肝细胞生长因子对人Tenon's囊成纤维细胞低密度脂蛋白受体表达的影响

目的:探讨人Tenon's囊成纤维细胞(HTFs)在肝细胞生长因子(HGF)刺激下,其低密度脂蛋白受体(LDLr)表达的动态变化。方法:分别以0、10、20、40、80和160μg/L的HGF刺激人Tenon's囊成纤维细胞12、24和48 h;应用MTT法检测HTFs的增殖率;real-time PCR定量分析不同增殖状态的HTFs上LDLr mRNA的表达水平;Western blot法检测不同增殖状态HTFs上LDLr蛋白表达水平的变化。结果:HTFs上LDLr mRNA及蛋白的表达水平均与HTFs的增殖率呈正相关,HGF以时间和浓度依赖的方式促进HTFs的增殖,同时以时间和浓度依赖的方式促进LDLr的表达(P0.05)。结论:在HGF刺激下,增殖活跃的HTFs上LDLr呈高表达状态,提示增殖异常活跃的HTFs上高表达的LDLr,可能成为一种新型的抗代谢药物作用靶点,尤其是在抗青光眼术后滤过泡瘢痕化的研究中可能得到广泛应用。     

脊椎动物成纤维细胞生长因子及其受体

成纤维细胞生长因子(FGFs)具有广泛的生物学功能,已知FGF家族至少包括23个因子(FGFs1-23);成纤维细胞生长因子受体(FGFRs)家族有3类:酪氨酸激酶受体类、富胱氨酸FGF受体和低亲和力受体肝素硫酸糖蛋白。FGFs和FGFRs一起组成了一个大而复杂的信号分子家族,具有促细胞分裂、促细胞运动和促形态形成的作用,在胚胎、组织发育和成熟中发挥着重要作用。     

U937细胞表达成纤维细胞生长因子受体

以逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）自Ｕ９３７细胞钓出了两条ｃＤＮＡ片段。将其克隆入ＴＡ克隆载体后进行ＤＮＡ测序。结果证明ｃＤＮＡ片段分别是人成纤维细胞生长因子受体１（ＦＧＦＲ１）的细胞外段和细胞内段ｃＤＮＡ。这一结果表明，Ｕ９３７细胞可以表达ＦＧＦＲ１ｍＲＮＡ。     

人成纤维细胞生长因子受体2的研究进展

人成纤维细胞生长因子受体 (FGFRs)家族在细胞的增殖、分化、血管生成、胚胎及骨骼发育和在与生长发育相关的进程中起着十分重要的作用。成纤维细胞生长因子受体 2 (FGFR2 )是该家族 4个成员中的一员 ,本文就其结构特点及与骨骼发育、肿瘤形成和其他疾病的关系加以综述     

成纤维细胞生长因子受体3突变与疾病

成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)在细胞的增殖、分化、血管形成、骨骼发育及与生长和发育相关的过程中起着十分重要的作用。本文概述了FGFR3突变与遗传性侏儒症、膀胱癌等肿瘤的发生和发展的关系。     

成纤维细胞生长因子受体3突变与疾病

成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)在细胞的增殖、分化、血管形成、骨骼发育及与生长和发育相关的过程中起着十分重要的作用。本文概述了FGFR3突变与遗传性侏儒症、膀胱癌等肿瘤的发生和发展的关系。     

高脂饲料对金黄地鼠肝低密度脂蛋白受体水平的影响

雄性金黄地鼠45只随机分成3组,对照组喂基础饲料,胆固醇组加喂0.12％的胆固醇,饱和甘油三酯组再加喂20％的猪油,5周后进行血脂测定和肝低密度脂蛋白受体(LDLR)分析。结果表明,动物饮食胆固醇与饱和甘油三酯后,血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)水平显著升高,而高密度脂蛋白胆固醇和总胆固醇之比(HDL-C/TC)明显下降;体外结合实验发现,胆固醇和饱和甘油三酯组动物肝LDLR显著低于对照组,受体分别减少68％、96％,同胆固醇组比较,饱和甘油三酯组肝LDLR又极度减少,几乎取消125I-LDL与受体的结合,而125I-LDL与各组动物肝LDLR结合的亲和力无明显差别,提示胆固醇和饱和甘油三酯升高血脂与肝LDLR数目减少密切相关。     

