PKA对跨膜型和分泌型TNF-α胞毒效应的影响

目的:研究PKA对跨膜型TNF-α(mTNF-α)和分泌型TNF- α (TNF-α)杀瘤效应的影响.方法:用TNF生物活性检测方法在体外观察PKA激活剂和抑制剂对二型TNF- α杀伤不同肿瘤细胞的影响. 结果:PKA激活剂Forskolin(10 μmol/L)和抑制剂H8(15 μmol/L) 可分别增强和抑制sTNF-α对其敏感靶细胞的胞毒活性,对其余4株耐受靶细胞却无逆转作用 ,而且对mTNF-α的胞毒效应无任何影响.此外,PKA活性增强,可使sTNF-α介导靶细胞的死亡方式发生改变,即坏死比例减少,凋亡比例增加. 结论:PKA仅参与sTNF-α胞毒作用的信号传导,与mTNF-α无关; 且与sTNF-α介导靶细胞凋亡有关.     

TNF—α的细胞毒效应及其信号传导

ＴＮＦ－α是一类具有多种生物学活性的细胞因子，其存在两型，即分泌型ＴＮＦ和跨膜型ＴＮＦ。ＴＮＦ－α自发现以来受到广泛重视，就其作用机制研究很多，但尚无定论。本文仅就ＴＮＦ介导的细胞毒作用的受体和胞内信号传递机制，靶细胞的死亡类型，不同靶细胞对ＴＮＦ反应差异的分子机制及两型ＴＮＦ介导的细胞毒效应差异等作一综述。     

跨膜型和分泌型TNF—α对TNF受体作用的比较

用可溶性ＴＮＦＲ预先与ｍＴＮＦα或ｓＴＮＦα温育可明显抑制两型ＴＮＦ随后的胞毒效应；用ｓＴＮＦ封闭靶细胞的ＴＮＦＲ可抑制随后ｓＴＮＦ对之的胞毒效应，却不能影响ｍＴＮＦ的作用。提示ｍＴＮＦ与ｓＴＮＦ一样是依赖ＴＮＦＲ发挥作用的，但二者与ＴＮＦＲ结合位点不同。比较两型ＴＮＦ对表达不同类型ＴＮＦＲ靶细胞的胞毒效应，对ｓＴＮＦ敏感的靶细胞主要表达ＴＮＦＲＩ，而ｍＴＮＦ则对表达Ⅰ型和／或Ⅱ型ＴＮＦＲ的靶细胞均有杀伤作用。抗ＴＮＦＲ抗体与ｍＴＮＦ相似，可杀伤对ｓＴＮＦ耐受肿瘤细胞系；将其预先与靶细胞作用并不能封闭ｍＴＮＦ的杀瘤效应，提示二者与ＴＮＦＲ结合位点不同，但可能有相似的信号传导     

跨膜型与分泌型TNF对中性粒细胞功能的影响

目的比较跨膜型和分泌型TNF-α对中性粒细胞生物学功能影响的异同,以探讨两型TNF在炎症中的作用。方法通过吞噬、呼吸爆发、原位杂交等方法研究跨膜型和分泌型TNF-α对中性粒细胞生物学功能的影响。结果分泌型TNF-α可促进中性粒细胞吞噬(P<0.001)、呼吸爆发功能(P<0.05)及IL-1βmRNA水平的表达,对中性粒细胞产生NO无明显影响;跨膜型TNF-α对中性粒细胞吞噬、呼吸爆发功能无明显影响,对IL-1βmRNA水平的表达仅有微弱的促进作用,但可明显促进中性粒细胞产生NO。结论分泌型TNF-α对中性粒细胞有明显的激活作用,而跨膜型TNF-α则可能对其功能具有调节作用。     

TNF—α诱导分泌型IL—1和膜型IL—1生成的实验研究

本实验应用丙酸杆菌和内毒素引起的肝坏死模型研究了肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα），分泌型白细胞介素１（ｓＩＬ－１）和膜型白细胞介素１（ｍＩＬ－１）在肝坏死形成中的相互作用。其结果：①枯否细胞培养上清液中的ＴＮＦα、ｓＩＬ－１和枯否细胞的ｍＩＬ－１活性较对照组明显增高。ＴＮＦα首先增高，随之为ｍＩＬ－１，最后为ｓＩＬ－１。②ＴＮＦα可以诱导ｓＩＬ－１和ｍＩＬ－１生成。③未发现ＩＬ－１诱导ＴＮＦα生成的作用     

