套细胞淋巴瘤分子遗传学研究进展

套细胞淋巴瘤(mantle cel l lymphoma,MCL)是一种具有独特生物学特征的非霍奇金B细胞淋巴瘤(non-Hodgkin l ymphoma,NHL),其特征是标志性易位t(11;14)(q13;q32)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的过度表达。MCL的分子遗传学改变包括频繁的继发性细胞遗传学异常和少数基因的反复突变,如CCND1,SOX11等。本文对MCL近年来在分子遗传学方面的研究进展,包括细胞循环周期失调、DNA损伤应答改变以及其他相关基因的异常改变作一综述。     

套细胞淋巴瘤相关的病理生物学预后因素研究新进展

套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)是一种罕见的成熟B细胞非霍奇金淋巴瘤,中位生存时间为3～5年.分子遗传学分析显示与t(11;14)(q13;q32)易位相关的CCND1基因重排.MCL通常极具侵袭性,其常规化疗效果不佳,预后较差.然而,10％～15％的MCL患者临床病程相对缓慢,提示其临...     

基于5′→3′核酸外切酶实时PCR技术检测染色体

外套细胞淋巴瘤 (MCL )是与染色体 t(11,14 ) (q13;q32 )高度关联的具有组织学和免疫表型特征的一类独特的恶性淋巴瘤 ,在 MCL病人中 ,染色体 t(11;14 ) (q13;q32 )易位与位于 11q13的细胞癌基因bcl-1重叠 ,该癌基因与位于 14 q32的免疫球蛋白重链基因增强子毗邻 ,导致原癌基因失调 ,细胞周期紊乱。 bcl-1主要易位簇 (MTC)裂点区与免疫球蛋白绞链 (JH)区外显子的 3′部分具有高度同源序列 ,可通过 PCR法检测。材料和方法　作者研究了 5 0例 MCL病人 ,2 7例其它型非何杰金 (NHL )病人 (13例滤泡型、4例弥漫性大细胞型、2例小淋巴细胞…     

SOX11在套细胞淋巴瘤中的研究进展

正套细胞淋巴瘤(MCL)是一种B细胞来源、具有侵袭性的非霍奇金淋巴瘤,占非霍奇金淋巴瘤的6%~8%,多见于中老年男性,中位生存期3~5年。MCL临床分期较晚,常合并结外病变,治疗效果不佳,预后差,复发率极高。MCL患者的11号和14号染色体可发生易位形成t(11;14)(q13;q32),进而产生免疫球蛋白重链-细胞周期蛋白1(IGH-CCND1)融合基因,导致Cyclin D1(CCND1)高表达[1]。CCND1能与细胞周期蛋白依赖的激酶4、6形成复合体,使抑癌基因Rb磷酸化而失活,进而释放腺病毒E2启动子结合因子(E2F),从而加速细胞     

外套细胞淋巴瘤及其他伴t(11;14)(q13;q32)易位的B细胞疾患的超微结构

近年来,依据形态学及免疫表型,能够对不同类型的B淋巴细胞增殖性疾患作出较准确的鉴定;但对于不典型病例,由于实验特征存在一定程度重叠,难以准确鉴别。而且,低到中度恶性的非霍奇金淋巴瘤(NHL)往往进展为白血病,细胞遗传学及分子生物学对这些情况的鉴别诊断有一定价值。象t(14;18)(q32;q21)易位在滤泡中心型细胞淋巴瘤(FCL)那样,t(11;14)(q13;q32)易位是弥散性小细胞NHL的较特异标志,如外套细胞淋巴瘤(MCL)及部分慢性淋巴细胞白血病(CLL)、前B淋巴细胞白血病(B-PLL)、伴毛细胞性脾淋巴瘤(SLVL)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(LPL)等,其另一特征性遗传学异常:该易位断裂点将11q13染色体上的bcl-1位点与染色体14q32上的免疫球蛋白重链连接区拼接在一起,t(11;14)易位导致bcl-1的下调,以致细胞     

