半夏泻心汤对幽门螺杆菌致人胃黏膜上皮细胞GES-1凋亡的影响

[目的]观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌致人胃上皮细胞GES-1调亡的干预作用。[方法]实验分正常组、感染组和半夏泻心汤组,感染组和半夏泻心汤组按50∶1的细菌∶细胞比例感染GES-1细胞,正常组和感染组均以正常鼠血清进行培养,半夏泻心汤组以含药鼠血清进行培养,采用MTT法检测细胞的增殖情况,DAPI染色分析细胞凋亡情况。[结果]与正常组比较,感染组的细胞增殖显著下降（P〈0.05）,细胞凋亡明显提高（P〈0.05）。与感染组相比,10%、15%的含药血清能促进细胞增殖（P〈0.05）,半夏泻心汤组能降低细胞凋亡（P〈0.05）。[结论]半夏泻心汤具有改变幽门螺杆菌对胃黏膜上皮细胞凋亡的作用。     

miR-133过表达对结肠癌细胞SW480凋亡、增殖和裸鼠成瘤的影响

目的:探究miR-133过表达对结肠癌细胞SW480凋亡、增殖和裸鼠成瘤的影响。方法:将miR-133 mimic转染至SW480细胞,将细胞分为3组:对照组、Scramble组和miR-133 mimic组。RT-PCR检测miR-133表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western 印迹检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、c-Myc蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞增殖倍数;克隆形成实验检测细胞克隆形成率;裸鼠右侧腋窝处皮下注射SW480细胞悬液建立裸鼠移植瘤模型,检测肿瘤重量,RT-PCR检测肿瘤组织miR-133表达水平,免疫组化检测Caspase-3、Ki67阳性细胞数。结果:与对照组相比,miR-133 mimic组miR-133表达升高（F=136.70,P＜0.05）,细胞凋亡率升高（F=59.995,P＜0.05）,Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3、cleaved Caspase-9/Caspase-9表达升高（F=726.85、138.76、55.85,均P＜0.05）,c-Myc蛋白表达水平降低（F=88.98,P＜0.05）,细胞活力降低（F=48.50,P＜0.05）,克隆形成率降低（F=42.63,P＜0.05）,肿瘤重量降低（t=1.788,P＜0.05）,肿瘤组织miR-133表达水平升高（t=1.043,P＜0.05）,Caspase-3阳性细胞数升高（t=1.167,P＜0.05）,Ki67阳性细胞数降低（t=1.557,P＜0.05）。结论:miR-133过表达诱导SW480细胞凋亡,抑制SW480细胞增殖和裸鼠肿瘤的形成。     

左归丸对不育症SD大鼠Ki67蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察左归丸对雷公藤多苷(tripterygium wilfordii,GTW)构建的少弱精子症模型大鼠睾丸组织中组织细胞增殖核抗原(Ki67)蛋白及mRNA表达的影响,初步探讨左归丸改善大鼠模型生殖功能的作用机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、左归丸组,每组12只,共干预8周。正常组全程给予去离子水灌胃;模型组前4周给予40 mg·(kg·d)~(-1)的GTW进行造模,实验5～8周给予去离子水灌胃干预。左归丸组前4周用40 mg·(kg·d)~(-1)的GTW造模,实验5～8周,给予6 g·(kg·d)~(-1)的左归丸混悬液灌胃。8周后将所有大鼠处死,无菌取睾丸组织,固定、包埋并切片。免疫组化法检测各组大鼠睾丸Ki67蛋白的表达,比较各组平均光密度值。采用RT-PCR方法检测各组大鼠睾丸组织Ki67mRNA的表达情况。结果:模型组大鼠睾丸组织各级生精细胞核中Ki67较正常组表达明显减弱(P0.05);左归丸组睾丸组织中各级生精细胞核中Ki67蛋白表达较模型组明显增多(P0.05)。模型组ki67 mRNA表达水平较正常组明显降低(P0.05);正常组与左归丸组ki67 mRNA表达水平相当;左归丸组ki67 mRNA表达水平明显高于模型组(P0.05)。结论:左归丸能够上调Ki67蛋白及mRNA的表达,促进生精细胞增殖,提高各级生精细胞的数量并改善其功能,最终提高精子质量。     