跨膜型和分泌型肿瘤坏死因子α对内毒素性休克肝的影响及意义

目的：探讨分泌型（S）和跨膜型（TM）肿瘤坏死因子α（TNF－α）对内毒素性休克肝的影响及意义。方法：首先使用埃氏大肠杆菌死菌液制备大鼠内毒素性休克模型;并分不同时间点检测血清中的S－TNF－α、腹腔巨噬细胞表面上的TM－TN－α;然后,在给大鼠注射死菌液之前30min,注射TNF－α转化酶（TACE）反义寡核苷酸（5mg/kg);6h后分别检测S－TNF－α、TN－TNF－α水平;检查肝脏的病理改变,并监测各组大鼠的血压变化。结果：在内毒素性休克过程中,TM－TNF－α表达的动态变化不同于S－TNF－α,TM－TNF－α在注射菌液30min后开始升高,4．5h达最高峰,随后有所下降,但一直维持在较高水平。TACE反义寡核苷酸有能有效地抑制TM－TNF－α转化为S－TNF－α,使腹腔巨噬细胞表面上的TM－TNF－α表达明显增高（P＜0．001）,使血压维持在正常水平,肝脏未见病理改变。结论：内毒素性休克的病理过程主要与S－TNF－α有关,而TM－TNF－α则可抵抗内毒素的攻击,稳定血压,限制炎症反应及保护肝组织免受损伤,此研究为临床治疗休克和感染性疾病提供了新的线索和实验依据。     

不同年龄段人血清肿瘤坏死因子—α（TNF—α）值的变化

我们用放免分析测定了不同年龄人血清ＴＮＦ－α值。结果显示，正常新生儿脐血、新生儿、幼儿及成人之间血清ＴＮＦ－α值有显著性差异（Ｐ〈０．０１），共值分别为８．０９±３．３９、１７．０９±３．２９、２４．５３±２．７９、１０．０１±４．１ｐｍｏｌ／Ｌ；新生儿败血症患者血清ＴＮＦ－α值显著高于成人肺炎患者（Ｐ〈０．０１）。结果提示同年龄人血清ＴＮＦ－α值的差异，可能反映了机体免疫状态的差异，从而引起不同     

TNFα对培养的脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的 :探讨肿瘤坏死因子α(TNFα,4× 10 5U/L)对血管内皮细胞增殖的影响。方法 :将传代培养的脐静脉内皮细胞随机分为实验组和对照组两组 ,分别在细胞传代时加入含TNFα(TNFα含量为 4× 10 5U/L)和等量的不含TNFα的培养液 ,通过描绘生长曲线及运用图像分析测定DNA相对含量来观察两组细胞增殖情况。结果 :处理因素作用 3天内实验组细胞增殖快于对照组 ,而 3天后则慢于对照组。结论 :TNFα(4× 10 5U/L)对培养的脐静脉内皮细胞的增殖的影响具有双向性。     

不同方式注射TNFα对正常小鼠胰岛素抵抗的影响

肿瘤坏死因子a（TNFa）是由单枚巨噬细胞系统分泌的一种多方面生物活性的细胞因子。它不仅介导肿瘤细胞溶解，且在物质和能量代谢中也发挥重要作用。本文以空腹血糖胰岛乘积（EGI）作为胰岛素抵抗的定量指标，通过对正常小鼠多种方式静脉注射TNFa，以比较观察TNFa对糖代谢的改变和胰岛素抵抗的发生的影响。材料与方法：TNFa由军事医学科学院提供，用5％BSA溶液配制。昆明小鼠（22～259），雌雄不拘，随机分为低剂量IHg／（kg·h）连续注射织间隔30min一次、高剂量100pg／（kg·h）连续注射组间隔30min一次，和高剂量200pg／（kg’h…     