套细胞淋巴瘤中SOX11的表达研究

目的探讨转录因子SOX11在套细胞淋巴瘤(MCL)中的表达特点。方法收集36例MCL和30例反应性淋巴结炎的临床资料及病理组织,采用免疫组织化学(Envision二步法)和流式细胞学方法检测SOX11蛋白在2组病例中的表达特点,荧光原位杂交技术(FISH)对其中22例MCL做IgH/CCND1基因断裂检测。结果36例MCL均表达B细胞相关抗原,94.44%(34/36)表达SOX11,FISH检测出81.82%(18/22)的MCL存在t(11;14)(q13;q32)染色体的易位;SOX11在MCL中的表达率与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 SOX11表达有助于套细胞淋巴瘤的诊断,包括可能被误诊的cyclinD1阴性母细胞样MCL。     

套细胞淋巴瘤发病机制的研究进展

套细胞淋巴瘤(MCL)是一种侵袭性的非霍奇金淋巴瘤(NHL),该病的经典遗传学标志为t(11;14)(q13;q32)移位和细胞周期蛋白(cyclin) D1过表达,以难治和易复发为临床特征,并且总体预后不良.近年,随着对MCL细胞遗传学及分子发病机制研究的不断深入,靶向药物的开发与应用,使得该病的临床疗效有所提高.本文就近年来MCL发病机制中细胞遗传学、信号通路、转录因子、肿瘤微环境等改变的研究最新进展作一综述,旨在为MCL的早期诊断和靶向治疗提供新的方向.     

多发性骨髓瘤遗传学研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一种骨髓浆细胞恶性肿瘤,来源于后生发中心的B细胞,常具有复杂的染色体异常。免疫球蛋白重链基因位点的易位为早期遗传学异常,引起易位伴随区域的癌基因的失调(11q13区域的cyclin D1,4p16.3区域的FGFR3/MMSET,16q23区域的c-maf和6p21区域的cyclin D3)以及13号染色单体的丢失或肿瘤抑制基因位点13q14的缺失,该缺失提示预后不良。其它的分子学异常包括继发的变化和癌基因的活化(N-RAS和K-RAS的突变,c-Myc的改变等),这通常和疾病的进展相关。这些研究不仅为临床预后评估、指导治疗提供参考,更为开发新疗法提供线索。     

套细胞淋巴瘤的治疗进展

套细胞淋巴瘤（MCL）占全部成人非霍奇金淋巴瘤（NHL）的4％～6％。常见于老年人，男性多于女性（2～3）：1，诊断时平均年龄为54～68岁，60％～70％的患者确诊时已为AnnArbor Ⅳ期。MCL瘤细胞免疫表型为CD5（＋），CD20（＋），CD23（-），CD10（-），具有特征性的t（11；14）（q13；q32）细胞遗传学改变，并导致其基因产物cyclin D1过表达。MCL虽对诱导化疗敏感，但多在短时间内出现疾病进展，中位存活时间仅3年左右，尚无有效的治愈方法。因此，MCL在各类型淋巴瘤中预后最差，迫切需要探索新的方法来提高其疗效。     

套细胞淋巴瘤诊断研究进展

套细胞淋巴瘤(MCL)是一种侵袭性较强的非霍奇金淋巴瘤,通过细胞形态学及组织病理学检查可初步诊断该病,CyclinD1蛋白对诊断此病有较高的特异性,对于不能单纯依靠形态学及病理学诊断的MCL,可采用一些适当的分子遗传学方法 ,研究表明70%～80%的MCL可检测到t(11;14)(q12;q32)染色体易位,故本文主要从细胞形态学、组织病理学、免疫表型及分子遗传学等方面对MCL作一综述.     