bcl-2基因转染对人胃上皮细胞GES-1增殖的影响

目的:观察bcl-2基因脂质体法转染人胃上皮细胞系GES-1及其转染后对GES-1细胞增殖的影响. 方法:以脂质体法转染构成bcl-2基因表达的人胃上皮细胞系GES-1细胞模型,空载体质粒pcDNA3转染GES-1细胞及正常GES-1细胞为对照;经酶标免疫组织化学法鉴定bcl-2基因表达阳性细胞;用HE染色法进行形态学观察;并采用细胞计数及MTT法分析bcl-2转染后对GES-1细胞增殖的影响. 结果:脂质体法转染bcl-2基因后,细胞高表达Bcl-2蛋白;HE染色后形态学观察无明显改变;细胞计数法绘制细胞生长曲线结果显示bcl-2基因转染6 d后细胞生长速度明显超过对照组,MTT法结果显示bcl-2基因转染第24,48,72 h, A490 nm值分别为4.15±0.31,5.98±0.56,8.94±0.79,对照组分别为3.01±0.20,4.76±0.52,7.69±0.84,两组相比较具有显著性差异(P＜0.05). 结论:bcl-2基因转染使GES-1细胞稳定且高表达Bcl-2蛋白,并促进了细胞增殖.     

不同幽门螺杆菌临床菌株对人胃黏膜细胞系GES一1增殖和凋亡的影响及其致癌性的研究

比较不同幽门螺杆菌（H.pylori）临床菌株对人胃黏膜细胞系GES-1细胞增殖、凋亡的影响,了解不同毒力菌株对胃黏膜的影响及致癌性。方法：选用临床分离自胃癌、胃炎患者的菌株各10例分别与GES-1细胞以不同浓度比例共培养,在不同时间点进行MTT和流式细胞仪检测,筛选出对GES-1细胞的增殖影响最大（A菌株）和最小（B菌株）的两株菌株,利用蒙古沙土鼠感染模型了解其导致胃黏膜病变情况及致癌性。结果：当细肜细菌浓度比为1：1,1：50共培养12h和细胞／细菌浓度比为1：50共培养24h时,分离自胃癌患者的麒H.pylori临床菌株可以不同程度地促进GES-1细胞增殖,与胃炎菌株组的吸光度值比较差异有统计学意义（P〈0．05）。当细肜细菌浓度比为1：50,1：200共培养时,胃炎菌株纽和胃癌菌株纽细胞凋亡率较对照组明显增加（P〈0．05）,胃炎菌株组与胃癌菌株组间差异无统计学意义（P〉0．05）。筛选出的2株菌株感染蒙古沙土鼠模型后28周,A菌株引起蒙古沙土鼠胃黏膜肠化及癌变,与B菌株组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：不同来源的Hpylori临床菌株对GES-1细胞的增殖影响具有差异性,分离自胃癌黏膜的菌株可明显促细胞增殖,并可以引起蒙古沙土鼠严重的胃黏膜癌前病变及胃癌发生。     

左归丸对不育症SD大鼠Ki67蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察左归丸对雷公藤多苷(tripterygium wilfordii,GTW)构建的少弱精子症模型大鼠睾丸组织中组织细胞增殖核抗原(Ki67)蛋白及mRNA表达的影响,初步探讨左归丸改善大鼠模型生殖功能的作用机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、左归丸组,每组12只,共干预8周。正常组全程给予去离子水灌胃;模型组前4周给予40 mg·(kg·d)~(-1)的GTW进行造模,实验5～8周给予去离子水灌胃干预。左归丸组前4周用40 mg·(kg·d)~(-1)的GTW造模,实验5～8周,给予6 g·(kg·d)~(-1)的左归丸混悬液灌胃。8周后将所有大鼠处死,无菌取睾丸组织,固定、包埋并切片。免疫组化法检测各组大鼠睾丸Ki67蛋白的表达,比较各组平均光密度值。采用RT-PCR方法检测各组大鼠睾丸组织Ki67mRNA的表达情况。结果:模型组大鼠睾丸组织各级生精细胞核中Ki67较正常组表达明显减弱(P<0.05);左归丸组睾丸组织中各级生精细胞核中Ki67蛋白表达较模型组明显增多(P<0.05)。模型组ki67 mRNA表达水平较正常组明显降低(P<0.05);正常组与左归丸组ki67 mRNA表达水平相当;左归丸组ki67 mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.05)。结论:左归丸能够上调Ki67蛋白及mRNA的表达,促进生精细胞增殖,提高各级生精细胞的数量并改善其功能,最终提高精子质量。     

