生物素-X—N-氢氧化琥珀酰亚胺和^ⅢIn—oxine-标记的狒狒的自体新鲜及冻干重建血小板的存活

背景及目的 按照食品及药品管理局（FDA）的规程，血小板在液态-22℃下可以保存5天；在6％的二甲基亚砜（DMSO）-80℃冰冻条件下可以保存2年，5％的二甲基亚砜-150℃条件下可以保存3年。了解冻干对血小板的影响的研究已有不少。在本研究中，作者测定了狒狒的自体冻干重建血小板的存活情况。材料及方法作者研究了新鲜狒狒血小板和分别用多聚甲醛、冰冻、冻干、解冻和重建处理的狒狒血小板。     

高血小板浓度在采集和冷冻干浓缩血小板中的影响

采用5％或6％二甲基亚砜(DMSO)冷冻保存血小板是浓缩血小板(PC)长期保存的最佳方法,这个浓度的DMSO对血小板没有毒性。虽然冷冻和融化过程由于血小板膜完整性丧失,引起血小板激活和细胞溶解,但冷冻保存血小板能被安全地输注,其止血功能优于22C保存5天的PC,且回收率相似。     

高血小板浓度在采集和冷冻干浓缩血小板中的影响

采用5％或6％二甲基亚砜(DMSO)冷冻保存血小板是浓缩血小板(PC)长期保存的最佳方法，这个浓度的DMSO对血小板没有毒性。虽然冷冻和融化过程由于血小板膜完整性丧失，引起血小板激活和细胞溶解，但冷冻保存血小板能被安全地输注，其止血功能优于22C保存5天的PC，且回收率相似。     

单采血小板冷冻保存的质量评价

[目的]研究单采血小板冰冻保存。[方法]在单采血小板中加入二甲基亚砜(DMSO)，终浓度为5％，-120℃保存。观察冰冻一周，一个月后血小板聚集功能和回收率的改变、血小板低渗休克反应回复率的变化。[结果]冻存一周，一个月后单采血小板仍具有较高的回收率，血小板聚集功能和低渗休克反应回复率有一定下降。[结论]单采血小板冰冻保存是可行的，具有较好的疗效。贮存期可以延长。     

冰冻保存对机采血小板释放5-HT的影响

目的 观察冰冻保存对机采血小板释放5-HT 的影响.方法 常规以二甲基亚砜(DMSO)为冷冻保护剂、-80 ℃冰冻保存机采血小板30 d;采用全自动血细胞分析仪检测并比较冰冻保存前后血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)和血小板体积分布宽度(PDW);ELISA法检测冰冻前后及在阳离子没食子酸丙酯(C-PG)、凝血酶(thrombin,THB)、二磷酸腺苷(ADP)、胶原(Collagen)等不同PLT诱导剂激活作用下PLT释放5-HT的数量.结果 冰冻复苏后机采血小板计数变化不大(P>0.05),但MPV和PDW 均增加,血小板制品血浆5-HT含量也显著增高(P<0.01).在不同诱导剂作用下,新鲜血小板释放5-HT均高于冰冻保存的血小板,差异有显著性(P<0.01).结论 (1)机采血小板冰冻保存与解冻过程中,会引起血小板膜形态和生物活性改变.(2)冰冻保存后PLT对不同诱导剂的反应下降.     

-80℃长期保存血小板的可行性研究

目的探索-80℃条件长期保存血小板的关键技术。方法将12人份加终浓度为5%二甲基亚砜(DMSO)的富含血小板血浆,分为若干等份后置于实验专用-80℃低温冰箱中保存1—16个月,1—6个月每月每人份各取1份样本、8—16个月每2个月每人份各取1份样本37℃水浴复温后检测:血小板计数(P lt)、血小板平均体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、pH、血小板CD62p表达、凝血酶激活CD62p表达、凝血酶激活CD62p再表达、磷脂酰丝氨酸(PS)表达和激活血小板诱导血浆凝固时间。结果在16个月的保存过程中P l、tMPV、PDW、pH、血小板CD62p表达、凝血酶激活CD62p表达、凝血酶激活CD62p再表达、PS表达和激活血小板诱导血浆凝固时间等,变化均无统计学意义(P>0.05)。结论血小板加终浓度为5%DMSO,在-80℃条件下长期保存质量较好且较稳定,此技术条件可用于长期储备血小板资源。     

