5-FU耐药免疫组化技术与MTT法敏感性比较

目的:探讨结肠癌对5-氟脲嘧啶(5-FU)产生耐药的机理,从细胞培养水平进一步论证胸苷酸合成酶(TS)对5-FU化疗产生耐药的影响,揭示不同TS蛋白表达水平的结肠癌患者对5-FU治疗的敏感性.方法:应用MTT法对体外培养的30例结肠癌细胞进行5-FU药敏试验,再应用SP免疫组化法对30例结肠癌进行TS检测,然后将两个试验结果进行比较;另采用SP法检测60例结肠癌组织切片及其正常对照组切片中TS蛋白的表达情况.结果:TS高表达组体外培养的结肠癌细胞对5-FU的敏感性明显低于TS低表达组.正常结肠粘膜组织中的TS表达水平高于结肠癌组织,结肠癌组织中TS表达水平与5-FU化疗患者的预后呈负相关,与患者的性别、有无淋巴结转移及癌组织的分化程度无关.结论:TS蛋白表达程度的高低对临床结肠癌患者化疗药物的选择有一定的指导意义:结肠癌组织中TS蛋白的表达水平可作为患者对5-FU为主的化疗疗效及预后的判断指标.     

术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌组织中血小板衍生的内皮细胞生长因子表达的影响

目的检测术前区域动脉灌注化疗,以及行根治手术后结直肠癌组织中PD-ECGF蛋白的表达水平.探讨术前区域动脉灌注化疗对肿瘤组织中PD-ECGF蛋白表达及肿瘤血管生成的影响.方法通过免疫组织化学方法,测定术前区域动脉化疗后30例结直肠癌组织中PD-ECGF的表达水平,并与同期未行术前动脉化疗的31例结直肠癌组织作比较.结果术前动脉化疗组的肿瘤组织中PD-ECGF的表达较对照组低,差异有显著性(P＜0.05).患者的性别、年龄、肿瘤的大体病理类型、部位、大小、分化程度与Dukes分期等临床病理因素对PD-ECGF的表达差异均无显著性.结论结直肠癌术前区域动脉灌注化疗可能通过抑制肿瘤细胞分泌PD-ECGF蛋白,从而减少肿瘤的血管生成及肿瘤细胞的供氧,改善结直肠癌患者的治疗效果和预后.     

p62在NSCLC组织中的表达及其与化疗效果的关系

目的 探讨自噬相关蛋白p62在非小细胞肺癌患者中的表达及其与化疗效果的关系.方法 选择60例确诊为NSCLC并接受联合化疗患者,并选择同期诊断为肺部良性疾病60例患者的外周血标本作为对照,采用免疫组化检测各组织标本中p62表达,ELISA检测患者外周血p62水平.结果 ①与对照组相比,NSCLC组p62高表达,化疗前后NSCLC患者外周血p62表达量及阳性表达率存在显著差异(P<0.05);②化疗有效者与无效者p62阳性率存在显著差异(P<0.05).结论 自噬相关蛋白p62在非小细胞肺癌呈高表达,且p62表达与NSCLC化疗效果有关,可作为NSCLC肿瘤指标及预测因子之一.     

microRNA-21表达水平与胃癌患者新辅助化疗敏感性的研究

目的:探讨microRNA-21表达水平与胃癌患者新辅助化疗敏感性的关系。方法:选择新疆医科大学第三临床医学院（附属肿瘤医院）消化内科2016年1月到2018年1月就诊胃癌患者90例,按照化疗治疗结果分为敏感组及非敏感组。所有患者按照SOX方案进行化疗,21 d为一个周期,持续治疗4个周期,所有患者均在化疗后1个月进行手术治疗,并在术中获得组织标本。检测患者癌变组织及正常胃部上皮组织中miR-21表达水平,统计不同临床病理特征患者中癌变组织miR-21表达水平,检测化疗前后敏感组及非敏感组患者癌变组织中miR-21表达水平。结果:胃癌患者癌变组织中miR-21水平为4.68±0.49,明显高于正常胃部组织中miR-21水平（3.35±0.37）（P＜0.05）;患者在不同分化程度、T分期、N分期上miR-21表达水平有差异（P＜0.05）;化疗后,两组患者miR-21表达水平均降低（P＜0.05）;化疗前后,敏感组miR-21表达水平均低于非敏感组（P＜0.05）。结论:microRNA-21低表达水平患者采用SOX新辅助化疗效果更好。     