上调NDRG1基因表达对肺腺癌细胞增殖与凋亡的影响

［摘要］目的: 建立稳定转染N myc下游调节基因1（N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1）的A549细胞株,探讨NDRG1对A549细胞增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法: 经脂质体介导将含有NDRG1的重组表达质粒转染人肺腺癌A549细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆并进行实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、蛋白质印迹鉴定;qRT-PCR和蛋白质印迹检测阳性细胞克隆P21及鼠双微体基因2（murine doubleminute 2,MDM2）的表达;MTT比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性;流式细胞仪检测阳性细胞克隆凋亡率。结果: 成功建立高表达NDRG1的阳性A549细胞克隆（N11）;N11细胞P21表达及细胞凋亡率显著增高（P<0.05）,而MDM2表达及细胞增殖显著降低（P<0.05）。结论: 上调A549细胞NDRG1表达后,细胞凋亡增加而细胞增殖降低,其作用机制可能与P21表达增高而MDM2表达降低有关。     

五子衍宗丸对幼年大鼠睾丸支持细胞增殖的影响及机制

目的探讨五子衍宗丸对幼年大鼠睾丸支持细胞的增殖作用及其机制。方法分离并培养20 d龄SD雄性大鼠的睾丸支持细胞,将支持细胞随机分为正常组和五子衍宗丸低、中、高剂量(5、10、15 g/L)组。采用MTT比色法检测各组支持细胞OD值的变化,采用免疫组化的方法检测各组支持细胞中Ki67阳性颗粒的表达,采用Western Blot方法检测各组支持细胞中Akt和p-Akt的表达。结果与正常组相比,经五子衍宗丸处理后的睾丸支持细胞增殖能力明显增加(P0.05或P0.01);Ki67阳性颗粒的表达明显增多(P0.05或P0.01);p-Akt的相对表达量明显增加(P0.05或P0.01)。结论五子衍宗丸可能通过激活Akt信号通路,上调p-Akt的表达,促进幼年睾丸支持细胞的增殖。     

灵芝酸A对人炎性乳腺癌细胞体外增殖和凋亡的影响

目的：探讨灵芝酸A在体外对人炎性乳腺癌SUM149细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制。方法：人炎性乳腺癌SUM149细胞分为对照组和不同浓度（0.1、0.5、1.0、5.0和10.0 μmol·L^-1）灵芝酸A组,每组设4个复孔,分别于培养24、48和72h取样本。MTT法检测各组SUM149细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组SUM149细胞凋亡率和细胞周期,免疫细胞化学染色法检测各组SUM149细胞Ki67和Livin蛋白表达水平。结果：MTT法检测,与0.1μmol·L^-1灵芝酸A组比较,其他浓度灵芝酸A组SUM149细胞增殖抑制率明显升高（P<0.05或P<0.01）,并呈浓度和时间依赖性。流式细胞术检测,与对照组比较,不同浓度灵芝酸A组SUM149细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）,并呈浓度和时间依赖性;同时细胞周期发生明显变化,与对照组比较,随着灵芝酸A浓度的增加和作用时间的延长,不同浓度灵芝酸A组G₁期细胞百分率明显增加（P<0.05）,S期细胞百分率减少（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较,不同浓度灵芝酸A组细胞中Ki67和Livin蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。结论：灵芝酸A通过诱导细胞凋亡抑制人炎性乳腺癌SUM149细胞增殖。     