血小板低温保存的初步研究

血小板输注应用的进展,要求体外长期保存血小板,低温保存是目前公认细胞长期保存的最好方法。本研究用体外回收率、血小板聚集试验、血小板低渗休克试验与透射电镜观察等手段,研究了不同降温方法与冻存条件下血小板的活力。结果发现:(1)用自动控温装置降温效果最好。(2)选用5％DMSO低温保护剂与1℃/min降温率为最好冻存条件,此时70％以上血小板活力得以保存。(3)血小板低温损伤主要发生在降温时融合热释放期(-6℃以上)。(4)-20℃冻存是不可取的。(5)血小板聚集功能在冻存后严重下降,有必要进一步研究解决方法。     

低浓度二甲基亚砜冰冻血小板的个性化研究

目的 探讨血小板(PLT)冰冻保存时保护剂二甲基亚砜(DMSO)的最佳浓度.方法 计算机随机选择2009年6月至2011年9月本血站机采室采集的120袋PLT作为研究对象.将不同质量浓度的DMSO作为保护剂加入PLT中,在-80℃条件下进行冰冻保存.检测冰冻前、后及不同离心条件下PLT计数、血浆中PLT第3因子(PF3)、PLT第4因子(PF4)、PLT体积分布宽度(PDW)及P-选择素(CD62P)的含量,并分析PLT的聚集、黏附、血块收缩功能的变化情况.结果 质量浓度为2％与5％的DMSO作为保护剂时,对冰冻PLT的各项功能指标影响不大,差异无统计学意义(P＞0.05).但1％的DMSO作为保护剂时,对PLT的各项功能指标影响较大.结论 PLT为无核细胞,结构简单,可用2％的DMSO作为保护剂进行冷冻保存.     

超低温保存血小板的制备与临床应用

血小板在成分输血中越来越显得重要,主要是血小板在止血和凝血过程中起到极其重要的作用.单采新鲜血小板于22±2℃条件下保存,容易发生细菌污染而引起输血反应,5 d保存期短很容易过期.不能满足临床输血紧急需求,供求矛盾突显.冰冻保存是延长血小板效期的最佳选择.冰冻保护剂有聚乙烯咯烷酮(PVD)、聚乙二醇(PEG)、Thrombosol,也有甘油、甘露醇、羟乙基淀粉等.目前常用的大多使用5%～6%的二甲基亚砜(DMSO)[1].笔者就当前超低温保存冷冻血小板(下称冷冻血小板)的制备和临床应用情况作简要的综述.     

去除白细胞和保存温度对用6%DMSO冰存3年的血小板的影响

背景 6％的DMSO冰冻PLT能够在-80℃存放2年,而 5％的 DMSO 冰冻血小板能够在-150℃存放 3年。-80℃下的冰冻血小板衰老更快,也许是由于粒细胞的存在。作者考查去除白细胞和保存温度对DMSO冰冻血小板的影响及-80℃和-135℃的保存温度对 PVC塑料袋破损量的影响。研究设计及方法 单采富血小板血浆(PRP)分为等量的 2份,一份去除白细胞,另一份不过滤分为等量的2份。用6％的DMSO冰冻在-80℃和-135℃下用PVC塑料袋存放3年。结果 -     

血小板4℃保存能改善其功能吗?

1969年,Murphy与Gardner报道,4℃条件下保存的血小板输人人体后会迅速地被血液循环清除.他们以及其他人也证明了室温(22C)保存的血小板具有更好的恢复功能和生存的特点,低温保存的血小板生存时间为2天～3天,室温保存的生存时间长达7天～9天.低温保存的血小板在人体内会迅速被清除,这对血液的保存产生了深刻的影响.数十年来,所有的血小板制品均在室温下保存,为防止细菌生长,将血小板保存期限制到5天.     