秋水仙碱对巨噬细胞分泌TNF－α的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌ．）能剂量依赖性地抑制ＬＰＳ刺激的大鼠巨噬细胞（Ｍψ）分泌ＴＮＦ－α。Ｃｏ１的衍生物β－ｌｕｍｉｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ对微管无影响，对ＴＮＦ－α的分泌亦无影响；其他微管抑制剂如长春新碱等亦能抑制Ｍψ分泌ＴＮＦ－α。间接免疫荧光染色和原位杂交法显示，ＬＰＳ能促进微管聚合，并使ＴＮＦ－αｍＲＮＡ及蛋白质表达明显增加；当ＬＰＳ与Ｃｏｌ．联用时，微管解聚，ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达及其蛋白质合成减少，ＴＮＦ－α失去原有的胞浆定位，弥散分布于胞浆。说明ＴＮＦ－α的合成需要完好的微管结构与功能，并提示在生理或病理条件下微管功能的变化可能直接或间接参与对ＴＮＦ－α生物合成的调节。     

LPS和TNF—α诱导血管内皮细胞ICAM—1蛋白表达的比较

目的和方法 采用细胞间免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜扫描技术,研究脂多糖（LPS）和肿瘤坏死因子α（TNF－α）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表面细胞间粘附分子－1（ICAM－1）表达的诱导作用。结果 与内皮细胞表明ICAM－1的基础表达相比,LPS可诱导内皮细胞表面ICAM－1表达在第8－24h显著增加,但第36h有较明显的下降;TNF－α也可诱导内皮细胞表面ICAM－1表达在第8－24h显著增加,并在36h仍维持在较高水平。LPS和TNF－α与内皮细胞ICAM－1表达之间存在剂量反应关系。结论 LPS和TNF－α可诱导血管内皮细胞ICAM－1的表达,但内皮细胞在表达ICAM－1时对LPS的长期刺激可能产生耐受性。     

肿瘤坏死因子—α对中性粒细胞凋亡的影响

细胞凋亡是生物界普遍的生命现象,是由基因控制的细胞自主的有序性的死亡,与临床疾病关系密切。中性粒细胞（ＰＭＮ）是一种主要的炎性细胞,本实验通过光镜、电镜、电泳。流式细胞仪等方法研究了重要的炎性介质肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）对正常和炎症状态下外周血ＰＭＮ凋亡的影响。结果表明,ＴＮＦ－α可以诱导ＰＭＮ凋亡,且与作用时间作用浓度相关,ＰＭＮ的凋亡在炎症微环境中被改变,ＰＭＮ凋亡延迟,对ＴＮＦα反应性下     

TNF—α和IL—8在兔创伤性急性肺损伤中的意义

为探讨肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）和白细胞介素８（ＩＬ－８）在创伤性急性肺损伤（ＡＬＩ）发生发展中的可能作用，采用兔胸部撞击致创伤性ＡＬＩ模型，利用酶联免疫法观察伤后血浆及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＴＮＦ－α及ＩＬ－８含量的变化，辅以动脉血氧分压（ＰａＯ２），肺湿／干比值和病理检查，结果显示：伤后兔出现急性呼吸衰竭，严重肺水肿，肺内大量炎性细胞聚集，浸润；血浆，ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α和ＩＬ－８含     

急性胰腺炎患者血中NO、TNF—α和sTNF—R的水平变化

急性胰腺炎（ＡＰ）常并发全身炎症反应综合征（ＳＩＲＳ）,可发展为脓毒血症、多器官功能障碍综合征（ＭＯＤＳ）乃至死亡。ＳＩＲＳ一般可按“ＳＩＲＳ→脓毒症→严重脓毒血症→脓毒性休克”的形式而演变。ＴＮＦ和ＮＯ均为炎性介质。前者可通过其受体（ｍＴＮＦ－Ｒ）而发挥作用１。但ｓＴＮＦ－Ｒ能与ｍＴＮＦ－Ｒ竞争结合ＴＮＦ－α,而参与免疫调节。后者作为内皮源性舒张因子及神经递质参与免疫防御,但也可引起炎症和免疫介导的组织损伤。为此,我们检测了５４例ＡＰ患者血中ＮＯ、ＴＮＦ－α和ｓＴＮＦ－Ｒ的水平,旨在探讨其…     