过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长

目的 探讨过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长机制。方法 体外培养视网膜母细胞瘤SO RB50细胞,并分为空白对照组（control组）、转染对照组（Vector组）及过表达组（MT1JP组）;采用RT PCR检测各组MT1JP的表达;克隆形成检测各组SO-RB50细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Transwell检测细胞侵袭情况;Western blot检测Ki67、VEGF蛋白表达情况。小鼠皮下注射SO-RB50细胞,建立移植瘤模型;RT PCR检测长链的表达;统计裸鼠生存时间,绘制生存曲线;检测小鼠肿瘤重量;免疫组化检测小鼠肿瘤组织中Ki67和VEGF的表达情况。结果 与空白对照组比较,转染对照组的MT1JP表达、单位面积细胞侵袭数目、Ki67、VEGF蛋白表达均无显著变化（P＞0.05）;与转染对照组比较,过表达组MT1JP的表达、细胞凋亡率显著升高（P＞0.05）,克隆实验细胞形成率、Ki67、VEGF蛋白表达、单位面积细胞侵袭数目显著降低（P＜0.05）;小鼠体内实验显示：与空白对照组比较,转染对照组小鼠肿瘤质量、生存期、Ki67、VEGF蛋白表达均无显著差异（P＞0.05）;相比转染对照组,过表达组小鼠MT1JP表达、小鼠生存率显著提高（P＜0.05）;肿瘤质量、Ki67、VEGF蛋白表达显著降低（均P＜0.05）。 结论 过表达长链非编码RNA MT1JP可以抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭,促进SO RB50细胞的凋亡并抑制体内移植瘤的生长。     

半夏泻心汤对胃癌SGC-7901细胞株细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:研究半夏泻心汤对胃癌SGC-7901细胞株细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:将半夏泻心汤分为半夏泻心汤低浓度组(0.125 g·L-1)、半夏泻心汤中浓度组(0.5 g·L-1)、半夏泻心汤高浓度组(2 g·L-1),按细胞凋亡检测试剂盒说明书及细胞DNA含量检测试剂盒说明进行,流式细胞仪检测样品,CELLQuest软件获取并分析数据。结果:半夏泻心汤能够增加SGC-7901细胞在G1期的比例,促进细胞凋亡,其中半夏泻心汤高浓度组优于半夏泻心汤中浓度(P<0.05),但半夏泻心汤低浓度对此没有作用。结论:一定程度半夏泻心汤可抑制细胞增殖,并有浓度依赖性,其机理可能与药物阻滞细胞至G1期和诱导细胞凋亡有关。     

半夏泻心汤通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路对结肠癌细胞增殖和转移的影响

目的:观察半夏泻心汤调控磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI-3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路对人结肠癌HT-29细胞增殖和转移的作用机制。方法:将40只大鼠按随机数字表法分为4组,每组10只,分别是空白对照组、半夏泻心汤+5-氟尿嘧啶(5-florouracil,5-FU)组、5-FU组和半夏泻心汤组。采用MTT法检测各组大鼠用药后对人结肠癌HT-29细胞增殖的影响;采用划痕实验检测各组大鼠用药后对HT-29细胞转移能力的影响;采用Western-blotting法检测各组用药对大鼠mTOR、PTEN蛋白表达水平的影响。结果:半夏泻心汤+5-FU组能够抑制HT-29细胞增殖,且呈剂量-时间依赖性,与其他3组比较,差异均有统计学意义(P0.05);半夏泻心汤+5-FU组能够抑制HT-29细胞转移,且呈剂量依赖性,与其他3组比较,差异均有统计学意义(P0.05);半夏泻心汤+5-FU组上调抑癌基因PTEN蛋白表达量,能够下调mTOR蛋白表达量,与其他3组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:半夏泻心汤具有抑制人结肠癌HT-29细胞增殖和转移的作用,其机制可能与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。     

EB病毒感染对人胃上皮细胞GES-1增殖的影响

目的:探讨EB病毒感染人胃上皮细胞GES-1后对GES-1增殖的影响。方法:用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,同时以正常人胃上皮细胞GES-1为对照。经G418筛选出EBV感染阳性克隆,进行细胞形态学检测,并采用免疫组织化学染色法测定EBNA1的表达以鉴定EBV感染细胞克隆。对上述细胞用细胞计数法及MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术对细胞周期进行分析。结果:感染EBV的GES-1细胞大部分为EBNA1表达阳性,通过G418筛选,获得了稳定的EBV感染细胞克隆。EBV感染组细胞体积变大,核浆比增加。细胞计数法及MTT法绘制细胞生长曲线显示细胞增殖速度明显加快。流式细胞分析结果显示EBV感染组细胞S期延长。结论:EBV感染后使GES-1细胞稳定且高表达EBNA1,并且能够促进GES-1细胞的增殖。     

