内毒素对人皮肤成纤维细胞基因表达谱的影响

目的 观察正常皮肤成纤维细胞经大肠杆菌内毒素(lipopolysaccharides,LPS)刺激后基因表达谱的变化,探讨LPS对后期瘢痕形成的影响及可能机制.方法 用0.1μg/ml LPS刺激正常皮肤成纤维细胞并进行连续传代培养,选择第3代成纤维细胞,采用基因芯片技术检测成纤维细胞基因表达谱的变化,与自身增生性瘢痕...     

人眶后成纤维细胞和皮肤成纤维细胞超微结构的比较

目的：为解释甲状腺相关眼病的器官特异性,建立体外人眶后成纤维细胞（ＲＦ）和皮肤成纤维细胞（ＤＦ）的培养方法,并在形态和超微结构上比较两种细胞的差异。方法：采用扫描电镜和透射电镜技术进行观察比较。结果：ＲＦ除生长速度较慢,光镜下细胞多形性和胞浆富颗粒性与ＤＦ不同外,其在扫描电镜和透射电镜下的超微结构间未见明显差异。结论：不同组织来源的成纤维细胞具有不同的生物活性,推测可能与其不同的表现型有关。     

雌激素受体β对牙周膜成纤维细胞骨钙素含量的影响

目的研究雌激素受体β（ERβ）对人牙周膜成纤维（HPLF）细胞骨钙素（OCN）含量的影响。方法采用基因干涉方法抑制了HPLF细胞中ERβ基因的表达,用雌激素干预ERβ抑制的和未抑制的HPLF细胞,研究细胞骨钙素含量的变化情况。结果测序鉴定重组质粒后,蛋白质印迹法及RT-PCR结果显示ERβsiRNA载体可特异地抑制HPLF细胞中ERβ的表达。经雌激素干预后,HPLF细胞OCN含量明显高于对照组（P〈0.01）,但ERβsiRNA载体稳定转染的HPLF细胞OCN含量与对照组相比无统计学意义。结论雌激素可能通过ERβ亚基促进人牙周膜成纤维细胞的骨钙素含量增加。     

干扰素对人皮肤成纤维细胞抑制作用的体外观察

干扰素对人皮肤成纤维细胞抑制作用的体外观察李英春，陈壁，汤朝武（￥第四军医大学西京医院烧伤科，西安７１００３３）关键词干扰素，成纤维细胞，皮肤中图号Ｒ６１９．６皮肤成纤维细胞（Ｆｂ）通过合成胶原等细胞外基质（ＥＣＭ）成分在维持真皮结缔组织稳定性和参与...     

增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞生长差异比较

【目的】探讨增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞基因表现型的差异以及EGF、PDGF和bFGF对其的影响。【方法】测定细胞生长曲线;应用液闪计数测定成纤维细胞胶原蛋白的合成。【结果】增生性瘢痕成纤维细胞增殖速度比正常皮肤成纤维细胞慢;胶原蛋白的合成高于正常皮肤成纤维细胞。EGF、PDGF和bFGF均对两种成纤维细胞的增殖具有强烈的刺激作用。EGF和bFGF可减少增生性瘢痕成纤维细胞的胶原蛋白合成,PDGF可以使两种成纤维细胞的胶原蛋白合成增加。【结论】增生性瘢痕成纤维细胞是一种特殊基因表现型的成纤维细胞,它具有自己特殊的生物学特性。EGF、PDGF和bFGF在增生性瘢痕的形成过程中可能具有重要作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞的影响

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是近年来研究较为热门的生物因子,为具有多种功能的多肽生长因子,能广泛促进来源于中胚层及神经外胚层细胞的增殖,是体内重要的创伤愈合因子之一。bFGF有主动诱导分化和加速生长作用,可以促进牙周膜成纤维细胞的分化和增殖,促进牙周组织的修复和再生。     

Cbfal基因转移对原代培养的兔皮肤成纤维细胞的影响

目的 探讨核心结合因子al（core binding factor al，Cbfal）基因转移对原代培养免皮肤成纤维细胞的影响作用。方法 胰酶消化法培养兔皮肤成纤维细胞，兔采用脂质体转染技术转染原代培养的兔皮肤成纤维细胞，RT—PCR检测成骨标志基因Ⅰ型胶原（Ⅰ collagen）、骨钙素（osteoclcin，OCN）、骨唾液蛋白（bone sialoprotein，Bsp）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、Cbfal的表达。结果 兔皮肤成纤维细胞在Cbfal基因转染后出现OCN、Bsp、ALP的表达，Ⅰ Collagen表达增强。结论Cbfal基因转移兔皮肤成纤维细胞可改变原代培养的兔皮肤成纤维细胞的表型，向成骨表型转化。     