单个供者血小板浓集物保存前去白细胞的优点

背景和目的 血小板浓集物中白细胞(WECs)的存在与输血反应有关,并可能对血小板在保存期产生不良影响。在血小板中过滤去白细胞的应用日益增多以避免这些并发症产生。然而,单个供者血小板浓集物(血小板单采术,TH)中过滤的最佳时机以及优势尚未有明确定义。方法 在采用Autopheresis C单采机采集的202份血小板浓缩物的随机研究中,作者对保存前白细胞过滤(Pre SF)血小板与保存后(床边)白细胞过滤(Post SF)血小板检测以决断效果。指标有保存中期细胞因子及C3a积聚物水平,血小板激活状态,体内血小板恢复,以及Pre SF及Post SF血小板制品的输血反应情况。结果 与Pre SF比较,Post SF制品中肿瘤坏死因子-α(TNF-α;47％对15％;P<     

冰冻保存血小板制备过程中的质量控制

22℃保存的血小板 ,保存期短 ,已不能满足日益增长的临床需求 ,且易受到细菌污染 ,而低温条件下贮存血小板 ,可使血小板得到长时间有效地贮存 ,从根本上解决了临床输注血小板供不应求的难题。冰冻保存血小板具有良好的临床止血效果 ,可有效防止细菌的污染 ,且具有长期大量保存稀有血型血小板的优点 [1] ,目前在临床已被广泛使用 ,但只有正确掌握冰冻血小板的制备和质量控制方法 ,才能提高冰冻血小板的数量和质量。1　制备过程中易出现的质量问题　冰冻保存血小板是由全血制备成富含血小板血浆 ( FPRP) ,在无菌条件下加入防冻剂二甲基亚砜 …     

血小板冷冻保存的研究

用终浓度4％二甲基亚砜(DMSO)作为防冻剂,于—30℃和—80℃冷冻保存血小板以开展低温保存血小板的输注。体内外研究结果表明:DMSO对血小板粘附和单一诱聚剂所致的聚集有可逆性抑制作用;洗涤去除DMSO后,粘附、聚集可以恢复。联合诱聚剂所致的聚集不受DMSO影响。冻存后的血小板粘附、聚集和低渗休克反应较冻前有所降低,与保存时间(1和3个月)无关。—80℃保存的血小板质量优于—30℃保存者。输注—80℃保存的血小板可提高患者的血小板数,因而能有效地预防和控制因血小板减少导致的出血。     

改良血小板添加液低温液态保存血小板的形态及功能研究

本研究探讨使用改良的血小板添加液替代70％自体血浆在低温（10℃）液态条件下对血小板的保存效果。采集6名供者单采血小板,每一名供者单采血小板平均分为3组,A组（常规保存组）加入100％血浆、22℃保存：B组（添加液10℃保存组）加入70％PAS—ⅢM／30％血浆、10℃保存;C组（冰冻保存组）加入100％血浆和海藻糖、-85℃保存;另设D组（血浆4℃保存组）加入100％血浆、4℃保存,作为扫描电子显微镜对照组。A、B组在第1、5、7、9天取样,C组在20天后复苏取样,分别检测CD62p、HSR、PAgT、LDH的变化。血浆常温组、添加液低温组于保存后第3、9天取样扫描电镜观察,血浆低温组于保存后第3天取样观察．冰冻组在20天后复苏取样观察,同时使用新鲜血小板作为对照。结果表明,保存期内随保存时间延长,A组和B组CD62p表达增加,HSR和最大聚集率降低;A组的LDH释放、CD62p表达、HSR、血小板最大聚集率与B组比较有显著统计学差异（P〈0．05）。C组LDH释放明显较其他两组增多,但CD62p表达较少（P〈0．05）。A、B组血小板形态保持较好,C组血小板形态保持差。结论：改良的PAS—ⅢM保存液能够替代血浆用于血小板的保存,在低温条件下能够很好地保护血小板的功能,保存效果优于血浆常温保存。     

冷冻干燥保存血小板的研究进展

血小板是血液中的一种重要组成成分,它主要参与血栓形成和凝血过程.在大量失血和化疗、放疗等处理后造成的血小板减少症患者的治疗过程中,需要进行血小板输注.因此,保证足够的血小板贮备和供应显得尤为重要.目前,临床应用血小板存在供应不足和浪费问题,主要是血小板保存技术在方法学上的局限性所造成的.血小板的保存方式有以下三种:①常温(22±2℃)保存,此条件下保存的血小板由于部分活性的丧失和微生物的污染,根据美国药品监督管理局规定最多只能保存5天;②冰冻保存,这种保存方法可以大大延长血小板的保存时间,临床实验证明冻-融血小板聚集功能仅为新鲜血小板的50%～60%,而且需要笨重的冰箱和存储设备;③冷冻干燥保存,冷冻干燥血小板可以在常温下长时间保存,不需要冷冻存储设备.在此,本文对冷冻干燥保存血小板(简称冻干血小板)进行综述.     