半夏泻心汤联合川乌对胃溃疡大鼠血清胃泌素水平的影响

目的:观察半夏泻心汤加减半夏反药川乌对胃溃疡大鼠血清胃泌素水平的影响。方法:SD大鼠50只,随机抽出10只作为正常组,其余大鼠禁食不禁水24 h后,以冷水浸法诱导应激性大鼠胃溃疡模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、半夏泻心汤组及半夏泻心汤加川乌组。于次日开始给药,正常组及模型组给予生理盐水10 m L·kg~(-1)灌胃,半夏泻心汤组给予半夏泻心汤水煎液10 m L·kg~(-1)灌胃,半夏泻心汤加川乌组给予半夏泻心汤10 m L·kg~(-1)及川乌水煎液10m L·kg~(-1)灌胃,连续给药7 d,记录各组大鼠摄食量及体质量变化,末次给药后,大鼠禁食12 h,眼眶采血,分离血清,以酶联免疫法检测大鼠血清胃泌素水平,分离大鼠心、肝、脾、肺、肾、胃、胸腺等脏器并称质量,以精密p H试纸检测大鼠胃液p H值,并以游标卡尺测量溃疡面积和溃疡抑制率。结果:半夏泻心汤及半夏泻心汤加川乌组大鼠体质量比给药前有所升高,其中半夏泻心汤加川乌组大鼠体质量高于半夏泻心汤组;与模型组比较,半夏泻心汤组及半夏泻心汤加川乌组大鼠摄食量增加,胃液p H值升高(P0.05),溃疡面积及溃疡抑制率降低(P0.01);此外,半夏泻心汤加川乌组大鼠血清胃泌素水平显著升高,肾脏系数显著降低,与正常组比较,有显著性差异(P0.05)。结论:半夏泻心汤加川乌可升高胃溃疡大鼠血清胃泌素水平,且对胃溃疡大鼠肾脏有一定损伤。     

CD98基因沉默对黑色素瘤B16-F10细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的影响

目的 探讨CD98基因沉默对黑色素瘤B16-F10细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的影响.方法 构建shRNA CD98载体转染至B16-F10细胞,将细胞随机分为3组:Con-trol 组、shRNA-NC组、CD98-shRNA3组进行后续实验.克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Tran-swell 检测细胞侵袭;Western blot 检测 CD98、Ki67、PCNA、Bax、Bcl-2、Caspase-3、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT 蛋白表达水平.结果 与Control组比较,CD98-shRNA3组CD98蛋白表达水平降低(P＜0.05),克隆形成率降低(P＜0.05),Ki67、PCNA蛋白表达水平降低(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05),Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3值升高(P＜0.05),侵袭细胞数降低(P＜0.05),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT值降低(P＜0.05).结论 沉默CD98可能通过抑制PI3K/ATK信号通路激活,抑制黑色素瘤B16-F10细胞增殖、侵袭,促进细胞凋亡.     

十溴联苯醚对宫颈癌细胞体外增殖的影响

目的探讨十溴联苯醚(PBDE-209)对宫颈癌HeLa细胞体外增殖的影响。方法观察HeLa细胞经不同浓度PBDE-209暴露后发生的形态学变化,并用MTT方法检测细胞存活率改变,采用免疫荧光化学方法检测细胞增殖核抗原Ki67表达变化,流式细胞术观察HeLa细胞细胞周期的分布变化。结果随着浓度升高,细胞增殖明显,细胞间隙变小。MTT方法检测发现PBDE-209促进HeLa细胞增殖,细胞增殖率的升高呈时间和浓度依赖效应,200nmol/LPBDE-209作用24、48和72h后细胞增殖率分别是阴性对照组的1.2、1.5和1.8倍(P<0.05)。Ki67表达强度随着PBDE-209浓度升高而增强。流式细胞术检测发现200nmol/LPBDE-209作用72h后,G0/G1期细胞比例下降了8%,而S期细胞比例升高了7%,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论低浓度PBDE-209暴露使HeLa细胞G0/G1期细胞减少,S期细胞增加,从而促进细胞增殖。     