自噬相关蛋白ATG4A在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的 探究ATG4A蛋白及mRNA在卵巢癌组织中的表达情况及临床意义。方法 收集71例卵巢癌患者作为研究对象，使用Western-blot法检测ATG4A蛋白表达情况，使用RT-PCR技术检测ATG4A mRNA表达水平；分析ATG4A与卵巢癌临床病理参数、化疗效果和患者预后的关系。结果 卵巢癌组织中ATG4A蛋白及ATG4A mRNA表达明显高于癌旁组织(P<0.001)。ATG4A表达水平与患者肿瘤分期、有无淋巴结转移及肿瘤分化程度相关(P<0.05);化疗获得CR、PR的患者癌组织中ATG4A表达量显著低于PD患者(P<0.05);ATG4A高表达患者生存率明显低于低表达患者(P<0.05)。结论 卵巢癌组织中ATG4A表达升高，且与患者肿瘤分期、淋巴结转移、分化程度、患者化疗效果及预后相关，可能可以作为卵巢癌化疗效果及预后的相关评估指标。     

5-FU耐药免疫组化技术与MTT法敏感性比较

目的：探讨结肠癌对5-氟脲嘧啶(5-FU)产生耐药的机理，从细胞培养水平进一步论证胸苷酸合成酶(TS)对5-FU化疗产生耐药的影响，揭示不同TS蛋白表达水平的结肠癌患者对5-FU治疗的敏感性。方法：应用MTT法对体外培养的30例结肠癌细胞进行5-FU药敏试验，再应用SP免疫组化法对30例结肠癌进行TS检测，然后将两个试验结果进行比较；另采用SP法检测60例结肠癌组织切片及其正常对照组切片中TS蛋白的表达情况。结果：TS高表达组体外培养的结肠癌细胞对5-FU的敏感性明显低于TS低表达组。正常结肠粘膜组织中的TS表达水平高于结肠癌组织，结肠癌组织中TS表达水平与5-FU化疗患者的预后呈负相关，与患者的性别、有无淋巴结转移及癌组织的分化程度无关。结论：TS蛋白表达程度的高低对临床结肠癌患者化疗药物的选择有一定的指导意义；结肠癌组织中TS蛋白的表达水平可作为患者对5-FU为主的化疗疗效及预后的判断指标。     

XIAP在宫颈鳞状细胞癌中表达及动脉介入化疗对其的影响

目的 探讨X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）在宫颈鳞状细胞癌中表达的意义及动脉介入化疗对宫颈鳞状细胞癌（XIAP）表达的影响。方法 选取50例宫颈鳞癌患者介入化疗前后宫颈组织,以30例正常宫颈组织为对照,采用免疫组化染色SP法检测XIAP表达水平的变化,采用DNA缺口原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡指数（AI）。结果 XIAP在宫颈鳞癌细胞的表达明显高于正常宫颈组织(P<0.05),且在低分化癌组织中表达明显高于高、中分化癌组织,Ⅲ期鳞癌明显高于Ⅱ期(P<0.05),介入化疗前XIAP表达水平明显高于介入化疗后(P<0.05),而介入化疗前AI明显低于介入化疗后(P<0.05)。结论 XIAP在宫颈鳞状细胞癌的发生发展中起着重要作用,动脉介入化疗可能通过有效下调XIAP表达,从而诱导宫颈鳞癌细胞凋亡。     

胃癌组织中 survivin 表达与新辅助化疗疗效的相关性研究

目的 观察以替吉奥为基础的新辅助化疗前后胃癌组织中 survivin 蛋白的表达水平,探讨 survivin 蛋白在进展期 胃癌的表达与胃癌新辅助化疗的关系。方法 对 60 例内镜诊断明确的进展期胃癌患者进行以替吉奥为基础的新辅助化疗及 化疗后的手术治疗,根据胃癌患者病理学改变对新辅助化疗后患者手术标本进行疗效判定,将病例分成化疗有效组和化疗 无效组。通过病理检测化疗前内镜诊断标本及新辅助化疗后手术切除组织后 survivin 的表达水平,进而分析化疗前后胃癌 组织中 survivin 蛋白表达与以替吉奥为基础的新辅助化疗效果的关系。结果 有效组病例新辅助化疗前 survivin 表达水平明 显低于无效组,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）;新辅助化疗后所有病例 survivin 表达水平均较新辅助化疗前升高,差异 有统计学意义（P ＜ 0.05）;新辅助化疗后 survivin 表达变化值在有效组和无效组差异不具有统计学意义（P ＞ 0.05）。结 论 胃癌患者 survivin 低表达,可能是患者对以替吉奥为基础的化疗敏感,化疗疗效好,行以替吉奥为基础的新辅助化疗后 survivin 表达水平升高,可能与胃癌化疗耐药相关,可能降低化疗效果;检测 survivin 表达水平可帮助预测胃癌对以替吉奥 为基础的新辅助化疗的敏感性。     