人多发性骨髓瘤细胞系与初治多发性骨髓瘤遗传学异常的比较研究

本研究采用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测人多发性骨髓瘤细胞系（human multiple myeloma cell lines,HMCL）和初治多发性骨髓瘤（MM）的分子遗传学异常并进行比较分析,以帮助筛选浆细胞肿瘤高危遗传学异常,为多发性骨髓瘤MM的危险度分层提供依据,并为利用HMCL进行MM研究提供遗传学资料。选用13q14（RB-1）、14q32（IGHC/IGHV）、1q12（CEP1）、17p13（TP53）荧光探针应用直接法检测7株HMCL,用CD138免疫磁珠分选（magnetic-activated cell sorting,MACS）联合FISH方法检测85例初治MM患者作为对照。对于存在14q32异常的患者进行IGH/CCND1、IGH/FGFR3、IGH/MAF双色双融合探针杂交以检测t（11;14）（q13;q32）、t（4;14）（p16;q32）、（14;16）（q32;q23）。结果显示：7株HMCL中RB-1/D13S19缺失6株（85.7%）,P53缺失5株（71%）,1q21扩增6株（85.7%）;5株（71.4%）HMCL存在IGH异常,IGH/CCND1阳性细胞系1株,IGH/FGFR3阳性细胞系2株,IGH/MAF阳性细胞系3株;其中KMS11细胞系同时存在IGH/FGFR3和IGH/MAF两种异常。85例初治MM细胞遗传学总体检出率为85.9%,38例（44.7%）伴有RB-1缺失,17例（20%）出现p53缺失,45例（52.9%）伴有1q21扩增,53例（62.4%）存在IGH异常,其中IGH/CCND1阳性23例（27.1%）,IGH/FGFR3阳性21例（24.7%）,IGH/MAF阳性3例（3.5%）。与初治MM相比较,HMCL的抑癌基因p53缺失率和IGH/MAF明显升高（p=0.008,p=0.005）,而其他分子遗传学异常检出率未达统计学差异。结论：HMCL作为浆细胞肿瘤恶性程度最高的形式,积累了大量的遗传学异常,p53缺失是其显著特征。绝大多数HMCL来源于疾病晚期的髓外浆细胞肿瘤细胞或者浆细胞白血病,提示p53缺失是这部分极高危浆细胞肿瘤患者的特征。     

骨髓增生异常综合征患者细胞遗传学特征分析

本研究探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者中染色体异常核型在MDS亚型中的分布及其数目异常和结构异常特点。常规培养骨髓细胞,采用G显带技术对染色体核型进行分析。结果表明,127例患者中异常核型比例为42．5％（54／127）,其中各亚型异常发生率MDS．RA为30％（3／10）,MDS．RCMD为35．9％（23／64）,MDS．RAS为22．2％（2／9）,MDS-RAEB-Ⅰ为45％（9／20）,MDS-RAEB-Ⅱ为66．7％（14／21）,5q-综合征100％（3／3）。54例异常核型中仅数目异常者21例,仅有结构异常者14例,同时有结构异常和数目异常者19例。常见染色体异常依次为复杂核型（11．02％,14／127）,单纯＋8（10．24％,13／127）,-7／7q-（3．9％,5／127）,1q＋（3．15％,4／127）,-X／-Y（3．15％,4／127）,20q-（2．36％,3／127）,5q-（2．36％,3／127）。MDS-RAEB（包括RAEB-Ⅰ和RAEB-Ⅱ）患者中复杂核型发生率为31．71％（13／41）,明显高于非RAEB（包括RA、RCMD、RAS、5q-综合征）患者中复杂核型发生率为1．16％（1／86）（P〈0．05）。平衡易位核型发生率为1．57％（2／127）,明显低于非平衡易位发生率为40．94％（52／127）（P〈0．05）,2例平衡易位患者均为MDS-RAEB。结论：MDS是一组高度异质性的克隆性疾病,染色体异常比较复杂,存在多种重现性异常;平衡易位较少见,仅存在于RAEB患者中;RAEB患者复杂异常核型发生率较高,本研究中伴dup（1）（q21q32）重现性异常核型所占比例较高。     

间期荧光原位杂交技术在慢性淋巴细胞白血病检测中的应用

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）基因组的异常情况及其临床意义.方法 对17例初诊CLL患者进行常规细胞遗传学（CC）检测,同时应用着丝粒探针CSP12（12p11.1-12q11.1）和序列特异性探针D13s25（13q14.3）、ATM（11q22.3）、RBI（13q14）、p53（17p13.1）进行间期荧光原位杂交（I-FISH）.比较I-FISH与CC敏感性的差异.结果 CC检测18.75%有核型异常（3/16）,1例未见核分裂相;I-FISH检测70.6%患者有基因异常（12/17）,p53缺失11.8%（2/17）、ATM缺失5.6%（1/17）、13q-47.1%（8/17）,其中包括RB1缺失23.5%（4/17）、D13S25缺失29.4%（5/17）,12-三体29.4%（5/17）,复杂基因组异常11.8%（2/17）.核型异常与性别、年龄、乳酸脱氢酶（LDH）、β2微球蛋白（β2-MG）及Binet分期无相关性.结论 I-FISH是检测CLL患者基因组异常的有效手段,与CC方法相比可明显提高CLL基因组异常的检出率.     