非小细胞肺癌组织中PTEN基因与Ki67蛋白的表达及其意义

目的:探讨第10染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白酶(PTEN)基因、Ki67蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义.方法:用免疫组化方法检测67例NSCLC组织以及41例癌旁正常肺组织中PTEN、Ki67蛋白的表达,并分析其与各临床病理指标及细胞增殖之间的相关性.结果:PTEN在正常肺组织中阳性表达率显著高于NSCLC组织(P＜0.05),PTEN表达与组织类型、细胞分化程度、淋巴结转移密切相关(P＜0.05);肺癌组织中Ki67的过度表达与肺癌的临床分期、淋巴结转移相关(P＜0.05);PTEN表达与Ki67表达负相关(r=-0.239,P＜0.05).结论:PTEN蛋白表达的缺失与NSCLC的恶性侵袭有关.联合检测PTEN与Ki67的表达有助于判断NSCLC的预后.     

p53基因表达，细胞增殖抗原Ki—67与下咽癌关系的探讨

目的 :探讨p53基因、细胞增殖抗原Ki 67在下咽癌临床分期、淋巴结转移及预后中的作用。方法 :应用免疫组织化学LASB法检测 84例下咽鳞癌石蜡标本 ,研究p53蛋白、细胞增殖抗原Ki 67的表达并与临床因素进行统计分析。结果 :下咽癌中p53阳性率为 52 4 % ;Ki 67标示率为 0～ 7% ,平均为 10 63% ,中位数为 7 2 5%。淋巴结转移组与非转移组Ki 67表达差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 :p53基因表达可作为下咽癌诊断的标志物之一 ,Ki 67可作为临床预测下咽癌颈淋巴结转移及预后的重要参考指标。     

RCS大鼠自然病程中视网膜边缘生发区细胞增殖及Shh/Ptc信号途径改变的观察

目的 观察遗传性视网膜色素变性RCS大鼠病程发展中视网膜边缘生发区Shh/Ptc信号途径改变及其与该区细胞增殖能力变化的关系.方法 RCS大鼠按出生后病程变化分为15、30、60、90 d 4组(免疫组化每组4只,PCR每组3只),以同龄含色素的正常大鼠(Long-Evan's 大鼠)作为正常对照.视网膜组织切片DAPI荧光染色观察外核层(outer nuclear layer,ONL)厚度的变化;视网膜细胞增殖标记Ki67免疫荧光染色观察视网膜边缘生发区细胞增殖能力的变化;荧光定量PCR检测视网膜边缘生发区Shh/Ptc信号途径中关键分子Shh、Ptc1、Smo和Gli1 mRNA表达水平.结果 ①RCS大鼠从第15天开始,随着年龄的增加视网膜ONL逐渐变薄,第90天ONL几乎消失.②正常对照组大鼠视网膜边缘生发区Ki67阳性细胞较少,与同龄正常对照组大鼠相比,出生30、60 d组大鼠Ki67阳性细胞数均显著增多(P＜0.05);大鼠各年龄组间比较,60 d组Ki67阳性细胞数明显增多(P＜0.01).③60 d组大鼠视网膜边缘生发区Shh、Ptc1、Smo和Gli1mRNA表达水平明显上调.结论 出生后60 d RCS大鼠视网膜边缘生发区Shh/Ptc信号途径的激活,可能刺激了该部位细胞短期的增殖.     

喉癌中Ki67和P53的表达及其相关性研究

目的探讨细胞增殖抗原标记物（Ki67）和P53在喉鳞状细胞癌中的表达及其相互关系。方法用免疫组织化学方法研究Ki67和P53在100例喉鳞状细胞癌组织（喉癌组）和15例正常喉黏膜标本（对照组）中的表达，并对它们的表达与喉癌的临床分期、颈淋巴结转移与生存率进行统计学分析。结果Ki67和P53在喉癌组中的表达率分别为60％和64％，明显高于对照组（分别为26．6％，13．3％，P〈0．05）；Ki67的表达与喉癌的临床分期和颈淋巴结转移有关（P〈0．05），与生存率无关（P〉0．05）；且Ki67和P53的表达之间存在正相关关系（r=0．763，P〈0．05）。结论P53和Ki67可作为反映喉鳞状细胞癌生物学行为的客观参考指标，可作为评定喉鳞状细胞癌的进展和预测其转移的指标。