成纤维细胞生长因子(FGFs)及其受体的结构与功能

到目前为止，已发现有９种成纤维细胞生长因子（ＦＧＦｓ），分别为酸性ＦＧＦ（ＦＧＦ－１），碱性ＦＧＦ（ＦＧＦ－２），Ｉｎｔ－２（ＦＧＦ－３），ＨＳＴ－１（ＦＧＦ－４），ＦＧＦ－５，ＦＧＦ－６，角质细胞生长因子（ＦＧＦ－７），雄激素诱导性生长因子（ＦＧＦ－８）和神经胶质激活因子（ＦＧＦ－９）。它们是９个独立的基因的产物，但不同种类动物之间ＦＧＦｓ序列具有很强的同源性。ＦＧＦｓ的受体至少有三类：酪氨酸激酶受体，富胱氨酸ＦＧＦ受体和肝素硫酸糖蛋白。ＦＧＦｓ具有广泛的生物学效应，对细胞增殖、细胞分化及动物组织修复均具重要意义。不同的ＦＧＦ其作用的靶细胞亦不一致。     

成纤维细胞生长因子受体1配体精细结合位点的确定

目的 确定人成纤细胞生长因子受体1（FGFR1）的配体精细结合位点。方法 合成肽文库筛选,定向点突变,源核细胞重组蛋白质表达及受体－配体结合实验。结果 采用^125I标记的酸性成纤维细胞生生长因子（aFGF),自合成肽文库中筛选到一个五肽序列（WGPGM）,其序列及立体结构和FGFR1细胞外段的一个基序（WISPEKM）相似。为了证明FGFR1的WTSPEKM基序是结合FGF的重要结合,采用定向突变技术将WITSPEKM基序中的P（CCA）突变成A（GCA）,并在原核细胞中表达了野生型和突变型FGFR1细胞外段重组蛋白质,受体－配体结合实验显示突变的GFFR1细胞外段结合aFGF的能力明显降低。结论 FGFR1的WISPEKM基序是配体结合的一个重要部位。     

Relative Platelet-derived Growth Factor Receptor Subunit Expression Determines Cell Migration to Different Dimeric Forms of PDGF

Abstract

Platelet-derived growth factor (PDGF) receptor transfectants of a fibroblastoid cell line (BHK) have been used to investigate the ability of the three dimeric forms of PDGF to elicit a chemotactic response. Cells transfected with the β receptor subunit were only responsive to PDGF-BB, whereas cells expressing the α-receptor subunit were equally responsive to all three dimeric forms, PDGF-AA, PDGF-AB, and PDGF-BB. A positive chemotactic response correlated with rearrangement of actin organization. In a study of human arterial smooth muscle cells that express both PDGF receptor subunits endogenously, we again found that recombinant PDGF-AA could elicit a chemotactic response. However, the two smooth muscle cell isolates we examined differed in their chemotactic response to PDGF-AA. This difference correlated closely with their ability to respond mitogenically to this PDGF dimeric form, and the magnitude of both chemotactic and mitogenic responses was related to the proportion of the two receptor subunit species at the cell surface.     

维生素C对培养人胚成纤维细胞LDL受体活性的影响

研究了维生素Ｃ对培养的人胚皮肤成纤维细胞低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受体活性的影响。从ＬＤＬ受体饱和分析和Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图以及单点分析表明，维生素Ｃ可增加细胞ＬＤＬ受体数量，但不影响受体对ＬＤＬ的亲和力。提示维生素Ｃ可通过增加ＬＤＬ受体数量而促进胆固醇的代谢，具有一定的抗动脉粥样硬化作用。     

血小板源生长因子在低氧性肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

运用流式细胞仪及细胞原位杂交方法测定低氧对培养的新生牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）生长的影响，并探讨血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）在其中的作用，结果表明：培养的ＰＡＳＭＣ的低氧１２ｈ时，由Ｇ０／Ｇ１期进入Ｓ斯的细胞数明显增多，为对照组的１５７．７％（Ｐ〈０．０５）；ＰＤＧＦ可进一步促进低氧状态下ＰＡＳＭＣ的增殖，Ｓ期细胞为对照组的２４２．３％（Ｐ〈０．０１），原位杂交结果显示：低氧（１２ｈ）条件下     

甲状腺素对胃腺癌细胞VLDL-R选择性剪接的影响

目的探讨甲状腺素对低分化胃腺癌细胞MKN45细胞中极低密度脂蛋白受体(VLDL-R)选择性剪接的影响。方法在体外,用一定浓度的甲状腺素与MKN45细胞温育不同时间后,采用RT-PCR和Western印迹技术检测两型VLDL-R mRNA和蛋白质的表达水平,以两型受体的比值间接反映甲状腺素对VLDL-R选择性剪接的影响。结果甲状腺素可明显上调两型VLDL-R的表达,Ⅱ型受体与Ⅰ型受体mRNA的比值随时间延长逐渐增大。结论甲状腺素可显著增强VLDL-R的选择性剪接,表现为Ⅱ型受体表达的增高幅度明显大于Ⅰ型受体。     