荧光原位杂交技术在慢性淋巴细胞白血病检测中的应用评估

本研究探讨与评估应用间期荧光原位杂交技术(FISH)检测慢性淋巴细胞白血病(CLL)遗传学异常的价值。应用间期FISH技术检测32例初诊CLL患者的del(13q14.3)、del(11q22.3)、del(17p13.1)、del(13q14)和12号染色体三体,同时对免疫表型不典型的10例初诊患者检测IGH/CCND1融合基因。结果表明,在32例病例组中FISH检测出26例(81.3%)基因异常,包括D13S25缺失14例,RB1缺失11例,12号染色体三体9例,P53缺失6例,ATM缺失4例;涉及1种基因异常的12例,其中12号染色体三体7例,D13S25缺失3例,P53缺失1例,ATM缺失1例;涉及2种基因异常的11例,其中D13S25/RB1缺失的7例,另4例均包含P53缺失;涉及3种以上基因异常的病例3例;10例免疫表型表达CD5+CD23-的初诊患者中2例IGH/CCND1(+)。结论:应用间期FISH技术检测CLL基因组的异常,可大大提高异常染色体的检出率,各基因异常有其不同的特点;IGH/CCND1融合基因的检测在CLL诊断中有重要意义。     

伴有t（8;21）染色体异常急性髓系白血病的免疫表型特征

本研究主要探讨具有t（8;21）（q22;q22）染色体改变的急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者的免疫表型及伴随的染色体异常。利用多参数流式细胞仪（multiparameter flow cytometry,MPFC）检测和分析47例具有t（8;21）的AML患者白血病细胞免疫表型。结果表明：47例t（8;21）-AML中21例（44.68%）伴有其他染色体异常,26例（55.32%）为单纯t（8;21）染色体改变。多参数流式检测结果提示：t（8;21）-AML患者干/祖细胞标记CD34、CD117和HLA-DR阳性率分别为87.2%、97.9%和95.7%,髓系标记CD13和CD33阳性率分别为93.6%和87.2%,T淋巴系标记CD2、CD3、CD5和CD7未见表达,B淋巴系标记CD19阳性率为66.0%,显著高于其他B淋巴系标记CD20和CD22,同时NK细胞标记CD56阳性率亦高达66.7%。结论：利用多参数流式细胞术检测t（8;21）-AML发现该亚型AML具有较为特异性的免疫表型特征：干祖细胞标志（CD34、CD117和HLA-DR）表达较高,并且B淋系标志CD19和NK细胞标志CD56表达明显较高,提示联合CD34/CD19/CD56检测可以成为预测AML可能具有t（8;21）（q22;q22）的染色体改变准确而快速的临床指标。     

CD5-negative blastoid variant mantle cell lymphoma with complex CCND1/IGH and MYC aberrations

The coexistence of CCND1/IGH and MYC rearrangements in mantle cell lymphoma (MCL) is a rare finding associated with a very poor prognosis. In this study, a patient with blastoid variant (MCL) is reported. The disease was clinically aggressive and refractory to chemotherapy, and the patient only survived for 1 month following diagnosis. Conventional cytogenetic study, FISH, and multicolor FISH (mFISH) demonstrated the involvement of the BCL1/CCND1 locus in a complex translocation, t(3;11)(q25;p15)t(11;14)(q13;q32). In addition, subclonal abnormalities in the 8q24 region, manifested as a t(8;14)(q24;q32)/MYC rearrangement, were identified. To the best of our knowledge, this is the first MCL case in Korea bearing these complex genomic aberrations.     