婴幼儿轮状病毒肠炎大例IL—8和TNF—α的检测及意义

目的：探讨ＩＬ－８和ＴＮＦ－α在ＲＶ肠炎发病中的作用及临床意义。方法：采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法。结果：ＰＶ肠炎患儿急性期大便ＩＬ－８和ＴＮＦ－α水平与对照组相比显著升高（Ｐ〈０．０１）,恢复期二者迅速下降,但仍高于对照组（Ｐ〈０．０５）。急性期中重症组大例ＩＬ－８和ＴＮＦ－α水平显著高于轻症组（Ｐ〈０．０１）,且大便ＩＬ－８水平和ＴＮＦ－α水平呈显著正相关（Ｐ〈０．０１）。结论：ＩＬ－８和ＴＮＦ     

比较跨膜型和分泌型TNF-α的体内杀瘤效应及其机制

目的比较跨膜型和分泌型TNF-α在体内的抗瘤作用及机制.方法在小鼠接种肿瘤细胞H22第3天,于肿瘤接种部位分别皮下注射插入TNF-α及其突变体基因的质粒DNA(分泌型TNF突变体、跨膜型TNF突变体和野生型TNF-α),观察肿瘤的生长情况,并用TUNEL检测肿瘤细胞是否发生凋亡;用免疫组化检测肿瘤局部淋巴细胞浸润和肿瘤组织表达的Fas和CD44V3.结果TNF-α及其突变体均可被肿瘤细胞有效表达,并都可明显抑制肿瘤的生长(P<0.01),其中跨膜型TNF突变体抑瘤作用最强,可促进肿瘤表达Fas,引起肿瘤细胞发生明显凋亡,同时抑制其表达CD44V3(P<0.01);而分泌型TNF则可诱导肿瘤局部大量淋巴细胞(CD4+、CD8+)浸润(P<0.01),并引起肿瘤组织出血坏死.结论直接注射跨膜型和分泌型TNF-α裸DNA均可在体内有效杀瘤.跨膜型TNF的体内杀瘤机制可能不同于分泌型TNF,前者可直接和通过Fas途径间接诱导瘤细胞凋亡;后者则可能通过募集和激活淋巴细胞发挥抗瘤作用.     

肿瘤坏死因子-α对Graves病甲状腺细胞凋亡的调节

Ｇｒａｖｅｓ病 (ＧＤ)是一种器官特异性自身免疫病 ,肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)参与其病理过程 ,但对ＧＤ甲状腺细胞凋亡的作用尚未见报道。为此 ,本文系统观察ＴＮＦ α对ＧＤ甲状腺细胞凋亡和凋亡相关蛋白Ｆａｓ基因及蛋白表达的影响 ,旨在探讨ＴＮＦ α在ＧＤ发病机理中的作用。甲状腺组织取自ＧＤ手术标本 ,采用原代细胞培养方法。孵育 5ｄ后 ,以含或不含ＴＮＦ α的试验液 (0、1、10、10 2 Ｕ ｍｌ)培养 72ｈ。采用流式细胞术测定甲状腺上皮细胞凋亡和凋亡相关蛋白Ｆａｓ表达阳性率。细胞培养上清液中ｓＦａｓ含量采用ＥＬＩＳＡ法…     

TNF-α对病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的作用及意义

目的：研究病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌细胞凋亡及肿瘤坏死因子(TNT-α)对心肌细胞凋亡的影响和意义。方法：用TUNEL法结合电镜观察VMC小鼠接种病毒后3、5、7、9、15、35天心肌细胞凋亡情况，另外我们用TNF-α及TNT-α单克隆抗体(mAb)干预，以观察TNF-α对VMC心肌细胞凋亡的影响。结果：实验发现VMC各时点凋亡心肌细胞数目较正常对照组明显增加，TNF-α干预能加重心肌细胞凋亡，给予TNF-α mAb中和了体内的TNF-α后，能使心肌细胞凋亡减少。结论：VMC中存在异常的心肌细胞凋亡现象，心肌细胞凋亡可能参与了VMC的发病。TNF-α能诱导VMC心肌细胞凋亡。TNF-α参与VMC的发病可能与其诱导心肌细胞凋亡有关。