PDGF、FN诱导FHL1细胞增殖的PI3K信号转导通路研究

目的探讨血小板源性生长因子（PDGF）和纤维连接蛋白（FN）诱导人胚胎肺成纤维细胞（HFL1）增殖的磷酸酰基醇-3-激酶（PI3K）信号转导通路。方法采用不同浓度的PDGF和FN分别刺激HFL1并观察PI3K抑制剂wortmannin（WMN）对PDGF、FN诱导HFL1增殖作用的影响。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖情况。结果PDGF和FN对HFL1的诱导增殖作用明显,并呈剂量依赖性升高趋势,二者均在50ng／mL时作用显著：PI3K抑制剂wortmannin可抑制PDGF和FN诱导的HFL1细胞增殖。结论PDGF和FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过PI3K信号转导途径实现。     

低密度及氧化低密度脂蛋白对内皮细胞表达血栓调节蛋白的影响

目的观察低密度及氧化低密度脂蛋白对细胞表达血栓调节蛋白的影响.方法用低密度和氧化低密度脂蛋白处理培养的ECV-304细胞,24h后分别收集培养液及细胞,用ELISA方法检测上层培养液中的可溶性血栓调节蛋白(sTM)及细胞总TM含量.结果两者均呈剂量依赖方式促进TM的表达和sTM的分泌,氧化低密度脂蛋白的作用明显强于低密度脂蛋白,而氧化低密度脂蛋白对低密度脂蛋白有氧化修饰作用.结论 TM表达及sTM分泌增加可能是脂蛋白损伤细胞的结果,但具体作用有待于进一步研究.     

神经细胞凋亡调节转化酶-1在LDL胆固醇代谢中的作用

人类枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)编码神经细胞凋亡调节转化酶-1,是一个属于丝氨酸蛋白酶K亚类的独特前蛋白转化酶。它能切割非碱性氨基酸,其底物特异性不同于许多其它前蛋白转化酶。它的唯一已知底物为前体NARC-1。PCSK9基因有多种序列变异,如错义突变S127R和F216L可引起常染色体显性高胆固醇血症;无义突变Y142X、C679X及错义变异R46L均可降低LDL胆固醇和冠心病发病率。通过研究这些变异和野生型PCSK9,发现PCSK9参与肝再生和神经分化,调节胆固醇代谢、含apoB脂蛋白代谢,并在动脉粥样硬化、冠心病等心血管疾病的发生发展和防治中发挥重要作用。     

Coexpression of the Genes for Platelet-Derived Growth Factor and Its Receptor in Human T-Cell Lines Infected with HTLV-I

Abstract

Several HTLV-I-infected T-cell lines express the two genes encoding platelet-derived growth factor (PDGF). Therefore, we examined the question of a possible self-stimulatory mechanism of proliferation involving PDGF in these cells. Using a nucleic acid probe and an antibody specific for the PDGF-B receptor (PDGFR-B), we examined four established human T-cell lines infected with HTLV-I, as well as several noninfected T-cell lines for expression of the PDGF-B receptor. Previous reports indicate that lymphocytes do not display receptors for PDGF; our results show that two noninfected T-cell lines (HUT-78, CCRF-HSB-2) expressed the canonical 5.5-kb PDGFR mRNA, and two HTLV-I-infected T-cell lines (C10/ MJ, MT-2) expressed a novel PDGFR mRNA of 4.8 kb. Concomitantly, the cell lines expressing PDGFR mRNA also synthesize PDGFR proteins immunoprecipitated by the antibody to PDGFR-B. Differences were observed in the molecular weight of PDGFR molecules immunoprecipitated from uninfected and HTLV-infected T-cells. Immunofluorescence studies demonstrated that the PDGFR-B proteins are localized primarily on the cell external membrane. The results suggest that the HTLV-I-infected T-cells acquire an autostimulatory mechanism of cell proliferation that involves PDGF.     

Recombinant Human Mullerian Inhibiting Substance Inhibits Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase

Abstract

Autophosphorylation of the epidermal growth factor (EGF) receptor in A-431 cells and plasma membrane fractions was inhibited by partially purified recombinant human Mullerian Inhibiting Substance (MIS). Immunoprecipitation of the EFG receptor using anti-EGF receptor or anti-phosphotyrosine antibodies, and phosphoamino acid analysis of this receptor, demonstrated that MIS specifically inhibited EGF-induced tyrosine phosphorylation. Inhibition of EGF receptor autophosphorylation by MIS in membrane preparations was not affected by increasing concentrations of EGF, manganese or [γ-(32)P] ATP. Thus, it is unlikely that MIS competes for EGF binding sites or sequesters substrate. Immunoabsorption of MIS with anti-human MIS antibody blocked the MIS inhibition of EGF receptor autophosphorylation, indicating that the inhibition was due to MIS. Our data suggest that MIS regulates the activity of the EGF receptor tyrosine kinase in A-431 cells.