Cytogenetics of mantle cell lymphoma

AIM: To determine the type and rate of secondary chromosomal aberrations and role in pathogenesis of mantle cell lymphoma (MCL). MATERIAL AND METHODS: Standard cytogenetic examination (SCE) and fluorescent in situ hybridization (FISH) with tests for 11q22/ATM, 13q14, 17p13/p53, 9p21/p16 and chromosome 12 centromere were made in 28 patients. RESULTS: Secondary chromosomal aberrations were detected in 22 patients. Chromosomal abnormalities occurring in more than 2 cases include deletions 6q15-q23 (53% cases); 11q22/ATM (50%); 9p21 (36%, in half the cases deletion 9p21 was biallele); 13q14 (32%); trisomy 3/3q, monosomy 20 and deletions/translocations 1q and 1p (27% and 20%) and deletion 17p13/p53 (18%). Trisomies 12/12q, 6 and 18/18q, monosomies 2 and 16, deletions/translocations 2p and 16p were found in 2 cases each. The FISH technique identified 9 chromosomal anomalies missed at SCE. Deletions 6q15-q23 were seen in patients with privalent lesions of lymph nodes. Deletions 11q, 13q14, 9p21 and 17p13 occur more frequently in transformation and the blastoid variant. Monosomy 20 was found only in patients with large cell transformations. This was the only cytogenetic defect characteristic for transformed cases, in contrast to denovoblastoid ones. Thus, deletions 6q, 11q23, 13q14 and 9p21 are typical for MCL. Deletions 9p21 and 17p13 are more characteristic for large cell variants of the tumor. Deletion 17p13 occurs at the terminal stage of the disease in rapidly growing tumor mass and resistance to chemotherapy. FISH technique is effective in detection of submicroscopic rearrangements especially small deletions. No significant differences were found between transformed and de novo blastoid cases. This shows that the blastoid variant is not a specific biological form, it is rather a less typical manifestation of the disease due to some preclinical cytogenetic disorders. CONCLUSION: Progression and transformation of MCL are related to mutation of proapoptotic genes and genes proteins of which are inhibitors of active complexes of D1 cycline. Specification of these mechanisms requires further investigations in patients with different clinicomorphological forms of the disease at various stages of the disease.     

30例慢性淋巴细胞白血病分子遗传学异常的FISH检测的意义

为探讨间期荧光原位杂交（FISH）在检测慢性淋巴细胞白血病（CLL）＋12、del（13q14）、p53基因缺失、atm基因缺失情况中的意义,采用组合探针（CEP12、LSI D13S319、LSI p53、LSI atm）对30例CLL患者进行FISH检测,分析分子遗传学异常与患者外周血淋巴细胞绝对计数、Binet分期、血清乳酸脱氢酶（LDH）和B：微球蛋白（β2-MG）水平、ZAP-70和CD38表达之间的相关性。结果发现,30例CLL患者中,19例（63．3％）存在1种及1种以上细胞遗传学异常,7例（23．3％）同时检测出2种及2种以上的异常,其中最常见为del（13q14）（43．3％）,其他依次为＋12（23．3％）,atm基因缺失（13．3％）,p53基因缺失（10．0％）。各分子遗传学异常与性别、年龄、Binet分期、外周血淋巴细胞绝对计数、血清LDH和β2-MG水平、ZAP-70表达水平无明显相关性（p〉0．05）,在CD38高表达组中,atm基因缺失的发生率均明显高于CD38低表达组,且差异有统计学意义（p=0．035）。结论：FISH是一种检测CLL患者分子遗传异常快速、准确及敏感的方法,其在CLL患者中的预后预测价值有待进一步的深入研究。     

Her2阳性乳癌组织TopⅡα的表达及临床意义

目的探讨人表皮因子受体基因2（Her2）阳性乳房浸润性导管癌DNA拓扑异构酶Ⅱα（TopⅡα）蛋白表达和基因变异的相关性,以及两者与乳癌临床病理特征关系。方法选取我院乳腺病诊疗中心组织标本库中2013年1—6月Her2阳性乳房浸润性导管癌标本76例。应用荧光原位杂交（FISH）、免疫组织化学（IHC）技术分别对76例乳癌组织的TopⅡα基因、蛋白进行检测和分析。结果 TopⅡα基因变异与TopⅡα蛋白表达无显著相关性（P〉0.05）;TopⅡα蛋白表达和基因变异与病人年龄、绝经情况、组织学分级及AJCC分期均无显著相关性（P〉0.05）,而与有无腋窝淋巴结转移显著相关（χ2=8.546、7.285,P〈0.05）。结论 TopⅡα蛋白表达与基因变异无相关性,且二者均只与乳房浸润性导管癌腋窝淋巴结转移显著相关,临床上TopⅡα蛋白的检测更适用于对蒽环类化疗药物的疗效评价。