Octreotide对人眼球后和皮肤成纤维细胞DNA合成的影响

应用细胞培养技术，观察Ｏｃｔｒｅｏｉｄｅ对人眼球后和皮肤成细胞细胞ＤＮＡ合成功能的影响。结果发现它对两种成纤维细胞的作用表现为双向性：低浓度抑制ＤＮＡ含成，但对球后成纤维细胞的作用无统计学意义；高浓度则促进细胞生长。     

17β-雌二醇诱导人精子顶体反应及胞内钙离子增加的研究

目的探讨雌激素对人精子的激活作用及其可能的作用机制。方法以17β-雌二醇(E2)及非透膜性大分子雌二醇-牛血清白蛋白交联物(E2-BSA)分别作用于生育力正常男性的精子,以三色法染色评价精子顶体反应(AR)发生率,流式细胞术检测精子内游离Ca2 浓度[Ca2 ]i的变化。结果E2可引起获能精子AR率明显增加,使[Ca2 ]i快速升高,对非获能精子则无明显影响;E2-BSA同样可以提高获能精子AR率及[Ca2 ]i,其作用与E2相似;E2诱导获能精子[Ca2 ]i升高依赖于胞外Ca2 的内流。结论雌激素对人精子有一定的激活作用,该作用可能是通过与人精子膜上的雌激素结合位点作用后使胞外Ca2 内流而实现的。     

积雪草甙、羟基积雪草甙对体外培养人胚胎成纤维细胞的影响

目的研究积雪草甙（asiaticoside,Ad）和羟基积雪草甙（madecassoside,Md）对体外培养人胚胎成纤维细胞（Human embryonic skin fibroblasts,HESFb）增殖过程的影响。方法在不同浓度（0μg/ml、10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml）Ad和Md的环境下对人胚胎细胞进行体外培养,用CCK-8试剂盒通过酶标仪检测不同培养时间（0、1、2、3、4、5d）HESFb的OD值,用SPSS13.0统计软件进行统计分析。结果在实验时间内Ad和Md在10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml浓度时均对人胚胎成纤维细胞的增殖有促进作用,200μg/ml浓度时最明显,且Ad比Md作用强。两组在400μg/ml浓度时均有抑制作用。结论在一定浓度和培养时间内一定剂量的Ad和Md对体外培养的HESFb增殖有促进作用,同剂量相比Ad比Md明显。而较高剂量的时候均可出现抑制作用。     

短期大剂量米非司酮口服对子宫肌瘤雌孕激素受体的影响

目的 :研究大剂量米非司酮口服对子宫肌瘤雌、孕激素受体的影响。方法 :对 18例临床诊断为子宫肌瘤、有手术指征的患者口服大剂量米非司酮 10 0mg/d ,共 5天 ,第 6天手术。选择临床情况相似的子宫肌瘤患者 18例作为对照组。用雌激素受体(ER)、孕激素受体 (PR)单克隆抗体免疫组织化学法检测子宫肌瘤中ER、PR水平。结果 :服药组子宫肌瘤中ER、PR明显低于对照组P <0 .0 5 )。结论 :米非司酮可明显降低子宫肌瘤组织中ER、PR水平。     

人胰岛素基因在NIH3T3细胞中的基因转染和表达

目的　研究人胰岛素基因在体外培养的小鼠成纤维细胞系的基因转染和表达。方法　采用壳聚糖转染法将重组的人胰岛素基因表达质粒转染鼠成纤维细胞 (NIH3T3) ,转染后 72h ,经G4 18抗性筛选出阳性克隆并培养到第 2 4d ,用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达 ,同时用ELASA法监测转染后 2 4d的细胞培养液的胰岛素水平。结果　转染PCMV .INS的NIH3T3细胞培养液的胰岛素水平明显高于未转染组 (P <0 .0 1)及PCMV转染组 (P <0 .0 1) ,未转染组与PCMV转染组细胞培养液的胰岛素水平无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论人胰岛素基因在NIH3T3细胞系的转染成功和表达说明基因治疗有望成为 1型糖尿病的重要治疗手段 ,壳聚糖是一种很有前途的胰岛素基因载体。     

雌激素缺乏对心肌衰老、凋亡和心功能的影响

目的 通过手术去除双侧卵巢建立更年期小鼠模型探讨雌激素缺乏对心脏衰老、凋亡和心功能的影响,并讨论相关机制。方法 取8周龄雌性C57/BL6小鼠20只,按随机数字表法分为去卵巢组（OVX group）和假手术对照组（control group）（每组各10只）。去卵巢组通过手术去除双侧卵巢建立更年期模型。术后6个月行心脏超声（以下简称心超）检测评估心功能,心肌组织取材进行组织学检测和衰老、凋亡等相关指标检测。结果 与对照组比较,OVX组小鼠心肌纤维化和心/体重比均明显升高。二维心超结果显示OVX组小鼠较对照组小鼠室间隔厚度、舒张期左心室内径和容量显著增高。与对照组比较,OVX组小鼠β-gal阳性细胞率明显增加,P16、P19表达显著上调,而SIRT1、Bmi-1等抗衰老指标显著降低。与对照组比较,OVX组小鼠凋亡指标Bax、caspase-3等表达显著增加,抗凋亡指标Bcl-2表达明显降低。与对照组比较,OVX组小鼠抗氧化指标SOD1、SOD2表达均显著下降。结论 雌激素缺乏能够促进心肌纤维化、导致心肌细胞衰老和凋亡,其主要机制可能与降低SIRT1和Bmi-1的表达促进氧化应激等多种因素相关。     