血小板保存期间血小板计数和P-选择蛋白的变化

探讨CS 30 0 0plus血细胞分离机全密闭 5天保存袋保存的血小板数量和质量的变化 ,研究在 (2 2± 2 )℃条件下振荡和静置两种方法保存的血小板有无差异。采用SysmexF 82 0型全自动血细胞分析仪对机采血小板产品计数 ,应用酶联免疫吸附法 (ELISA)定量检测机采血小板上清液中P 选择蛋白的含量。结果显示 ,振荡与静置两种方法保存的血小板产品中血小板计数和P 选择蛋白含量均无显著性差异。随保存时间延长 ,振荡和静置保存的血小板计数逐渐减少和P 选择蛋白逐渐增多 ,其中两组内的血小板计数在保存 0 - 72小时以内均无显著性差异 ;而在保存 96 - 1 2 0小时后与保存前比较都有显著性差异。振荡保存组 0 - 72小时内 ,每相邻 1天之间P 选择蛋白量无显著性差异 ,其余各时间段均有显著性差异 ;静置保存组 0 - 72小时内各时间段均无显著性差异。结论 :①使用CS 30 0 0plus血细胞分离机全密闭 5天保存袋 ,对血小板制品的有效保存期以 3天为宜 ;②在 (2 2± 2 )℃条件下 ,振荡保存的血小板在数量和质量上并不优于静置保存的血小板。     

浓缩血小板血浆对造血干细胞增殖分化作用的研究

目的观察浓缩血小板血浆对外周血造血干细胞增殖分化的作用。方法使用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞后进行培养;按在IMDM培养液中加入血浆的不同分为3组:浓缩血小板保存0d(A组)和5d血浆组(C组)、单采血小板保存5d血浆组(B组);A、B、C组在培养的1、3、7d时取细胞进行瑞氏染色观察细胞形态,流式细胞术检测CD41+、CD61+细胞的增殖情况,C组在培养0、23h时流式细胞术检测CD34+CD38+、CD34+CD38-的增殖情况。结果浓缩血小板保存5d血浆组(C组)培养23h后CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞分别扩增了3.12±1.45倍、0.98±0.45倍;浓缩血小板保存0d血浆组(A组)、单采血小板保存5d血浆组(B组)和浓缩血小板保存5d血浆组(C组)培养3d后CD41+细胞分别扩增了1.16±0.36倍、1.28±0.67倍和18.72±3.73倍;CD61+细胞分别扩增了1.67±0.55倍、4.01±1.43倍和19.32±4.32倍。结论浓缩血小板保存5d的血浆具有促进造血干细胞快速增殖的作用,并能在体外诱导巨核系细胞的分化。     

体外凝集和新鲜、液态保存及冷冻保存人类血小板血栓素A2产生之间的联系，激活剂、pH值、血浆和盐水重悬浮的影响

背景 检测新鲜以及保存的血小板的质量的方法已有不少，包括血小板的数量、形态学、血小板介质的pH值，低渗反应，以及激活剂引起的凝集。本研究的目的在于评估在体外受激活剂刺激后，产生凝集反应和血栓素A2，以评估新鲜的和保存后的血小板的功能。设计和方法经单采制备的血小板于22℃保存5天，然后于6％的二甲基亚砜冷冻保存于-80℃，经解冻、清洗、在保存介质中重新悬浮。测定激活剂、pH值和介质成分对血小板的凝集，以及对刺激后的血小板产生血栓素A2的影响。     

吉安市冰冻机采血小板临床应用情况

常规血小板体外保存3-5 d后,其活性已大部分丧失.深低温(-80℃)冰冻保存,是目前能够做到的长期保存血小板的较好方法.因冰冻血小板在制备时需要一定的条件和技术,2005年本站才开始冰冻机采血小板的制备与临床供应.现就本市近3年来临床应用冰冻机采血小板的情况介绍如下.