干细胞标志物CD44⁺CD133⁺的表达,TUNEL染色检测细胞凋亡。 结果与结论：①与阴性对照组和空白对照组比较,FABP-5-shRNA组的FABP-5 mRNA和蛋白表达明显下降;②与阴性对照组和空白对照组比较,FABP-5-shRNA组细胞生长速度明显减慢,细胞周期阻滞在G₀/G₁期,S期细胞数减少;肿瘤干细胞标志物CD44⁺CD133⁺的表达比例亦显著降低(P < 0.05);③与阴性对照组和空白对照组相比,FABP-5-shRNA组细胞凋亡率明显升高(P < 0.01),增殖、侵袭力显著下降(P < 0.05);④结果表明,FABP-5基因可能直接或间接地参与到胶质瘤细胞周期的调控和凋亡过程,其基因的表达水平改变与肿瘤细胞侵袭力关系密切。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程 ORCID: 0000-0002-2849-8117(刘海鹏)     

MCF7细胞中肿瘤干细胞的增殖特征

背景：肿瘤干细胞学说认为,肿瘤干细胞是肿瘤不断增殖的根源,并与肿瘤的浸润转移、耐药现象密切相关。 目的：在单细胞水平研究体外传代培养的MCF7细胞中肿瘤干细胞含量变化规律,认识肿瘤干细胞在体外培养环境下的增殖特点。 方法：利用单细胞分离种植-成瘤性克隆方法对传代培养后不同时间点MCF7细胞中肿瘤干细胞的比例连续检测,流式细胞仪同步检测相应细胞样本中CD44⁺CD24^-/low亚群的含量变化。 结果与结论：传代后培养的MCF7细胞在不同时间点其肿瘤干细胞比例及CD44⁺CD24^-/low亚群比例均呈现有规律的变化。但CD44⁺CD24^-/low亚群变化更为显著(36.84%到81.95%),而肿瘤干细胞含量仅在小范围波动(38.54%~47.39%)。结果提示传代培养的MCF7细胞中,肿瘤干细胞具有通过调节自身增殖来保持其比例相对稳定的特点;CD44⁺CD24^-/low亚群并不代表或者富集MCF7细胞株中的肿瘤干细胞亚群。     

人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中肿瘤干细胞的培养分化及增殖侵袭能力分析

BACKGROUND: There is a certain cell subset in esophageal cancer tissues, with certain invasive and metastatic properties, which is closely related to the clinical therapeutic effect on tumors. OBJECTIVE: To isolate tumor stem cell spheres in human esophageal carcinoma cell lines KYSE-150 and TE-1 and to analyze their proliferation and invasion ability. METHODS: KYSE-150 and TE-1 cells were cultured in serum-free medium to observe the formation of cell spheres. Cell proliferation and invasion were detected using MTT and Transwell chamber culture. Surface markers of cells were detected using flow cytometry. RESULTS AND CONCLUSION: Cell spheres that were stably subcultured were obtained from KYSE-150 and TE-1 cells cultured in serum-free medium. The proliferation and invasion abilities of cell spheres were significantly stronger than those of parent cells (P < 0.05). The number of CD44+, CD271+ and CD44+CD271+ cells in TE-1 and KYSE-150 cell spheres was significantly higher than that in the TE-1 and KYSE-150 parent cells (P < 0.05). These experimental results show that cell spheres isolated from human esophageal carcinoma cell lines TE-1 and KYSE-150 have tumor stem cell properties as well as strong proliferation and invasion abilities. And moreover, CD44 and CD271 can be used as important surface markers of esophageal carcinoma stem cells.      

结直肠腺癌组织中CD44+/Oct4+癌干细胞的形态及分布

背景：越来越多的证据显示CD44可作为结直肠腺癌干细胞的一个特异性的标志物,近年发现胚胎干细胞转录因子Oct4在结直肠腺癌中有表达。 目的：观察CD44⁺/Oct4⁺细胞在原发性结直肠腺癌组织中的数量、位置及分布方式。 方法：取108例结直肠腺癌、18例癌旁正常肠黏膜组织及18例伴不典型增生的结直肠腺瘤标本制成48点共3块组织芯片,应用免疫组织化学双重染色和苏木精-伊红染色,定位CD44⁺/Oct4⁺肿瘤细胞,观察计数并在苏木精-伊红切片的对应位置上观察其形态特征。 结果与结论：免疫组织化学双重染色结果显示,癌旁正常肠黏膜中未见CD44⁺/Oct4⁺细胞,在伴不典型增生的腺瘤中可见极少量CD44⁺/Oct4⁺细胞,结直肠腺癌中可见到少量CD44⁺/Oct4⁺细胞。双阳性细胞主要分布在腺管样结构基底膜侧或共壁腺体的共壁侧,呈小灶状或散在点状分布;细胞呈卵圆形或立方状,胞浆稀少,胞核规则,均质深染,呈卵圆形或高柱状。其数量与结直肠癌分化程度呈负相关(r=-0.579,P < 0.01),与肿瘤浸润深度有一定关联(r=0.236,P < 0.05)。结果提示CD44⁺/Oct4⁺细胞可能是结直肠腺癌干细胞。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

CD44+/C-myc+癌干细胞在结直肠肿瘤中表达及与预后的关系

背景：肿瘤复发的原因是具有自我更新特性的肿瘤干细胞未能彻底清除,于是如何标记并消灭肿瘤干细胞成为治疗肿瘤的关键所在。目的：观察结直肠癌组织中CD44⁺/C-myc⁺细胞的形态分布及数量,并探讨其表达与患者肿瘤复发转移的关系。方法：选取150例结直肠腺癌患者的病理组织制成组织芯片,采用免疫组化双重染色观察并计数CD44⁺/ C-myc⁺细胞,并与正常组织、腺瘤组织比较。使用手机、书信等方式对患者进行随访,统计患者的复发转移与CD44⁺/C-myc⁺细胞表达的关系。结果与结论：CD44⁺/C-myc⁺细胞在正常组织中无分布,在腺瘤组织中极少散在分布,在腺癌组织中少量单个点状或灶性分布,双阳细胞数量与腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P < 0.05)。单因素分析患者腺癌的总生存率、无进展生存率均与双阳性细胞数量、淋巴结有无转移、Ducks分期有关(P < 0.05),多因素分析患者的总生存率与双阳性细胞数有关,无进展生存率与双阳性细胞数及Ducks分期有关。结果表明结直肠组织中CD44⁺/C-myc⁺细胞极有可能为腺癌干细胞;Ducks分期、CD44⁺/C-myc⁺细胞的数量是影响患者预后的重要因素。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：