DEK原癌基因在新辅助化疗前后宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的:检测DEK原癌基因在新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NACT)前后宫颈癌组织中表达的差异,为宫颈癌新辅助化疗寻找新的评价化疗疗效及预测敏感性的指标。方法:采用免疫组织化学方法检测DEK在30例Ⅰb2-Ⅱa期患者宫颈鳞癌组织中的表达,其中新辅助化疗前宫颈鳞癌组织30例,同一患者新辅助化疗后组织30例。结果:30例宫颈鳞癌组织中23例对NACT有反应,其中5例为临床完全缓解(5/30,16.7%),18例为部分缓解(18/30,60.0%),总有效率为(23/30,76.7%),7例为病情进展或稳定的无效病例(7/30,23.3%)。宫颈癌患者化疗后DEK在组织中的表达低于化疗前,差异有统计学意义(P=0.021)。NACT有效者DEK的表达强于无效者,差异有统计学意义(P=0.003)。结论:DEK与化疗疗效及敏感性显著相关,可作为评价化疗疗效和预测化疗敏感性的指标。     

宫颈癌组织中OPN和HIF-1α的表达及其与新辅助化疗敏感度的关系北大核心CSCD

目的探讨新辅助化疗前、后宫颈癌组织OPN mRNA与HIF-1αmRNA的表达变化,分析其作为宫颈癌新辅助化疗敏感度预测因子的可能性。方法采用实时荧光定量PCR法检测20例宫颈癌患者新辅助化疗前、后组织中OPN mRNA与HIF-1αmRNA的表达水平。结果宫颈癌患者新辅助化疗后组织中OPN mRNA与HIF-1αmRNA的表达水平明显下降(P<0.05)。新辅助化疗有效组化疗前、后组织中OPN mRNA与HIF-1αmRNA表达水平均明显低于无效组(P=0.016,P=0.001)。结论宫颈癌患者组织中OPN mRNA与HIF-1αmRNA的表达水平与化疗的敏感性及临床疗效关系密切,可作为宫颈癌新辅助化疗敏感度的重要预测因子。     

STMN 1m RNA在非小细胞肺癌中的表达与紫杉醇类药物化疗效果和患者生存率的关系

目的：RT－PCR法检测STMN1 mRNA在非小细胞肺癌石蜡组织中的表达与患者紫杉醇治疗疗效以及生存率的关系。方法：RT－PCR法检测135例非小细胞肺癌及20例正常肺组织中STMN1 mRNA的表达,探讨STMN1 mRNA表达水平与紫杉醇类药物化疗效果的关系。通过随访STMN1 mRNA不同表达水平的患者,探讨STMN1 mRNA表达水平与患者生存率的关系。结果：STMN1 mRNA表达水平在肺癌组织中显著高于正常肺组织（P＝0．021）。STMN1 mRNA低表达患者无进展生存期为13．0个月,而高表达者为8．0个月（P＝0．037）。紫杉醇类化疗方案在STMN1 mRNA 高表达组中的疗效显著低于 STMN 1 mRNA 低表达组（P＝0．028）,而在无紫杉醇类化疗患者中,两组之间疗效评价差异没有显著性（P＝0．912）。结论：STMN1 mR-NA在肺癌组织中高表达。STMN1 mRNA高表达与较短的生存期相关,STMN1 mRNA表达水平与紫杉醇类药物化疗效果有关。mRNA高表达组的患者化疗疗效较差,提示STMN1 mRNA高表达对紫杉醇耐药。     