雌激素,胎盘生乳素,钙,磷与妊高征的关系

目的：探讨雌激素，胎盘生乳素，钙在妊高征发病中的作用及其相互关系，方法：采用放射免疫法及离心分析钙试剂，测定了４２例妊高征患者血清雌二醇，胎盘生乳素，钙，磷及尿钙，磷的含量，３４例同期门诊正常孕妇作为对照组，结果：轻度妊高征患者血清雌二醇明显增加（Ｐ〈０．０５）。重度妊高征患者血清胎盘生乳素显著减少（Ｐ〈０．０５），轻，中，重度妊高征患者血钙，尿钙含量显著降低（Ｐ〈０．０５，Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．     

雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

目的 研究雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流的影响.方法 用急性酶分离法分离人肠系膜平滑肌细胞,采用单通道膜片钳技术记录该细胞上的钙激活钾通道电流.结果 雌激素浓度依赖性的不可逆性的激活人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道.在细胞贴附式膜片(cell-attached patch)下,膜电位为 50 mV时,10、70、150、200、300 μL/mL的雌激素,可使通道开放概率从0.0214±0.0112分别增加到0.0385±0.0146(n=8,P＜0.05)、0.0425±0.0251(n=8,P＜0.01)、0.0614±0.0152(n=8,P＜0.01)、0.1263±0.0346(n=8,P＜0.01)、0.2636±0.1046(n=8,P＜0.01).在内面向外式膜片(inside-out patch)下,膜电位为 50 mV时,10、70、150、200、300 μL/mL的雌激素,可使通道开放概率从0.0342±0.01024分别增加到0.0454±0.0231(n=8,P＜0.01)、0.0617±0.0137(n=8,P＜0.01)、0.0980±0.0202(n=8,P＜0.01)、0.1203±0.0153(n=8,P＜0.01)、0.3149±0.0851(n=8,P＜0.01).随着雌激素浓度的增加,通道活动逐步被激活,这种作用冲洗后不可逆.结论 雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流有一定激活作用,提示雌激素对人肠系膜阻力血管有一定的舒张作用.     

5味中药对体外培养原代人外阴皮肤成纤维细胞增殖的影响

目的 利用原代培养的人外阴正常皮肤成纤维细胞,观察中药对人外阴皮肤成纤维细胞增殖的影响.方法 胰蛋白酶消化、分离及培养人外阴皮肤成纤维细胞;倒置显微镜下观察成纤维细胞生长状态;HE染色观察细胞爬片下的形态及着色;免疫组织化学染色观察成纤维细胞中间丝波形蛋白;测定细胞生长曲线;MTT法测定莪术、黄芪、丹参、川穹及当归5种中药作用后细胞增殖能力.结果 生长曲线测定结果显示:传6代内以及传6代内复苏人外阴皮肤成纤维细胞增殖能力均很强.MTT检测结果显示:5种药物在特定浓度范围内均能抑制人外阴皮肤成纤维细胞的增殖.分别作用于人外阴皮肤成纤维细胞72 h后,莪术5、10、100 mg/L浓度组,黄芪500、1 000 mg/L浓度组,丹参1 000 mg/L浓度组,川穹500、1 000 mg/L浓度组,当归100、500、1 000 mg/L浓度组均显示抑制增殖作用,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),其中莪术和川穹的抑制强度呈剂量依赖性.结论 成功建立了体外人外阴皮肤成纤维细胞原代培养及鉴定方法;特定浓度范围内的莪术、黄芪、丹参、川穹和当归能够抑制人外阴皮肤成纤维细胞的体外增殖.     

雌激素对更年期女性冠心病的影响

目的探讨小剂量组织选择性雌激素活性调节剂对更年期女性冠心病的影响。方法入选对象经筛选分为非冠心病组及冠心病组,组内再分为观察组及对照组,观察组给予小剂量雌激素,观察其对更年期女性冠心病的影响。结果观察组治疗后与治疗前血液学相关指标有明显变化（P〈0．05,或P〈0．01）,治疗后E2水平与对照组比较明显升高（P〈0．01）;非冠心病组治疗后冠心病发生率明显降低（P〈0．05）,而冠心病组观察组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）;更年期症状明显改善。结论小剂量组织选择性雌激素早期应用可延缓动脉粥样硬化,有益于冠心病一级预防,并有效改善更年期症状,但对冠心病二级预防获益不大。