新辅助化疗对进展期乳腺癌患者 CD46表达影响及临床预后预测意义的研究

目的：探讨CD46在进展期浸润性乳腺癌及正常乳腺组织中的表达水平,并分析其与乳腺癌患者新辅助化疗疗效的关系,探讨其在乳腺癌新辅助化疗预后评估方面的预测价值。方法采用免疫组化的方法检测60例浸润性乳腺癌组织及30例正常乳腺组织标本CD46的表达,并分析该表达与新辅助化疗疗效的关系,采用生存分析预测CD46表达对患者预后的意义。结果乳腺癌组织CD46阳性率明显高于正常乳腺组织（81．67％vs．46．67％,P＜0．05）;新辅助化疗后,CD46表达阳性率明显下降（P＜0．05）,CD46表达阳性率与患者化疗疗效呈负相关关系（P＜0．05）;CD46阳性表达提示患者的生存预后较差,浸润程度、有无淋巴结转移、CD46表达是乳腺癌新辅助化疗技术有效与否的独立影响因素（ P＜0．05）。结论乳腺癌患者的CD46表达高于健康者,与新辅助化疗技术的临床疗效呈负相关,CD46阳性表达率升高对患者较差的预后具有一定的预测价值。     

PARP-1表达与晚期卵巢癌组织血管生成及新辅助化疗耐药的关系研究

目的 探讨晚期卵巢癌组织中聚腺苦酸二憐酸核糖聚合酶(PARP-1)的表达与血管生成及新辅助化疗敏感性的相关性.方法 选取恶性卵巢癌患者76例、良性卵巢癌患者21例及健康对照组15例,采用RT-PCR及免疫组化法,测定三组研究对象的PARP-1及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平;在恶性卵巢癌患者经过3个疗程的化疗后评定其化疗敏感性及化疗效果,并分析化疗敏感性及有效性与PARP-1的表达的相关性.结果 在恶性卵巢癌组织中,PARP-1及VEGF均呈高表达,且二者呈正相关关系(γ=0.3460,P=0.0022;γ=0.5469,P＜0.0001);在化疗敏感及有效的患者中,PARP-1也呈高表达(P＜0.05);PARP-1的表达水平对晚期卵巢癌患者的化疗敏感及有效均具有较高的灵敏度和特异度(80.95％和64.71％;94.12％和66.10％).结论 在晚期卵巢癌患者中,PARP-1呈高表达状态,下调PARP-1的表达可以提高患者的化疗敏感性,PARP-1可以作为预测患者化疗敏感的生物标志物.     

MDRI基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测多药耐药基因MDR1 mRNA在卵巢癌组织中的表达及其临床应用价值。方法 选择卵巢癌组织30例、卵巢良性肿瘤组织30例、正常卵巢组织30例。采用RP－PCR复合定量技术检测卵巢癌组织中的耐药相关基因MDR1 mRNA的表达水平及分析其表达与临床化疗的相关性。结果 正常卵巢组织不表达MDR1基因;卵巢良性肿瘤组织MDR1基因表达率为10．0％;卵巢癌组织表达率为73．3％,其中高表达率占77．3％。卵巢癌组织中MDR1基因表达与卵巢良性肿瘤的比较,有非常显著性差异（P＜0．01）。卵巢癌术前化疗组MDR1基因表达率为83．3％;术前末化疗组MDR1基因表达率为58．3％,2组比较无显著性差异（P＞0．05）。定量分析表明化疗可以诱导MDR1基因表达水平增高,与非化疗组比较有非常显著性差异（P＜0．01）。结论 MDR1基因表达与卵巢癌有关。MDR1表达与卵巢癌化疗与否无关,但化疗可诱导MDR1基因表达水平增高。因此检测MDR1基因表达水平的变化可以预测继发耐药性。在判断卵巢癌临床用药时,检测MDR1耐药相关基因的表达情况可得到一定的耐药信息,对临床化疗方案的制定有较大的应用价值。     

恶性肿瘤外周血P-gp表达阳性的逆转治疗临床观察

目的:通过检测恶性肿瘤患者P-糖蛋白(P-gp)在外周血的表达情况,研究其相关药物逆转治疗作用及效果.方法:采用免疫组化SP法检测67例肿瘤患者化疗前后外周血P-gp的表达情况的变化.结果:P-gp表达阳性强度下降者实验组与对照组分别为18/37及7/30,两组有显著差异(P＜0.05);在可评价疗效的40例病例中,实验组与对照组化疗有效率分别为66.67%(14/21)及31.58%(6/19),有统计学差异(P＜0.05).结论:修饰剂可能部分逆转P-gp的过分表达而提高化疗疗效,值得临床化疗过程中进一步研究.     

结直肠癌组织中ERCC1蛋白的表达及其与铂类化疗疗效的关系

目的 探讨核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)蛋白在结直肠癌组织中的表达及其与铂类化疗疗效的关系.方法 采用免疫组化法检测结直肠癌组织中ERCC1蛋白的表达,所有入组患者术后均给予含奥沙利铂的方案辅助化疗,并且随访4年以上.结果 结直肠癌组织中ERCC1蛋白阳性表达率为42.6%,低于两对照组(P<0.01);ERCC1蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤局部浸润、淋巴结转移及TNM分期无关,但与组织病理学分级有关;ERCC1蛋白阴性患者术后经含奥沙利铂的方案化疗后生存期高于阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05);Cox回归分析显示ERCC1蛋向表达为结直肠癌患者的独立预后因子.结论 ERCC1蛋白阴性患者应用含奥沙利铂的方案化疗可获得生存获益,ERCC1蛋白表达水平有可能作为指导结直肠癌患者术后化疗方案选择及预后判断的指标.     

P-糖蛋白在肺癌中的表达及其临床意义

目的　探讨肺癌组织P糖蛋白(Pgp)的关系,以及复发肺癌与化疗效果的关系。　方法　采用免疫组织化学方法检测51例肺癌标本中的Pgp表达水平。　结果　51例肺癌组织中有20例Pgp表达阳性,阳性率为392%。Pgp表达与肺癌组织学类型无关,而在吸烟者与不吸烟者之间,有显著差异,但与吸烟史长、短无关。29例肺癌患者5年无瘤生存率与Pgp表达无关。15例复发肺癌患者接受联合化疗,Pgp阳性病例疗效较阴性者为差。　结论　Pgp表达与肺癌患者吸烟史有关;Pgp阳性患者化疗效果较差     

敲减MAC30通过PI3K/AKT抑制人乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡

目的:探讨MAC30在乳腺癌中的作用和机制。方法:使用慢病毒介导的Lenti-shRNA来沉默乳腺癌细胞MCF7和MDA-MB-231中MAC30的表达，并通过Western Blot检测相关蛋白的表达；采用CCK8法检测细胞增殖；Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡。结果:MAC30的表达下调后乳腺癌细胞的增殖率减少且凋亡率增加，通过Western Blot，发现MAC30 敲低后p-AKT，Cyclin D1和Bcl-2的表达明显下降，而BAX的表达增高。结论:敲减MAC30的表达后，可以明显抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡，而MAC30可能是通过PI3K/AKT信号通路来调控乳腺癌的发生发展过程。因此，MAC30可能是一个治疗乳腺癌的潜在治疗靶点。     

外周血单个核细胞中Nrf2mRNA表达水平与化疗后骨髓抑制程度的相关性分析

目的:探讨肿瘤患者化疗前外周血有核细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)mRNA表达水平的个体差异与化疗所致骨髓抑制程度的相关性.方法:采用半定量RT-PCR法检测30例肿瘤患者化疗前外周血有核细胞中Nrf2 mRNA的表达水平,并分析其与肿瘤患者化疗后骨髓抑制程度的相关性.结果:肿瘤患者化疗前外周血单个核细胞中Nrf2 mRNA表达水平存在明显的个体差异;其在化疗后发生0～1度白细胞或中性粒细胞减少患者中的表达水平明显高于2～4度的患者(P＜0.05),但与患者的年龄、性别、治疗方案及肿瘤类型等无相关性.相关性分析表明,外周血单个核细胞中Nrf2 mRNA的表达水平与白细胞减少(r=-0.448,P=0.013)和中性粒细胞减少(r=-0.493,P=0.006)呈显著负相关.结论:化疗前外周血单个核细胞中Nrf2 mRNA表达水平与化疗所致骨髓抑制具有相关性,因此,其可能成为一种预测化疗所致骨髓抑制程度的理想标志物,用于指导临床方案的选择及骨髓抑制的早期防治.     

拓扑异构酶Ⅱ在化疗后患者骨肉瘤组织中的表达及其意义

目的 探讨DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）在化疗后患者骨肉瘤组织中的表达.方法 对30例骨肉瘤患者术前进行2个疗程化疗,手术切除肿瘤组织,通过免疫组织化学法检测骨肉瘤组织中TopoⅡ的表达,分析其与临床病理因素的关系.结果 30例骨肉瘤组织中TopoⅡ阳性表达8例（26.7％）.TopoⅡ蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤的恶性程度、发生部位、有无转移及Enneking分期均无关（P＞0.05）,21例生存患者中,TopoⅡ蛋白阴性18例,9例死亡患者中,TopoⅡ蛋白阴性4例,二者阴性表达率差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 TopoⅡ低表达的骨肉瘤患者可能预后较差.